目的 旨在研究一体化18F-氟乙基酪氨酸(18F-fluoroethyltyrosine,18F-FET)正电子发射断层成像(positron emission tomography,PET)/MR对成人胶质瘤的O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(O6-methylguanine DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子甲基化状态的鉴别能力.材料与方法 回顾性分析未经活检或治疗的胶质瘤患者资料16例,均完成一体化PET/MR扫描,包括18F-FET PET、常规MRI及体素内不相干运动(intravoxel incoherent motion,IVIM)成像.以靶本比(target-background ratio,TBR)=1.6为阈值对PET图像进行感兴趣体积(volume of interest,VOI)分割,通过刚性配准获得肿瘤VOI对应的IVIM图及其参数表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)、真实扩散系数(true diffusion coefficient,D)、伪扩散系数(pseudo diffusion coefficient,D)、灌注分数(perfusion fraction,f)、分布扩散系数(distributed diffusion coefficient,DDC)和异质性指数(heterogeneity index,α),使用pyradiomics对各参数进行特征提取,获得对应的一阶灰度直方图特征.计算每个IVIM参数图对应的特征值与18F-FET PET参数的关系,并利用组间比较和受试者工作特征(receive operating characteristic,ROC)曲线分析探究PET和IVIM参数对MGMT启动子甲基化的区分能力.结果 IVIM-α的两个特征值90分位值(r=0.526,P<0.05)和最大值(r=0.520,P<0.05)与PET参数平均标准摄取值(mean standard uptake value,SUVmean)呈正相关;IVIM-α 和SUVmean在MGMT启动子甲基化状态阳性和阴性两组之间的差异有统计学意义(P<0.05),阳性组的IVIM-α均值和SUVmean显著高于阴性组;融合IVIM-α均值和SUVmean对MGMT启动子甲基化状态进行区分的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.77.结论 基于一体化PET/MR的18F-FET PET和IVIM参数能够有效预测胶质瘤的MGMT启动子甲基化状态.

目的:探讨芳香族L-氨基酸脱羧酶缺乏症（AADCD）的临床特征、实验室特点及基因诊断，提高对该病的认识。方法:收集2016年8月至2020年6月首都医科大学附属北京儿童医院神经内科确诊的4例AADCD患儿，对其临床表现、实验室及影像学资料、基因检测结果进行回顾性分析。结果:4例患儿均在婴儿早期起病，首发症状为喂养困难，分别于2~4月龄余出现伴眼动危象的阵发性运动障碍，并出现运动倒退，肌张力低下，发育迟缓，睡眠障碍和自主神经症状如上睑下垂、出汗过多、鼻塞等。4例患儿为来自2个家庭的兄妹，他们的父母均身体健康。例1、例2的二羟基苯丙氨酸脱羧酶（ DDC）基因突变分别来自母亲的错义突变c.1040G>A（p.Arg347Gln）和来自父亲的11和12号外显子的全部缺失。例3的 DDC基因突变分别来自母亲的突变c.419G>A（p.G140E）和来自父亲的突变c.1375C>T（p.H459Y）；例4未进行基因检测。对3例患儿进行血氨基酸和酰基肉碱谱、尿有机酸分析，均未见特异性异常；对例3用血干滤纸片筛查3-O-甲基多巴，结果明显增高；脑脊液神经递质检测结果示3-甲氧基4-羟基苯二醇、高香草酸和5-羟基吲哚乙酸浓度明显降低，5-羟色氨酸和3-O-甲基多巴水平升高；血芳香族L-氨基酸脱羧酶（AADC）活性明显降低。对例1、例3、例4进行头颅磁共振成像（MRI）和脑电图检查，其中例1头颅MRI正常，例3、例4头颅MRI提示髓鞘化稍落后，3例患儿脑电图检查均正常。例1、例2在1岁10个月时因肺炎、呼吸衰竭死亡。例3在4月龄确诊后口服氯硝西泮、盐酸苯海索片、维生素B6片，后加用盐酸司来吉兰片、盐酸普拉克索片治疗，1岁6月龄随访时眼动危象、运动障碍的发作频率减少，睡眠改善，自主神经症状减轻，但发育迟缓无改善。例4诊断脑瘫和癫痫，多种抗癫痫药物和康复训练治疗无效，于10岁时因心脏衰竭、肾脏衰竭夭折。 结论:AADCD临床表现复杂，误诊率高。对早发性肌张力低下、发育落后、眼动危象、运动障碍的婴儿应尽早进行干滤纸片筛查3-O-甲基多巴水平，对可疑病例进行脑脊液神经递质检测、血浆AADC活性测定和基因检查以明确诊断。早期确诊AADCD患儿及基因变异携带者，可指导治疗及提供遗传咨询，降低后代的发病率。

