目的:探讨间皮素mRNA（MESO mRNA）、KISS1 mRNA在上皮性卵巢癌（EOC）中的表达及与预后的相关性。方法:选取2017年1月至2019年1月河北省唐山市妇幼保健院52例EOC患者作为观察组，另选取52例同期健康体检者作为对照组，对比两组血MESO mRNA、KISS1 mRNA表达水平；分析MESO mRNA、KISS1 mRNA水平与EOC的关系；分析EOC患者MESO mRNA、KISS1 mRNA水平与临床病理学特征的相关性；对EOC患者随访1年，对比不同预后患者MESO mRNA、KISS1 mRNA的表达情况。结果:观察组血MESO mRNA、KISS1 mRNA水平高于对照组（1.41 ± 0.40比1.41 ± 0.40、0.73 ± 0.08比0.54 ± 0.07），差异有统计学意义（ P<0.01）。MESO mRNA、KISS1 mRNA联合诊断EOC的曲线下面积（AUC）为0.892（95% CI 0.816～0.944），高于MESO mRNA、KISS1 mRNA单一诊断的AUC 0.798（95% CI 0.708～0.870）、0.812（95% CI 0.723～0.882）。血MESO mRNA水平与EOC患者病理类型、手术-病理分期、病理分级、肿瘤直径、淋巴结转移存在相关性（ P<0.05）；血KISS1 mRNA水平与EOC患者手术-病理分期、病理分级、肿瘤直径、淋巴结转移存在相关性（ P<0.05）。死亡者血MESO mRNA水平高于生存者（1.52 ± 0.17比1.38 ± 0.15），血KISS1 mRNA水平低于生存者（0.69 ± 0.07比0.74 ± 0.06），差异有统计学意义（ P<0.05）；随访1年，血MESO mRNA高表达者1年生存率低于低表达者，KISS1 mRNA高表达者1年生存率高于低表达者（ P<0.05）。 结论:EOC患者外周血MESO mRNA、KISS1 mRNA表达升高，但随病情进展MESO mRNA呈升高趋势，KISS1 mRNA呈降低趋势，二者异常表达可能参与EOC发生发展。

Kiss1基因编码的Kisspeptin及其受体在哺乳动物体内分布广泛，目前Kisspeptin已被确认为哺乳动物生殖轴的重要调控因子，通过调控下丘脑促性腺激素释放激素的分泌，进而控制垂体黄体生成素和卵泡刺激素的分泌及性行为的调节。此外，Kisspeptin还参与情感方面的调节，包括恐惧、焦虑和认知等。生殖和情感关系密切，在临床中，生殖功能异常与情感障碍伴随的疾病十分常见，然而关于协调生殖与情感方面的研究还较少。目前的研究表明，Kisspeptin可能是介导生殖及情感协调的控制中心。本文将对Kisspeptin在生殖与情感功能两方面的调控作用进行综述，以期为防治因情感障碍导致的生殖疾病提供新的靶点和思路。

目的 kisspeptin是一种肿瘤抑制因子,由 KISS1基因编码.Notch1/Akt/Foxo1是调节细胞增殖、分化的重要信号通路.本研究探讨kisspeptin通过Notch1/Akt/Foxo1信号通路调控子宫内膜蜕膜化在复发性流产(RSA)中的作用机制.方法 纳入2020年6月-2020年12月苏州大学附属第二医院生殖中心门诊收治的RSA患者45例及同期计划生育门诊择期人工流产女性50例,Western blot、RT-qPCR检测蜕膜组织中kisspeptin(及其基因KISS1)、蜕膜化标志物胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP1)、Notch1、Akt、Foxo1表达水平.使用siRNA干扰KISS1或添加kisspeptin10(kisspeptin的活性片段)处理永生化子宫内膜基质细胞(hESC)后,命名为siKP组或KP10组,并设转染空白siRNA的hESC为对照组,CCK8检测增殖情况.对3组hESC进行体外诱导蜕膜化,免疫荧光检测siKP组和KP10组细胞Notch1表达及蜕膜化形态差异,RT-qPCR和Western blot检测3组细胞IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的表达.hESC添加Notch1、Akt、Foxo1对应抑制剂后诱导蜕膜化(以仅诱导蜕膜化、未添加抑制剂的hESC为正常对照组),检测4组细胞上述蛋白和基因的表达.建立正常妊娠(CBA/J×BALB/c)和复发性流产(CBA/J×DBA/2)小鼠模型,即NP模型和RSA模型,实验组分别给予kisspeptin10和kisspeptin234(阻滞剂)隔日1次腹腔注射(RSA-KP10组和NP-KP234组),对照组给予生理盐水隔日1次腹腔注射(RSA-NS组和NP-NS组),共4组,每组6只,取孕9.5 d的子宫组织,观察胚胎吸收的情况,检测上述蛋白和基因的表达.结果 与正常妊娠(NP)女性相比,RSA患者kisspeptin、IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及其基因表均降低(P<0.01或P<0.05).hESC添加 kisspeptin10 后蜕膜化能力增强,Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及基因表达增加,干扰KISS1后表达降低;免疫荧光见增殖状态的 hESC呈细长形,蜕膜化后细胞变圆、变大,Notch1 表达增加,添加kisspeptin10后蜕膜化程度增高,干扰KISS1后减弱;分别用Notch1、Akt、Foxo1抑制剂处理hESC,发现三者按Notch1/Akt/Foxo1的顺序依次调控(P<0.05).与注射生理盐水组相比,正常妊娠小鼠注射 kisspeptin234后吸收胎增多(P<0.001),IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及基因表达下降(P<0.05);复发流产小鼠注射 kisspeptin10 后吸收胎减少(P<0.001),上述蛋白及基因表达升高(P<0.05).结论 kisspeptin可能通过Notch1/Akt/Foxo1信号通路调控子宫内膜蜕膜化,其表达下调导致蜕膜化不良,可能是导致RSA发病的原因之一.

