目的:探究双氢青蒿素(dihydroartemisinin，DHA)和索拉非尼(sorafenib, SOR)诱导未分化甲状腺癌(anaplastic thyroid cancer, ATC)细胞发生铁死亡的协同作用及分子机制。方法:以细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞仪检测DHA和SOR对ATC细胞CAL-62增殖及铁死亡的影响；实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测铁死亡相关基因谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11基因(SCL7A11)、脂氧合酶-15(LOX-15)及p53表达水平的变化；对应的检测试剂盒检测铁死亡中间代谢产物乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛、亚铁离子(Fe 2+)、一氧化氮(NO)、活性氧簇(ROS)水平；建立裸鼠肿瘤模型分析DHA和SOR对ATC在体内的抑制作用。 结果:与对照组相比，DHA、SOR和DHA+SOR处理均呈剂量依赖性抑制细胞增殖( P<0.001)，LDH、Fe 2+、丙二醛及ROS含量明显增多，GSH活性明显降低( P<0.001)，其作用均被硫酸亚铁(FeSO 4)促进，被铁抑素-1逆转。与对照组及单独用药组比较，DHA+SOR组15-LOX-2及p53表达上调，GPX4和SCL7A11水平降低( P<0.001)，15-LOX-1蛋白含量差异无统计学意义；此外，DHA+SOR组NO的含量显著降低( P<0.001)。DHA和SOR在体抑制ATC肿瘤生长。 结论:DHA与SOR协同作用上调15-LOX-2基因的表达，抑制NO的合成，从而诱导ATC细胞发生铁死亡。

目的:分析刚果（金）维和任务区疟疾的发病特征和诊治情况，同时评价基于青蒿素的联合疗法（ACT）的效果，为疟疾的诊断及治疗提供临床依据。方法:收集2014年1月至2020年9月联合国刚果（金）稳定特派团（MONUSCO）中国二级医院收治的感染疟疾维和人员的临床资料，回顾性分析患者一般资料、发病特点、治疗及临床结局等情况。结果:2014年1月至2020年9月，362例维和人员因感染疟疾住院，年均发病例数为54例/年，年发病率为9.5/1 000，从发病到明确诊断的时间中位数为2.5 d，范围为1 ~ 9 d；患者中，重症疟疾占7.73%（28/362），非复杂性疟疾占92.27%（334/362）；旱季（4 - 9月）发病占37.57%（136/362），雨季（10月至次年3月）发病占62.43%（226/362）。使用ACT抗疟治疗后均临床治愈，其中8例出现复燃，经药物转换ACT再次治疗后临床治愈。结论:在刚果（金）维和任务区，维和人员对疟疾普遍易感，在临床治疗中采用ACT，治愈率高，安全高效。

目的:研究双氢青蒿素联合卡非佐米对多发性骨髓瘤细胞株ARD活性、增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:体外培养多发性骨髓瘤细胞ARD，分别用0、5、10、20、40、80 μg/ml浓度双氢青蒿素及0、5、10、20、40、80 nmol/L浓度卡非佐米处理ARD细胞。将ARD细胞分为对照组（不做任何处理）、双氢青蒿素组（2 μg/ml）、卡非佐米组（8 nmol/L）和联合组（双氢青蒿素2 μg/ml+卡非佐米8 nmol/L）。采用MTT法和EdU-488法检测细胞活性和增殖情况；活细胞/死细胞双染法和流式细胞术检测细胞凋亡情况；蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果:经0、5、10、20、40、80 μg/ml浓度双氢青蒿素处理ARD细胞的存活率分别为（100.00±2.18）%、（50.22±3.09）%、（37.39±2.34）%、（30.42±1.79）%、（23.80±1.12）%、（18.04±0.79）%，差异有统计学意义（ F=653.30， P<0.001）；随着药物浓度增加，ARD细胞活性逐渐下降（均 P<0.05）。经0、5、10、20、40、80 nmol/L浓度卡非佐米处理ARD细胞的存活率分别为（100.00±1.12）%、（83.98±2.95）%、（67.27±2.10）%、（58.24±2.02）%、（46.34±1.14）%、（37.47±1.36）%，差异有统计学意义（ F=227.40， P<0.001）；随着药物浓度增加，ARD细胞活性逐渐下降（均 P<0.05）。对照组、双氢青蒿素组、卡非佐米组和联合组的细胞存活率分别为（100.00±2.67）%、（67.23±0.57）%、（76.23±2.83）%、（27.06±1.09）%，差异有统计学意义（ F=655.60， P<0.001）；双氢青蒿素组、卡非佐米组、联合组与对照组相比，差异均有统计学意义（均 P<0.001）；双氢青蒿素组、卡非佐米组与联合组相比，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。对照组、双氢青蒿素组、卡非佐米组和联合组细胞EdU阳性率分别为（100.00±8.17）%、（68.07±6.14）%、（85.04±2.78）%、（19.62±3.83）%，差异有统计学意义（ F=115.20， P<0.001）；双氢青蒿素组、卡非佐米组、联合组与对照组相比，差异均有统计学意义（ P<0.001； P=0.047； P<0.001）；双氢青蒿素组、卡非佐米组与联合组相比，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。活细胞/死细胞双染实验显示，在明场视野下，对照组细胞形态完整，各用药组细胞形态不规则、体积缩小、细胞质浓缩，细胞周围可见形态不规则的凋亡小体，其中，联合组变化最明显；在荧光视野下，对照组细胞只显示绿色荧光，各用药组均出现红色荧光，其中，联合组中红色荧光细胞占比最大。对照组、双氢青蒿素组、卡非佐米组和联合组的细胞凋亡率分别为（9.06±2.95）%、（29.50±1.34）%、（20.77±3.00）%、（58.23±5.13）%，差异有统计学意义（ F=115.80， P<0.001）；双氢青蒿素组、卡非佐米组、联合组与对照组相比，差异均有统计学意义（ P<0.001； P=0.012； P<0.001）；双氢青蒿素组、卡非佐米组与联合组相比，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。对照组、双氢青蒿素组、卡非佐米组和联合组的P53、Cleaved-Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白相对表达量差异均有统计学意义（ F=21.76， P<0.001； F=42.87， P<0.001； F=44.27， P<0.001； F=163.50， P<0.001）；双氢青蒿素组、卡非佐米组、联合组与对照组相比，差异均有统计学意义（均 P<0.05）；双氢青蒿素组、卡非佐米组与联合组相比，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:双氢青蒿素联合卡非佐米可协同抑制多发性骨髓瘤ARD细胞的活性及增殖能力，并促进其凋亡，其作用机制可能与线粒体凋亡途径相关。

