目的:研究大鼠在体心肌过表达血管紧张素转化酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2）是否通过迷走神经调控高迁移率族蛋白B1 （high mobility group box 1, HMGB1 ），从而对大鼠心肌缺血／再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI）产生保护作用。方法:雄性SD大鼠50只，体重220~280 g，按随机数字表法分为5组（每组10只）：假手术组（S组）、缺血／再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）组、单侧迷走神经切断术（unilateral vagotomy, VG）+I/R组（V组）、ACE2+I/R组（A组）、VG+ACE2+I/R组（VA组）。ACE2过表达在术前3周通过经腹心包腔注射腺相关病毒（adeno-associated virus, AAV）获得。I/R模型为结扎左冠状动脉前降支（left anterior descending coronary artery, LAD) 30 min后恢复灌注24 h。ELISA法测定血清中肌钙蛋白I (cardiac troponin I, cTnI）浓度，Western blot法检测心肌组织中HMGB1水平，实时荧光定量PCR （real-time quantitative PCR, qPCR）检测心肌组织中TNF-α mRNA和IL-6 mRNA水平，伊文蓝及2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积。结果:与I/R组比较，A组心肌梗死面积明显减少（ P<0.05），心肌组织HMGB1蛋白水平下调（ P<0.05）、TNF-α mRNA和IL-6 mRNA下调（ P<0.05），血清cTnI浓度明显降低（ P<0.05）；与A组比较，VA组以上指标均明显升高（ P<0.05）。 结论:ACE2过表达通过迷走神经调控HMGB1能够减轻MI/RI，对大鼠心肌产生保护作用。

目的:观察过表达生存素(Survivin)对颅脑外伤大鼠神经细胞凋亡和神经功能的影响。方法:75只SD大鼠随机分为对照组、模型组和Survivin组。模型组和Survivin组大鼠采用自由落体法构建颅脑外伤大鼠模型，假手术组不做颅脑损伤。假手术组和模型组大鼠经颅内注射对照线相关病毒1×10 11 vg，Survivin组大鼠经颅内注射携带Survivin基因的腺相关病毒1×10 11 vg。治疗4周后，采用神经行为学评分评价3组大鼠神经功能状态，采用Morris水迷宫分析3组大鼠的学习记忆能力。采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠神经元凋亡水平。采用荧光定量聚合酶链反应分析Survivin、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3) mRNA表达水平。组间比较采用单因素方差分析。 结果:Survivin组大鼠脑组织Survivin mRNA表达水平(3.17±0.32)明显高于假手术组(1.15±0.22)和模型组(1.10±0.18)，差异有统计学意义( t＝4.088、3.591， P<0.05)。Survivin组大鼠神经功能评分[(6.88±1.01)分]明显低于模型组大鼠神经功能评分[(10.79±1.54)分]，差异有统计学意义( t＝4.319， P<0.05)。Survivin组大鼠逃避潜伏期[(7.88±0.93) s]低于模型组大鼠逃避潜伏期[(10.98±2.21) s]，差异有统计学意义( t＝3.114， P<0.05)。Survivin组大鼠穿台指数(5.27±0.99)高于模型组大鼠穿台指数(3.01±0.89)，差异有统计学意义( t＝2.891， P<0.05)。Survivin组大鼠神经细胞凋亡比例[(14.21±3.25)%]明显低于模型组大鼠神经细胞凋亡水平[(25.91±5.20)%]，差异有统计学意义( t＝3.972， P<0.05)。Survivin组大鼠脑组织bax和Caspase-3 mRNA表达水平(1.79±0.24、1.44±0.17)明显低于模型组bax和Caspase-3蛋白表达水平(2.19±0.38、1.95±0.22)比较，差异有统计学意义( t＝2.528、2.107， P<0.05)。Survivin组大鼠脑组织bcl-2 mRNA水平(0.91±0.13)明显高于模型组(0.49±0.11)，差异有统计学意义( t＝3.027， P<0.05)。 结论:过表达Survivin可显著降低颅脑外伤大鼠神经细胞凋亡相关基因表达，抑制神经细胞凋亡，提高神经功能和认知能力。

