目的:探讨直肠癌根治术后行完全腹腔镜回肠造口还纳术的安全性、可行性及其近期疗效。方法:回顾性分析2019年10月至2020年6月于中国医学科学院肿瘤医院和北京市朝阳区三环肿瘤医院行完全腹腔镜回肠袢式造口还纳术的20例直肠癌根治术后患者的临床资料，评价患者并发症发生情况、术后恢复情况及近期疗效。结果:全组20例行完全腹腔镜回肠造口还纳术患者均顺利完成手术，无中转开腹或中止手术者，无围手术期相关死亡患者。全组患者完全腹腔镜回肠造口还纳手术时间为60~145 min，中位时间为97 min；术中出血量为10~100 ml，中位出血量为20 ml。术后1 d视觉疼痛评分(VAS)为1.0~5.0分，术后1 d中位VAS为1.9分。全组患者麻醉清醒后均无需使用附加止痛药物。术后下床活动时间为16~42 h，中位时间为25 h；术后排气时间为19~51 h，中位时间为44 h；术后住院时间为5.0~9.0 d，中位时间为6.9 d。全组患者无手术相关切口感染、腹盆腔感染、肠梗阻、吻合口漏、出血等相关并发症。结论:经筛选的合适的患者行完全腹腔镜回肠造口还纳术安全可行，近期疗效满意，完全腹腔镜回肠造口还纳术是一种值得推广的手术方式。

目的:探讨线粒体DNA（mtDNA）控制区D环（D-loop）的突变与瘢痕疙瘩的相关性。方法:收集2016—2019年昆明医科大学第一附属医院皮肤科门诊瘢痕疙瘩患者216例，提取患者外周血总DNA及25例患者的瘢痕疙瘩组织、瘢痕疙瘩旁正常组织的总DNA。以云南大学附属医院体检中心无瘢痕疙瘩的健康体检者299例外周血样本数据作为对照。对mtDNA D-loop区进行PCR扩增及Sanger测序，并与修正后的剑桥参考序列（rCRS）比对，获得每个样本的突变位点。根据Phylotree-mtDNA tree Build 17，对2组人群进行单倍型类群划分。比较瘢痕疙瘩组织、瘢痕疙瘩旁正常组织及自身外周血mtDNA的D-loop区突变。使用network 5.0软件制作中介网络图，采用二元logistic回归分析单倍型类群频率与瘢痕疙瘩发病的相关性， χ2、 t及 t′检验分析临床数据。 结果:216例瘢痕疙瘩患者mtDNA可划分为10个单倍型类群：A、B、D、R9、G、M*、M7、M8、M9、N9，其中R9分布频率最高（21.3%，46/216），M9分布频率最低（0.9%，2/216）。瘢痕疙瘩患者的单倍型类群M7和N9的分布频率均显著低于对照人群（ P=0.040， OR=0.248，95% CI：0.066~0.937； P=0.048， OR=0.191，95% CI：0.037~0.986）。中介网络图显示，瘢痕疙瘩患者和对照人群的单倍型类群M7具有不同的分布模式。单倍型类群M7患者的发病部位数比非M7患者少（ P=0.000 1），且发病年龄比非M7患者小（ P=0.045）。 结论:单倍型类群M7与瘢痕疙瘩的发生具有相关性，可能是瘢痕疙瘩发生的潜在保护性因素。

