目的 检测肝细胞肝癌患者血浆中甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)的表达水平,探讨其与肝细胞肝癌发生发展的相关性.方法 用酶联免疫吸附测定方法检测64例肝细胞肝癌患者及30例健康人血浆中MBL及MASP-2的表达水平,并用统计学方法分析患者血浆中MBL及MASP-2的浓度与各临床指标的相关性.结果 肝细胞肝癌患者血浆中MBL和MASP-2的浓度均显著高于健康人群(P=0.014、0.002),MBL/MASP-2比值在健康人群与肝细胞肝癌患者中的差异无统计学意义,此外,患者血浆中MBL与MASP-2并无相关性.在肝细胞肝癌患者中,血浆MBL水平与肿瘤的血管侵犯(r=0.253,P=0.047)和总胆红素水平(r=0.283,P=0.024)呈正相关;血浆中MASP-2水平与肝细胞肝癌的TNM分期呈正相关(r=0.276,P=0.027),而与血浆白蛋白呈负相关(r=0.-0.317,P=0.015).经ROC曲线分析,MBL和MASP-2曲线下面积分别为0.665(P=0.010)和0.694(P=0.003),对肝细胞肝癌诊断的敏感性分别为50%和89.1%.结论 补体凝集素途径的关键分子MBL、MASP-2与肝细胞肝癌患者的炎症状态和疾病进展相关,参与了肝癌的发生与发展.

目的 制备甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MBL-associated serine protease-2,MASP-2)EGF功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定,为后续研究奠定基础.方法 利用带有EGF基因片段的pGEX-6P-2原核载体诱导表达GST-EGF融合蛋白,并采用商品化GST-Beads进行纯化;将纯化的融合蛋白作为抗原,与弗氏完全佐剂充分混合后,免疫5周龄BALB/c雌性健康小鼠,制备多克隆抗体;利用琼脂双扩散法检测多克隆抗体的效价,并进一步应用Western blot鉴定多克隆抗体的特异性及效价.结果 成功表达并纯化EGF蛋白,以此成功制备出特异性强的GST-EGF融合蛋白的多克隆抗体,与其他蛋白无交叉反应;琼脂双扩散法检测的EGF抗体效价为1∶8;Western blot检测的EGF抗体效价大于1∶2 000.结论 成功制备出具有特异性强且效价高的GST-EGF蛋白的多克隆抗体.

目的:探讨甘露糖结合凝集素(MBL)途径相关蛋白甘露糖结合丝氨酸蛋白酶-2(MASP2)、MASP3在C3肾小球病(C3G)患者血清中的表达及其在C3G发病中的作用.方法:回顾性分析15例C3G患者(14例C3肾小球肾炎和1例致密物沉积病)的临床资料,用ELISA测定肾活检当天血清MASP2、MASP3水平,分析MASP2、MASP3与临床及病理指标的关系.10名健康志愿者为对照.结果:C3G患者血清MASP2、MASP3水平均高于对照组(P<0.05).血清MASP2、MASP3水平与肾小球滤过率及血清补体C3水平均无关(P>0.05),血清MASP3水平与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=0.563,P=0.036).C3荧光强度高或有基底膜内电子致密物沉积的C3G患者血清MASP2水平较低(P<0.05).结论:C3G患者尿蛋白量随着血清MASP3的升高而升高,提示MBL途径可能参与该病的发生发展;MASP2水平的异常降低可能与C3G病理损伤程度加重有关.

目的:通过生物信息学方法对甘露糖结合凝集素2(MBL2)蛋白与甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASPs)家族蛋白质的相互作用进行全面预测分析.方法:使用同源建模(Swiss-model)和折叠识别(Phyre2)分别来构建MBL2蛋白与MASPs家族蛋白质的结构,使用STRING数据库及ZDOCK3.02预测分析MBL2与MASP1、MASP2两个蛋白质的相互作用情况.结果:MBL2与MASP1和MASP2均存在直接相互作用,并且和COLEC11、COLEC10、FCN2、C4B等构成相互作用网络.MBL2与MASP1结合位点和MASP2的结合位点高度重叠.MBL2参与结合MASP1的残基,大部分(77％)也参与了与MASP2的结合,表明MBL2是通过同一个区域,分别与MASPs家族的蛋白质相互作用.结论:MBL2与MASPs家族蛋白质之间作用密切,从而可能在补体系统激活及机体免疫防御等方面发挥重要的作用.

