噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(hemophagocytic lymphohistiocytosis，HLH)是一种全身炎症反应综合征，X连锁凋亡抑制因子(X-linked inhibitor of apoptosis，XIAP)缺乏症是一种先天免疫缺陷病，常合并HLH，对EB病毒的易感性增加，多在儿童期发病。目前认为发生HLH的机制是XIAP缺乏导致了固有免疫功能缺陷、细胞凋亡增加以及NLRP3炎症小体过度激活，共同导致了病原体的清除障碍及细胞因子的过度释放。XIAP缺乏症患者中HLH的病程一般较轻，病死率较低，但经常复发。除HLH外，该病还可同时合并一些自身炎症性疾病的表现。造血干细胞移植是唯一可以治愈的方法，减低强度的预处理效果较好。一些新型靶向药物如IFN-γ单克隆抗体、IL-18及IL-6等拮抗剂也许有效，但尚需更多的研究来证实。

目的:探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和Krüppel样因子4(KLF4)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC临床生物学特征之间的关系。方法:收集2015年3月至2019年9月金华市中心医院磐安分院和金华市中心医院病理科归档病历中资料完整的94例NSCLC组织标本，所有患者术前均未行放化疗或靶向免疫治疗，同时另取距离癌组织边缘5 cm非肿瘤组织石蜡标本为对照。采用免疫组织化学法检测94例NSCLC患者的癌组织和癌旁组织中XIAP和Cdc42表达水平。各组间比较采用 χ2检验。 结果:XIAP在NSCLC癌组织中表达率明显高于对应癌旁组织(75.53%比14.89%， t＝69.767， P<0.05)，差异有统计学意义，XIAP表达水平与NSCLC的TNM分期和淋巴结转移明显相关( t＝7.686、4.171， P<0.05)；KLF4在NSCLC癌组织中表达率明显低于对应癌旁组织(30.85%比84.04%， t＝54.398， P<0.05)，差异有统计学意义，KLF4表达水平与NSCLC的TNM分期、组织学分化程度和淋巴结转移明显相关( t＝6.224、7.523、7.650， P<0.05)。 结论:联合检测XIAP和KLF4有助于判断NSCLC临床生物学行为。

目的:探讨沉默调节蛋白3（Sirtuin3, Sirt3）在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）诱发急性肺损伤（acute lung injury, ALI）中对肺上皮细胞凋亡的影响及其相关分子机制。方法:野生型小鼠和基因敲除小鼠（靶向突变删除Sirt3等位基因）各35只。各取34只腹腔注射雨蛙素50 μg/kg和内毒素10 mg/kg构建SAP-ALI模型，记录野生型小鼠和基因敲除小鼠注射后12、24、36、48、72 h的生存率，采用H-E染色观察野生型小鼠和基因敲除小鼠注射后12 h肺组织炎症水平，Western blot法比较野生型小鼠和基因敲除小鼠注射前及注射后8、12、24 h肺组织胱天蛋白酶（cysteinyl aspartate specific proteinase, caspase）-3、caspase-9及X-连锁凋亡抑制蛋白相关因子1（X-linked inhibitor of apoptosis-associated factor, Xaf1）蛋白水平。剩余野生型小鼠和基因敲除小鼠各1只处死取肺组织，免疫组化染色观察肺组织Xaf1表达水平。取MLE12细胞分为4组（每组1孔）：空白对照1组（A组）、TNF-α 20 μg/L刺激36 h组（B组）、细胞干扰+TNF-α 20 μg/L刺激36 h组（C组）、细胞过表达+TNF-α 20 μg/L刺激36 h组（D组），流式细胞术检测4组细胞凋亡率。另取MLE12细胞分为3组（每组1孔）：空白对照2组（E组）、细胞干扰Sirt3+TNF-α 20 μg/L刺激36 h组（F组）、细胞干扰Sirt3和Xaf1+TNF-α 20 μg/L刺激36 h组（G组），比较E组、F组和G组细胞Xaf1干扰后caspases-3、caspase-9蛋白水平及酶活性。结果:基因敲除小鼠注射后12、24、36、48、72 h生存率均低于野生型小鼠（ P<0.05）。与野生型小鼠比较，注射后12 h基因敲除小鼠肺组织炎症细胞浸润和间质水肿更加明显。基因敲除小鼠注射后8、12、24 h肺组织caspase-3、caspase-9蛋白水平均高于野生型小鼠（ P<0.05），Xaf1蛋白水平均高于野生型小鼠（ P<0.05）。A组、B组、C组、D组细胞凋亡率依次为11%、21%、33%、7%。F组细胞caspase-3、caspase-9蛋白水平高于E组（ P<0.05），caspase-3、caspase-9活性高于E组（ P<0.05）；G组细胞caspase-3蛋白水平低于F组（ P<0.05），caspase-3、caspase-9活性低于F组（ P<0.05）。 结论:Sirt3可通过调控Xaf1的表达，抑制SAP应激状态下的肺上皮细胞凋亡，并降低SAP-ALI的死亡率。