目的:探讨双氢青蒿素（DHA）、焦孔素E（GSDME）对喉癌细胞增殖、转移及焦亡的影响及相关机制。方法:取人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞，将其分为空白组（未干预的Hep-2细胞）、DHA组（采用50 μmol/L DHA处理的Hep-2细胞）、GSDME-siRNA组（转染GSDME-siRNA的Hep-2细胞）、DHA+GSDME-siRNA组（采用50 μmol/L DHA培养并转染GSDME-siRNA的Hep-2细胞）。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测DHA对Hep-2细胞增殖能力的影响，计算细胞增殖抑制率及半数抑制浓度（ IC50）；流式细胞术检测细胞焦亡率；Transwell法检测细胞侵袭能力；蛋白质印迹法检测焦亡相关蛋白GSDME、caspase-3及己糖激酶Ⅱ（HK-Ⅱ）、亲环素D、电压依赖性阴离子通路（VDAC）蛋白的相对表达水平。 结果:10、20、40、80、160 μmol/L DHA作用Hep-2细胞48 h的细胞增殖抑制率均高于相应浓度作用24 h的细胞增殖抑制率（均 P<0.05）；DHA作用Hep-2细胞24、48 h的 IC50值分别为57.20、43.50 μmol/L，故选择50 μmol/L DHA进行后续实验。空白组、DHA组、GSDME-siRNA组及DHA+GSDME-siRNA组细胞焦亡率分别为（6.5±0.8）%、（22.7±2.5）%、（3.1±0.6）%及（7.0±1.0）%，差异有统计学意义（ F=221.20， P<0.05）；细胞侵袭数分别为（153±14）个、（95±10）个、（205±16）个及（148±16）个，差异有统计学意义（ F=56.89， P<0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，DHA组GSDME、caspase-3相对表达水平均高于空白组（均 P<0.05）；GSDME-siRNA组GSDME、caspase-3相对表达水平均低于DHA组（均 P<0.05）；DHA+GSDME-siRNA组GSDME、caspase-3相对表达水平均高于GSDME-siRNA组（均 P<0.05）；DHA组HK-Ⅱ、亲环素D、VDAC相对表达水平均低于空白组（均 P<0.05）；GSDME-siRNA组HK-Ⅱ、亲环素D、VDAC相对表达水平均高于DHA组（均 P<0.05）；DHA+GSDME-siRNA组HK-Ⅱ、亲环素D、VDAC相对表达水平均低于GSDME-siRNA组（均 P<0.05）。 结论:双氢青蒿素可增加喉癌细胞焦亡，降低细胞增殖及转移能力，可能与抑制线粒体HK-Ⅱ表达相关。

