目的:研究中枢蓝斑区促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)系统在IBS中的作用，探索影响其改变的分子机制。方法:采用母婴分离联合出生后复合应激构建大鼠IBS模型，后采用脑核团微取样的方法获得大鼠蓝斑区的组织样本。应用实时荧光定量PCR技术检测对照组和IBS组大鼠蓝斑核内细胞癌基因 Fos( c- Fos)，以及 CRH和其相应受体促肾上腺皮质激素释放激素受体( CRHR)1、 CRHR2的mRNA表达；同时检测DNA甲基转移酶( DNMT)1、 DNMT3a和 DNMT3b的mRNA表达；采用蛋白质印迹法检测组蛋白甲基转移酶——ASH2样蛋白(ASH2L)，以及SET核癌基因和MYND域2蛋白(SMYD2)的表达。统计学分析采用 t检验。 结果:IBS组的直肠充气压低于对照组[(69.82±5.47) mmHg比(86.86±5.98) mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)]， c- Fos基因的mRNA水平较对照组升高(2.11±0.44比1.00±0.19)， CRH的mRNA水平较对照组升高(1.99±0.35比1.00±0.13)，SMYD2的蛋白表达水平较对照组上调(1.04±0.21比0.61±0.12)，差异均有统计学意义( t＝6.215、2.321、2.797、4.451， P均<0.05)。IBS组大鼠 CRHR1、 CRHR2、 DNMT1、 DNMT3a、 DNMT3b的mRNA水平以及ASH2L的表达与对照组比较(分别为0.96±0.13比1.00±0.26、1.35±0.63比1.00±0.43、1.40±0.61比1.00±0.19、1.39±0.58比1.00±0.21、1.45±0.71比1.00±0.39和0.80±0.19比1.05±0.26)，差异均无统计学意义( P均>0.05)。 结论:母婴分离联合出生后复合应激通过影响蓝斑核内 Crh基因的转录进而造成CRH系统和去甲肾上腺能系统应激调控网络的激活，导致大鼠内脏敏感性增加。 Crh基因转录异常可能与SMYD2介导的组蛋白H3K36的甲基化有密切关系，而与DNA的甲基化修饰无关。

目的:分析促肾上腺皮质激素释放激素受体1(corticotropin releasing hormone receptor 1，CRHR1)基因rs1876828位点的多态性与支气管哮喘患儿吸入性糖皮质激素(inhaled corticosteroids，ICS)疗效的相关性。方法:2018年1月至2019年6月于哈尔滨医科大学附属第一医院儿科诊治的中度持续性哮喘患儿60例为研究对象。应用Sanger测序法，检测哮喘患儿的CRHR1基因rs1876828位点。根据基因位点碱基序列的不同，将患儿分为TT基因型组(TT组)和CC基因型组(CC组)。其中TT组22例(36.7%)，CC组38例(63.3%)。两组患儿均予ICS雾化吸入及对症治疗。观察治疗前及治疗后3 d、10 d、30 d的临床症状及体征并评分，记录症状及体征完全消失所需天数。结果:治疗3 d后，TT组及CC组患儿临床症状及体征均获得一定程度的改善，但组间差异无统计学意义( P>0.05)。治疗后10 d、30 d两组患儿病情恢复均较3 d时更好，TT组改善程度明显优于CC组，差异有统计学意义( P<0.05)。TT组及CC组症状及体征完全缓解时间分别为(8.68±7.42)d和(16.21±7.82)d，差异有统计学意义( P<0.01)。 结论:支气管哮喘患儿存在CRHR1基因rs1876828位点的多态性，表现为TT基因型和CC基因型，其中CC基因型占多数。哮喘患儿CRHR1基因rs1876828位点的多态性与ICS疗效相关。TT基因型患儿的ICS疗效优于CC基因型患儿。

