目的:探讨动脉粥样硬化患者胱硫醚酶基因多态性及其与临床的关联性。方法:在颈动脉超声检查的高血压患者中，随机抽取114例颈动脉中内膜增厚或斑块阳性的患者作为研究组，检测其身高、体重、血压、血脂、血糖、血尿酸、同型半胱氨酸(homocysteine，HCY)水平，并检测CBS基因G919A和T883C位点碱基，并与155例颈动脉正常的高血压患者作为对照组比较。结果:研究组体重指数、收缩压、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、血尿酸、HCY水平高于对照组，差异有统计学意义( P<0.05)。研究组舒张压和高密度脂蛋白胆固醇水平与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。血尿酸，收缩压和CBS基因T883C位点突变是颈动脉粥样硬化的独立危险因素( P<0.05)。其风险关系分别为1.4倍、2.0倍和3.3倍；性别、年龄、体重指数、舒张压、总胆固醇、甘油三酯、血尿酸、HCY和CBS基因G919A位点等观察指标与颈动脉粥样硬化不存在风险关系( P>0.05)。颈动脉粥样硬化的高血压患者CBS基因T883C位点次等位基因突变率高。 结论:颈动脉粥样硬化的高血压患者血压、血脂、血糖、血尿酸、HCY水平高、收缩压、血尿酸和CBS基因T883C位点多态性是颈动脉粥样硬化的独立危险因素，其CBS基因T883C次等位基因突变率高。

高同型半胱氨酸血症是青年脑梗死的独立危险因素。同型半胱氨酸代谢过程中关键酶的基因突变是高同型半胱氨酸血症的主要原因，胱硫醚-β-合成酶复合杂合变异致青年脑梗死，同时合并肺栓塞及下肢动脉血栓罕见报道。文中报道1例青年脑梗死患者，合并肺栓塞及下肢动脉血栓，病因筛查发现血同型半胱氨酸水平显著增高，基因检测胱硫醚-β-合成酶833T>C/1082C>T复合杂合变异，予叶酸、甲钴胺、维生素B 6以及抗凝治疗后，患者血同型半胱氨酸水平逐渐下降，随访1年，未见新发血栓事件，复查同型半胱氨酸在正常范围。

目的:分析经典型同型半胱氨酸尿症患儿的临床特点和CBS基因变异情况，探讨个体化治疗方法及预防。方法:回顾性分析2013年11月至2021年6月就诊于郑州大学附属儿童医院及北京大学第一医院儿科的13例经典型同型半胱氨酸尿症患儿的一般情况、临床表现、实验室检查、头颅影像学、CBS基因变异特点、诊断及治疗等资料。结果:13例患儿中男6例，女7例，确诊年龄为10日龄至14岁。3例为新生儿筛查检出，无症状时开始治疗，余10例于1~6岁发病，5~14岁时确诊，主要表现为马凡综合征样体型、晶状体脱位和（或）近视、发育落后、骨质疏松及心脑血管疾病。4例脑磁共振成像示不对称梗死灶，1例示髓鞘形成低下。13例患儿血清蛋氨酸、血清总同型半胱氨酸及尿液总同型半胱氨酸均增高，尿液甲基丙二酸正常，符合经典型同型半胱氨酸尿症。13例患儿CBS基因共检出18种变异，其中10种为新变异、8种为已知变异。仅1例为维生素B 6部分反应型，12例为维生素B 6无反应型，均以低蛋氨酸饮食及甜菜碱治疗为主，3例疗效不良患儿分别于3、8、8岁进行了肝移植治疗，术后1周内血液蛋氨酸及同型半胱氨酸恢复正常。1例患儿死亡。1例患儿母亲再孕时进行产前诊断，羊水细胞CBS基因存在与患儿相同的致病变异。 结论:经典型同型半胱氨酸尿症临床表现复杂多样，血氨基酸、血清及尿液总同型半胱氨酸和基因分析是诊断的关键。检出10种CBS基因新变异，扩展了CBS基因变异谱。肝移植为有效的治疗办法。产前诊断是防控经典型同型半胱氨酸尿症的重要措施。

