目的 观察木犀草素对流感病毒感染引起的细胞炎症反应的影响,探讨木犀草素调控流感病毒引发的免疫反应的作用机制.方法 ①用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度木犀草素(5、10、25、30 μmol/L)对小鼠巨噬细胞RAW 264.7存活率的影响.②咪喹莫特(R837)刺激RAW 264.7或原代腹腔巨噬细胞的同时,用不同浓度木犀草素(5、10、20 μmol/L)干预细胞3、6、18 h后,用荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、β干扰素(IFN-β)、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)以及血红素加氧酶-1(HO-1)基因及TNF-α、IL-6的表达水平.③R837刺激RAW 264.7细胞的同时,用不同浓度木犀草素(5、10、20 μmol/L)干预细胞1、3 h,用Western blot法检测细胞核因子-κB(NF-κB)p65蛋白、磷酸化p65(p-p65)蛋白、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)蛋白、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)和核内核因子红细胞2相关因子(Nrf2)蛋白的表达水平.④用Nrf2抑制剂(ML385)处理RAW 264.7细胞12 h后,加入R837和木犀草素(5 μmol/L)继续培养6 h,用RT-qPCR法检测细胞IL-6、TNF-α、IL-1β、IFN-β、IP-10 mRNA的表达水平.⑤流感病毒A/PR/8(PR8)感染A549细胞2 h,同时用不同浓度木犀草素(5、10、20 μmol/L)处理细胞10 h,用RT-qPCR法检测细胞IL-6、TNF-α、IL-1β、IFN-β、IP-10和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA的表达水平.结果 ①30 μmol/L以内各浓度木犀草素对RAW 264.7细胞存活率没有明显影响(P>0.05).②木犀草素能够显著降低R837诱导的RAW 264.7细胞IL-6、TNF-α的表达水平和IL-1β、IFN-β、IP-10 mRNA表达水平,且木犀草素也能显著降低原代腹腔巨噬细胞IL-6、TNF-α的表达水平.③木犀草素可以促进Nrf2入核,上调HO-1 mRNA表达并抑制p-p65表达,促进糖原合成酶激酶3β(GSK3β)的磷酸化.④在R837诱导的巨噬细胞炎症反应中,ML385可恢复木犀草素抑制的RAW 264.7细胞炎症因子IL-6、IL-1β、IFN-β和IP-10 mRNA的表达水平.⑤木犀草素抑制PR8感染引起的A549细胞炎症因子的产生.结论 木犀草素可通过抑制GSK3β活性促进Nrf2/HO-1通路,从而抑制流感病毒感染引起的炎症反应.

目的:评价体外循环(CPB)致大鼠肺损伤与乙酰转移酶p300(p300)的关系。方法:SPF级健康雄性SD大鼠18只，12～16周龄，体质量350～450 g，采用随机数字表法分为3组( n＝6)：假手术组(S组)、CPB组和CPB＋左肺缺血再灌注组(CPB＋IR组)。CPB＋IR组在CPB过程中采用夹闭左肺门45 min后开放的方法制备肺缺血再灌注损伤模型，30 min后停止CPB，继续机械通气1.5 h后结束实验。分别于CPB前、开放肺门后10 min和实验结束即刻行动脉血气分析，计算氧合指数(OI)和呼吸指数(RI)。实验结束即刻收集大鼠左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)及左肺组织，采用ELISA法检测BALF IL-6、TNF-α、总蛋白和肺组织IL-17浓度，采用Western blot法检测肺组织p300、磷酸化p300(p-p300)和乙酰化组蛋白H3(AC-H3)表达，免疫组化染色法检测肺组织p-p300表达，光镜下观察肺组织病理学结果，并行病理损伤评分。 