目的:探究左心室压力-应变环(PSL)评价重度动脉性肺动脉高压(sPAH)患者左心室心肌做功及阐明左右心室相互影响的可行性。方法:选取2020年11月至2022年4月于内蒙古自治区人民医院就诊的sPAH患者30例(病例组)和健康体检者30例(对照组)，采集常规超声心动图数据后进行左心室心肌做功分析，得出参数包括：整体做功指数(GWI)、整体有用功(GCW)、整体无用功(GWW)、整体做功效率(GWE)。比较两组间心肌做功参数的差异，并将心室应变参数及其他常规超声心动图参数进行相关性分析。结果:(1)sPAH组与对照组相比，除肺动脉收缩压(PASP)外的一般临床资料差异均无统计学意义(均 P>0.05)。(2)sPAH组右心室常规超声心动图参数右心室径(Rv-d)/左心室径(Lv-d)、右室壁厚度、右心室面积变化分数(RVFAC)、三尖瓣瓣环位移(TAPSE)与对照组比较差异均有统计学意义( t＝21.305、12.485、12.359、8.095，均 P<0.05)，左心室常规超声心动图参数左心室舒张期末容积(LVEDV)、心输出量(CO)均小于对照组( t＝4.443、2.458，均 P<0.05)。(3)sPAH组左心室整体纵向应变(LVGLS)、右心室整体纵向应变(RVGLS)均低于对照组( t＝2.927、22.350，均 P<0.05)。(4)sPAH组GWI、GCW、GWE低于对照组，GWW高于对照组，差异均有统计学意义( t＝8.297、5.520、15.251、11.389，均 P<0.05)。(5)sPAH组左心室GWI、GCW、GWE与LVGLS、RVGLS、PASP呈负相关(均 P<0.01)，与TASPE、RVFAC呈正相关(均 P<0.01)；GWW与PASP、RVGLS、LVGLS呈正相关(均 P<0.01)，与RVFAC、TAPSE呈负相关(均 P<0.01)。 结论:PSL能够精准灵敏地反映sPAH患者左心室早期心功能改变和左右心室功能之间相互影响的关系，为临床评估心功能提供了新的参考依据。

目的:基于柯萨奇病毒A组6型（coxsackievirus group A type 6，CV-A6）VP1编码区寻找与其流行强度增加有关的关键氨基酸位点。方法:对GenBank数据库中全部CV-A6 VP1编码区核苷酸序列进行筛选，获得其中的1 533条序列进行比对。使用RAxML软件构建最大似然树。使用Shannon Entropy在线分析工具计算序列的氨基酸置换熵值，并用Datamonkey在线分析平台通过MEME，SLAC和FUBAR三种方法来分析正向选择位点。结果:目前全球流行的CV-A6以D3基因亚型为主。在VP1编码区存在三个高度可变的氨基酸位点，分别是VP1-5、VP1-30、VP1-137。三种方法均发现VP1-5、VP1-90、VP1-137三个位点在流行中受到过正向选择的作用。结论:应继续加强对D3基因亚型CV-A6的监测，D3基因亚型的CV-A6在位于DE环中的VP1-137高度可变且受到了正向选择的作用，需要加以重视，并通过进一步研究来确定它与D3亚型广泛流行的关系。

目的:获得我国隐匿性乙型肝炎病毒感染（occult HBV infection，OBI）人群中乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）基本核心启动子区（basic core promoter，BCP）、前C区和C区序列特征，为进一步阐明该区域与OBI的关系奠定基础。方法:收集2016—2018年全国18个省、自治区和直辖市的43家血站实验室，经日常检测后HBV DNA阳性的血浆样本。经实验室确认后HBsAg阳性样本和OBI样本各入组不少于200例，针对HBV BCP/前C区、C区和S区进行半巢式或巢式PCR和Sanger测序及序列分析。结果:完成测序417例样本，其中HBsAg阳性样本216例和OBI阳性201例，均为基因型B和C。HBsAg阳性组该区域的突变频率明显高于OBI组。在B基因型中仅发现1个OBI高频突变A1896G，在C基因型中发现T1762A/A1764G、T1803A/G、A1986G、T1866A（D22E）等OBI高频突变。在C基因型中发现的前C区ε-反式作用元件区域（1 847-1 907 nt）突变G1888T可能会改变前基因组RNA的茎环结构，从而影响其的转录。此外，还在OBI组首次发现了BCP区1 756-1 775 nt缺失突变，可能会直接影响HBsAg和HBeAg的表达，从而导致OBI的发生。结论:本研究深入分析了我国OBI献血者中BCP区、前C区、C区的序列基本特征，发现HBsAg阳性组该区域突变频率显著高于OBI组，TA缺失突变和G1888T可能会导致OBI的发生。

