目的 用生物信息学方法预测脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的上游调控miRNA,体外培养子宫内膜癌细胞Ishikawa,了解微小核糖核酸-409-3p(miR-409-3p)是否通过抑制FABP4的表达水平,进而影响Ishikawa细胞的生物学行为.方法 实验分为control组、miR-409-3p mimics组、miR-409-3p inhibitor组、miR-409-3p NC组、FABP4-OE组及FABP4-shRNA组6组,采用实时定量聚合酶链式反应及蛋白质印迹法检测miR-409-3p及FABP4在Ishikawa中的表达情况;采用细胞增殖实验(CCK-8)、细胞侵袭及迁移实验(Transwell法)检测miR-409-3p与FABP4对Ishikawa细胞增殖、侵袭以及迁移能力的影响;用双荧光素酶报告基因实验在Ishikawa细胞中检测miR-409-3p对FABP4的调控作用.结果 1)在Ishikawa细胞中下调FABP4的表达后,Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05);在Ishikawa细胞中上调FABP4的表达后,Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著升高(P<0.05).2)在Ishikawa细胞中转染miR-409-3p mimics后,FABP4的表达水平以及Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05);而转染miR-409-3p inhibitor后,FABP4的表达水平以及Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著升高(P<0.05).3)双荧光素酶报告基因结果显示,在Ishikawa细胞中miR-409-3p可靶向调控FABP4.结论 高表达的FABP4促进Ishikawa细胞增殖、侵袭及迁移,miR-409-3p可通过下调FABP4的表达进而抑制Ishikawa细胞发生转移.

目的 探讨锌指蛋白750(ZNF750)在子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭和迁移中的作用并筛选其调控的潜在靶基因.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞转染ZNF750过表达质粒(OE-ZNF750组)和ZNF750干扰片段(si-ZNF750组)后ZNF750的mRNA和蛋白质表达水平;细胞计数试剂盒8(CCK8)检测细胞增殖能力,Trans well实验检测细胞的侵袭和迁移能力;基因表达微阵列分析结合生物信息学方法筛选ZNF750调控的候选靶基因.设置对照组(NC组),组间比较采用t检验和非参数检验.结果 上调ZNF750基因第72 h,CCK8实验结果显示,与NC组(5.79±0.20)相比,OE-ZNF750组(4.70±0.10)Ishikawa细胞的增殖能力降低,t=10.571,P＜0.001;Transwell 实验结果显示,NC 组细胞侵袭数为(156.44±7.84)个,迁移数为(125.55±19.69)个,OE-ZNF750组细胞侵袭数为(103.44±19.21)个,迁移数为(49.33±14.15)个,差异均有统计学意义,t值分别为7.660 和 9.428,均 P＜0.001.下调 ZNF750 基因第 72 h,CCK8 实验结果显示,与 NC 组(5.21±0.07)相比,si-ZNF750组(5.59±0.12)Ishikawa细胞的增殖能力升高,t=-5.876,P＜0.001;Trans well实验结果显示,NC组细胞侵袭数为(159.11±32.91)个,迁移数为(84.88±11.47)个,si-ZNF750 组细胞侵袭数为(314.77±24.06)个,迁移数为(181.11±18.01)个,差异均有统计学意义,t值分别为一 11.454和一 13.518,均P＜0.001.通过基因表达微阵列分析筛选ZNF750的下游靶基因,结果显示,上调ZNF750后,有414个差异表达基因,下调ZNF750后,有50个差异表达基因,结合生物信息学筛选出与癌症相关的基因有RAC2、KLF4、FN1、IGF2和MAGEA2.qRT-PCR结果显示,上/下调ZNF750后,与NC组相比,KLF4、RAC2、MAGEA2和IGF2的mRNA表达水平显著升高/降低,FN1的mRNA表达水平显著降低/升高,差异均有统计学意义,均P＜0.05.结论 在子宫内膜癌细胞中,ZNF750作为抑癌基因发挥作用,抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移,RAC2、KLF4、FN1、IGF2和MAGEA2为ZNF750的潜在候选靶基因.