目的:探讨双氢青蒿素(DHA)通过氯离子通道抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖的作用及其机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测DHA抑制LNCaP细胞增殖，并确定其半抑制浓度(IC 50值)：分别配制的浓度梯度为0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000、40.000、80.000、160.000 μmol/L DHA溶液，并按实验设计加入含有LNCaP细胞的96孔板中，在酶联免疫检测仪490 nm处测量各孔的吸光度( A)值；全细胞膜片钳：检测DHA激活LNCaP细胞氯电流以及氯通道抑制剂4，4’-二异硫氰酸基-2，2’-二苯乙烯磺酸二钠(DIDS)和5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)抑制LNCaP细胞氯离子电流。依次用0、±40 mV、±80 mV电脉冲刺激细胞，每个刺激间隔时间为200 ms，每个周期间隔为4 s。开始刺激后的10 ms收集和测量电流。通过将电流归一化到膜电容来确定电流密度。组间比较使用独立样本 t检验。 结果:DHA能够抑制LNCaP细胞增殖，其抑制效果具有时间依赖性，DHA抑制LNCaP细胞增殖的IC 50值随时间延长逐渐降低。在用DHA处理LNCaP细胞24、48、72 h后，其IC 50值分别为(51.34±1.49)、(24.98±2.07)、(22.79±1.38) μmol/L[ n＝3， t＝17.901(24 h比48 h)， t＝24.349(24 h比72 h)， P<0.01]。此外，DHA也能激活LNCaP细胞氯通道产生氯电流，在80 mV电压钳制下，LNCaP细胞的电流密度增加至(48.30±7.52) pA/pF，被激活的电流可被氯通道抑制剂抑制至(6.35±2.47) pA/pF(DIDS)和(9.25±2.09) pA/pF(NPPB)[ n＝3， t＝9.180(DHA比DIDS)， t＝8.666(DHA比NPPB)， P<0.01]。 结论:DHA能够抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖，其抑制效果具有时间依赖性；DHA也能够激活LNCaP细胞氯离子通道产生氯离子电流，且激活的氯电流能够被氯通道抑制剂所抑制。

目的:探讨双氢青蒿素对非细菌性前列腺炎(Chronic non-bacterial prostatitis,CNP)的治疗效果及其对骨髓间充质干细胞(BMSCs)归巢的影响.方法:选取30只9～11 w龄雄性C57BL/6小鼠,随机抽取6只作为正常对照组,剩余24只注射消痔灵.建立慢性非细菌性前列腺炎小鼠模型.将造模成功后的小鼠随机分为模型对照组、骨髓间充质干细胞组、双氢青蒿素5 mg/kg+骨髓间充质干细胞组和双氢青蒿素15 mg/kg+骨髓间充质干细胞组,每组6只.采用膀胱穿刺测压法行小鼠膀胱排尿功能检测;免疫荧光法检测红色荧光蛋白(RFP)阳性细胞在前列腺组织中的表达情况;HE染色检测小鼠前列腺组织病理状态;天狼星红染色检测小鼠前列腺组织胶原累积情况;ELISA法检测小鼠前列腺组织炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β和趋化因子COX2、CXCL9、CXCL10、CXCL11的含量.结果:膀胱穿刺测压法结果显示,与正常对照组相比,模型对照组和骨髓间充质干细胞组小鼠膀胱最大容量(vm)和最大排尿压力(PMV)降低,残余尿量(vR)增加,CNP小鼠膀胱组织大部分腺体炎细胞浸润,胶原积累增多,前列腺组织TNF-α、IL-1β、C0X2、CXCL9、CXCL10、CXCL11含量明显增加(P＜0.05或P＜0.01);与模型对照组相比,双氢青蒿素各组vm和PMV均增加,vR减少;腺体炎细胞浸润和胶原积累减少;双氢青蒿素5 mg/kg+骨髓间充质干细胞组前列腺组织TNF-α、IL-1β、COX2、CXCL11的含量明显降低,双氢青蒿素15 mg/kg+骨髓间充质干细胞组前列腺组织TNF-α、IL-1β、COX2、CXCL9、CXCL10、CXCL11的含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:双氢青蒿素治疗可剂量依赖性地促进骨髓间充质干细胞的归巢,改善小鼠的CNP相关症状,降低CNP小鼠前列腺组织炎症水平和纤维组织增生,降低炎性因子和趋化因子的水平.双氢青蒿素和骨髓间充质干细胞联合治疗可极大改善CNP病情.