线粒体作为独立存在于细胞核外唯一具有DNA的代谢性细胞器，在结直肠癌的发生发展过程中起到重要的作用。而结直肠癌与线粒体DNA(mtDNA)的相关性研究亦层出不穷，mtDN控制区(D-loop)作为其转录与复制的起始位点成为该研究领域的热点之一。本文试从D-loop区的突变、多态性、甲基化、微卫星不稳定以及拷贝数改变等方面综述其与结直肠癌相关性研究进展。目前的研究证明肿瘤D-loop区突变的存在与不良预后相关，且可作为Ⅲ期结直肠癌患者术后辅助化疗效应的预测因子。高变区段1(HV1)中核苷酸16290T的次要单倍型和核苷酸16298T的频繁单倍型与结直肠癌的高生存率相关，其中16 290位点的多态性被认定可作为结直肠癌预后的独立预测因子。该区域的去甲基化可能参与到mtDNA拷贝数和NADH脱氢酶亚单位2(ND-2)表达的调节，且其微卫星不稳定(mtMSI)与基于氟尿嘧啶的辅助化疗的耐药性及不良预后相关。D-loop区作为mtDNA的重要转录起始区域，深入而全面的研究势必有助于我们了解其在结直肠癌的发病以及进展过程中的作用，并进一步为临床的诊断、治疗提供指导。

目的:观察不同类型视网膜静脉阻塞患眼侧支循环的临床特征。方法:回顾性临床研究。2021年12月至2023年12月于云南大学附属医院眼科检查确诊的单眼视网膜静脉阻塞患者360例360只眼纳入研究。其中，男性157例157只眼，女性203例203只眼；年龄（61.0±5.9）岁；出现症状至就诊时病程为3 d~ 6个月。黄斑分支静脉阻塞（MBRVO）、视网膜分支静脉阻塞（BRVO）、视网膜中央静脉阻塞（CRVO）分别为67、187、106只眼；合并黄斑水肿210只眼。合并黄斑水肿者均给予玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子（VEGF）药物治疗。患眼均行扫频源光相干断层扫描检查。观察视网膜侧支循环的发生率、部位、形态特点、形成时间以及抗VEGF药物治疗对侧支循环形成的影响。将从视盘发出呈血管袢样的血管在视盘走形一段后回到视盘的短路循环定义为视盘睫状血管短路型侧支循环。结果:病程1周时，MBRVO、BRVO患眼部分侧支循环已建立；1 ～2个月时，已建立较为丰富而稳定的侧支循环。病程2~ 3个月时，CRVO患眼视盘睫状血管短路型侧支循环逐渐形成。病程6个月时，MBRVO者67只眼中，侧支循环建立36只眼（53.7%，36/67）；BRVO者187只眼均观察到侧支循环（100.0%，187/187）；CRVO者106只眼中，视盘侧支循环建立29只眼（18.1%，29/106）。MBRVO者中建立侧支循环的36只眼，其侧支循环均建立于阻塞区域和非阻塞区域之间的垂直水平缝处。BRVO者187只眼中，侧支循环建立于阻塞区域和非阻塞区域之间的垂直水平缝处102只眼；阻塞最中央逐级搭桥至正常血管上的侧支循环54只眼；通过鼻侧与颞侧建立侧支循环19只眼；通过中心凹建立的侧支循环12只眼。其形态表现为平直走形、螺旋状纡曲和花簇状。CRVO建立侧支循环的29只眼，均为视盘睫状血管短路型侧支循环。行抗VEGF药物治疗的210只眼中，侧支循环建立160只眼。其中，MBRVO 32只眼（62.0%，32/63）；BRVO 119只眼（100.0%，119/119）；CRVO 9只眼（32.1%，9/28）。结论:MBRVO、BRVO、CRVO侧支循环发生率分别为53.7%、100.0%、18.1%，其形态多样，形成时间多为病程2个月左右。抗VEGF药物治疗未抑制侧支循环的建立。