目的 比较四氯化碳(CCl4)和3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢可力丁(DDC)两种肝毒性化学物诱导的肝纤维化小鼠模型的转录组学差异,为使用肝纤维化小鼠模型的研究提供参考依据.方法 分别采用10％CCl4(2 mL/kg)腹腔注射和0.1％DDC饮食喂养诱导小鼠肝纤维化模型.造模4周后,检测血清ALT、AST、TBil水平;HE染色观察肝内炎症浸润情况;天狼猩红染色观察肝胶原沉积情况;Jamall's法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;ELISA检测肝组织上清TNF-α、IL-6和IL-1β含量.提取小鼠总RNA进行测序(RNA-Seq),使用R软件分析2种肝纤维化模型的差异基因,并进行GO和KEGG富集分析,并验证差异显著的基因.结果 与正常小鼠相比,CCl4染毒小鼠和DDC饮食小鼠血清ALT、AST、TBil水平和肝组织TNF-α、IL-6和IL-1β含量显著升高,血清Alb水平下降.病理染色提示CCl4染毒小鼠肝组织结构破坏,中央静脉周围大量肝细胞玻璃样变及坏死;DDC饮食小鼠肝内卟啉沉积,大量炎症细胞在汇管区和胆管周围浸润;两种模型小鼠肝内均有不同程度胶原沉积.通过筛选条件(|logFC|＞2倍且P＜0.05)获得CCl4染毒模型、DDC饮食模型的差异基因分别为1820、2373个,其中上调基因分别为1302、1978个,下调基因分别为518、395个.GO注释发现2种模型在分子功能(MF)、生物学过程(BP)、细胞成分(CC)等方面具有重要功能,KEGG分析发现CCl4染毒模型、DDC饮食模型分别激活22、29条信号通路,其中细胞外基质受体的相互作用、细胞周期、蛋白的消化与吸收、焦点粘附、PI3K-Akt等16条信号通路在2种模型中均显著富集(P＜0.05).聚类分析发现在2种模型中均明显下调基因包括Mup11、Mup15、Mup17、Mup1等,采用RT-qPCR得以证实(P＜0.05).结论 本研究报道了 CCl4染毒和DDC饮食两种肝纤维化模型的RNA-Seq转录组学特点并进行比较,观察基因表达的场所、基因表达所调节的通路等方面,为后续肝纤维化的发病机制和治疗研究的动物模型的选择提供参考依据.

为探讨异硫氰酸烯丙酯(Allylisothiocyanate,AITC)调控肠嗜铬细胞(Enterochromaffin cells,EC)中血清素(5-hydroxytryptamine,5-HT)的合成及其对EC生物学功能的影响,使用食用级AITC对RIN-14B细胞(大鼠胰腺内分泌细胞系)进行干预处理,采用FLUO-8 AM检测RIN-14B细胞内钙离子浓度,qRT-PCR分析 5-HT合成相关基因表达,UPLC测定 5-HT含量,以及RNA-seq检测AITC处理后的RIN-14B细胞转录组,并对其结果进行生物信息学分析.结果表明,AITC通过激活离子通道TRPA1 使胞内钙离子浓度升高,上调Tph1(色氨酸羟化酶)和Ddc(5-羟色氨酸脱羧酶)的表达,从而促进 5-HT合成及分泌.此外,GO和KEGG功能富集分析AITC处理后的RIN-14B细胞差异表达基因发现,AITC主要调控谷胱甘肽代谢和抗氧化、炎症调节等相关通路,提示AITC可能通过刺激EC促进谷胱甘肽代谢来调节肠道稳态,同时参与肠道的炎症调节.以上结果为研究AITC影响EC及肠道更深入的生物学功能提供实验数据与研究思路.