结果:与S组比较，CPB组和CPB＋IR组开放肺门后10 min和实验结束即刻OI降低，RI升高，肺组织病理损伤评分、BALF IL-6、TNF-α、总蛋白和肺组织IL-17水平升高，p300、p-p300和AC-H3表达上调( P<0.05)；与CPB组比较，CPB＋IR组开放肺门后10 min和实验结束即刻OI降低，RI升高，肺组织病理损伤评分、BALF IL-6、TNF-α、总蛋白和肺组织IL-17水平升高，肺组织p300、p-p300和AC-H3表达上调( P<0.05)。 结论:CPB致大鼠肺损伤的机制可能与肺组织p300表达上调和活性增强，炎症因子释放增加有关。

目的:探讨敏感肺结核患者血清白细胞介素1(IL-1)、IL-10水平表达情况，并分析两指标与患者预后的关系。方法:采用前瞻性队列研究。选取2017年5月至2018年5月海南医学院第二附属医院敏感肺结核患者为研究对象。患者均接受2HRZE/4HR方案治疗(至少6个月)，并在患者治愈后持续随访2年(至2020年5月)，随访期间，患者接受痰结核分枝杆菌厚涂片、痰菌培养等检查，并记录相关结果及痰菌复发的情况。根据随访结果分为预后良好组(未复发)与预后不良组(复发)。自制基线资料调查问卷调查患者一般人口学特征；采用酶联免疫吸附法测定血清IL-1、IL-10、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(INF-γ)水平；全自动血细胞分析仪测定白细胞计数(WBC)。比较2组一般资料及实验室指标，并进行logistic回归分析；绘制受试者工作特征曲线，分析IL-1、IL-10预测敏感肺结核患者治疗后短期预后不良的价值；双变量Pearson直线相关性检验敏感肺结核患者血清IL-1和IL-10的关系。结果:本研究共纳入200例敏感肺结核患者，其中11例治疗失败剔除本次研究，5例失访，最终184例患者纳入本次研究。随访2年，经评估184例敏感肺结核患者中18例治愈后复发，预后不良发生率为9.78%(18/184)。预后不良组患者WBC、CRP、TNF-α、INF-γ、IL-1、IL-10均高于预后良好组( P值均<0.05)；经logistic回归分析检验结果显示，敏感肺结核患者IL-1、IL-10与预后有关( OR＝1.68、5.00， P值均<0.05)；WBC、CRP、TNF-α、INF-γ与肺结核患者预后结局无关( P值均>0.05)；绘制受试者工作特征曲线，结果显示，入院时血清IL-1、IL-10单独及联合预测敏感肺结核患者预后不良的曲线下面积分别为0.88、0.88、0.93，均有一定预测价值；经Spearman相关性分析检验，敏感肺结核患者血清IL-1与IL-10水平呈正相关( r＝0.28， P<0.05)。 结论:敏感肺结核患者血清IL-1、IL-10水平表达的临床意义在于预测敏感肺结核患者预后不良，IL-1、IL-10水平高会增加预后不良的风险。

目的:分析过敏性鼻炎(allergic rhinitis，AR)患者外周血CD4 ＋Th17细胞中IL-18、IL-18结合蛋白a(IL-18-binding protein a, IL-18BPa)和IL-18受体α(IL-18 receptor α，IL-18Rα)的表达水平及过敏原对其表达的影响。 方法:选择2019年10月—2020年9月锦州医科大学附属第一医院过敏反应科门诊AR患者45例和该医院体检中心体检者23例(健康对照组)为研究对象。根据皮肤点刺试验结果，将患者分为阳性组(AR组，24例)和阴性组(nAR组，21例)。收集受试者血液样本，流式细胞术检测过敏原对CD4 ＋Th17细胞中IL-18、IL-18BPa和IL-18Rα蛋白质表达水平的影响。Bioplex检测血浆中IL-17A水平，并分析其与IL-18 ＋Th17细胞比例的相关性。 结果:与健康对照组比较，AR组患者CD4 ＋Th17细胞和IL-18 ＋Th17细胞比例均增加( P<0.01)，IL-18BPa ＋Th17细胞比例降低( P<0.01)，IL-18BPa的平均荧光强度(mean fluorescence intensity，MFI)增加( P<0.01)，IL-18Rα的MFI降低( P<0.01)；nAR组患者CD4 ＋Th17细胞IL-18BPa的MFI增加( P<0.000 1)，IL-18Rα的MFI降低( P<0.000 1)。