目的:利用温敏性水凝胶泊洛沙姆 407(P407)负载Erastin缓释系统诱导人子宫内膜癌细胞(Ishikawa)铁死亡.方法:构建并评估负载Erastin水凝胶复合物(P407Era)的物理表征、相变时间和缓释性能.实验分为对照(control,Ctrl)组、水凝胶(P407)组、Erastin处理(Erastin)组和水凝胶负载 Erastin(P407Era)组.CCK-8 检测细胞增殖情况,ROS试剂盒检测细胞内活性氧含量,TUNEL原位细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡,Mito-Tracker Red CMXRos检测细胞线粒体膜电位,Mito-FerroGreen检测线粒体内Fe2+含量,免疫荧光和RT-qPCR检测铁死亡相关分子的表达水平.结果:P407 水凝胶的相变时间与浓度呈负相关,18%浓度的P407 水凝胶复合物药物缓释性能较优.与对照组相比,P407 组、Erastin组和P407Era组的Ishikawa细胞增殖、迁移和侵袭均受明显抑制,且P407Era组比Erastin组抑制增殖、迁移和侵袭作用更加明显;Erastin组及P407Era组细胞活性氧水平、细胞凋亡相对数量显著升高;细胞线粒体膜电位和线粒体Fe2+结果显示,Erastin组和P407Era组细胞线粒体膜电位显著下降,且线粒体Fe2+含量显著升高;免疫荧光结果显示Erastin组及P407Era组GPX4 含量显著降低,NRF2 含量无明显变化;Erastin组及P407Era组TFR1、NCOA4 和P53 的mRNA表达水平显著升高.结论:温敏性水凝胶泊洛沙姆 407 负载Erastin缓释系统诱导人子宫内膜癌细胞发生铁死亡.

目的:探讨非常规静脉吻合方式重建IshikawaⅡ区断指再植静脉回流的临床疗效。方法:自2010年1月至2019年6月，我们对70指IshikawaⅡ区完全离断患者进行再植术，术中因无指背皮下静脉吻合，采用非常规静脉吻合方式重建静脉回流，其中吻合指腹静脉77条，吻合指侧方静脉86条，吻合甲床静脉12条。结果:本组70指，其中66指未出现血管危象，术后无需湿敷放血治疗，指体血运良好，一期顺利存活；4指出现静脉危象，予甲床或指端小切口肝素棉球湿敷放血治疗，1指存活、3指坏死。再植成活率95.7%。存活指体术后随访时间为5～47个月，平均11.3个月，再植指体血供良好，皮肤质地良好，外形饱满。46指指甲生长良好，13指轻微畸形，8指畸形明显或生长不全。感觉恢复均S 3以上，两点分辨觉为3～8 mm。按中华医学会手外科学会断指再植功能评定试用标准评定67指存活指体：优59指，良8指；优良率100%。 结论:了解IshikawaⅡ区断指静脉分布规律，采用非常规静脉吻合方式重建静脉回流，可明显提高再植指体成活率，恢复良好的外观及功能。

目的:探讨miRNA-3653-3p（miR-3653-3p）对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其相关机制。方法:从OncoLnc数据库中下载356例子宫内膜癌患者资料，数据更新时间为2020年；采用Kaplan-Meier法分析miR-3653-3p表达水平与子宫内膜癌患者总生存的关系；采用miRGator数据库预测与miR-3653-3p存在结合位点的靶基因。选择人子宫内膜癌细胞株AN3CA、HEC-1A、HEC-1B、Ishikawa和人正常子宫内膜上皮细胞株ESC，采用实时荧光聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-3653-3p相对表达量。选取miR-3653-3p表达最低的细胞株为研究对象，分为阴性对照组和miR-3653-3p组，分别转染对照空载质粒和miR-3653-3p过表达质粒。采用CCK-8法检测细胞的增殖能力，Transwell法检测细胞的侵袭能力；qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-3653-3p靶基因的表达。蛋白质印迹法检测miR-3653-3p对Wnt-β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。结果:OncoLnc数据库中数据分析显示，与miR-3653-3p低表达的子宫内膜癌患者相比，miR-3653-3p高表达的患者总生存较好（ P<0.01）。与人正常子宫内膜上皮细胞ESC相比，子宫内膜癌细胞株AN3CA、HEC-1A、HEC-1B、Ishikawa中miR-3653-3p表达水平均降低（均 P<0.05），并且HEC-1A细胞中miR-3653-3p的相对表达量最低，选择HEC-1A细胞进行后续实验。CCK-8实验结果显示，与阴性对照组相比，第2、3、4、5天miR-3653-3p组HEC-1A细胞能力均降低（均 P<0.05）。Transwell小室侵袭实验结果显示，培养26 h时，阴性对照组和miR-3653-3p组HEC-1A细胞侵袭数分别为（80±11）个和（21±4）个，差异有统计学意义（ t＝5.18， P<0.01）；与阴性对照组比较，miR-3653-3p组细胞侵袭数降低。采用miRGator数据库预测miR-3653-3p的靶基因可能是胎盘特异蛋白8（PLAC8）。阴性对照组和miR-3653-3p组HEC-1A细胞中PLAC8 mRNA的相对表达量分别为6.26±0.83和0.97±0.31，差异有统计学意义（ t＝6.00， P<0.01），miR-3653-3p组PLAC8 mRNA的相对表达量低于阴性对照组。与阴性对照组相比，miR-3653-3p组HEC-1A细胞PLAC8蛋白降低，Wnt-β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、转化生长因子β（TGF-β）、GSK-3β、Rac1表达均降低。 结论:miR-3653-3p可能通过调节PLAC8-Wnt-β-catenin信号通路抑制子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭。