中枢性性早熟(central precocious puberty,CPP)是下丘脑-垂体-性腺轴提早激活所导致的发育异常性疾病,其发病率快速增加,但发病机制尚未完全明确.既往研究发现KISS1R、KISS1基因的功能获得性突变,以及MKRN3、LIN28和DLK1基因的功能缺失性突变可导致青春发育期启动时间提前.新近研究发现表观遗传因素如DNA甲基化、微小核糖核酸在促性腺激素释放激素神经元的调控中起重要作用;基因网络中多个变异基因的协同作用也可影响青春发育启动.该文综述了导致CPP的遗传学病因进展及其致病机制.[中国当代儿科杂志,2024,26(3):302-307]

为探明许氏平鲉交配诱导机制,研究以繁殖内分泌及生殖行为重要调控因子促性腺激素抑制激素(GnIH)及其受体为对象,探究其在卵胎生鱼类中的功能.结果显示,gnih在下丘脑表达量最高,定位于视前区小细胞体视前核(NPO)、大细胞体视前核(PM)及前室周核(NAPv);gnihr与脑中调控生殖行为的基因kiss-peptin1和cgnrh共定位;GnIH成熟肽能够结合GnIHR并激活下游CRE信号通路;脑室注射和腹腔注射结果显示,GnIH成熟肽在生殖轴及血清类固醇激素等水平协同促进性腺成熟并引发交配行为.

Kiss1基因编码Kisspeptins,是一种细胞间信号肽,其相应的受体为Kiss1R.最初的研究发现Kiss1/Kiss1R系统具有抑制肿瘤转移的作用,越来越多的证据表明,其可作用于下丘脑-垂体-性腺轴,是青春期启动和进展的关键,在生殖的神经内分泌调节中扮演重要角色.本文就Kiss1/Kiss1R系统的发现、诱导的细胞内信号转导通路、对下丘脑-垂体-性腺轴的作用、调节机制及其临床应用进行综述.

目的:探讨骨肉瘤组织中自噬标志分子Beclin1的m RN A、蛋白表达量及其与病理特征的相关性.方法:2012年4月~2016年1月间在本院进行手术治疗的骨肉瘤患者60例,术中取骨肉瘤组织及瘤旁正常组织标本.采用荧光定量PCR法检测标本组织中Beclin1 mRNA 及增殖、侵袭基因表达量,采用western-blot法检测标本组织中Beclin1蛋白表达量.根据骨肉瘤组织中Beclin1的mRNA、蛋白表达量中位数,将其二次分组成为Beclin1 m RN A高表达组、Beclin1 m RN A低表达组各30例,Beclin1蛋白高表达组、Beclin1蛋白低表达组各30例.对比骨肉瘤组织中不同Beclin1 m RN A、Beclin1蛋白表达者增殖、侵袭基因表达量的差异.结果:骨肉瘤组织中Beclin1 m RNA、Beclin1蛋白的表达量低于瘤旁正常组织;Beclin1 mRNA低表达组骨肉瘤组织中,增殖基因KISS-1 mRNA 的表达量低于Beclin1 mRNA高表达组,Six1、FoxM1、RIPK4、STIM1 mRNA 的表达量高于Beclin1 mRNA 高表达组,侵袭基因DLX1 mRNA的表达量低于Beclin1 mRNA 高表达组,EFEMP1、MTA1、Notch1、HES1、LEF-1 mRNA的表达量高于Beclin1 mRNA高表达组;Beclin1蛋白低表达组骨肉瘤组织中,增殖基因KISS-1 mRNA的表达量低于Beclin1蛋白高表达组,Six1、FoxM1、RIPK4、STIM1 mRNA的表达量高于Bec-lin1蛋白高表达组;侵袭基因DLX1 mRNA 的表达量低于Beclin1蛋白高表达组,EFEMP1、MTA1、Notch1、HES1、LEF-1 mRNA的表达量高于Beclin1蛋白高表达组.结论:骨肉瘤组织中自噬标志分子Beclin1的m RN A、蛋白表达量均下降,且其表达量与肿瘤细胞的增殖侵袭活性直接相关.

