乳头状甲状腺癌症(PTC)约占所有甲状腺癌(TC)的80％,由于其在所有癌症类型中的发病率增长最快,已引起全球广泛关注[1].大多数PTC患者在手术、放疗和化疗后具有良好的预后[2].然而,由于肿瘤转移,复发率大大增加,导致病人病情加重甚至死亡[3].基因诊断和治疗已经成为预防和治疗PTC的研究热点,因此,了解PTC进展的分子机制,寻找PTC的潜在靶点具有重要意义.

目的:通过分析FAM83H基因突变导致遗传性牙釉质发育不全（amelogenesis imperfecta，AI）病例的牙萌出异常特征，揭示FAM83H基因可能存在的新表型和新功能，为精准诊治AI等遗传性疾病奠定基础。方法:通过PubMed数据库检索已发表的FAM83H突变导致的AI病例，检索关键词为“（FAM83H）AND（amelogenesis imperfecta）”，文献发表时间为2008年1月1日至2023年2月28日。文献纳入标准为能够提供患者详细的影像学资料或牙萌出信息以及FAM83H基因突变资料。收集文献来源的每位患者的基本信息、牙齿表型特征和突变基因信息，分析和总结其牙萌出异常的部位和数量特征。结果:在检索到的45篇相关文献中，20篇符合纳入标准，并提供了50例具有影像学资料或牙萌出详细资料、携带FAM83H突变的AI患者的相关信息，共有12例（24%）患者出现了牙萌出异常，累计34颗患牙，其中85%（29/34）的患牙无任何萌出阻力，为埋伏牙［74%（25/34）］或部分萌出［12%（4/34）］。牙位分析发现，尖牙和第二磨牙萌出异常占比最高，均占38%（13/34）。结论:FAM83H基因突变导致AI的同时，还可引起特定牙位牙萌出异常。

利用生物信息学方法筛选肺癌H460 顺铂耐药细胞(H460/DDP)中的差异表达基因,从Gene Expression Omnibus (GEO)公共数据库获得肺癌H460 及其顺铂耐药细胞株的基因表达芯片GSE21656,利用GEO2R软件分析差异表达基因,利用DAVID 在线数据库对差异基因进行重注释和功能富集分析.本研究共筛选出相关的差异表达基因75个,与H460 细胞相比,H460/DDP 细胞中有24个表达上调,51个表达下调,差异均具有统计学意义.预后分析的结果表明,高表达RAB3C [HR 1.33(1.13～1.56), p＜0.01]、SERPINB1 [HR 1.32(1.12～1.56), p<0.01]、CHRNA9 [HR 1.25(1.1～1.42), p<0.01]、FAM83A [HR 1.27 (1.08～1.5), p<0.01]、IGFBP4[HR 1.35 (1.19～1.53), p<0.01]和IGF2BP1 [HR 1.47(1.24～1.73), p<0.01]基因的肺癌患者拥有较差的总生存期.

目的 探讨微小RNA?3182(miR?3182)在肝癌细胞凋亡和放射敏感性中的作用及机制.方法 实时荧光定量PCR与Western blot检测肝癌细胞系及正常肝细胞中miR?3182、FAM83A的表达;miR?3182 mimics与si?FAM83A分别转染入肝癌MHCC97H细胞,采用平板克隆形成实验检测miR?3182与FAM83A对肝癌细胞放射敏感性的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测Bcl?2、Bax的表达;生物信息学预测miR?3182下游调控的靶基因,双荧光素酶报告基因实验、Western blot法进一步验证.结果 miR?3182在肝癌细胞系中表达下调,而FAM83A表达上调;miR?3182过表达或抑制FAM83A表达后细胞放射敏感性增强,Bcl?2表达下调,Bax表达上调;miR?3182可靶向结合FAM83A,并可负性调控FAM83A表达;FAM83A过表达能够逆转miR?3182过表达对肝癌细胞凋亡及放射敏感性的作用.结论 miR?3182过表达可通过靶向调控FAM83A的表达促进肝癌细胞凋亡、抑制其存活从而提高肝癌细胞的放射敏感性.

目的:研究FAM83A基因对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤生长的影响.方法:运用qRT-PCR法检测非小细胞肺癌细胞H1299中FAM83A的表达;将blank组(未作任何处理)、si-control组(转染si-control)、si-FAM83A组(转染si-FAM83A)用脂质体法转染至H1299细胞;Western blot检测细胞中FAM83A、p16、p21、MMP-2、MMP-9的蛋白表达;MTT法检测细胞的增殖;Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭;裸鼠成瘤实验检测肿瘤的生长.结果:沉默FAM83A后,H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力均得到显著下调,并且p16、p21的蛋白表达明显上调,MMP-2、MMP-9的蛋白表达明显下调.最重要的是,沉默FAM83 A后的异种移植裸鼠体内的肿瘤生长能力得到明显抑制.结论:沉默FAM83 A可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制裸鼠体内肿瘤的生长.