目的:研究氢气对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及作用机制。方法:本研究为实验研究。常规培养A549细胞，当细胞数量达到实验需要时，采用随机数字表法将细胞分为对照组、20%氢气组、40%氢气组、60%氢气组。对各氢气组细胞分别使用20%、40%、60%氢气干预，干预结束后收集各组细胞使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。使用蛋白质印迹法检测各组A549细胞中X连锁凋亡抑制因子(XLP2)、胱天蛋白酶3(Caspase3)、胱天蛋白酶7(Caspase7)的表达。9只5~6周雄性裸鼠皮下成瘤造模，采用随机数字表法将荷瘤鼠分为空白对照组、氢气组(给予60%浓度氢气吸入，1次/d，4 h/次)、顺铂组(4 mg/kg腹腔注射顺铂，1次/周)，每组3只。免疫组织化学比较3组肿瘤组织中XLP2、Caspase3、Caspase7的表达。结果:对照组、20%氢气组、40%氢气组、60%氢气组细胞凋亡率分别为(1.270±0.096)%、(2.250±0.076)%、(3.080±0.040)%、(7.760±0.050)%，差异有统计学意义( F＝5 186.17， P＝0.001)；与对照组比较，其余3组的细胞凋亡率均升高(均 P<0.001)。对照组、20%氢气组、40%氢气组、60%氢气组中XLP2的相对表达量分别为(0.355±0.012)、(0.300±0.016)、(0.303±0.019)、(0.231±0.022)，差异有统计学意义( F＝7.33， P＝0.011)；与对照组比较，其余3组XLP2的相对表达量均降低(均 P<0.05)。对照组、20%氢气组、40%氢气组、60%氢气组中Caspase7的相对表达量分别为(0.123±0.008)、(0.225±0.009)、(0.335±0.002)、(0.449±0.007)，差异有统计学意义( F＝1 181.95， P<0.001)；与对照组比较，其余3组XLP2的相对表达量均增高(均 P<0.05)。对照组、20%氢气组、40%氢气组、60%氢气组中Caspase3的相对表达量分别为(1.174±0.130)、(1.136±0.167)、(1.194±0.111)、(1.169±0.179)，差异无统计学意义( F＝0.05， P＝0.984)。XLP2主要在细胞质中表达，氢气组、顺铂组、空白对照组中XLP2的表达量分别为(0.041±0.012)、(0.024±0.001)、(0.090±0.033)，差异有统计学意义( F＝8.44， P＝0.018)；氢气组、顺铂组XLP2的表达量均较空白对照组降低(均 P<0.05)，氢气组与顺铂组之间XLP2的表达量比较差异无统计学意义( P>0.05)。Caspase7主要在细胞质中表达，在氢气组、顺铂组、空白对照组中Caspase7的表达量分别为(0.204±0.004)、(0.234±0.007)、(0.122±0.003)，差异有统计学意义( F＝372.42， P<0.001)；氢气组、顺铂组Caspase7的表达量均较空白对照组升高(均 P<0.05)，顺铂组Caspase7的表达量较氢气组升高( P<0.05)。Caspase3主要在胞浆中表达，空白对照组、氢气组、顺铂组中Caspase3的表达量分别为(0.255±0.024)、(0.273±0.109)、(0.287±0.046)，差异无统计学意义( F＝0.16， P＝0.853)。 结论:氢气可促进肺腺癌A549细胞凋亡，降低XLP2在肺腺癌A549细胞和瘤组织中的表达，提高Caspase7在肺腺癌A549细胞和瘤组织中表达。氢气可能通过影响XLP2和Caspase7蛋白表达量，发挥其促进肺癌A549细胞凋亡的作用。

