目的 测量不同年龄组儿童上颌第一乳磨牙的解剖参数,评估牙冠增龄性变化.方法 回顾性分析评估了 154例4～8岁儿童患者308颗上颌第一乳磨牙的锥形束计算机断层扫描(CBCT)图像.用NNT软件分析上颌第一乳磨牙的多个重要指标.结果 髓顶厚度H1(左侧,P=0.01;右侧,P=0.02)和髓室底厚度H3(左右侧P＜0.01)与年龄呈正相关,而髓腔高度H2(左右侧P＜0.01)和腭尖的高度D1(左侧P=0.003,右侧P=0.002)与年龄呈负相关.颊尖的高度与年龄无关.4、5岁年龄组与8岁年龄组之间的H1和H3差异有统计学意义(P＜0.05),4、5岁年龄组与6、7岁和8岁年龄组之间的H2和D1差异有统计学意义(P＜0.05).结论 上颌第一乳磨牙牙冠的年龄相关性变化是临床治疗的重要参考依据,可以通过CBCT数据进行精确测量.

选择闽江河口短叶茳芏(Cyperus malaccensis)湿地为研究对象,基于野外氮负荷增强模拟实验,探讨了不同氮负荷水平下(NNT对照处理,0 g N m-2 a-1;LNT低氮处理,12.5 g N m-2 a-1;MNT中氮处理,25.0 g N m-2 a-1;HNT高氮处理,75.0 g N m-2 a-1)湿地植物-土壤系统的氮累积与分配特征.结果表明,不同氮负荷处理下湿地土壤(TN)、NH4+-N和NO-3-N含量均发生了明显改变.相较于NNT,LNT 和 MNT 的 TN、NH4+-N 和 NO-3-N 含量均明显增加,增幅分别为 9.44%、3.57%、11.99%(LNT)和6.71%、9.37%、46.50%(MNT).与之不同,HNT的TN含量相比NNT增幅不大,而其NH4+-N、NO-3-N含量均显著降低,降幅分别为9.26%和40.77%.不同氮负荷处理下土壤氮含量的垂直分布特征亦发生了明显变化.除HNT外,LNT和MNT的TN、NH4+-N和NO-3-N含量均以表层土壤最高.不同氮负荷处理下的TN和NH4+-N含量分布主要受SOM的影响,而NO-3-N含量分布主要受植物吸收和垂直淋失的影响.氮负荷增强条件下植物不同器官的TN含量整体表现为叶＞茎＞根.不同氮负荷处理下植物-土壤系统的氮储量整体以LNT和MNT较高,而HNT最低.研究发现,短叶茳芏在中低氮负荷条件下可能将更多的氮优先分配给根系,进而以拓展地下空间和提高地下生物量的方式来适应环境;而在高氮负荷条件下,其可能通过增强"自疏效应",并通过拓展地上空间的方式来适应环境.

目 的:在中国鄞州电子健康档案研究(Chinese electronic health records research in Yinzhou,CHERRY)的队列人群中,评价启动降压药物治疗的不同策略预防心血管病的健康收益与干预效率.方法:采用马尔科夫模型模拟评价的不同策略包括:策略1,对收缩压≥140 mmHg的人群启动降压药物治疗(根据2020年《中国心血管病一级预防指南》);策略2,对收缩压≥130 mmHg的人群启动降压药物治疗;策略3,对收缩压≥ 140 mmHg以及130～140 mmHg且心血管病高风险人群启动降压药物治疗(根据2017年美国心脏病学会/美国心脏协会《成年人高血压预防、检测、评估和管理指南》);策略4,对收缩压≥160 mmHg以及140～160 mmHg且心血管病高风险人群启动降压药物治疗(根据2019年英国国家卫生与临床优化研究所《成年人高血压诊断与管理指南》).采用2019年世界卫生组织心血管病风险评估模型进行风险分层.马尔科夫模型的循环周期设为1年,模拟10个周期后计算质量调整生命年(quality-adjusted life year,QALY)、心血管病发病数、全因死亡数等结局事件数以评价策略的健康收益,并计算每预防一例心血管病事件或全因死亡的需治疗人数(number needed to treat,NNT)以评价策略的干预效率.马尔科夫模型的参数主要来源于CHERRY队列与公开发表的文献.采用单因素敏感性分析探讨心血管病发病率对结果的影响,采用概率敏感性分析探讨干预措施效应参数的不确定性对结果的影响.结果:共纳入213 987名35～79岁基线无心血管病史的人群.相比于策略1,单纯下调降压起始值的策略2可预防的心血管病发病数增加666(95％UI:334～975)例,但每预防一例心血管病发病的NNT增加10(95％UI:7～20)人;而考虑定量风险评估的策略3可预防的心血管病发病数增加388(95％UI:194～569)例,且每预防一例心血管病发病的NNT减少6(95％UI:4～12)人,提示策略3可增加健康收益并具有更高的干预效率.策略4相比于策略1,可预防的心血管病发病数虽然减少193(95％UI:98～281)例,但每预防一例心血管病事件的NNT减少18(95％UI:13～37)人,效率更高.单因素敏感性分析及概率敏感性分析结果与主分析结果一致.结论:在中国发达地区的社区人群中选择降压药物治疗目标人群时,结合心血管病定量风险评估的策略优于单纯将起始值从140 mmHg降至130 mmHg的策略,前者可提升健康收益且兼顾干预效率;不同地区需因地制宜选择降压起始值并结合定量风险评估的策略,以权衡健康收益与干预效率.