目的:探讨下丘脑-垂体-肾上腺轴相关基因SKA2、AVPR1B、CRHR2基因位点的多态性与抑郁症患者自杀未遂行为的关联性及基因与环境因素的交互作用。方法:选取自2017年3月至2018年8月因自杀就诊的抑郁症患者61例(病例组)，同期选取与病例组年龄、性别、受教育程度匹配人员57例(对照组)。使用Snapshot分型技术对病例组和对照组进行基因型检验，采用Barratt冲动量表(Barratt impulsiveness scale，BIS-Ⅱ)、生活事件量表(life event scale，LES)分别评估个体的冲动特质及其过去1年的精神压力。使用SPSS 22.0软件，采用卡方检验、独立样本 t检验进行组间比较；应用广义多因子降维法进行基因-环境交互作用分析。 结果:自杀未遂组BIS-Ⅱ总分和LES总分[分别为(65.05±11.14)分，(34.16±27.23)分]均高于对照组[分别为(53.30±9.07)分，(11.67±12.64)分]，差异具有统计学意义(均 P<0.05)；两组SKA2和CRHR2基因的基因型与等位基因频率分布均差异无统计学意义( P>0.05)；两组AVPR1B基因rs28373064的基因型和等位基因频率分布差异均具有统计学意义(χ 2＝5.763，4.279，均 P<0.05)，经Bonferroni校正后的分布差异无统计学意义( P>0.05)。GMDR中最优交互模型为AVPR1B基因rs28373064位点与冲动特质、生活事件构建的三阶模型，检验样本准确度最高0.789，模型差异具有统计学意义( P＝0.001)。在多个遗传模式中，AVPR1B基因rs28373064位点与抑郁症患者自杀未遂行为存在关联[显性模式：A/G-G/G( OR＝0.38，95% CI＝0.16～0.88， P＝0.021)；超显性模式：A/G( OR＝0.36，95% CI＝0.15～0.87， P＝0.019)；累加模式：A/A、A/G及G/G( OR＝0.44，95% CI＝0.20～0.96， P＝0.034)]。 结论:AVPR1B基因rs28373064多态性与抑郁症患者的自杀未遂行为相关，该位点AA基因型携带者在生活事件及冲动特质的影响下更容易发生自杀行为。

目的 探讨芍药甘草颗粒对斑秃样小鼠毛发生长、行为学及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响.方法 C3H/HeJ小鼠42只,随机分为空白对照组、模型组、芍药甘草颗粒高、中、低剂量组、促肾上腺皮质激素释放激素1型受体拮抗剂组、复方甘草酸苷片组,每组6只,分别予以不同药物干预.进行照片和毛发镜拍摄、体重称量、行为学测定,以及促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素、皮质醇、糖皮质激素受体、脑源性神经营养因子检测.结果 与模型组比较,高剂量芍药甘草颗粒可加速斑秃样小鼠毛发再生及体重增长(P＜0.05),增加旷场实验运动总路程及中央区运动路程占总路程百分比(P＜0.05),减少强迫游泳实验及悬尾实验不动时间(P＜0.05),降低外周血促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素、皮质醇水平(P＜0.05),增加海马体糖皮质激素受体及脑源性神经营养因子表达(P＜0.05).结论 芍药甘草颗粒能促进斑秃样小鼠毛发生长、改善其行为学表现,其作用的发挥可能与下调促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素、皮质醇水平,上调糖皮质激素受体、脑源性神经营养因子表达,抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴过度活化相关.

目的 探讨电针印堂、内关、足三里对FD大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的可能作用机制.方法 40只SD大鼠随机分为空白组、模型组和电针组.采用夹尾、不规律饮食以及冰生理盐水灌胃法复制FD模型.造模后,电针组行针刺干预,每天1次,每次30 min,连续14天.记录大鼠的一般状态;旷场实验检测大鼠的自主行为及紧张度;HE染色法观察大鼠胃黏膜形态及炎症反应;实时荧光定量PCR法检测大鼠下丘脑5-羟色胺3受体(5-HT3R)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的表达;蛋白免疫印迹法检测大鼠十二指肠促肾上腺皮质激素释放激素受体2(CRHR2)、NOD样受体蛋白6(NLRP6)蛋白表达;阿利新蓝染色观察大鼠十二指肠黏膜上皮形态及杯状细胞的阳性表达.结果 与空白组相比,模型组大鼠一般状态、旷场自主运动距离、运动速度、十二指肠CRHR2、NLRP6蛋白均大幅下降(P<0.05),下丘脑5-HT3R、CRH mRNA明显升高(P<0.05).与模型组相比,电针组大鼠一般状态、旷场自主运动距离、运动速度、十二指肠CRHR2、NLRP6蛋白及杯状细胞的表达均明显提高(P<0.05),下丘脑5-HT3R、CRH mRNA大幅下降(P<0.05).模型组大鼠胃黏膜可见疏松的结缔组织,黏膜下层轻度水肿,淋巴细胞增生;空白组和电针组大鼠胃黏膜结缔组织排列紧密,胃腺间质无明显增生,未见炎症细胞.结论 电针印堂、内关、足三里可能是通过提升十二指肠CRHR2、NLRP6蛋白和杯状细胞表达,抑制下丘脑5-HT3R、CRH的表达,来提高FD大鼠自主运动水平,缓解焦虑,修复缺损的肠道黏膜屏障,恢复下丘脑-垂体-肾上腺轴的正常功能.