患儿，女，G2P2，足月剖宫产出生，出生体重3 200 g。7岁3月龄时主因"头痛、呕吐2 d，左侧肢体运动障碍7 h，伴意识丧失20 min"在当地医院入院。患儿婴儿期起视力差，曾在当地眼科专科医院多次就诊。6岁1月龄因"斜视"行"左眼斜视矫正术"，6岁11月龄发现"晶状体脱位"接受"双眼人工晶状体置换术"。发病前智力及运动发育与正常同龄儿相仿。平时易疲劳，情绪不稳，爱发脾气，小便气味明显。家族史无特殊，父母非近亲婚配，父亲身高178 cm，母亲身高150 cm。入院时体格检查：身高139 cm，体重33 kg，头围54.6 cm，神志清楚，呼吸平稳，心肺腹无异常，脊柱外观无畸形，左上、下肢肌力2级，右上、下肢肌力正常，肌张力未见异常，双侧膝腱反射未引出，左侧巴氏征阳性，右侧阴性，布氏征、克氏征均阴性。

目的:探究肝癌和胱硫醚β-合成酶（cystathionine β-synthase, CBS）基因及胱硫醚γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase,CTH）基因的关系。方法:通过挖掘GEO（gene expression omnibus）与TCGA（the cancer genome atlas）数据库，对肝癌的临床特征与CBS及CTH基因表达进行了相关性分析。并通过对肝癌细胞系进行免疫印迹验证。结果:CBS及CTH在肿瘤中的表达较非肿瘤明显降低（ P < 0.05）。Cox回归结果显示CBS是肝细胞癌不良预后的独立危险因素（ HR = 0.65， P = 0.02）。针对CBS基因对不同肿瘤分期进行单因素 logistics回归分析，发现肝癌TNM分期II期比I期（ P =0.01， OR=0.50）、III期比I期（ P =0.03， OR=0.56）、T分期T2期比T1期（ P <0.01， OR=0.43）、T3期比T1期（ P = 0.02， OR=0.54）CBS基因显著降低。肝癌TNM分期III期比I期（ P = 0.01, OR=0.50）, Edmondson分期II期比I期（ P =0.03， OR=0.48）, III期比I期（ P <0.01， OR=0.30）, IV期比I期（ P = 0.03， OR=0.22）CTH基因表达显著降低。GSEA富集分析结果显示，与肝癌细胞CTH与CBS基因表达相关性最高的信号通路为细胞色素P450（FDR Q < 0.01，FWER P < 0.01）。免疫印迹结果显示，与人肝永生化细胞系HL-7702相比，HLE和Hep3B细胞等肝细胞癌细胞系中CTH下游蛋白CSE表达降低。 结论:肿瘤组织中的CBS及CTH基因表达低于正常组织。CBS基因是肝细胞癌不良预后的独立危险因素。与CBS及CTH基因关系最为密切的是信号通路为细胞色素P450通路。

目的:探讨对比剂诱导的急性肾损伤（contrast-induced acute kidney injury，CIAKI）中内源性硫化氢水平是否发生变化，补充硫化氢是否可下调Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor protein 3，NLRP3）炎症复合体从而保护肾小管上皮细胞对抗对比剂所致的肾损伤。方法:24只体重180~220 g清洁级健康雄性Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为对照组、CIAKI组（碘普罗胺2.9 g/kg）及CIAKI+NaHS组（NaHS 4 mg/kg处理3 d后予碘普罗胺2.9 g/kg）组，每组8只。对肾组织进行全转录组测序及生物信息学分析，HE、PAS染色观察肾组织病理改变，TUNEL法检测肾小管上皮细胞损伤情况，免疫荧光染色检测肾组织炎症复合体NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain，ASC）、caspase-1的表达。在人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）中探讨硫化氢在对比剂（碘普罗胺200 mgI/ml）诱导的细胞损伤中的作用，CCK-8法测定细胞存活率。结果:与对照组相比，CIAKI组大鼠内源性硫化氢合成酶相关基因胱硫醚-β-合成酶（ CBS）、胱硫醚-γ-裂解酶（ CSE）和3-巯基丙酮酸硫转移酶（ 3- MST）水平下降（均 P<0.05）。 CBS、 CSE和 3- MST基因表达水平与肾功能临床生化指标血肌酐、尿素氮和胱抑素C水平呈负相关（均 P<0.05）。与CIAKI组比较，CIAKI+NaHS组大鼠血肌酐、尿素氮及胱抑素C水平较低，肾脏病理改善，肾小管上皮细胞焦亡减少，肾组织炎症复合体NLRP3、ASC、caspase-1的水平较低（均 P<0.05）。在HK-2细胞中，对比剂+NaHS组细胞存活率高于对比剂组；应用CBS抑制剂减少内源性硫化氢水平，对比剂诱导的HK-2细胞存活率进一步降低（ P<0.05）。 结论:内源性硫化氢系统受损是CIAKI发病的关键环节，上调硫化氢水平可改善CIAKI大鼠的肾损伤，其保护机制与调节NLRP3炎症复合体相关。