目的:探讨信号传导及转录活化因子3(STAT3)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在子宫内膜癌组织中的表达，以及两者与子宫内膜癌临床生物学行为的关系。方法:收集惠州市中心人民医院(中山大学附属惠州医院)和广东医科大学附属医院2015年1月至2020年3月25例正常子宫内膜组织、53例子宫内膜癌组织标本，采用免疫组织化学方法检测其中的STAT3和XIAP的表达水平，计数资料各组比较采用 χ2检验。 结果:子宫内膜癌组织中的STAT3阳性表达率为79.25%(42/53)，明显高于正常子宫内膜组织阳性表达率[24.00%(6/25)]，差异有统计学意义( χ2＝21.905， P<0.01)；STAT3表达水平与子宫内膜癌组织学分化程度、FIGO分期、淋巴结转移明显相关(分别为 χ2＝4.115、5.962、4.862， P<0.05)。子宫内膜癌组织中的XIAP阳性表达率为73.58%(39/53)，明显高于正常子宫内膜组织阳性表达率[16.00%(4/25)]，差异有统计学意义( χ2＝22.772， P<0.01)，XIAP表达水平与子宫内膜癌肌层浸润深度、组织学分化程度、FIGO分期、淋巴结转移明显相关(分别为 χ2＝6.564、4.369、6.632、6.086， P<0.05)。 结论:STAT3和XIAP在子宫内膜癌组织呈高表达，其对子宫内膜癌的诊断及预后评估有一定指导意义。

目的:探究X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)对人胃肠道间质瘤(GIST)细胞中半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase 1)介导的细胞焦亡的影响及机制.方法:实时荧光定量 PCR 和 West-ern blot检测人正常胃黏膜上皮细胞系(RGM-1)和 GIST 细胞系(GIST-T1、GIST-430、GIST-882)中XAF1 的表达水平;采用脂质体介导转染法将pcDNA3.1-XAF1 重组质粒染进GIST-882 细胞,以构建高表达XAF1 的GIST-882 细胞.GIST-882 细胞分为对照组、pcDNA3.1 组(转染 pcDNA3.1 空载体质粒)、pcDNA3.1-XAF1 组(转染pcDNA3.1-XAF1 重组质粒)、pcDNA3.1-XAF1+Rap 组(转染 pcDNA3.1-XAF1 重组质粒并给予自噬激活剂雷帕霉素处理),免疫荧光染色检测各组细胞内微管相关蛋白 1 轻链3(LC3)表达情况,Western blot 检测各组细胞中 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与 Beclin1 蛋白表达水平,ELISA法检测各组细胞上清中白细胞介素,IL-1β、IL-18 含量,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测各组细胞LDH释放率,Western blot检测各组细胞中Caspase-1 及其活化形式 cleaved-Caspase-1、NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、消皮素 D(GSDMD)蛋白表达水平.结果:与RGM-1 细胞比较,GIST-T1、GIST-430、GIST-882 细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量显著减少(P<0.05);细胞转染后,pcD-NA3.1-XAF1 组GIST-882 细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于pcDNA3.1 组、对照组(P<0.05).与对照组比较,pcDNA3.1-XAF1 组 GIST-882 细胞内 LC3 荧光强度明显减弱,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1 蛋白相对表达量显著减少(P<0.05),细胞上清液 IL-1β、IL-18 含量及 LDH 释放率显著升高(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著增加(P<0.05);与pcDNA3.1-XAF1 组比较,pcDNA3.1-XAF1+Rap 组 GIST-882 细胞内 LC3 荧光强度明显增强,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1 蛋白相对表达量显著增加(P<0.05),同时,细胞上清液 IL-1β、IL-18 含量及LDH释放率显著下降(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD 蛋白相对表达量也显著减少(P<0.05).结论:XAF1 在 GIST 细胞中表达下降,提高 XAF1 表达能通过抑制自噬从而促进Caspase 1 介导的GIST细胞焦亡,发挥抗肿瘤作用.

目的 研究癫痫患儿认知功能、细胞凋亡因子的变化及其相关性分析.方法 选择癫痫患儿150例为癫痫组,根据脑电图异常情况分为轻度组和重度组;另选取同期健康志愿者150例为对照组.比较各组认知功能言语智商、操作智商及总智商评分,以及细胞凋亡因子X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、促凋亡基因(Bim)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、Caspase-3、Caspase-4、Caspase-9水平.分析细胞凋亡因子与认知功能的相关性.结果 分别与对照组、轻度组比较,癫痫组、重度组言语智商、操作智商及总智商评分、XIAP降低,Bim、Bax、Caspase-3、Caspase-4、Caspase-9升高(P＜0.05).患儿言语智商、操作智商、总智商评分均与Bim、Bax、Caspase-3、Caspase-4、Caspase-9水平呈正相关,与XIAP呈负相关(P＜0.05).结论 癫痫患儿细胞凋亡因子水平随脑电图异常加重而变化,可作为机体认知功能预测的重要依据.