目的:评价GSK484对小鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)及中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的影响。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠48只，5~6周龄，体质量15~20 g，采用随机数字表法将小鼠分为4组( n＝12)：自主呼吸组(S组)、自主呼吸+GSK484干预组(SG组)、VILI组(V组)、VILI +GSK484干预组(VG组)。S组及SG组气管插管后自主呼吸4 h；V组及VG组机械通气4 h(潮气量30 ml/kg、呼吸频率75次/min、吸呼比1∶2、呼吸末正压0 mmHg、吸入氧气浓度21%)。于VILI建模前3 d，SG组及VG组腹腔注射GSK484 4 mg/kg，1次/d，S组及V组每天以等容量生理盐水代替。小鼠自主呼吸或机械通气4 h时，采集腹主动脉血样，行血气分析，记录PaO 2；随后处死小鼠，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。确定肺组织湿重/干重比值(W/D)；肺组织HE染色后，光镜下观察病理学结果并行损伤评分；采用ELISA法检测BALF IL-1β、IL-6、TNF-α及髓过氧化物酶(MPO)浓度；采用Western blot法检测肺组织肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及瓜氨酸化组蛋白3(Cit-H3)表达水平。 结果:与S组和SG组比较，V组和VG组肺损伤评分和W/D比值升高，PaO 2降低，BALF IL-1β、IL-6、TNF-α和MPO浓度升高，肺组织PAD4、NE、HMGB1和Cit-H3表达上调( P<0.05)；与V组比较，VG组肺损伤评分和W/D比值降低，PaO 2升高，BALF IL-1β、IL-6、TNF-α和MPO浓度降低，肺组织PAD4、NE、HMGB1和Cit-H3表达下调( P<0.05)。 结论:GSK484可减轻小鼠VILI，机制与抑制PAD4表达，减少NETs产生，减轻肺组织炎症反应有关。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-135a沉默对急性肾损伤大鼠肾功能保护作用并探讨其分子机制。方法:将2018年6月到2019年12月购自河南实验动物中心的60只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组和miR-135a组。miR-135a组通过腹腔注射沉默miR-35a的腺相关病毒1×10 11 vg/只；对照组和模型组通过腹腔注射对照miRNA腺相关病毒1×10 11 vg/只。3组大鼠接种15 d后，模型组和miR-35a组连续15 d注射庆大霉素50 mg/kg建立急性肾损伤模型；对照组连续15 d注射等体积生理盐水。建模成功48 h后处死小鼠，采用自动生化仪分析大鼠血肌酐和血尿氮水平；采用苏木精-伊红(HE)染色分析肾脏病理学变化；采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析趋化因子2(CCL2)和趋化因子3(CCL3) mRNA表达水平；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析3组大鼠外周血炎性因子水平；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-135a靶蛋白叉头蛋白转录因子O1(FoxO1)表达水平。计量资料比较采用单因素方差分析。 结果:miR-135a组大鼠肾组织病理评分[(5.19±1.38)分]显著低于模型组[(8.09±3.09)分]，差异有统计学意义( t＝3.193， P<0.05)。miR-135a组大鼠造模48 h后血肌酐和尿素氮水平[(73.76±9.43)、(12.60±4.01) mmol/L]显著低于模型组[(130.37±10.54)、(29.43±5.12) mmol/L]，差异有统计学意义( t＝2.941、3.019， P<0.05)。miR-135a组大鼠肾组织CCL2和CCL3 mRNA表达水平(1.59±0.12、1.73±0.19)显著低于模型组(3.42±0.38、2.51±0.29)，差异有统计学意义( t＝2.012、2.240， P<0.05)。miR-135a组大鼠血清白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平[(165.76±14.36)、(196.250±15.65) pg/ml]显著低于模型组[(252.32±21.44)、(318.02±27.36) pg/ml]，差异有统计学意义( t＝3.212、3.937， P<0.05)。miR-135a组大鼠肾组织FoxO1蛋白表达水平(0.29±0.09)显著高于模型组(0.12±0.07)，差异有统计学意义( t＝2.719， P<0.05)。 结论:miR-135a沉默通过上调FoxO1蛋白表达水平，降低急性肾损伤大鼠炎症水平，保护大鼠肾功能。