目的:研究类风湿性关节炎(RA)患者血清甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关的丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)和Dickkopf-1蛋白(DKK-1)水平变化及其与患者预后相关性.方法:选取2017年8月至2020年8月我院194例RA患者和102例健康体检者分别为研究组和对照组,检测入院时血清MBL、MASP-2和DKK-1水平,同时根据28个关节疾病活动评分(DAS28)将患者分为轻度组83例、中度组62例和重度组49例,按指南对RA患者给予达标治疗并根据疗效将患者分为达标组129例和未达标组65例,比较各组血清MBL、MASP-2和DKK-1水平,同时分析其对DAS28评分的影响和对疗效的预测价值.结果:研究组血清MBL和MASP-2水平低于对照组,血清DKK-1水平高于对照组;轻度组、中度组和重度组血清MBL和MASP-2逐渐降低,血清DKK-1水平和DAS28评分逐渐升高;达标组血清MBL和MASP-2水平高于未达标组,血清DKK-1水平低于未达标组,差异有统计学意义(P<0.05).多元线性回归分析显示,血清MBL和MASP-2水平为影响DAS28评分的重要因素(P<0.05).血清MBL和MASP-2水平与RA治疗效果存在密切联系,RA治疗未达标的logistics回归模型为Y=12.573-0.722×血清MBL-0.090×血清MASP-2+0.792×血清DKK-1.血清MBL、MASP-2、DKK-1及三者联合检测预测RA疗效的AUC分别为0.896、0.825、0.693和0.958,敏感度分别为72.09％、67.44％、80.62％和89.15％,特异度分别为90.77％、81.54％、52.31％和90.77％.结论:RA患者血清MBL和MASP-2水平明显降低,血清DKK-1水平明显升高,且与病情变化密切相关,可为评估疗效和预后提供参考.

目的 分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺部感染致病菌分布及营养状态、甘露糖结合凝集素(MBL)相关的丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)基因多态性.方法 选取2018年12月-2020年12月在四川省人民医院呼吸与危重症医学科住院治疗的159例COPD患者为研究对象,其中111例COPD继发社区获得性肺炎(CAP)患者经病原学检查确诊肺部感染,纳入感染组,其余48例非CAP患者纳入非感染组;分析感染组致病菌分布及药敏试验结果、营养状态、MASP-2基因多态性,Logistic回归分析COPD患者肺部感染与营养状态、MASP-2基因多态性的关系.结果 111例COPD继发肺部感染患者标本中检出病原菌123株,其中革兰阴性菌占61.79％,其次为革兰阳性菌占31.71％.两组肺炎严重度指数(PSI)分级、营养风险筛查(NRS2002)评分差异有统计学意义(P＜0.05);两组MASP-2基因rs2273346位点基因型分布差异无统计学意义,但rs6695096位点基因多态性有统计学意义(P＜0.05);Logistic回归分析显示PSI分级Ⅳ～V级、NRS2002评分、rs6695096位点TC基因型均是COPD继发肺部感染的影响因素(P＜0.05).结论 COPD患者肺部感染的发生与PSI分级、营养状态及rs6695096位点基因多态性显著相关,值得临床重视.

目的 探讨甘露糖醇结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)基因多态性与肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)住院短期预后的关联性.方法 选择四川省人民医院肝胆外科2017年12月-2020年12月收治肝硬化合并SBP患者80例为研究对象,根据患者入院后30 d临床结局,将其分为存活组和死亡组.患者均在入院当天清晨抽取外周血,采用聚合酶链式扩增反应对MASP-2基因rs61735600位点目的片段进行扩增,采用酶联免疫吸附法检测血清中MASP-2、甘露糖醇结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP-1)、甘露糖醇结合凝集素(MBL)蛋白水平.结果 死亡组肝硬化病程、腹水持续时间高于存活组(P<0.05);哈迪-温伯格遗传平衡检验结果显示,存活组和死亡组SBP患者MASP-2基因rs61735600位点理论值和实际值分布比较差异无统计学意义;死亡组MASP-2基因rs61735600位点AA基因型、A等位基因频率高于对照组,GG基因型、G等位基因频率低于存活组(P<0.05);死亡组SBP患者入组当天血清MASP-2、MASP-1以及MBL水平高于存活组(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果发现肝硬化病程、腹水持续时间和MASP-2基因rs61735600位点多态性均为影响肝硬化合并SBP患者入院30 d预后的影响因素(P<0.05).结论 MASP-2基因rs61735600位点AA基因型增加肝硬化SBP患者住院30 d死亡风险,其机制可能与影响血清MASP-2、MASP-1以及MBL水平有关.

目的:检测成人急性白血病血清甘露糖结合凝集素(Mannose-bindingLectin,MBL)、甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-1(mannose-bindinglectinassociatedserineprotease-1,MASP1)和甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(mannose-bindinglectinassociatedserineprotease-2,MASP2)水平并研究其临床价值.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测成人急性白血病患者及正常健康人血清MBL、MASP1和MASP2水平,采用ROC曲线分析血清MBL、MASP1和MASP2在诊断成人急性白血病时的灵敏度、特异度、准确度.结果:白血病组和对照组研究对象在MBL方面的差异无统计学意义,白血病组患者血清MASP1水平显著低于对照组健康人,而血清MASP2显著高于对照组健康人.复发白血病患者血清MBL水平显著低于初发白血病患者,MASP2显著高于初发白血病患者,而两组间血清MASP1差异无统计学意义.Logistics回归分析表明血清MBL、MASP1、MASP2水平和成人白血病均有一定的关联.MBL、MASP1联合MASP2诊断成人急性白血病灵敏度、特异性、准确度分别为0.854、0.810和0.664.结论:成人白血病患者血清MASP1显著降低而 MASP2显著升高,MBL、MASP1及MASP2联合检测对成人白血病具有较高的诊断价值.