目的:探讨一例表现为无诱因惊厥发作、生长发育迟缓、血乳酸值升高的2月龄患儿的遗传学病因。方法:应用二代测序技术对患儿进行全外显子组和线粒体环基因测序，用Sanger测序对候选致病变异进行验证，依据美国医学遗传学及基因组学学会相关指南进行致病性分析。检索PubMed、万方数据库和中国知网数据库中 FARS2变异所致的联合氧化磷酸化缺乏症14型(COXPD14)的病例报道，总结其临床特征及基因变异谱。 结果:全外显子组测序提示患儿携带 FARS2基因c.925G>A(p.G309S)和c.405C>A(p.H135Q)复合杂合变异；Sanger测序证实这两个变异分别遗传自母亲和父亲。其中c.925G>A为HGMD数据库已收录的致病变异，c.405C>A预测为疑似致病变异。检索文献另发现30例COXPD14患者，其 FARS2变异类型包括错义变异、剪接变异、读码框内碱基缺失和编码区微缺失。 结论:COXPD14临床表现以发育迟缓(96%)、癫痫发作(97%)和乳酸升高(96%)最为经典。 FARS2基因c.925G>A(p.G309S)和c.405C>A(p.H135Q)复合杂合变异是本例患儿的发病原因。

目的:研究孕期尼古丁暴露对子代小鼠牙釉质形成的影响及其可能的表观遗传学机制。方法:通过随机数字表法将10只C57BL/6孕鼠分为对照组（皮下注射生理盐水）及孕期尼古丁暴露（prenatal nicotine exposure，PNE）组（皮下注射尼古丁溶液），每组5只，孕鼠生产后分别收集出生后0 d（postnatal day 0，P0；P14、P25含义依此类推）、P14、P25新生小鼠，根据母代分组分为子代对照组及子代PNE组，并记录P0、P25子代小鼠体质量。采用显微CT（micro-CT）扫描分析、扫描电镜和维氏显微硬度检测对子代小鼠牙槽骨和下颌切牙进行硬组织相关参数分析。提取P25子代小鼠下颌骨组织及第3代牙上皮干细胞（dental epithelial stem cell，DESC）中的总RNA，通过实时荧光定量PCR检测成骨向及成釉向分化相关基因、增殖相关标志物和干细胞标志物的表达水平。采用石蜡切片免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，Pcna）、釉原蛋白（amelogenin，Amelx）、甲基转移酶ZESTE增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2，Ezh2）、组蛋白H3第27位赖氨酸的三甲基化修饰（histone H3 trimethylated at lysine 27，H3K27me3）阳性染色分布及水平。使用细胞增殖（cell counting kit-8，CCK-8）试剂盒对外源性添加不同浓度（0.01、0.1、1 mmol/L）尼古丁以及Ezh2抑制剂GSK126的DESC进行细胞活力检测。结果:PNE组孕鼠较对照组更容易出现不良妊娠结局，P0时子代PNE组小鼠体质量［（0.99±0.02）g］显著低于子代对照组［（1.20±0.04）g］（ P<0.001）；P25时，子代PNE组小鼠体质量［（9.65±1.32）g］显著低于子代对照组［（15.26±1.70）g］（ P<0.001），死产率［（46.40±9.30）%］显著高于对照组（0）（ P<0.001）。P14和P25时，子代PNE组小鼠下颌切牙釉质矿化沉积点与第一磨牙近中面的距离数值［分别为（-1 349±45）、（-506±380）μm］均较子代对照组［分别为（-1 192±147）、（504±198）μm］显著减小（ P<0.05， P<0.001），提示矿化沉积点延迟。子代PNE组小鼠切牙釉柱及釉柱间质较对照组排列松散无序，显微硬度［（245.7±18.4）MPa］较子代对照组［（371.9±28.7）MPa］显著降低（ P<0.001）。HE染色显示子代PNE组小鼠前成釉细胞（pre-ameloblast，Pre-Am）区域排列较对照组紊乱，矿化沉积点推迟，暂时性扩增细胞（transit-amplifying cell，TA）及Pre-Am区域延长。免疫组织化学染色显示，子代PNE组小鼠唇侧颈环（labial cervical loop，LaCL）整体Pcna表达较子代对照组显著增多（ P<0.05），H3K27me3较对照组显著富集（ P<0.01），对应区域可见Ezh2表达显著增加（ P<0.01），同时成釉细胞胞质中Amelx阳性信号减弱。体外实验添加1 mmol/L 尼古丁能显著上调子代PNE组DESC的Pcna基因表达水平（ P<0.01），同时显著下调DESC标志物B淋巴瘤Mo-MLV插入蛋白1、富亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1和成釉细胞向分化的相关基因Amelx等的基因表达水平（ P<0.05， P<0.05， P<0.01）。此外，与0 h时相比，干预24 h后1 mmol/L尼古丁可显著增强DESC的增殖活性（ P<0.001），添加10 μmol/L Ezh2抑制剂GSK126可挽救1 mmol/L尼古丁对DESC带来的增殖促进作用。 结论:孕期尼古丁暴露可能导致成釉向谱系定向分化过程延迟，致子代小鼠DESC增殖及分化异常，并且影响H3K27me3表观遗传修饰水平，造成子代牙釉质发育障碍，提示孕期尼古丁暴露是牙发育的危险环境因素。