目的 探讨体素内不相干运动成像(IVIM)无创性诊断弥漫性胶质细胞瘤异柠檬酸盐脱氢酶1(IDH1)基因状态的价值.方法 前瞻性收集95例弥漫性胶质细胞瘤患者的临床资料,测量肿瘤实性区域IVIM的各影像学参数:灌注比例系数(F)、平均表观扩散系数(ADCmean)、快速表观扩散系数(fastADC)、扩散系数(DDC)、伪扩散系数(D*).计算以对侧脑白质区标化后的参数:相对灌注比例系数(nrF)、相对平均表观扩散系数(nrADCmean)、相对快速表观扩散系数(nrfastADC)、相对扩散系数(nrDDC)、相对伪扩散系数(nrD*).随访所有入组患者的病理学诊断和IDH1基因检查结果.采用独立样本t检验统计分析同级别IDH1基因野生型与突变型各参数差异,有效参数绘制ROC曲线,同时应用Logistics回归分析计算IDH1基因整体正确预测率.结果 突变型低级别组的F值、ADCmean值、nrADCmean值、DDC值均显著高于野生型低级别组(P值均＜0.05),两组间nrF值、D*值、nrD*值、nrDDC值、fastADC值、nrfastADC值的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).突变型高级别组的F值、fastADC值均显著低于野生型高级别组(P值均＜0.05),两组间nrF值、ADCmean值、nrADCmean值、D*值、nrD*值、DDC值、nrDDC值、nrfastADC值的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).低级别胶质细胞瘤患者F的切值、敏感度、特异度、ROC曲线的AUC分别为0.125、0.667、0.625、0.780,ADCmean值分别为1.182、0.750、0.875、0.842,nrADCmean值分别为1.481、0.762、0.875、0.899,DDC值分别为1.193、0.792、0.750、0.774.高级别胶质细胞瘤患者F的切值、敏感度、特异度、ROC曲线的AUC分别为0.155、0.750、0.750、0.775,fastADC值分别为1.545、0.708、0.875、0.813.低级别胶质细胞瘤联合F值和nrADCmean值得出诊断IDH1基因的整体正确预测率为93.8％,似然比为13.97.高级别胶质细胞瘤联合F值和fastADC值得出诊断IDH1基因的整体正确预测率为82.5％,似然比为46.07.结论 IVIM检查为术前无创性诊断弥漫胶质细胞瘤IDH1基因状态提供了新的方法.