目的:探讨硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）在布比卡因介导氧化应激引起脊髓神经毒性中的机制。方法:无特定病原体（SPF）级健康雄性SD大鼠48只，体重110~130 g，采用随机数字表法分为4组（每组12只）：对照组（C组）、布比卡因组（B组）、布比卡因+腺相关病毒（AAV）-TXNIP短发夹RNA（shRNA）（BT组）、布比卡因+shRNA组（BS组）。C组、B组、BT组、BS组大鼠均行L 5-L 6节段鞘内置管。C组和B组均鞘内注射5 μl生理盐水；BT组和BS组分别鞘内注射5 μl AAV-TXNIP shRNA（病毒滴度为1.01×10 12 VG/ml）和5 μl无义对照序列shRNA。随后拔除鞘管，待所有大鼠饲养至250~300 g时，再次行L 5-L 6节段鞘内置管，B组、BT组、BS组鞘内注射3次5%布比卡因0.12 μl/g，每次间隔90 min，C组在相应时间内鞘内注射等量生理盐水。各组于相应处理后采用大鼠甩尾潜伏期（TFL）换算而来的最大抗伤害效应百分比（%MPE）、巴索-比蒂-布雷斯纳汉（BBB）评分法于鞘内注射布比卡因或等量生理盐水后当天（T 0）、鞘内注射后第1天（T 1）、鞘内注射后第2天（T 2）、鞘内注射后第3天（T 3）测定大鼠的尾部感觉和下肢运动功能；苏木精-伊红染色（H-E染色）观察脊髓组织损伤情况，尼氏染色观察存活神经元；生化检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）含量，免疫荧光多重染色法检测活性氧（ROS）水平，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测TXNIP信使RNA（mRNA）水平，免疫印迹法（Western blot）检测脊髓神经组织中TXNIP、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的蛋白水平。 结果:与C组比较：B组、BT组、BS组T 0、T 1、T 2、T 3时%MPE均较高，BBB评分均较低（均 P<0.05）；B组和BS组脊髓组织少突胶质细胞和小胶质细胞增多，神经元细胞水肿或萎缩，存活神经元较少（均 P<0.05）；B组、BT组、BS组的MDA含量较高（均 P<0.05），SOD、GSH、CAT含量较低（均 P<0.05）；B组和BS组ROS水平较高（均 P<0.05），TXNIP mRNA水平较高（均 P<0.05）；BT组TXNIP mRNA水平较低（ P<0.05）；B组和BS组TXNIP蛋白水平较高（均 P<0.05），GPX4蛋白水平较低（ P<0.05）。与B组比较，BT组T 1、T 2、T 3时%MPE较低，BBB评分较高（均 P<0.05），灰质及白质水肿空泡减少，受损的神经元减少，存活神经元较多（ P<0.05），MDA含量较低（ P<0.05），SOD、GSH、CAT含量较高（均 P<0.05），ROS水平较低（ P<0.05），TXNIP mRNA水平、TXNIP蛋白水平较低（均 P<0.05），GPX4蛋白水平较高（ P<0.05）。 结论:布比卡因通过激活TXNIP介导氧化应激产生脊髓神经毒性，敲低TXNIP可通过抑制氧化应激缓解布比卡因导致的脊髓神经毒性。

目的:研究胃饥饿素（Ghrelin）对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）小鼠的抗纤维化作用。方法:24只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常饮食（NCD）组、NCD+Ghrelin组、高脂饮食（HFD）组和HFD+Ghrelin组。HFD组及HFD+Ghrelin组给予高脂饲料喂养16周诱发NASH，其中NCD+Ghrelin组及HFD+Ghrelin组于喂养14周后，持续给予Ghrelin干预(11 nmol·kg -1·d -1) 2周。16周末处死动物。检测小鼠血浆丙氨酸转氨酶（ALT）、透明质酸（HA）水平；测定肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量；RT-qPCR检测肝组织转化生长因子β1（TGF-β1）及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原mRNA表达水平；Western blot检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白表达水平；苏木精染色观察肝组织形态学变化，VG染色观察肝组织纤维化的情况。 结果:NCD组ALT、HA、Hyp分别为（19.17±3.71）U/L、（80.58±27.27）ng/ml、（0.20±0.06）μg/mg与NCD组比较，HFD组血浆ALT (266.80±146.80)U/L、HA (219.00±39.47)ng/ml水平显著升高（ P < 0.05），肝组织Hyp (0.35±0.05)μg/mg prot含量增加（ P < 0.05），TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原mRNA表达水平显著升高（ P < 0.05），α-SMA蛋白表达水平明显增加，肝小叶中央静脉淤血、肝细胞肿胀，肝组织大量胶原纤维沉积。与HFD组比较，HFD+Ghrelin组小鼠血浆ALT (57.17±20.88)U/L 、HA (75.68±8.40)μg/mg水平、肝组织Hyp (0.19±0.07)μg/mg prot含量明显降低（ P < 0.05），TGF-β1、Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原mRNA表达水平均降低（ P < 0.05）；HFD+Ghrelin组α-SMA的蛋白表达水平下降（ P < 0.05）。肝组织内仅见血窦轻度淤血，肝损伤明显改善，胶原纤维沉积显著减少。 结论:Ghrelin对NASH小鼠的肝纤维化具有明显的改善作用。