目的:探讨X射线辐射远端效应（X-ray radiation-induced abscopal effects，X-RIAEs）对小鼠卵巢储备的影响及可能的作用机制。方法:16只动情周期规律的6~8周龄雌性C57BL/6J小鼠分为对照组和照射组，8只/组，照射组小鼠麻醉后每日给予胸部局部区域8 Gy X射线照射，连续照射3 d，对照组小鼠仅给予麻醉处理。照射结束21 d后，检测两组小鼠动情周期、血清激素及促炎性因子水平、卵巢组织形态学变化；利用转录组测序技术（ribonucleic acid sequencing，RNA-seq）检测小鼠卵巢组织RNA转录组表达情况，筛选差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs）后行基因本体论-生物学过程（gene ontology-biological processes，GO_BP）分析，通过应用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）验证测序结果，免疫组织化学染色（immunohistochemistry，IHC）检测精卵发生特异性碱性螺旋环螺旋蛋白1（spermatogenesis-and oogenesis-specific basic helix-loop-helix-containing protein 1，SOHLH1）和中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophil elastase，NE）在卵巢组织内表达和定位情况。结果:照射组小鼠动情周期紊乱，主要停滞于间期，照射组小鼠始基卵泡数量［10.50（1.25，12.75）］及生长卵泡数量［4.50（2.50，9.00）］均显著少于对照组小鼠［60.00（30.00，90.25）， P<0.001；18.50（18.00，20.75）， P<0.001］，差异均具有统计学意义，而闭锁卵泡数量［56.00（45.25，98.75）］明显多于对照组［12.50（5.25，20.25）］，差异具有统计学意义（ P<0.001）；照射组小鼠血清雌二醇水平［（70.28±5.27）pmol/L］、抗苗勒管激素水平［（104.00±6.98）μg/L］均明显低于对照组小鼠［（97.58±7.25）pmol/L， P=0.016；（129.70±8.39）μg/L， P=0.046］，而照射组小鼠卵泡刺激素水平与对照组小鼠相比，差异无统计学意义（ P=0.996）；与对照组小鼠血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平［（31.61±12.89）μg/L］、白细胞介素（interleukin，IL）-1β水平［（52.75±2.06）μg/L］相比，照射组小鼠血清TNF-α水平［（488.30±36.20）μg/L］和IL-1β水平［（62.37±2.50）μg/L］均明显升高（ P<0.001， P=0.018），照射组小鼠血清IL-6水平较对照组小鼠也呈上升趋势，但差异无统计学意义（ P=0.301）。GO_BP分析结果显示，X-RIAEs诱导小鼠卵巢组织表达下调的DEGs主要参与卵泡发育过程，表达上调的DEGs主要参与卵巢组织炎症反应过程，RT-qPCR结果与测序结果一致。IHC结果显示，照射组小鼠卵巢组织SOHLH1阳性表达面积［（23.18±4.00）%］显著低于对照组［（65.90±6.28）%， P=0.005］，而NE阳性表达面积［（30.73±4.00）%］显著高于对照组［（14.47±2.22）%， P=0.024］。 结论:X-RIAEs可诱发卵巢组织炎性反应，并抑制小鼠卵巢卵泡生长及发育过程，进而导致卵巢储备功能下降。