背景与目的:食管鳞癌是常见的消化道恶性肿瘤,基因异常表达参与食管鳞癌的恶性生物学行为.探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的FAM83H在食管鳞癌组织中的表达水平,以及其表达水平与临床病理学参数之间的关系,初步研究FAM83H对食管癌细胞生物学行为的影响.方法:用TGF-β1处理食管癌细胞Eca109后,在倒置显微镜下观察Eca109细胞形态学的变化.应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测TGF-β1处理前后食管癌细胞中上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物以及FAM83H表达水平的变化.应用RTFQ-PCR检测FAM83H在不同食管癌细胞系、67例2015—2017年河北医科大学第四医院生物样本库收集的食管鳞癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,并分析其表达水平与临床病理学参数之间的关系.应用MTS实验以及transwell小室迁移、侵袭实验检测FAM83H在体外对食管癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.结果:TGF-β1处理后,Eca109细胞的形态变为细长梭形、纺锤形,呈现出明显的间充质细胞形态;Eca109细胞中E-cadherin表达水平降低,而N-cadherin、vimentin、Snail、Twist 1表达水平均显著升高(P<0.05).同时,TGF-β1处理后,FAM83H表达水平上调(P<0.01).FAM83H在食管鳞癌组织中表达升高(P<0.05),与食管鳞癌患者病理学分化程度相关(P<0.05).FAM83H在食管癌细胞系中表达升高(P<0.01).转染针对FAM83H的小干扰RNA后,可以显著抑制FAM83H的表达水平(P<0.05).在体外FAM83H促进食管癌细胞的增殖、迁移及侵袭(P<0.05).结论:TGF-β1诱导EMT过程以及FAM83H表达,FAM83H表达水平升高可能与食管鳞癌的发生、发展相关,且在体外促进食管癌细胞的增殖、迁移及侵袭.

目的 探讨长链非编码RNA(Long non-coding RNA,IncRNA)APTR、HEIH、FAS-ASA1、FAM83H-AS1、DICER1-AS1、PR-lncRNA在肺癌患者中的表达.方法 收集昆明医科大学第三附属医院肺癌手术患者的癌组织,癌旁正常组织及肺癌淋巴结转移组织,利用TRI z o l提取总 RNA,再用SYBR Green实时荧光定量PCR检测每种基因的RNA相对表达量.结果 APTR在淋巴组织中表达升高(P < 0.05),HEIH在淋巴组织中表达下降(P < 0.05),FAM83H-AS1和、PR-lncRNA在肺癌组织中表达升高(P < 0.05).结论 APTR在淋巴组织中高表达,可能有促进肺癌淋巴结转移的作用;FAM83H-AS1及PR-lncRNA癌组织中表达上调,可能会促进肺癌的发生发展.

目的:验证遗传性釉质发育不全(amelogenesis imperfecta,AI)相关基因FAM83H突变(c.1354C>T,p.Gln452*)后的功能.方法:构建FAM83H突变(c.1354C>T,p.Gln452*)和空白对照野生型慢病毒载体;应用转染技术感染人胚肾上皮细胞(HEK293T),对转染后的细胞形态进行观察;用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞中FAM83H信使RNA(mRNA)的表达水平;细胞免疫荧光技术(immunofluorescence technique)检测转染后的细胞中FAM83H蛋白细胞定位的改变.结果:慢病毒转染HEK293T细胞后,细胞形态无明显变化,FAM83H突变细胞中,mRNA表达低于对照组;细胞免疫荧光结果显示,FAM83H突变后,胞内定位改变,主要在胞核表达,少量表达于细胞质,提示FAM83H胞内作用位点的改变可能导致釉质钙化不全.结论:突变FAM83H改变了其蛋白在HEK293T细胞中的表达及定位,为进一步理解FAM83H突变导致AI的发病机制提供了依据.

目的 探讨长链非编码RNA FAM83H-AS1调控肺腺癌细胞化学治疗(简称化疗)敏感性(培美曲塞和顺铂)的作用效果及机制.方法 实时定量PCR法检测FAM83H-AS1在肺腺癌组织和细胞系中的表达.CCK8法检测并计算肺腺癌细胞对培美曲塞和顺铂的半抑制率(IC50).基于TCGA数据库,应用生物信息学方法分析FAM83H-AS1与ATP结合盒亚家族C成员1(ABCC1)基因表达的相关性.Western boltting检测ABCC1蛋白的表达.结果 与癌旁正常肺组织和人肺泡上皮细胞相比,FAM83H-AS1在肺腺癌组织和细胞系(PC9和A549)中高表达.FAM83H-AS1的表达与肺腺癌患者的吸烟史和化疗不敏感呈正相关.与化疗敏感的肺腺癌组织和细胞系(A549)相比,FAM83H-AS1在化疗(培美曲塞和顺铂)耐药的肺腺癌组织和细胞系(A549/CR)中高表达.沉默FAM83H-AS1能够降低A549/CR细胞对培美曲塞和顺铂的IC50,提高对化疗药物的敏感性.在肺腺癌中FAM83H-AS1与多药耐药相关基因ABCC1的表达呈正相关.沉默FAM83H-AS1能够降低A549/CR细胞中ABCC1蛋白的表达.结论 FAM83H-AS1在肺腺癌中高表达,且与肺腺癌的化疗不敏感相关,沉默FAM83H-AS1通过下调ABCC1蛋白的表达提高肺腺癌细胞对培美曲塞和顺铂的敏感性.

目的:探讨一个遗传性釉质发育不全(amelogenesis imperfecta,AI)家系的临床表型和致病基因,为该病的临床诊断和遗传咨询提供依据.方法:收集先证者及其家系成员的临床资料,同时采集家系成员的外周血,提取全基因组DNA,全外显子组测序检测可能的致病基因,进一步对候选变异进行Sanger测序验证.结果:该家系患病成员的临床表现为全口牙呈黄褐色,釉质质地较软,剥脱磨损,牙面粗糙不规则,釉质密度接近牙本质,符合AI中的亚型钙化不全型的临床表型;同时该家系患病成员在FAM83H基因第5外显子上均存在c.1366C>T(p.Gln456*)的无义突变,已有该变异致病性的相关报道,且未患病的家系成员未发现上述突变.结论:该家系患有常染色体显性遗传钙化不全型AI,FAM83H基因第5外显子c.1366C>T(p.Gln456*)的无义突变是该家系的致病原因,本研究为该家系的诊断和遗传咨询提供依据.