目的 探讨腹腔镜辅助远端胃癌D2根治术治疗老年进展期胃癌的临床预后,并观察其对腹腔冲洗液癌胚抗原(CEA)、多巴胺脱羧酶(DDC)及血清低氧诱导因子-1α(HIF-1 α)、结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达的影响.方法 将120例行远端胃癌根治术的老年病人分为腹腔组和开腹组,每组各60例,分别行腹腔镜和开腹远端胃癌D2根治术.比较两组病人围手术期情况、生存情况及复发转移情况,术前及术后测定血清HIF-1α、MACC1及腹腔冲洗液CEA、DDC水平.结果 腹腔镜组手术时间、淋巴清扫数、近切端与肿瘤距离、远切端与肿瘤距离、术后并发症率依次为(163.05±15.41)分钟、(26.89±4.55)枚、(7.04±1.13)cm、(6.13±1.04)cm、3.33％,开腹组为(158.23 ±13.44)分钟、(28.41±5.23)枚、(7.22±1.28)cm、(6.02±1.13)cm和11.67％比较,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05);腹腔镜组的切口长度、术中出血量、术后肛门排气时间、进食时间、下床活动时间及住院时间分别为(5.23±1.26)cm、(155.01±30.21) ml、(4.12±0.65)天、(4.15±0.71)天、(2.91±0.44)天、(12.69±2.45)天,开腹组分别为(16.32±2.53)cm、(351.91±42.16)ml、(5.13±1.02)天、(5.22±1.14)天、(4.82±1.13)天、(18.12±4.43)天比较,差异有统计学意义(P＜0.05).腹腔镜组术后腹腔冲洗液中CEA、DDC含量和血清HIF-1α、MACC1依次为(1423.49±331.56) ng/ml、(115.03±30.21) ng/ml、(45.02±10.03) pg/ml、(76.69±12.45) pg/ml,开腹组分别为(2812.43±702.48) ng/ml、(168.40±47.19) ng/ml、(61.45±15.44) pg/ml、(104.46±15.96) pg/ml,差异有统计学意义(P＜0.05).腹腔镜组术后1年、3年、5年生存率为96.49％、83.64％、60.87％,与开腹组的94.55％、80.77％、59.52％比较,差异无统计学意义(P＞0.05),且两组的术后平均生存时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05);腹腔镜组与开腹组术后局部复发转移率分别为14.04％和25.45％,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 腹腔镜与开腹远端胃癌D2根治术对老年进展期胃癌的根治效果相当,而腹腔镜手术具有微创及术后康复快等优势,并可降低肿瘤微转移风险.

目的:探讨磁共振非高斯弥散加权成像预测低级别胶质瘤异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变状态的可能性方法:回顾性分析了44例病理证实的WHOⅡ级(低级别)胶质瘤,所有病例均执行了常规简单b值(0,1000s/mm2)和多b值弥散成像(22b值:0,10,20,30,50,100,150,200,300,400,500,600,800,1000,1500,2000,2500,3000,3500,4000,4500和5000s/mm2).根据IDH1突变状态分为IDH1+ (n=30)组和IDH1组(n=14),采用肿瘤T2FLAIR最大横断面方法计算肿瘤平均ADC,Dslow,DDC和α值,同时提取基于肿瘤容积的ADC,Dslow,DDC和α的78个影像组学特征值(包括19个First order特征,27个GLCM特征,16个GLRLM特征和16个GLSZM特征),统计学分析采用Student's t-test检验(正态分布)或者Mann Whitney U-test检验(非正态分布),Shapiro-Wilk's tests用于数据正态性检验.ROC分析用于评估IDH1基因突变预测效能,并计算曲线下面积AUC,P＜0.05差异有统计学意义.结果:①IDH1突变组α和Dslow均较IDH1野生组明显增高,AUC值分别为0.721和0.751 (P=0.008和0.019),ADC和DDC差异均无显著统计学意义(P均＞0.05);②全肿瘤容积影像组学特征值分析显示,3个α组学特征值、7个Dslow组学特征值在IDH1突变组较野生组均明显增高,P＜0.05,其中α特征值中90 Percent诊断效能最高,AUC值为0.778 (P=0.007);Dslow特征值GL CM_Difference_variance诊断效能最高,AUC值为0.772 (P=0.016);ADC和DDC组学特征值在两组间差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论:磁共振非高斯弥散成像与低级别胶质瘤IDH1突变状态密切相关,Dslow和α具有预测低级别胶质瘤IDH1突变状态的潜能,IDH1野生型低级别胶质瘤比突变型具有更不均质的水分子弥散微环境.