目的:探讨同型半胱氨酸（Hcy）代谢酶基因多态性与汉族多发性骨髓瘤（MM）预后不良的关系。方法:选取河北北方学院附属第一医院2018年2月至2020年3月收治的128例汉族MM患者（疾病组）和同期招募的120例汉族健康志愿者（对照组）为研究对象，两组均检测血浆Hcy水平及Hcy代谢酶基因多态性，包括亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T、MTHFR A1298C、蛋氨酸合成酶还原酶（MTRR）A66G、胱硫醚β合成酶（CBS） 844ins68、蛋氨酸合成酶（MS）A2756G。疾病组采用常规方法治疗，于治疗后跟踪随访1年并统计预后不良的发生情况，采用Logistic多元回归分析Hcy代谢酶基因多态性与疾病组预后不良的关系。结果:疾病组血浆Hcy水平高于对照组[（15.01 ± 2.98）μmol/L比（8.45 ± 1.69）μmol/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。疾病MTHFR C677T位点TT基因型频率和T等位基因频率分别为26.56%、29.30%，高于对照组的6.67%、16.25%，CT基因型频率为5.47%，低于对照组的19.17%，差异均有统计学意义（ P<0.05）。两组其余基因位点基因型分布和等位基因频率比较差异均无统计学意义（ P>0.05）。疾病组预后不良的发生率为49.22%（63/128），年龄、血小板计数和血清β 2微球蛋白、κ轻链、血浆Hcy水平及MTHFR C677T位点TT基因型均是疾病组预后不良的影响因素（ OR=7.286、0.545、6.841、6.284、8.117、8.440， P<0.05）。 结论:汉族MM患者血浆Hcy水平、MTHFR C677T位点TT基因型频率和T等位基因频率均高于健康人群，CT基因型频率低于健康人群，且汉族MM患者预后不良与血浆Hcy水平、MTHFR C677T位点TT基因型有关。

目的:探讨中国育龄人群中21种遗传代谢病的携带率，为遗传咨询和生育指导提供依据，同时为新生儿遗传代谢病筛查病种的选择提供一定的参考。方法:采集897位无关健康个体(包括143对夫妇)的外周血，提取DNA。应用全外显子组测序技术对该897位个体的54个基因(21种遗传代谢病的致病基因)进行检测，筛选在数据库记载的致病性/疑似致病性变异和未记载的功能丧失型变异。结果:897位个体中检出数据库记载的54个致病基因中致病性/疑似致病性变异和未记载的功能丧失型变异共140个，总频次为183次，人均携带0.20个。一对夫妇同时携带 SLC25A13基因致病性变异，通过胚胎植入前遗传学诊断生育一健康婴儿。检出的变异涉及40个基因，变异数频次较多的5个基因分别是 ATP7B、SLC25A13、PAH、CBS和 MMACHC。根据Hardy-Weinberg定律，人群中该21种遗传代谢病发病率约为1/1100，发病率较高的5种单基因病是瓜氨酸血症、甲基丙二酸血症、肝豆状核变性、糖原累积病和苯丙酮尿症。 结论:本研究初步明确了21种遗传代谢性疾病在中国育龄人群中的携带率及发病率，为新生儿遗传代谢病筛查病种的选择提供了参考。孕前遗传病携带者筛查是主动的一级预防措施，是阻断患儿出生的有效方法。