目的:探讨过表达血管内皮生长因子(VEGF)对颅脑损伤大鼠神经保护作用及作用机制。方法:60只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、脑损伤组和VEGF组。脑损伤组和VEGF组大鼠建立颅脑损伤模型，对照组仅分离皮肤，不进行颅脑损伤。VEGF组大鼠经颅内注射过表达VEGF的腺相关病毒1×10 10 vg/只，对照组和脑损伤组大鼠经颅内注射对照腺相关病毒1×10 10 vg/只；3组治疗4周后，采用神经行为学评分分析大鼠神经功能；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析脑组织炎性因子的水平；采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色观察大鼠脑组织凋亡水平；采用免疫荧光染色分析脑组织神经元细胞数量。计量数据比较采用方差分析。 结果:VEGF组大鼠改良神经功能评分(mNSS)评分[(7.29±2.98)分]明显低于脑损伤组[(12.54±3.90)分]，差异有统计学意义( t＝4.819， P<0.05)。VEGF组大鼠逃避潜伏期[(28.18±5.44)s]明显高于脑损伤组[(43.59±7.30)s]，差异有统计学意义( t＝6.115， P<0.05)。VEGF组大鼠穿台次数[(50.14±6.32)s]明显高于脑损伤组[(38.74±8.19)次]，差异有统计学意义( t＝4.905， P<0.05)。VEGF组大鼠脑组织神经元细胞数量[(43.89±7.18)个/视野]明显高于脑损伤组[(31.44±6.39)个/视野]，差异有统计学意义( t＝4.103， P<0.05)。VEGF组大鼠外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β炎性因子水平[(103.48±8.18)、(167.39±9.28)、(114.52±9.87) pg/ml]明显低于脑损伤组[(187.38±12.47)、(215.31±14.21)、(165.83±13.09) pg/ml]，差异均有统计学意义( t＝3.198、3.004、2.896， P<0.05)。VEGF组大鼠脑组织TUNEL阳性率[(15.33±4.28)%]明显低于脑损伤组[(29.41±5.39)%]，差异有统计学意义( t＝3.174， P<0.05)。 结论:过表达VEGF可显著降低炎性因子水平和神经细胞凋亡，进而保护颅脑损伤大鼠神经功能和学习记忆能力。

目的:探讨FK1706对神经吻合后神经源性膀胱(NB)大鼠膀胱形态恢复的影响。方法:40只健康成年雄性SD大鼠(河南省实验动物中心提供)按照随机数字表法分为FK1706＋神经端侧吻合组(FK1706＋ECG，15只)、神经端侧吻合组(ECG，15只)和手术对照组(SCG，10只)。FK1706＋ECG大鼠先离断左侧腰6(L6)和骶1(S1)脊神经前后根，然后将左侧L6前根端侧吻合到左侧L4前根上，术后连续8周给予皮下注射FK1706溶液(0.32 mg/kg)；ECG大鼠手术方法同FK1706＋ECG大鼠，术后连续8周注射相同剂量的30%的二甲基亚砜(DMSO)；SCG大鼠离断左侧L6后根和S1前后根，作为手术对照组，术后连续8周注射相同剂量的30%的DMSO。术后4个月，麻醉3组大鼠，打开下腹部，暴露膀胱，取出膀胱并称重，剪开膀胱并测量膀胱壁厚度，比较3组大鼠膀胱湿重及膀胱壁厚度。之后将膀胱标本置于10%的福马林中，并放在4 ℃冰箱保存，将膀胱标本制作成石蜡切片，然后行苏木精-伊红(HE)和苦味酸-酸性品红(VG)染色，显微镜下观察并拍照，进行图像分析，计算并比较3组大鼠膀胱纤维化面积。两样本均数比较采用 t检验。 结果:FK1706＋ECG组大鼠膀胱湿重[(0.291±0.023) g]和膀胱壁厚度[(1.613±0.051) mm]明显高于SCG组[(0.122±0.017) g和(1.169±0.035) mm， t＝19.463、23.537， P<0.01]，但低于ECG组[(0.415±0.032) g和(2.005±0.075) mm， t＝11.345、15.583， P<0.01]。HE染色显示：SCG组大鼠膀胱组织形态正常，上皮扁平，肌束排列整齐，肌束间结缔组织紧密；FK1706＋ECG组和ECG组大鼠膀胱肌层排列不规则，并且有水肿，但FK1706＋ECG组大鼠的肌层排列不规则和水肿程度较ECG组轻。