目的 研究泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响.方法 泥浆悬液和稀释血混合,制成混有灰尘、泥土的生物样本以模拟现场生物物证,分别用加热裂解和胍盐化学裂解的方式进行细胞裂解,硅珠法提取DNA后用Identifiler Plus试剂盒进行PCR扩增及毛细管电泳检测,并对电泳结果进行比较;用泥浆悬液代替硅珠提取稀释血DNA,反向验证泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响.结果 混有泥浆悬液的4μL、20 μL稀释血加热裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 969.7±376.9 RFU、9 706.7±349.8 RFU;混有泥浆悬液的4 μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后无法获得完整STR分型;混有泥浆悬液的20 μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 899.8±801.3 RFU;泥浆悬液代替硅珠提取20 μL稀释血得到完整STR分型.结论 泥土中的二氧化硅在胍盐存在条件下会与DNA结合,导致硅珠法提取现场生物物证DNA的回收效率降低.

目的 对贵州汉族人群在Identifiler体系中的15个短串连重复序列(STR)基因座进行遗传多态性调查.方法 采用荧光标记STR-PCR复合扩增、毛细管电泳基因分型技术,对1 000名贵州汉族人群无关个体进行15个STR基因座的基因分型,计算其等位基因频率、杂合度(H)、匹配概率(PM)、个人识别力(DP)、非父排除率(PE)、多态信息总量(PIC)、父权指数(PI)等多态性参数,并进行统计学分析.结果 在贵州汉族人群1 000名无关个体中共检出178个等位基因,其频率分布为0.0005～0.531 5.15个STR基因座的基因型分布进行x2检验符合Hardy-Weinberg平衡定律(P＞0.05).杂合度为0.603 0 ～ 0.880 0;个人识别力为0.786 1 ～ 0.966 6,累积DP＞ 0.999 999 999;匹配概率为0.0334 ～0.2139,累积PM=1.198×10-17;三联体非父排除率为0.294 5 ～0.754 8,累积CPE=0.999 998 925;二联体非父排除率为0.1959～0.571 6,累积CPE=0.999 760 600;多态信息含量为0.545 1 ～0.849 2,累积PIC=0.999 999 999;亲权指数为1.2 594～4.1 667.结论 贵州汉族人群检测的15个STR基因座具有高度多态性,是较理想的遗传标记,统计的等位基因频率等基础数据可为本地区的个人识别、三联体亲子鉴定及群体遗传学研究提供依据,但在二联体亲子鉴定中运用存在一定风险.

1 案例资料1.1 简要案情2016年4月16日至24日在xx市x区两条河内,陆续发现10块人体组织,包括头颅2个、上肢4个、下肢4个,发现尸块当天有大雨.5月24日在距离抛尸现场5公里的树林里发现疑被雨水浸湿过且沾满血迹和脂肪的被子及两件衣服.1.2 DNA检验提取腐败头颅内软骨组织及胳膊上近骨肌肉;剪取被子衣服上血迹.采用Prepfiler试剂盒提取DNA;使用Identifiler Plus试剂盒进行STR分型.通过分析被子及衣服上血迹滴落的形态,先后取材500余份,经DNA检验,在被罩上的缝线线头,被罩头、尾部检出两名死者及一名男性的混合STR分型.录入全国公安系统DNA数据库未比中嫌疑人.

目的 以随机模拟法对大量混合样本拆分进行统计分析. 方法 在Identifiler、PP18D、AGCU EX20、PP21、AGCU EX20 & AGCU 21+1等5个系统中,使用自主研发软件模拟100万组混合样本,每组逐个拆分,统计平均拆分基因座数(L)和平均拆分组合数(Π). 结果 Identifiler、PP18D、AGCU EX20、PP21、AGCU EX20 & AGCU 21+1系统的L分别为4.8、5.8、6.7、7.0、11.1;Π分别为3.71×104、1.06×105、3.34×105、6.40×105、2.48×1012. 结论 本文结果对于混合样本拆分具有一定的指导意义.

本文对贵州省遵义地区布依族164名健康无关个体的15个常染色体STR基因座进行遗传多态性调查.采用Chelex-100法提取样本DNA,应用Identifiler-plus试剂盒进行复合扩增及毛细管凝胶电泳检测.研究共观察到136个等位基因和424种基因型,各基因座基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P＞0.05).所调查的贵州遵义地区布依族人群15个STR基因座具有较好的识别能力.