与nAR组患者比较，AR组患者IL-18 ＋Th17细胞比例( P<0.05)和IL-18Rα的MFI均增加( P<0.01)。户尘螨和梧桐花粉过敏原粗提液能分别诱导AR组患者IL-18 ＋Th17和IL-18BPa ＋Th17细胞比例增加( P<0.05)。户尘螨过敏原粗提液可直接诱导分选后的健康对照者CD4 ＋Th17细胞表达IL-18和IL-18Rα( P<0.05)。AR组患者血浆IL－17A水平升高( P<0.001)，并与IL-18 ＋Th17细胞比例中度相关( P<0.05)。 结论:过敏原可能通过诱导外周血CD4 ＋Th17细胞表达IL-18和IL-18Rα参与AR发病。

目的:探讨冠心病(CHD)患者血清白细胞介素17A(IL-17A)、血管内皮生长因子(VEGF)、25-羟维生素D 3[25(OH)D 3]水平变化及其与冠状动脉狭窄程度的相关性。 方法:选取临汾市人民医院2017年6月至2018年6月收治的CHD患者40例为观察组，选取该院同期体检健康者60例为对照组。记录两组一般资料，采用全自动生化检测仪检测受试者生化指标，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测受试者血清IL-17A、VEGF、25(OH)D 3水平，采用Gensini积分评价冠状动脉狭窄程度，采用SPASS Pearson软件分析冠心病患者血清IL-17A、VEGF、25(OH)D 3水平与冠状动脉狭窄程度的关系。 结果:观察组收缩压、舒张压、糖尿病比例、高血压比例、高脂血症比例、饮酒比例、吸烟史比例及Gensini积分分别为(140.64±17.65)mmHg、(98.31±9.37)mmHg、20例(50.0%)、31例(77.5%)、26例(65.0%)、22例(55.0%)、20例(50.0%)、(27.43±3.26)分，对照组分别为(128.15±15.60)mmHg、(79.52±10.44)mmHg、17例(28.3%)、34例(56.6%)、27例(45.0%)、21例(35.0%)、18例(30.0%)、(3.10±1.02)分，两组差异均有统计学意义( t＝3.629、9.382，χ 2＝4.833、4.579、3.854、3.917、4.074， t＝45.730，均 P<0.05)；观察组脂蛋白α、血糖分别为(1.46±0.41)g/L、(5.60±1.17)mmol/L，均显著高于对照组的(1.31±0.27)g/L、(5.20±0.56)mmol/L( t＝2.038、2.014，均 P<0.05)；观察组血清IL-17A、VEGF分别为(43.82±5.18)ng/L、(83.77±17.80)ng/L，均显著高于对照组的(37.28±4.37)ng/L、(56.62±16.48)ng/L( t＝6.576、7.695，均 P<0.05)，25(OH)D 3为(15.15±8.67)pg/L，显著低于对照组的(37.34±16.20)pg/L( t＝8.874， P<0.05)。经SPASS Pearson软件分析，冠心病患者血清IL-17A、VEGF与Gensini积分呈正相关( r＝0.567、0.633，均 P<0.05)，25(OH)D 3水平与Gensini积分呈负相关( r＝－0.618， P<0.05)。 结论:CHD患者血清IL-17A、VEGF显著升高，其与冠状动脉狭窄程度呈正相关；血清25(OH)D 3水平显著降低，其与冠状动脉狭窄程度呈负相关。