目的:利用二代测序技术检测GT1-7细胞中KISS1和GnRH基因启动子范围内的甲基化状态,并用金标准的亚硫酸氢盐修饰后的克隆测序作为对照,比较二代测序与金标准克隆测序在研究DNA甲基化检测中的差别.方法:提取GT1-7细胞基因组DNA并进行亚硫酸氢盐处理.进行巢式PCR,将PCR产物进行二代测序.同时采用金标准的亚硫酸氢盐修饰后克隆测序的方法作为对照,对相同批次的PCR产物进行克隆测序.结果:PCR产物二代测序结果表明KISS1和GnRH两个基因的27个CpG甲基化位点信息完整,结果准确.挑取10个克隆进行一代测序结果表明序列无丢失,KISS1和GnRH两个基因的27个CpG甲基化位点信息完整.结论:利用高通量的二代测序技术能够有效的对DNA甲基化的PCR产物进行检测,二代测序和克隆测序都是研究DNA甲基化的有效方法,但前者与克隆测序相比每一个读取序列(reads)都相当于一个单克隆,且二代测序每个区段得到成百上千个reads,因此二代测序结果更加精确.

目的:探讨结肠癌术前动态增强磁共振成像参数与肿瘤病灶中血管新生、细胞增殖的相关性.方法:选择2015年1月～2017年1月间本院收治的结肠癌患者186例作为结肠癌组;100例同期在本院接受肠镜治疗的多发结肠息肉患者作为结肠息肉组.对比两组DCE-MRI参数以及病灶组织中血管新生、细胞增殖基因表达量的差异,采用Pearson检验评估结肠癌患者术前DCE-MRI参数与血管新生、细胞增殖基因表达量的相关关系.结果:结肠癌组术前DCE-MRI参数Ktrans、Kep的水平均显著高于结肠息肉组;结肠癌组病灶组织中Cyr61、HIF-a、VEGF、MMP-9、CXCR7、EZH2、SphK1、IFT57mRNA的表达量均显著高于结肠息肉组,Kiss-1 mRNA的表达量低于结肠息肉组.Pearson检验发现,结肠癌术前术前DCE-MRI参数Ktrans、Kep的水平与病灶组织中血管新生、细胞增殖基因的表达量直接相关.结论:术前DCE-MRI参数可准确反映结肠癌病情严重程度.

目的:探讨骨肉瘤组织中肾母细胞瘤过表达基因(NOV)表达量检测及与细胞增殖、迁移的相关性.方法:2014年5月～2017年8月在孝感市中心医院接受手术治疗的骨肉瘤患者的病灶组织及瘤旁正常组织各97例,分别作为骨肉瘤组、正常对照组.采用荧光定量PC R检测不同组织标本中N O V基因、增殖相关基因、侵袭相关基因的表达量,采用Pearson检验评估骨肉瘤组织中NOV基因表达量及其与细胞增殖、迁移的相关性.结果:骨肉瘤组中NOV mRNA的表达量显著低于正常对照组(P<0.05);骨肉瘤组中KISS-1、TAp73 mRNA的表达量低于正常对照组(P<00.5),VCP、FoxM1、RIPK4、STIM1 mRNA的表达量高于正常对照组(P<00.5);骨肉瘤组中DLX1、Sema6A mRNA的表达量低于正常对照组(P<00.5),EFEMP1、GPR56、SOX5、CRYAB mRNA的表达量高于正常对照组(P<0.05).Pearson检验发现,骨肉瘤组织中NOV基因表达量与细胞增殖基因、侵袭基因的表达量直接相关.结论:骨肉瘤组织中NOV基因表达量低于瘤旁正常组织,且具体表达量与肿瘤细胞增殖、侵袭活性直接相关,可作为骨肉瘤恶性程度判断的可靠指标.