目的 比较GlobalFiler、PowerPlex 21及Identifiler Plus3种PCR扩增试剂盒对陈旧口腔拭子的检验效率.方法 采用硅珠法提取150份保存7-13年陈旧口腔拭子的DNA,分别用GlobalFiler、PowerPlex 21及Identifiler Plus试剂盒进行扩增检测,比较分析所得分型数据.结果 在150份降解样本的检验结果中,GlobalFiler试剂盒21个常染色体STR基因座有效分型检出率为76％,PowerPlex 21试剂盒20个STR基因座检出率为74.93％,Identifiler Plus所含的15个STR基因座检出率为77.56％.结论 对于陈旧口腔拭子检材,Identifiler Plus检验成功率最高,需要更多基因座时,GlobalFiler优于PowerPlex 21.

目的 观察磁粉刷显后联合硅珠法对光滑非渗透性客体汗潜指印STR分型检验的影响.方法 制备磁粉刷显后指印样本(实验组)45份和对应未加磁粉显现的指印样本(对照组)45份,脱落细胞经两步擦拭法转移至提篮套管中,采用硅珠法抽提DNA,AmpFlSTR Identifiler?Plus试剂盒进行STR复合扩增,3500XL遗传分析仪电泳检测扩增产物,用GeneMapper?ID-X软件进行基因分型判定.以5名受试者已知分型为对照,记录每个样本检出等位基因的个数.两组样本检出STR基因座数个数差异利用配对样本t检验进行统计学分析.结果 经磁粉显现后的指印样本(实验组)检出STR基因座个数与对应未加磁粉显现的指印样本(对照组)比较无统计学差异(P>0.05).结论 磁粉刷显联合硅珠法对脱落细胞STR检验无影响,正确运用可为侦查办案提供更多线索和依据.

目的 对不同载体上人体脱落细胞的富集方法进行比较研究.方法 选取使用过的口罩、衣服、手套,分别采取负压吸附、粘取、剪取和擦拭4种方法富集脱落细胞.用QIAGEN QIAamp DNA Investigator Kit提取DNA,用AB Identifiler系统进行PCR扩增,用AB 3130 XL自动遗传分析仪进行扩增产物的电泳分离,用Gen-emapper ID v3.2软件进行STR分型.结果 口罩、手套类体积小的载体,采取负压吸附、粘取、剪取、擦拭的方法,均能得到完整的STR分型图谱;而对于大件的衣服载体,采用负压吸附和直接剪取明显斑迹处可得到完整的STR分型图谱.结论 对于纺织类渗透性载体,体积较大时可采用负压吸附法富集人体脱落细胞;对于有明显斑迹的,可直接剪取可疑斑迹进行检测;体积较小的载体,可采用脱落细胞富集器粘取,富集尽可能多的人体脱落细胞.

目的 黑色塑料袋上潜在指印经“502”胶熏显后,观察比较5种脱落细胞转移方法对STR分型影响.方法 在黑色塑料袋上捺印手印230枚,经“502”胶熏显后分别采用实物剪取、去离子水、无水乙醇、丙酮、解胶剂等5种方法转移脱落细胞,硅珠法抽提DNA,AmpFeSTR(R) Identifiler(R) Plus试剂盒进行STR复合扩增,3500XL遗传分析仪电泳检测扩增产物,等位基因分型用GeneMapper(R) ID-X软件判读分析.记录每个样本检出等位基因的个数.各组间差异利用SPSS13.0软件进行统计学分析.结果 5种方法转移后的检材STR检出率差异明显.以STR检出≥13个基因座为标准,去离子水组最高(检出率82.6％),解胶剂组次之(检出率78.3％),实物剪取组最低(检出率34.8％),以每例样品RFU值≥5000为检验满意标准,解胶剂组的检验满意度最高(26.1％).结论 使用解胶剂类溶剂可以有效转移“502”胶中的脱落细胞,为“502”胶熏显客体中的脱落细胞的STR检验提供新思路.

目的 建立对衣物类生物检材STR检验的有效自动提取纯化方法.方法 对100例衣物类生物检材用EZ1(R) DNA Investigator试剂盒、EZ1(R)Advanced XL工作站的Large-Volume程序(大体积法)进行提取纯化,AmpFLSTR(R)Identifiler(R) Plus荧光STR复合扩增,3500xL型遗传分析仪分析结果.结果 69份检材中检出了单一DNA分型结果,9份检出了混合基因型,22份未检出基因型.结论 该方法对衣物类生物检材DNA提取纯化后进行荧光STR检测,可应用于法庭科学实践.