目的:观察健脾止泻宁颗粒联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠细胞因子以及结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)水平的影响。方法:75只Wistar雄性大鼠采用随机数字表法随机分为5组：正常对照组、模型对照组、健脾止泻宁组、美沙拉嗪组和联合治疗组，每组15只。采用大鼠疾病活动指数(DAI)评分评估大鼠肠炎症状严重程度的指标。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清中细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-18水平，蛋白质印迹法(Western blot)检测结肠黏膜组织中MPO的表达。采用单因素方差分析进行统计学分析。结果:与正常对照组比较，模型组及各个给药治疗组DAI评分均增高，差异有统计学意义( F＝128.574， P<0.05)；与模型组比较，各治疗组DAI评分均降低，差异有统计学意义( F＝128.574， P<0.05)。与模型组比较，健脾止泻宁组、美沙拉嗪组及联合用药组血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和IL-18水平升高( F＝90.948、92.243、132.437、37.070、61.971， P<0.05)，IL-4和IL-10水平降低( F＝82.250、83.657， P<0.05)；与健脾止泻宁组和美沙拉嗪组比较，联合用药组血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和IL-18水平降低( F＝90.948、92.243、132.437、37.070、61.971， P<0.05)，IL-4和IL-10水平升高( F＝82.250、83.657， P<0.05)。与模型组比较，健脾止泻宁组、美沙拉嗪组及联合用药组结肠组织中MPO含量降低( F＝178.140， P<0.05)；与健脾止泻宁组和美沙拉嗪组比较，联合用药组结肠组织中MPO含量降低( F＝178.140， P<0.05)。血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、IL-18的表达水平与大鼠结肠组织中MPO的含量呈正相关( r＝0.821、0.861、0.886、0.718、0.793， P<0.05)，血清IL-4、IL-10的表达水平与大鼠结肠组织中MPO的含量呈负相关( r＝－0.837、－0.817， P<0.05)。 结论:联合使用健脾止泻宁颗粒和美沙拉嗪治疗UC可以产生协同效应。

目的:探讨CD19 +CD27 +CD39 hi调节性B细胞（Breg）在1型糖尿病（T1DM）患者中的特征及临床意义。 方法:为病例对照研究。招募自2022年1至8月在南京医科大学第一附属医院就诊的49例T1DM患者和20名健康对照者，采集研究对象的一般信息和病史，检测T1DM患者的空腹血糖、糖化血红蛋白（HbA 1c）、血清胰岛素和C肽、糖尿病胰岛自身抗体等临床指标；采用流式细胞术分析CD19 +B细胞、CD19 +CD27 +CD39 hi Breg比例及白细胞介素（IL）-10、程序性死亡配体1（PD-L1）的表达；通过酶联免疫吸附法测定血清IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平。组间比较采用独立样本 t检验、Mann-Whitney U检验或 χ2检验。采用Spearman相关分析法评估Breg比例与炎性细胞因子水平之间的相关性。 结果:与健康对照者相比，T1DM患者外周血CD19 +B细胞比例没有变化，CD19 +CD27 +CD39 hi Breg比例显著增加［分别为3.45%（1.80%，7.96%）和1.28%（1.04%，2.17%）， P<0.001］，但其胞内IL-10的表达水平下降（分别为4.96%±3.15%和9.47%±6.52%， P=0.007），PD-L1表达无明显改变。进一步分析发现，发病年龄≥18岁［分别为6.42%（2.89%，11.53%）和2.37%（1.42%，5.26%）， P=0.004］、病程≤1年［分别为5.74%（2.60%，12.58%）和2.95%（1.47%，5.83%）， P=0.026］或峰值C肽>3.30 pmol/L［分别为5.27%（2.19%，10.38%）和2.39%（1.14%，5.42%）， P=0.029］的患者CD19 +CD27 +CD39 hi Breg比例更高。Spearman相关分析结果显示，Breg比例与血清IL-1β水平呈正相关（ r=0.360， P=0.011）。然而，Breg内IL-10的表达与患者的临床特征及炎性细胞因子水平均无关（ P>0.05）。 结论:T1DM患者外周血CD19 +CD27 +CD39 hi Breg数量及功能存在异常，本研究结果进一步补充了T1DM免疫失衡的临床证据。