目的:分析舒适化护理模式在Ishikawa Ⅱ区断指再植术后的临床应用效果。方法:2010年1月-2019年6月,苏州瑞华骨科医院手外科对收治的61例70指Ishikawa Ⅱ区完全离断伤患者,应用非常规静脉吻合方式重建静脉回流。术后应用舒适护理模式,即采用视觉模拟评分（VAS）、匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）及焦虑自评量表（SAS）评估,并记录术后24 h内及术后72 h疼痛程度、夜间睡眠质量及负面情绪。结果采用SPSS 20.0统计软件进行统计和分析,组间比较用 t检验,计数资料进行 χ 2检验, P<0.05为差异有统计学意义。术后采用复诊、电话等方式进行随访,观察再植指的并发症及成活情况。 结果:术后24 h内VAS评分[（5.92±1.46）分]高于术后72 h评分[（2.08±1.05）分],差异有统计学意义（ P<0.05）。术后24h内PSQI及SAS结果[分别为（6.42±1.18）分和（30.81±2.03）分]均高于术后72 h评分[分别为（3.33±1.07）分和（44.02±3.11）分],差异有统计学意义（ P<0.05）。本组61例70指中,66指未出现血管危象,均顺利成活。4指发生血管危象,予以对症处理后,1指成活,3指坏死。术后随访5~47个月,平均11.3个月,再植指体血供良好,外形饱满。 结论:采用舒适护理模式,能够提高Ishikawa Ⅱ区断指再植术后患者的生理、心理及社会舒适度,减轻患者负面情绪,增强患者依从性,提高断指再植成活率及成功率,效果显著。

目的:探究T-钙黏蛋白（T-cadherin）是否通过调控胱天蛋白酶1（Caspase-1）介导的细胞焦亡途径影响子宫内膜癌细胞的放射敏感性。方法:收集海南西部中心医院2019年10月—2021年3月收治的82例子宫内膜癌患者手术切除的子宫内膜癌组织及癌旁组织标本，免疫组织化学染色和实时反转录PCR（RT-qPCR）检测子宫内膜癌与癌旁组织样本中T-cadherin表达。通过转染pcDNA3.1-T-cadherin慢病毒至人子宫内膜癌细胞系Ishikawa，建立高表达T-cadherin的Ishikawa稳定表达细胞株。Ishikawa细胞给予2 Gy X射线处理，培养24、48、72 h后检测细胞增殖活性。将Ishikawa细胞分为对照组（正常培养的Ishikawa细胞）、照射组（给予2 Gy X射线照射）、pcDNA3.1-NC+照射组（转染pcDNA3.1-NC后给予2 Gy X射线照射）、pcDNA3.1-T-cadherin+照射组（转染pcDNA3.1-T-cadherin后给予2 Gy X射线）、pcDNA3.1-T-cadherin+VA765+照射组（转染pcDNA3.1-T-cadherin，加10 μmol/L VA765处理再给予2 Gy X射线照射），进行对应处理后，CCK-8法检测细胞存活率，克隆形成实验检测细胞增殖情况，乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测LDH释放水平，蛋白质印迹法（Western blot）检测Caspase-1、白介素（IL）-1β、IL-18及焦孔素A（gasdermin A，GSDMA）表达，免疫荧光染色检测Caspase-1表达。使用SPSS 23.0统计软件进行数据分析，多组数据比较用单因素方差分析，两两比较采用LSD- t检验。 结果:子宫内膜癌组织的T-cadherin蛋白阳性表达率为6.09%，低于癌旁组织的87.80%（ t=58.48， P<0.01），子宫内膜癌组织中T-cadherin mRNA相对表达量为1.00±0.07，低于较癌旁组织的4.02±0.38（ t=32.35， P<0.01）。pcDNA3.1-T-cadherin+照射组细胞活性下降，细胞克隆形成数目减少，LDH释放水平增加，细胞中Caspase-1、IL-1β、IL-18及GSDMA蛋白相对表达量均升高，Caspase-1蛋白红色荧光增强（ P<0.01）；pcDNA3.1-T-cadherin+VA765+照射组细胞活性升高，LDH释放水平减少，Caspase-1、IL-1β、IL-18及GSDMA蛋白相对表达量均下降，Caspase-1蛋白红色荧光也减弱（ P<0.01）。 结论:T-cadherin能够通过增加Caspase-1介导的细胞焦亡来提高子宫内膜癌细胞的放射敏感性。