目的 探究海马促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体1型(CRHR1)在慢性应激致老年前期小鼠学习记忆损伤中的作用机制.方法 12～14月龄的C57BL/6J小鼠根据性别、基因型以及是否予以慢性不可预测应激(CUS)进行分组,对应激组施加为期30 d的CUS.使用聚合酶链式反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对小鼠进行基因型鉴定.新物体识别实验和Morris水迷宫测定学习记忆能力.Golgi-Cox染色观察海马神经元树突受损情况,Western blot测定海马组织雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR(Ser2448)、核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、p-p70S6K(Thr389/Thr412)蛋白表达,ELISA检测血清CRH水平.结果 相较于慢性应激前,WT应激各组小鼠慢性应激后的认知系数下降,差异有统计学意义(P<0.05),而KN应激各组小鼠慢性应激前后认知系数差异无统计学意义.与WT应激组相比,WT对照组小鼠逃避潜伏期均缩短(P<0.05)、穿越平台和目标象限次数上升(P<0.01),KN各组小鼠上述差异无统计学意义.相较于WT对照组,WT应激组小鼠海马CA1、CA3、DG区神经元复杂性降低(P<0.05),海马p-mTOR、p-p70S6K表达水平均降低(P<0.05);而KN应激组与KN对照组相比,除雌性组小鼠海马p-mTOR表达水平降低外(P<0.05),其余均无显著性差异.此外,与对照组相比,应激各组小鼠血清CRH水平均上升,差异有统计学意义(P<0.01).结论 海马CRHR1调控慢性应激所致的老年前期小鼠的学习记忆损伤和神经元树突受损,其机制可能是慢性应激引起的高水平CRH无法与受体CRHR1结合,减轻了高水平CRH所抑制的mTOR/p70S6K信号通路表达.

目的:观察柴胡疏肝汤对炎症诱导的肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质(hypothalamic-pit uitary-adrenal,HPA)轴亢进和内脏高敏的影响.方法:48只Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,匹维溴铵组,柴胡疏肝汤低剂量组、中剂量组和高剂量组,采用乙酸灌肠法造模.造模后第7周,予匹维溴铵和柴胡疏肝汤治疗2周,检测血清IL-1β、IL-6水平,结肠5-HT含量及促肾上腺皮质激素释放激素受体1和2(corticotropin releasing hormone receptor 1 and 2,CRH-R1和CRH-R2) mRNA的表达,地塞米松/促肾上腺皮质激素释放激素测试各阶段的皮质酮(Corticosterone,CORT)水平,评价内脏高敏情况.结果:肠易激综合征大鼠模型出现IL-6、IL-1β水平升高,地塞米松/促肾上腺皮质激素释放激素测试不同时间段CORT水平升高,结肠5-HT含量增加,CRHR1 mRNA的表达上调,回缩反射中压力阈值降低,而避水应激实验中粪粒数明显增加.柴胡疏肝汤(5、10g/kg)下调肠易激综合征大鼠模型IL-6、IL-1β水平,降低地塞米松/促肾上腺皮质激素释放激素测试不同时间段CORT水平,减少结肠5-HT含量,抑制结肠CRH-R1 mRNA的表达,正常化回缩反射中压力阈值和减少避水应激实验中粪粒数.结论:柴胡疏肝汤通过下调IL-6、IL-1β水平,纠正失调的HPA轴,减少结肠5-HT含量,抑制结肠CRHR1 mRNA的表达,降低大鼠肠道敏感性而治疗肠易激综合征.

动物和人类研究结果表明,早年应激会导致下丘脑释放促肾上腺素皮质激素释放激素(Corticotropin-Releasing Hormone,CRH),通过激活促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRHR1)调节下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴功能,以及认知相关脑区特别是海马的结构、功能或遗传学改变.现将早年应激导致认知功能障碍与CRHR1对认知影响的相关机制进行综述.

促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及其受体1(CRHR1)与抑郁、焦虑、自杀、双相障碍等情感障碍类精神疾病的发病关系密切.现从基因角度就各类情感障碍疾病与CRHR1的研究进展进行综述.

背景近年来,众多研究报导了数百种与焦虑症有关的基因,为系统研究焦虑症的基因网络提供了研究基础.方法从ResNet 11 Mammalian数据库中提取了焦虑症-基因的关系数据,包含592个焦虑症基因.通过基因富集分析、子网络富集分析、网络连通性分析和网络度量分析研究网络属性并选择关键节点.另外,通过采集焦虑症-药物和药物-基因的关系数据,在小分子/药物水平对焦虑症进行病理研究.结果592中的526个基因富集在100个焦虑症通路(P＜1e-15),并显示出较强的基因间相互关联性.综合报导频率,网络中心性和功能多样性的分析,6个基因被推为首选焦虑症基因,包括DRD2、ADORA2A、IL1B、CRH、AVP和CRHR1.此外,538个基因和548个药物强相关,间接支持焦虑症与这些基因之间的关系.结论焦虑症的遗传原因与大量基因构成的遗传网络有关.基因网络以及本研究中提供的文献和量度指标为进一步的生物/遗传学研究奠定了基础.