目的:评价核因子E2相关因子2/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nrf2/NLRP3)信号通路在丙泊酚后处理减轻氧糖剥夺-复糖复氧大鼠海马神经元损伤中的作用。方法:原代培养孕16~18 d Wistar大鼠胎鼠海马神经元7 d，采用随机数字表法分为4组( n＝42)：对照组(C组)正常培养；氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)氧糖剥夺1 h后复糖复氧；丙泊酚后处理组(P组)复糖复氧即刻加入丙泊酚(终浓度1.2 μg/ml)孵育2 h，更换为正常培养液；Nrf2 siRNA(-)转染组(N组)原代神经元培养第3天行携带Nrf2基因敲除的慢病毒转染，24 h后更换为正常培养液，第7天进行模型制备及丙泊酚后处理。于继续培养24 h时收集细胞，采用流式细胞术检测神经元凋亡率，RT-PCR法检测Nrf2和NLRP3 mRNA表达，Western blot法检测Nrf2和NLRP3表达，ELISA法测定TNF-α、IL-6和IL-1β浓度；试剂盒法检测还原性谷胱甘肽(GSH)、SOD和过氧化氢酶(CAT)活性。 结果:与C组比较，O组和P组神经元凋亡率升高，TNF-α、IL-6和IL-1β浓度升高，GSH、SOD和CAT水平降低，Nrf2、NLRP3及其mRNA表达上调，Nrf2细胞核/浆比例增加( P<0.05)；与O组比较，P组神经元凋亡率降低，TNF-α、IL-6和IL-1β浓度降低，GSH、SOD和CAT水平升高，Nrf2及其mRNA表达上调，Nrf2细胞核/浆比例增加，NLRP3及其mRNA表达下调( P<0.05)；与P组比较，N组神经元凋亡率升高，TNF-α、IL-6和IL-1β浓度升高，GSH、SOD和CAT水平降低，Nrf2及其mRNA表达下调，Nrf2细胞核/浆比例降低，NLRP3及其mRNA表达上调( P<0.05)。 结论:Nrf2/NLRP3信号通路参与了丙泊酚后处理减轻氧糖剥夺-复糖复氧大鼠海马神经元损伤的过程。

目的:探究首发和复发青少年抑郁症患者血浆细胞因子水平与疾病严重程度的相关性。方法:前瞻性收集2020年10月至2022年3月在安徽医科大学附属巢湖医院精神科和合肥市第四人民医院门诊及住院的共134例青少年抑郁症患者的临床资料，其中男36例，女98例，年龄12~18（15.3±1.5）岁。根据抑郁症状是否为第1次发作分为首发抑郁症患者（首发组）76例和复发抑郁症患者（复发组）58例。同期招募年龄匹配的健康对照人群（健康对照组）76名，其中男45名，女31名，年龄12~18（15.1±1.8）岁。采用24项汉密尔顿抑郁量表（24-item Hamilton Depression Scale，HAMD 24）评估患者的抑郁程度，以HAMD 24总分35分为界将首发组患者分为轻中度抑郁症患者（52例）和重度抑郁症患者（24例）。使用超敏多因子电化学发光检测技术测定患者的血浆白细胞介素（interleukin，IL）-10、IL-17A、IL-1β、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α（tumour necrosis factor-α，TNF-α）水平。采用Spearman相关分析抑郁症患者的细胞因子水平与疾病严重程度之间的关系，采用多元线性回归分析首发抑郁症患者的疾病严重程度的影响因素，采用二元logistic回归分析首发重度抑郁症患者的危险因素。 