目的 探讨血清LncRNA NNT-AS1、白细胞介素(IL)17A在难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿中的表达及临床应用价值.方法 选取2021年2月—2022年3月张家口市妇幼保健院诊治的148例MPP患儿(MPP组),根据是否发生RMPP分为RMPP组(48例)和非RMPP组(100例),以同期60例择期行鞘膜积液手术的患儿为对照组.比较各组血清LncRNA NNT-AS1、IL-17A的差异.采用Pearson相关分析研究血清LncRNA NNT-AS1、IL-17A与炎性指标的相关性.采用多因素logistic回归分析研究影响RMPP发病的因素.采用受试者工作特征曲线分析LncRNA NNT-AS1、IL-17A对RMPP发病的预测价值.结果 MPP组血清LncRNA NNT-AS1、IL-17A 均高于对照组(P＜0.05).MPP 组血清 LncRNA NNT-AS1、IL-17A 与 CRP、PCT、IL-6、TNF-α 均呈正相关关系(r=0.623～0.721,P＜0.001).血清LncRNA NNT-AS1、IL-17A升高是影响RMPP发病的独立危险因素.两者联合对MPP患儿发生RMPP的曲线下面积为0.906,优于单独检测.结论 RMPP患儿血清LncRNA NNT-AS1、IL-17A水平升高,是影响RMPP发病的独立危险因素,两者联合检测有助于评估RMPP的发生.

目的 检测膀胱癌中长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(nicotinamide nucleotide transhydrogenase antisense RNA 1,NNT-AS1)表达情况,研究其对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响及可能分子机制.方法 实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测膀胱癌组织标本及细胞中LncRNA NNT-AS1表达情况;将膀胱癌细胞转染分为sh-NC组,sh-NNT-AS1组,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组和sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组.采用CCK-8法检测细胞增殖吸光度值(A值);Transwell实验检测细胞迁移、侵袭穿膜数;细胞成球实验检测干细胞干性.检索starBase和TargetScan数据库,并通过双荧光素酶报告基因实验预测验证LncRNA NNT-AS1 和miR-582-5p,miR-582-5p与NCKAP1 的靶向结合关系.Western blot检测膀胱癌干细胞标志蛋白(CD44,ALDH1A1,Oct4,Nanog)及Hippo-YAP/TAZ信号通路相关蛋白表达灰度值.结果 与癌旁组织相比,膀胱癌组织中LncRNA NNT-AS1表达水平(0.34±0.07 vs 1.15±0.21)明显升高,差异有统计学意义(t=16.364,P＜0.001).与人正常膀胱上皮SV-HUC-1 细胞(1.00±0.01)相比,膀胱癌细胞T24,5637,UM-UC-3和TCC-SUP中LncRNA NNT-AS1 表达(6.03±0.17,4.66±0.36,5.47±0.26,3.02±0.20)明显升高,差异有统计学意义(t=17.472～51.160,均P＜0.001).与sh-NC组相比,在24,48和72 h时sh-NNT-AS1组细胞增值能力(A值)均显著降低(0.80±0.01 vs 1.07±0.06,1.18±0..07 vs 1.83±0.03,1.89±0.07 vs 2.53±0.06),差异有统计学意义(t=7.688,14.783,12.024,均P＜0.05);sh-NNT-AS1 组细胞迁移穿膜数(55.00±2.65 个 vs 354.30±7.84 个)、细胞侵袭穿膜数(45.67±2.33 个 vs 303.00±9.07 个)及膀胱癌干细胞成球数(20.85±2.17 个 vs 41.35±3.67 个)显著降低,差异具有统计学意义(t=-62.641,-47.596,8.328,均P＜0.001).