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是生物界广泛分布的信号分子,涉及动物的重要行为.5-HT是色氨酸羟化酶(Tryptophan hydroxylase,TRH)将L-色氨酸羟化为5-羟-L-色氨酸,5-羟-L-色氨酸随即被多巴脱羧酶(Aromatic L-amino acid decarboxylase,DDC)脱羧而成.TRH作为5-HT合成的限速酶,在无脊椎动物神经调控中具有重要地位.鳞翅目昆虫中TRH的功能研究并不多.在家蚕中克隆了家蚕TRH (Bombyx mori TRH,BmTRH)的cDNA序列1 667 bp,其中包含1 632 bp的开放读码框(Open reading frame,ORF).人类TPH或者果蝇TRH(Drosophila TRH,DmTRH)与BmTRH有高度相似性,尤其BmTRH和DmTRH之间大多数氨基酸保守说明它们在系统发育上的密切关系并可能有相似功能.基因表达分析显示BmTRH主要表达于头部和中枢神经组织,免疫组织化学和Western blotting结果显示BmTRH只存在于神经组织中,即BmTRH可能仅参与家蚕的神经活动.此外,家蚕DDC (B.mori decarboxylase,BmDDC)和蛋白具有TRH活性的苯丙氨酸羟化酶基因(Phenylalanine hydroxylase,BmPAH)也在中枢神经系统中有表达,暗示家蚕神经系统5-HT的合成与果蝇中不同,可能有两种不同的调控机制.

目的 研究非诺贝特对3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶(DDC)诱导的原发性硬化性胆管炎(PSC)的预防作用及机制.方法 将健康雌性野生型和过氧化物酶体增殖物激活受体α(Pparα)基因敲除型小鼠随机各分为4组,分别为正常对照组、PSC模型组、非诺贝特对照组和非诺贝特预防组.非诺贝特对照组和预防组连续10 d每天2次ig给予非诺贝特25 mg·kg-1,PSC模型组给予玉米油;给药第4～10天,PSC模型组和非诺贝特预防组连续食饲含0.1％DDC的饲料诱导PSC,正常对照组和非诺贝特对照组正常饲养.采用生化法测定小鼠血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)水平;HE染色观察肝组织病理改变;RT-qPCR检测肝组织胆固醇7α-羟化酶(Cyp7α1)、固醇12α羟化酶(Cyp8b1)、有机阴离子转运多肽1(Oatp1)、钠离子-牛磺胆酸协同转运多肽(Ntcp)、多药耐药蛋白1α(Mdr1α)、Mdr2、Mrp4、有机溶质转运体β(Ostβ)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(Tnf-α)、细胞因子信号抑制物(Socs3)、c-Fos、c-Jun、Bcl-2、Bax和Bcl-xl mRNA表达水平.结果 与正常对照组相比,野生型和基因敲除型小鼠的PSC模型组GOT,GPT,TBA和ALP均显著升高(P<0.01),肝组织胆管周围发生炎症并有胆淤,表明在2种基因型小鼠中,DDC均成功地诱导了PSC;且RT-qPCR检测结果表明,PSC模型组Cyp8b1和Ntcp mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01),Mdr1α,Ostβ,IL-1β和Socs3 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01).与PSC模型组相比,在野生型小鼠中,非诺贝特预防组肝组织Cyp8b1和Ntcp mRNA表达显著升高(P<0.05),Mdr1α,Mdr2,Ostβ,IL-1β,IL-2,IL-6,IL-10,Socs3,c-Fos,c-Jun,Bcl-2和Bax mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01);而在基因敲除型小鼠中,非诺贝特预防组肝组织未见明显病理损伤,炎症和胆汁酸代谢相关基因mRNA表达水平均未见改善.在2种基因型小鼠中,非诺贝特对照组上述各指标与正常对照组均无明显差异.结论 非诺贝特可通过调节胆汁酸代谢和抑制炎症反应预防DDC诱导的小鼠PSC,且该作用依赖于PPARα介导.

目的 报道芳香族L-氨基酸脱羧酶缺乏症(AADCD)患儿的临床表现及基因特征.方法 分析2例AADCD患儿的临床资料及基因结果,并复习相关文献.结果 2例女性患儿,均为新生儿期起病,表现为喂养困难、运动发育落后、眼球震颤、痉挛发作.2例患儿均于1岁余行基因检测,发现DDC基因第13外显子的杂合突变c.1234C>T,例1来源于母亲,例2来源于父亲;同时例1和例2也均携带新的杂合突变c.170 A>G(p.I57T)和c.179 T>C(p.V60A),临床意义不明.结论 2例AADCD患儿均有典型临床表现,早期基因检测识别确诊有助于改善预后.