[目的]探讨加减补阳还五汤是否通过沉默信息调节因子 1(SIRT1)途径激活自噬改善糖尿病肾病(DKD)小鼠肾组织损伤.[方法]将DKD小鼠随机分为模型组、中药组,db/m组小鼠作为正常组.给药 8周后,检测小鼠血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HBA1c)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、尿微量白蛋白(mALB)水平;实时定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)和免疫组化检测小鼠肾组织Wilms肿瘤基因 1(WT1)、nephrin及podocin的表达;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肾组织SIRT1、人微管相关蛋白轻链 3B(LC3B)、自噬相关蛋白 7(Agt7)、自噬受体蛋白p62(P62)、Bcl-2 同源结构域蛋白抗体(Beclin1)、B细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达;同时光镜观察肾脏病理形态学变化.[结果]中药干预后,小鼠肾脏病理改变轻于模型组;尿微量白蛋白(mAlb)、血脂(TC、TG)下降,肾功能(BUN、Scr)改善;同时抑制了肾组织P62、Bax、Caspase-3 表达,上调了SIRT1、Beclin-1、Agt7、Bcl-2、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ的表达,并改善了肾组织足细胞标志蛋白WT1、nephrin及podocin的表达(P＜0.05或P＜0.01),但对血糖水平无明显影响(P＞0.05).[结论]加减补阳还五汤可通过增强DKD小鼠肾脏细胞自噬,并抑制其凋亡,保护足细胞,进而发挥肾脏保护作用.其中SIRT1 途径可能是其促进自噬的潜在途径.

目的 观察急性胰腺炎小鼠胰腺和远隔脏器组织中肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达变化,并分析其与多脏器细胞凋亡的关系.方法 将30只雄性C57BL/10SnJ小鼠随机分为对照组、急性水肿性胰腺炎(AEP)组、急性坏死性胰腺炎(ANP)组,每组10只.AEP组建立AEP模型,ANP组建立ANP模型,对照组注射等量磷酸盐缓冲盐水.采用RT-qPCR法检测各组胰腺组织中的TRAF6、XIAP mRNA,Western blotting法检各组胰腺、肠、肝、肺、肾组织中的cleaved Caspase-3、TRAF6、XIAP蛋白.采用TUNEL法测算胰腺、小肠、肝、肺、肾组织细胞凋亡率.结果 ANP组、AEP组胰腺及多个远隔脏器组织中TRAF6、XIAP蛋白表达与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);AEP组胰腺组织中XIAP mRNA表达低于ANP组(P<0.05);AEP组胰腺、肠、肝、肺、肾组织中TRAF6蛋白表达高于ANP组,XIAP蛋白表达低于ANP组(P均<0.05).AEP组胰腺、肠、肝、肺、肾组织细胞凋亡率及cleaved Caspase-3表达高于ANP组和对照组(P均<0.05).胰腺炎小鼠胰腺及多个远隔脏器组织中cleaved Caspase-3蛋白表达与TRAF6蛋白表达呈正相关,与XIAP蛋白表达呈负相关(P均<0.05).结论 急性胰腺炎小鼠胰腺和远隔脏器组织中TRAF6、XIAP表达异常,且与细胞凋亡指标存在相关性;TRAF6、XIAP在AEP与ANP中的表达趋势有所差异,TRAF6、XIAP对细胞凋亡的调控作用可能与急性胰腺炎严重程度有关.

目的:探讨miR-1229-5p对SW480 细胞生物学功能的影响和作用机制.方法:采用瞬时转染在SW480 细胞中过表达miR-1229-5p,进行细胞克隆、EdU实验、MTT、细胞划痕、Transwell小室迁移及侵袭实验,检测miR-1229-5p mimics组与对照组结直肠癌细胞SW480 生物学功能变化.转染过表达miR-1229-5p慢病毒后进行裸鼠皮下成瘤实验,观察miR-1229-5p在体内对细胞增殖能力的影响.通过预测软件TargetScan筛选出X连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)作为miR-1229-5p的潜在下游靶基因,并检测miR-1229-5p对其蛋白表达的影响.在SW480 细胞中转染XAF1 过表达质粒,共转染miR-1229-5p后进行回复实验验证miR-1229-5p通过靶向XAF1 促进SW480 细胞增殖及侵袭.结果:miR-1229-5p mimics组较miR-NC组细胞的增殖、迁移及侵袭能力均提高(P＜0.01);miR-1229-5p组瘤体体积高于miR-NC组(P＜0.01);miR-1229-5p组对靶基因XAF1 表达量低于miR-NC组(P＜0.01),转染XAF1 质粒后可逆转miR-1229-5p mimics对细胞增殖及侵袭的促进作用(P＜0.01).结论:miR-1229-5p可通过靶向XAF1 促进结直肠癌细胞SW480 的增殖和侵袭能力.