与sh-NC组相比,sh-NNT-AS1组细胞中CD44(0.04±0.01 vs 1.12±0.02),ALDH1A1(0.23±0.01 vs 1.16±0.05),Oct4(0.17±0.02 vs 1.10±0.04),Nanog(0.49±0.03 vs 1.24±0.03)的蛋白表达灰度值显著降低,差异具有统计学意义(t=83.656,31.591,36.019,30.619,均P＜0.001).与si-NC组相比,sh-NNT-AS1组CD44+CD133+细胞比例(9.30%±0.79%vs 88.50%±2.77%)明显降低,差异有统计学意义(t=-47.624,P＜0.001).双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-582-5p为LncRNA NNT-AS1靶基因,NCKAP1为miR-582-5p靶基因;LncRNA NNT-AS1 靶向调控miR-582-5p/NCKAP1 轴.与sh-NNT-AS1 组相比,在 24,48,72 h时sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞增值能力(A值)均明显升高(0.98±0.03 vs 0.73±0.06,1.74±0.04 vs 1.22±0.05,2.33±0.16 vs 1.69±0.14),差异有统计学意义(t=5.977～11.628,均P＜0.001).与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,在 24,48,72 h时sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1 组细胞增值能力(A值)显著降低(0.69±0.04,1.01±0.07,1.39±0.08),差异有统计学意义(t=7.877～16.323,均P＜0.001).与sh-NNT-AS1组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞迁移穿膜数(322.31±28.45个 vs 81.42±13.22 个)、细胞侵袭穿膜数(316.07±30.21 个 vs 92.13±12.65 个)及膀胱癌干细胞成球数(38.55±2.20个 vs 18.98±1.16 个)显著增加,差异具有统计学意义(t=15.115,13.158,14.592,均P＜0.001).与sh-NNT-AS1组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞CD44(1.05±0.08 vs 0.10±0.01),ALDH1A1(1.20±0.16 vs 0.22±0.02),Oct4(1.32±0.14 vs 0.19±0.03),Nanog(0.97±0.12 vs 0.15±0.04),YAP(1.29±0.11 vs 0.42±0.07)和TAZ(1.41±0.16 vs 0.35±0.05)蛋白表达灰度值均显著增加,差异具有统计学意义(t=10.650～21.243,均P＜0.001).与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1 组细胞迁移穿膜数(65.33±12.60 个)、细胞侵袭穿膜数(71.08±15.19 个)、膀胱癌干细胞成球数(11.36±1.05 个)均显著降低,差异具有统计学意义(t=16.125,14.395,21.365,均P＜0.001).与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞CD44(0.25±0.05),ALDH1A1(0.61±0.11),Oct4(0.22±0.08),Nanog(0.44±0.07),YAP(0.25±0.09)和TAZ(0.30±0.04)蛋白表达灰度值显著降低,差异具有统计学意义(t=6.412～17.889,均P＜0.001).结论 膀胱癌中LncRNA NNT-AS1 表达上调,其对膀胱癌细胞增殖、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响,可能是通过调控miR-582-5p/NCKAP1 分子轴,激活Hippo-YAP/TAZ信号通路完成.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(NNT-AS1)在非小细胞肺癌(NSCLC)进展中的潜在机制.方法 30例NSCLC组织和癌旁正常组织获自于2020年6-12月在空军军医大学第二附属医院接受手术切除的NSCLC患者,NSCLC细胞系H1650、A549、H1299、H2170以及人肺上皮细胞BEAS-2B常规培养.