VG染色显示：FK1706＋ECG大鼠和ECG大鼠膀胱纤维化面积[(16.99±2.45)%比(19.99±2.55)%]明显大于SCG大鼠膀胱纤维化面积[(11.10±1.38)%， t＝6.796、9.928， P<0.01]，但是FK1706＋ECG大鼠膀胱纤维化程度较ECG大鼠轻( t＝3.059， P<0.01)。 结论:FK1706能够促进神经吻合后NB大鼠膀胱形态的恢复。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-33对小鼠肝再生的促进作用及其分子机制。方法:2018年9月到2019年12月，将40只C57/B6小鼠(购自上海斯莱克实验动物有限公司)按照数字随机分组法分为模型组和miR-33 KD组。模型组小鼠经尾静脉注射对照腺相关病毒1×10 11 vg/ml，miR-33 KD组小鼠经尾静脉注射miR-33敲降的腺相关病毒1×10 11 vg/ml。在注射20 d后，模型组和miR-33 KD组采用70%肝切除方法建立小鼠肝再生模型。分别在肝切术后4 d计算肝重/体重比，采用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)免疫组织化学染色分析肝脏细胞分裂能力；采用生物信息学分析miR-33的靶基因，采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞增殖指标细胞核增殖抗原(Ki-67)和靶蛋白在两组肝组织中的表达。组间比较采用 t检验。 结果:模型组和miR-33 KD组小鼠术后4 d肝脏/体重比分别为(4.10±0.61)%和(4.98±0.72)%。与模型组比较，miR-33 KD组术后4 d肝脏/体重比显著增加，差异有统计学意义( t＝2.019， P<0.05)。与模型组肝脏细胞BrdU阳性率(32.47±7.99)%比较，miR-33 KD组小鼠肝脏细胞BrdU阳性率(75.38±10.56)%显著增加，差异有统计学意义( t＝4.391， P<0.05)。与模型组肝脏细胞Ki-67蛋白表达水平(0.43±0.11)比较，miR-33 KD组小鼠肝脏细胞Ki-67蛋白表达水平(1.37±0.31)显著增加，差异有统计学意义( t＝3.281， P<0.05)。生物信息学显示细胞周期素依赖性激酶(CDK6)是miR-33的靶基因。与模型组CDK6蛋白表达水平(0.25±0.15)比较，miR-33 KD组CDK6蛋白表达水平(1.02±0.28)显著增加，差异有统计学意义( t＝3.108， P<0.05)。 结论:miR-33通过靶向作用于CDK6 3’端非编码区(3’UTR)区域，调控CDK6蛋白表达水平，进而影响细胞周期，调节正常肝脏细胞增殖。

目的:探讨腺相关病毒介导神经生长因子(NGF)对大鼠脑损伤的保护作用及其机制。方法:2018年11月到2019年11月，将购自河南省实验动物中心的45只SD随机分为对照组、模型组和NGF组，每组15只。采用自由落体法建立大脑急性脑损伤大鼠模型，对照组和模型组大鼠建模后经颅内注射携带空载体的腺相关病毒1×10 10 vg，NGF组大鼠建模后经颅内注射携带NGF的腺相关病毒1×10 10 vg，3组在治疗2周后，采用神经行为学评分评价大鼠神经功能症状，采用Morris水迷宫实验评估3组大鼠空间学习记忆能力；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠脑组织凋亡，采用蛋白质印迹法(Western blot)分析3组大鼠脑组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。 结果:与模型组神经损伤程度评分[(11.24±3.99)分]比较，NGF组大鼠神经损伤程度评分[(6.09±4.11)分]显著下降，差异有统计学意义( t＝3.011， P<0.05)。与模型组逃避潜伏期[(29.55±5.94) s]比较，NGF组大鼠逃避潜伏期[(17.19±3.84) s]显著下降，差异有统计学意义( t＝3.415， P<0.05)。与模型组穿台指数(1.54±1.09)比较，NGF组大鼠穿台指数(3.58±2.10)显著下降，差异有统计学意义( t＝3.001， P<0.05)。与模型组大鼠脑细胞凋亡率[(31.58±6.04)%]比较，NGF组大鼠大鼠脑细胞凋亡率[(15.87±4.28)%]显著下降，差异有统计学意义( t＝3.841， P<0.05)。与对照组大鼠脑组织Caspase-3和bax表达水平(0.25±0.09、0.15±0.08)比较，模型组脑组织Caspase-3和bax表达水平显著增加(0.94±0.15、1.18±0.18)，差异有统计学意义( t＝3.491、2.192， P<0.05)。与模型组大鼠脑组织Caspase-3和bax表达水平(0.94±0.15、1.18±0.18)比较，NGF组大鼠脑组织Caspase-3和bax表达水平显著下降(0.39±0.12、0.28±0.14)，差异有统计学意义( t＝3.718、2.004， P<0.05)。 结论:腺相关病毒介导NGF在通过抑制脑组织细胞凋亡，可显著改善脑组织神经功能，提高学习和记忆能力。