结果:3组受试者的血浆IL-1β、IL-6和TNF-α水平差异具有统计学意义（ H=6.46、6.75、6.41，均 P<0.05）；两两比较显示首发组和复发组患者的血浆细胞因子水平差异均无统计学意义（均 P>0.05）；首发组血浆IL-6水平较健康对照组显著升高［ M（ Q1， Q3）］［1.69（1.17，2.45）ng/L比1.34（1.05，2.06）ng/L， Z=-2.67， PBonferroni校正=0.030］。Spearman相关分析显示，首发组HAMD 24总分与IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α水平呈正相关（ r=0.275、0.260、0.300、0.331，均 P<0.05）；复发组HAMD 24总分与任何细胞因子均不具有相关性（均 P>0.05）。在首发组中，与轻中度抑郁症患者相比，重度抑郁症患者的血浆IL-10、IL-17A、IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著升高［分别为0.48（0.33，0.72）ng/L比0.63（0.46，1.10）ng/L、1.89（1.22，3.04）ng/L比3.01（1.94，5.18）ng/L、0.17（0.12，0.36）ng/L比0.42（0.22，0.65）ng/L、1.55（1.12，2.05）ng/L比2.30（1.68，3.75）ng/L、0.92（0.77，1.38）ng/L比1.42（0.95，2.15）ng/L；均 P<0.05］。多元线性回归及二元logistic回归分析均显示，LgIL-6水平是疾病严重程度的危险因素（多元线性回归：β=2.550，95% CI：1.258~10.724， P<0.05；二元logistic回归： OR=12.499，95% CI：2.061~75.806， P<0.05）。 结论:较高水平的血浆IL-6与首发青少年抑郁症患者较严重的抑郁症状具有相关性，是重度抑郁症患者的危险因素。

目的:探讨白细胞介素（interleukin，IL）-7受体α抗体对MRL/lpr狼疮小鼠免疫炎症和肾脏损伤的作用。方法:15只体重15~16 g无特定病原体3~4周龄雌性MRL/lpr小鼠饲养至14周龄，随机分为IL-7受体α抗体干预组、IL-7受体α同型抗体组（阳性对照组）和生理盐水组（阴性对照组），分别腹腔注射IL-7受体α抗体、同型抗体和生理盐水，每周3次，每次100 μg，共4周。18周龄时处死小鼠，考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白量；过氧化物酶法检测血清肌酐；酶联免疫吸附测定法检测自身抗体（抗双链DNA抗体）、炎性因子肿瘤坏死因子α、γ干扰素、IL-21的表达；PAS染色和天狼星红染色检测肾组织病理；免疫组化法检测肾组织CD3、F4/80的表达；流式细胞术检测调节性T细胞、囊泡样辅助性T细胞（follicular helper T cells，Tfh）和囊泡样调节性T细胞（follicular regulatory T cells，Tfr）亚群并计数。结果:与生理盐水组和IL-7受体α同型抗体组比较，IL-7受体α抗体干预组24 h尿蛋白量及血清肌酐、抗双链DNA抗体、γ干扰素、IL-21均降低（均 P<0.01），但三组间血清肿瘤坏死因子α的差异无统计学意义（ F=0.39， P>0.05）。与生理盐水组和IL-7受体α同型抗体组比较，IL-7受体α抗体干预组肾脏组织CD3和F4/80阳性浸润细胞减少，Ⅰ/Ⅲ型胶原纤维比值下降（ F=41.11， P<0.01）；血液中调节性T细胞（CD4 +CD25 +Foxp3 +）/效应T细胞（CD4 +CD25 +）比值增高（ F=21.64， P<0.01），且外周血和脾脏中Tfr（CD4 +CXCR5 +Foxp3 +）/Tfh（CD4 +CXCR5 +）比值均升高（ F=38.95， P<0.01； F=12.90， P<0.01）。 结论:IL-7受体α抗体可能通过升高调节性T细胞比例、Tfr/Tfh比值，降低自身抗体如抗双链DNA抗体生成，减少炎性因子生成，从而减轻MRL/lpr狼疮小鼠的免疫炎症和肾脏损害。