将A549细胞分为siRNA阴性对照(si-con)组、靶向NNT-AS1的siRNA(si-NNT-AS1)组、miR-142-3p抑制物阴性对照(si-NNT-AS1+in-miR-con)组、miR-142-3p 抑制物(si-NNT-AS1+in-miR-142-3p)组、锌指 E 结合蛋白 1(ZEB1)阴性对照空载(si-NNT-AS1+vector)组和ZEB 1过表达质粒(si-NNT-AS1+ZEB1)组.BALB/c雄性裸小鼠随机分为sh-NC组(n=5)和sh-NNT-AS1组(n=5),分别将转染sh-NC或sh-NNT-AS1慢病毒的A549细胞皮下注射到裸小鼠背部.35 d后切除肿瘤,测量肿瘤组织重量和体积.qRT-PCR检测NSCLC组织和细胞中NNT-AS1、miR-142-3p和ZEB1水平;双荧光素酶报告基因实验探究3个因子之间的作用关系.细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞增殖,集落形成实验测定集落形成数量,Tranwell测定迁移和侵袭细胞数量,肿瘤异种移植实验检测体内肿瘤生长情况.结果 与癌旁正常组织比较,NSCLC组织中 NNT-AS1 和ZEB1 mRNA上调[(3.28±0.26)vs.(1.05±0.04),(2.65±0.22)vs.(1.04±0.06)],miR-142-3p下调[(0.43±0.03)vs.(1.02±0.08)],差异均有统计学意义(P均＜0.05).与人肺上皮细胞 BEAS-2B 比较,NSCLC 细胞系 H1650、A549、H1299、H2170 中 NNT-AS1 和 ZEB1 mRNA 上调,miR-142-3p 下调,差异均有统计学意义(P均＜0.05);且A549细胞中NNT-AS1、miR-142-3p和ZEB1 mRNA表达差异变化最大,因此选择A549细胞继续进行后续的探究.与miR-NC组比较,A549细胞中miR-142-3p转染后降低了 NNT-AS 1-WT或ZEB 1-WT的荧光素酶活性,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与si-con组比较,si-NNT-AS1组A549细胞中NNT-AS1和ZEB1 mRNA、蛋白表达降低,miR-142-3p表达增高,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与si-NNT-AS 1+in-miR-con组比较,si-NNT-AS1+in-miR-142-3p组A549细胞中ZEB1 mRNA和蛋白表达升高,miR-142-3p表达降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与si-NNT-AS1+vector组比较,si-NNT-AS1+ZEB1组A549细胞中ZEB1 mRNA和蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与si-con组比较,si-NNT-AS 1组A549细胞活力[(0.42±0.04)vs.(0.84± 0.07)]、集落形成数量[(54.23±5.64)个vs.(117.36±11.24)个]、迁移和侵袭细胞数量[(72.16±6.54)个vs.(164.23± 12.34)个和(65.23±5.27)个vs.(123.18±10.21)个]均下调,细胞凋亡率[(21.69±2.54)％vs.(7.54±0.72)％]上调,差异均有统计学意义(P 均＜0.05);与 si-NNT-AS 1+in-miR-con 组比较,si-NNT-AS1+in-miR-142-3p 组 A549 细胞活力、集落形成数量、迁移和侵袭细胞数量均上调,细胞凋亡率下调,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与si-NNT-AS1+vector组比较,si-NNT-AS 1+ZEB1组A549细胞活力、集落形成数量、迁移和侵袭细胞数量均上调,细胞凋亡率下调,差异均有统计学意义(P均＜0.05).体内实验表明,与sh-NC组比较,sh-NNT-AS 1组肿瘤组织中NNT-AS 1和ZEB1 mRNA表达降低,miR-142-3p表达增高,肿瘤体积、重量以及增殖细胞核抗原(Ki67)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 沉默NNT-AS1抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,可能与miR-142-3p/ZEB1轴有关.