目的 探究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对糖尿病大鼠创面炎症反应和愈合的影响.方法 用卡波姆 980、吐温-80、甘油、超纯水、氢氧化钠配制基质软膏,加入双氢青蒿素、尼泊金乙酯搅拌均匀,即得双氢青蒿素软膏.50 只SPF级SD大鼠,采用链脲佐菌素腹腔注射法制作糖尿病大鼠模型,成功造模 44 只.用直径 2.0 cm圆形打孔器在大鼠背部制造全层皮肤缺损创面.用随机数表法将 36 个创面分为 4 组,每组9 个,分别外用 5%、10%、15%双氢青蒿素软膏及基质软膏(对照组),每天 1 次,连续 14 d.第 3、7 和14 天观察创面愈合情况,然后切取包含 0.2 cm创缘和创面组织,HE染色观察组织学变化,Masson染色观察胶原变化,ELISA法检测白细胞介素 6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素 10(interleukin 10,IL-10)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量.另外 8 只随机分为 10%双氢青蒿素组和对照组,切取第7 天时的创面组织,高通量测序技术进行转录组测序,筛选两组间的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析.采用SPSS 27.0 统计软件对数据进行单因素方差分析.结果 不同浓度双氢青蒿素组的创面愈合率均优于对照组,10%双氢青蒿素组最明显(P＜0.05).与对照组比较,各双氢青蒿素组在第 7、14 天时炎症细胞浸润减少,胶原纤维面积增加(P＜0.05).各双氢青蒿素组IL-6、TNF-α表达明显低于对照组(P＜0.05);而IL-10 表达明显高于对照组(P＜0.05).差异基因火山图显示,10%双氢青蒿素组明显上调缺氧诱导因子 1α(hypoxia inducible factor 1α,Hif-1α)、Smad同源物 12(Smad homolog 12,Smad12)、β-防御素 4(β-defensin 4,Defb4)等抗炎、抗菌基因.GO功能富集分析显示,10%双氢青蒿素组在炎症反应、免疫反应和对细菌的防御反应等方面显著富集.KEGG富集分析显示,10%双氢青蒿素组在趋化因子信号通路和NOD样受体信号通路等方面显著富集.结论 双氢青蒿素可能通过减少炎症细胞浸润、调节炎症因子、抗炎抗菌基因、趋化因子信号通路和NOD样受体信号通路等来抑制过度的炎症反应,从而加速创面愈合.

目的 探究二氢青蒿素对衰老细胞的作用及其机制.方法 利用双氧水诱导小鼠成纤维细胞(NIH3T3)构建应激早衰模型(SIPS),通过衰老特异性标记物SA-β-半乳糖苷酶染色、蛋白质印迹技术进行SIPS鉴定;细胞实验分为对照组(磷酸盐缓冲液+二甲基亚砜)、模型组(双氧水+二甲基亚砜)、药物组(双氧水+二氢青蒿素),采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法、乳酸脱氢酶法、SA-β-半乳糖苷酶染色、细胞内铁含量测定、蛋白质印迹技术、荧光探针染色及流式细胞术检测二氢青蒿素对衰老细胞的影响.结果 CCK-8结果显示,二氢青蒿素作用模型组24 h的半数抑制浓度(IC50)为(8.26±0.66)μmol/L;与对照组相比,模型组存活率降低,且呈剂量依耐性;蛋白质印迹结果显示,与模型组相比,药物组铁蛋白重链(FTH)及谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)蛋白表达水平降低(P＜0.05),细胞内铁、活性氧(ROS)含量增加(P＜0.05).结论 二氢青蒿素可特异性诱导衰老细胞死亡,其机制与铁死亡有关.

目的 探讨青蒿素衍生物双氢青蒿素(DHA)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞诱导的CD8+T细胞抗肿瘤免疫功能的调控作用.方法 将NSCLC细胞系A549 细胞分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和DHA处理组;分别用DMSO和不同浓度的DHA(25、50 和100 μmol/L)处理A549 细胞,根据半抑制浓度(IC50)选择最适浓度的DHA处理A549 细胞 0、24、48、72 h;CCK-8 法和集落形成实验检测DHA对A549 细胞增殖和集落形成能力的影响;密度梯度离心法分离健康个体外周血单个核细胞(PBMC),经黏附贴壁法去除单核细胞,随后与丝裂霉素C预处理的A549 细胞按照 10∶1 比例共培养,2 周后采用流式细胞术分别检测CD8+T细胞比例及其穿孔素和颗粒酶B的表达水平.结果 与对照组相比,25、50 和100 μmol/L DHA处理24h后的A549 细胞增殖的抑制率均升高(P<0.01);DHA对A549 细胞的IC50为46.26 μmol/L;依据IC50浓度检测50 μmol/L DHA处理A549 细胞0、24、48、72 h 的细胞抑制率分别为 1.53%、53.50%、63.84%和69.91%,分别与前一观察时间点即 0、24 和 48h相比,细胞抑制率均增高(P<0.01);集落形成实验结果显示,与对照组相比,DHA处理组的A549 细胞集落形成数减少(P<0.01);流式细胞术结果显示,与对照组相比,DHA预处理组的A549 细胞在共培养体系中诱导的CD8+T细胞的比例、表达穿孔素和颗粒酶B的CD8+T细胞比例均更高(P<0.01).结论 DHA 能够抑制 NSCLC 细胞生长,促进NSCLC细胞诱导的CD8+T细胞抗肿瘤免疫应答.