目的 采用成簇的规律性间隔的短回文重复序列(CRISPR)/Cas9系统对斑马鱼胱硫醚-β-合成酶b基因(cbsb)进行编辑,并制备稳定的斑马鱼cbsb敲除品系.方法 使用ClustaIX软件分析斑马鱼cbsb编码蛋白(Cbsb)的保守结构域,利用生物信息学选取向导RNA(gRNA)靶点,体外合成并纯化gRNA和密码子优化的Cas9 mRNA,在刚受精的斑马鱼胚胎(1-cell期)中显微注射混合的gRNA和Cas9mRNA,提取受精后3 d的斑马鱼幼鱼基因组,通过PCR扩增并测序分析靶点的切割效率,通过基因组扩增和测序筛选并获得cbsb敲除的稳定品系.结果 斑马鱼Cbsb与人、小鼠胱硫醚-β-合成酶(CBS)高度同源.在斑马鱼Cbsb保守结构域的编码序列处设计4个靶点,其中4#靶点具有高效的切割效率,利用该靶点制备并筛选获得多个cbsb敲除斑马鱼,选取-3+13 bps和-228 bps移码突变的两种品系,进一步筛选获得稳定的cbsb敲除品系.结论 利用CRISPR/Cas9系统成功制备了两种斑马鱼cbsb敲除的稳定品系,为进一步在斑马鱼活体中研究Cbsb的功能奠定了基础.

目的 探讨lncRNA SNHG1在同型半胱氨酸诱导足细胞焦亡中的作用.方法 选取Cbs+/-小鼠随机分成2组,设置正常饮食组(ND)和高蛋氨酸饮食组(HMD),Western blot检测Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3的蛋白表达水平.体外培养小鼠肾小球足细胞,设置对照组(Control,0 μmol/L Hcy)和同型半胱氨酸干预组(Hcy,80 μmol/L Hcy);足细胞转染慢病毒后设置lncSNHG1过表达阴性对照组(OE-NC)和lncSNHG1过表达组(OE-SNHG1);lncSNHG1过表达阴性对照+同型半胱氨酸干预组(OE-NC+ Hcy)和lncSNHG1过表达+同型半胱氨酸干预组(OE-SNHG1+Hcy),干预细胞48 h后,实时荧光定量PCR检测Hcy干预的足细胞中lncSNHG1表达水平;Western blot和免疫荧光技术检测足细胞中焦亡相关蛋白Caspase-1、Cleaved Caspase-1、NLRP3及GSDMD和GSDMD-N表达水平;ELISA检测足细胞中焦亡介导的炎症相关因子IL-1β和IL-18含量.结果 (1)动物实验中:与正常饮食组(ND)相比,高蛋氨酸饮食组(HMD)中焦亡相关蛋白Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3及GSDMD、GSDMD-N表达水平增高;(2)细胞实验中:与对照组(Control)相比,同型半胱氨酸干预组(Hcy)中焦亡相关蛋白Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3及GSDMD、GSDMD-N表达水平增高,焦亡介导炎症因子IL-1β和IL-18含量增高;(3)细胞实验中:与对照组(Control)相比,同型半胱氨酸干预组(Hcy)中lncSNHG1表达水平增高;足细胞转染lncSNHG1慢病毒后,与Control组及OE-NC组相比,OE-SNHG1组lncSNHG1表达水平增高;(4)细胞实验中:与OE-NC+ Hcy组相比,OE-SNHG1+Hcy组中焦亡相关蛋白Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3及GSDMD、GSDMD-N表达水平增高,焦亡介导炎症因子IL-1β和IL-18含量增高.结论 lncRNA SNHG1在Hcy诱导的足细胞焦亡过程中起到促进作用.