目的 探讨LncRNA NNT-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测胃癌细胞系KATO-ⅢⅡ、NUGC-3、AGS、N87及正常胃成纤维细胞系NSFC中LncRNA NNT-AS1的表达水平;将KATO-Ⅲ细胞系分成对照组、sh-vector组及sh-NNT-AS1组,分别不感染慢病毒、感染阴性shRNA慢病毒及感染lenti-sh-NNT-AS1慢病毒.采用MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞凋亡蛋白Caspase 3、8、9的表达水平,并进行组间比较.结果 胃癌细胞系KATO-Ⅲ、NUGC-3、AGS、N87 LncRNA NNT-AS1的表达水平均明显高于正常胃成纤维细胞系NSFC(均P＜0.01).细胞培养12、24、48、72 h后,相比sh-vector组、对照组,sh-NNT-AS1组吸光度值(OD490值)明显降低(均P＜0.05).细胞培养7d后,sh-NNT-AS1组克隆形成数明显低于sh-vector组、对照组(均P＜0.05).sh-NNT-AS1组细胞凋亡率明显高于sh-vector组、对照组(均P＜0.01).sh-NNT-AS1组细胞凋亡蛋白Caspase3、9表达水平均高于sh-vector组(均P＜0.05),而Caspase 8表达水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 LncRNA NNT-AS1促进胃癌细胞增殖,抑制凋亡,机制可能与上调凋亡蛋白Caspase3、9表达有关.

目的 观察胃癌组织中长链非编码RNA (LncRNA)烟酰胺核苷酸反义转氢酶RNA1(NNT-AS1)的表达并探讨其意义.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测77例份胃癌组织及相应癌旁正常胃组织中LncRNA NNT-AS1的表达,并分析LncRNA NNT-AS1表达与胃癌患者临床病理特征的关系.结果 胃癌及癌旁正常组织中LncRNA NNT-AS1相对表达量分别为0.509 ±0.110、0.103±0.004,二者比较差异有统计学意义(t=32.366,P=0.000).LncRNA NNT-AS1在胃癌组织中的表达与肿瘤分化程度、TNM分期、脉管侵袭、淋巴结转移相关(P均＜0.05),而与患者年龄、性别、神经侵袭无关(P均＞0.05).胃癌组织中LncRNA NNT-AS1表达较低者生存率与生存时间均高于LncRNA NNT-AS1表达较高者(P均＜0.05).结论 胃癌组织中LncRNA NNT-AS1呈异常高表达,LncRNA NNT-AS1可能是胃癌发生及恶性进展的重要因素,检测LncRNA NNT-AS1表达有助于患者预后判断.

目的 研究长链非编码RNA NNT-AS1在人肺癌组织及细胞中的表达和作用.方法 收集人肺癌组织和五种不同的肺癌细胞株,进行qPCR分析,检测肺癌组织、细胞中NNT-AS1的相对转录水平.研究NNT-AS1在肺癌细胞集落形成、细胞增殖和细胞凋亡中的作用.结果 ①人肺癌组织及细胞株中LncRNA NNT-AS1过度表达.LncRNA NNT-AS1表达与肿瘤大小、TNM分期呈正相关(P =0.005,P=0.042).②NNT-AS1敲低抑制A549和95D细胞的集落形成能力.③A549和95D细胞中的NNT-AS1下调可抑制细胞增殖.④A549和95D细胞中的NNT-AS1下调可以促进细胞凋亡.结论 LncRNA NNT-AS1促进人肺癌细胞增殖并抑制细胞凋亡,是肺癌的致癌因子.NNT-AS1是肺癌诊断和治疗的新型lncRNA,为肺癌的诊断和治疗提供了新的线索.

烟酰胺核苷酸反义转氢酶RNA1 (nicotinamide nucleotide transhydrogenase-antisense RNA1,NNT-AS1)作为一种新近发现的在肿瘤中异常表达的长链非编码RNA,其在肿瘤中作用的相关研究也获得了突破性进展.现有研究已证实NNT-AS1广泛参与多种肿瘤的发生和发展,其对肿瘤的诊断、治疗都有重要意义.全文将对NNT-AS1与肿瘤的研究进展作一综述.