目的:探讨LINC01320在子宫内膜癌细胞中的表达、作用及可能机制。方法:分析GEPIA数据库中LINC01320在子宫内膜癌组织中的表达及与预后的相关性；qRT-PCR检测子宫内膜癌细胞中LINC01320和微RNA-4770（miR-4770）的表达；采用ENCORI预测能与LINC01320结合的miRNA并采用荧光素酶报告分析验证；CCK8检测细胞增殖情况。结果:LINC01320在子宫内膜癌组织中的表达高于正常子宫内膜组织，但与分期无关，在子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1A中表达高于正常子宫内膜上皮细胞hEEC（ P<0.05）；LINC01320表达与患者总生存率和无病生存率无关；在Ishikawa细胞中抑制LINC01320的表达可抑制细胞增殖，在KLE细胞中过表达LINC01320可促进细胞增殖；ENCORI在线软件预测并采用双荧光素酶报告分析证实LINC01320可与miR-4770结合；miR-4770在子宫内膜癌组织中的表达显著低于正常子宫内膜组织，在Ishikawa和HEC-1A细胞中的表达低于hEEC细胞（均 P<0.05）；过表达miR-4770可抑制子宫内膜癌Ishikawa和HEC-1A细胞增殖，而同时增加LINC01320的表达可促进这两株细胞增殖。 结论:LINC01320在子宫内膜癌中高表达，可能通过吸附miR-4770促进子宫内膜癌Ishikawa和HEC-1A细胞增殖。

Background::Steroid receptor-associated and regulated protein (SRARP) suppresses tumor progression and modulates steroid receptor signaling by interacting with estrogen receptors and androgen receptors in breast cancer. In endometrial cancer (EC), progesterone receptor (PR) signaling is crucial for responsiveness to progestin therapy. The aim of this study was to investigate the role of SRARP in tumor progression and PR signaling in EC. Methods::Ribonucleic acid sequencing data from the Cancer Genome Atlas, Clinical Proteomic Tumor Analysis Consortium, and Gene Expression Omnibus were used to analyze the clinical significance of SRARP and its correlation with PR expression in EC. The correlation between SRARP and PR expression was validated in EC samples obtained from Peking University People’s Hospital. SRARP function was investigated by lentivirus-mediated overexpression in Ishikawa and HEC-50B cells. Cell Counting Kit-8 assays, cell cycle analyses, wound healing assays, and Transwell assays were used to evaluate cell proliferation, migration, and invasion. Western blotting and quantitative real-time polymerase chain reaction were used to evaluate gene expression. The effects of SRARP on the regulation of PR signaling were determined by co-immunoprecipitation, PR response element (PRE) luciferase reporter assay, and PR downstream gene detection. Results::Higher SRARP expression was significantly associated with better overall survival and disease-free survival and less aggressive EC types. SRARP overexpression suppressed growth, migration, and invasion in EC cells, increased E-cadherin expression, and decreased N-cadherin and Wnt family member 7A ( WNT7A) expression. SRARP expression was positively correlated with PR expression in EC tissues. In SRARP-overexpressing cells, PR isoform B (PRB) was upregulated and SRARP bound to PRB. Significant increases in PRE-based luciferase activity and expression levels of PR target genes were observed in response to medroxyprogesterone acetate. Conclusions::This study illustrates that SRARP exerts a tumor-suppressive effect by inhibiting the epithelial-mesenchymal transition via Wnt signaling in EC. In addition, SRARP positively modulates PR expression and interacts with PR to regulate PR downstream target genes.

探讨长链非编码RNA（lncRNA）DSCAM-AS1对子宫内膜癌（EC）发生发展的影响和机制。研究发现与癌旁组织比较，EC组织中DSCAM-AS1表达升高，微RNA-299-3p(miR-299-3p)表达降低，且EC组织中DSCAM-AS1和miR-299-3p的表达呈负相关。DSCAM-AS1在Ishikawa细胞中负调控miR-299-3p表达。干扰DSCAM-AS1后，Ishikawa细胞OD值、克隆形成数、迁移和侵袭数降低；而干扰miR-299-3p降低了干扰DSCAM-AS1对Ishikawa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。DSCAM-AS1可能通过竞争性结合miR-299-3p促进EC细胞增殖、迁移和侵袭。