目的:筛选非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂耐药相关微小RNA(miRNA，miR)并分析其生物学功能。方法:从高通量基因表达数据库(GEO)中搜索并下载与非小细胞肺癌顺铂耐药相关的miRNA芯片数据，并通过Targetscan和miRanda预测miRNA的靶基因，对靶基因行基因本体(GO)生物学进程分析，京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析，并构建蛋白与蛋白相互作用网络图(PPI)；进一步对KEGG通路行网路分析，并结合与顺铂耐药存在显著相关性的miRNA，构建miR-KEGG网路。组间数据比较采用 t检验。 结果:共筛选到GSE84200、GSE43249和GSE56036 3个数据库，总计23个与顺铂耐药相关的miRNA。Targetscan和miRanda共同预测的靶基因共计914个。GO功能富集分析表明这些基因主要以蛋白结合，信号传导和正性调节基因转录等生物学过程相关。KEGG通路分析显示这些基因主要参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)等信号通路。PPI网路分析结合关键基因分析显示p53为关键基因。miR-KEGG网络分析显示miR-195-5p和miR-424-5p在顺铂耐药中发挥重要作用。结论:miR-195-5p和miR-424-5p可能在顺铂耐药中发挥重要作用，生物学分析预测有助于进一步认识miRNA在非小细胞肺癌顺铂耐药中的功能。

目的:观察氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠视网膜组织中miRNA的表达，筛选与p21及视网膜新生血管（RNV）形成相关的miRNA。方法:实验研究。40只健康7日龄C57BL/6J小鼠随机分为正常组和OIR组，每组20只。OIR组构建氧诱导RNV模型，正常组不做任何处理。小鼠17日龄时，处死小鼠，视网膜荧光铺片观察小鼠RNV发生情况；光学显微镜下计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核。取视网膜组织行miRNA芯片分析，检测正常组与OIR组之间差异表达的miRNA。所得差异miRNA靶基因分别进行基于基因注释（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）的富集分析；通过Targetscan、MiRanda、MicroT-CDS数据库比对筛选可能与p21有关的miRNA及通路。组间两两比较采用独立样本 t检验。 结果:与正常组比较，OIR组小鼠视网膜无灌注区面积、RNV及突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数量增加，差异均有统计学意义（ t=18.800、9.025， P<0.05）。与正常组比较，OIR组有统计学差异表达的miRNA 54个，其中，上调、下调者分别为47、7个。从3个数据库与所得差异miRNA的比对结果中共筛选到与p21相关miRNA 13个，按差异倍数从高到低分别为miR-7218-5p、miR-322-5p、miR-224-5p、miR-335-5p、miR-329-3p、miR-362-3p、miR-532-5p、miR-20b-5p、miR-20a-5p、miR-195a-5p、miR-423-5p、miR-497a-5p、miR-129-5p。差异miRNA靶基因富集分析，得到1 112个GO条目及50条KEGG通路，其中50个GO条目和13条KEGG通路与p21相关。 结论:在OIR模型中共筛选出13个与P21相关的miRNA。

目的:探讨miR-195调控FOXK1基因及PI3K/Akt通路对胃癌细胞增殖侵袭和迁移能力的影响及机制。方法:采用公共数据库样本对胃腺癌中miR-195的表达差异和预后意义进行分析。研究分为MGC803和AGS两种细胞系中过表达miR-195-5p实验组和cel-miR-67-3p mimic和cel-miR-239b-5p mimic两组阴性对照组。通过阿尔玛蓝、细胞划痕和Transwell实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力的改变。通过starbase v3.0对miR-195潜在的靶基因及结合位点进行预测。采用Western blot检测过表达miR-195-5p后靶基因FOXK1和PI3K/Akt通路磷酸化位点的表达水平，并采用双荧光素酶报告验证miR-195-5p和FOXK1的关系。统计分析采用IBM SPSS 22软件和R 4.0.3软件。结果:miR-195在胃腺癌肿瘤标本中的表达水平相比于癌旁正常组织的表达显著降低（ P<0.001），并与患者生存显著相关（HR: 1.853, P=0.011）。多种表型实验证明miR-195表达水平的上调可明显抑制胃腺癌细胞的增殖和侵袭能力（MGC803侵袭： P<0.001，MGC803迁移： P<0.001；AGS侵袭： P<0.001，AGS迁移： P<0.001）（划痕：MGC803迁移： P<0.010，AGS迁移： P<0.010）。进一步研究证实FOXK1基因可能受到miR-195的调控，是miR-195的潜在靶点之一。而miR-195在调控FOXK1的同时能明显降低PI3K/Akt信号通路的激活程度，过表达miR-195之后，PI3K/Akt通路中的磷酸化Akt（S473位点）表达明显下降。 结论:本研究说明miR-195调控FOXK1抑制PI3K/Akt通路，从而抑制胃癌细胞增殖侵袭能力，进一步说明miR-195在胃癌的诊断和治疗中潜在的重要作用，对胃癌发生发展的分子机制及新靶点的发现具有重要的临床意义。

目的:探讨食管癌患者血清微小RNA（miR）-195表达及临床意义。方法:回顾性分析2015年4月至2019年4月在北京怀柔医院105例食管癌患者的临床资料。采用实时定量荧光聚合酶链反应法检测血清miR-195相对表达量，并与同期90例健康体检者比较。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，分析血清miR-195相对表达量诊断食管癌的效能；生存分析采用Kaplan-Meier法，比较采用log-rank检验；采用多因素Cox分析影响食管癌患者预后的独立危险因素。结果:食管癌患者血清miR-195相对表达量明显低于健康体检者（4.39 ± 1.86比7.17 ± 2.37），差异有统计学意义（ t = 9.155， P<0.05）。以食管癌患者血清miR-195相对表达量平均值作为阈值，>4.39为高表达，50例；≤ 4.39为低表达，55例。血清miR-195相对表达量与肿瘤直径、TNM分期、浸润程度和淋巴结转移有关（ P<0.05），而与性别、年龄、病理类型和分化程度无关（ P>0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-195相对表达量诊断食管癌的曲线下面积为0.819（95% CI 0.758~0.879， Z = 10.265， P<0.05），约登指数0.539，截断值取6.03时灵敏度为82.86%，特异度为71.11%。血清miR-195低表达患者中位生存时间明显短于高表达患者（25.7个月比36.6个月），5年总生存率明显低于高表达患者（18.2%比38.0%），差异有统计学意义（ P<0.05）。多因素Cox分析结果显示，miR-195和肿瘤直径是影响食管癌患者预后的独立危险因素（ HR = 0.377和0.418，95% CI 1.276~5.599和1.478~7.608， P<0.01）。 结论:食管癌患者血清miR-195相对表达量明显低于健康人群，且miR-195表达越低，患者预后越差，miR-195可以作为食管癌患者早期诊断和预后评估的指标之一。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤易感性候选基因9(CASC9)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响，明确微小RNA-195-5p(miR-195-5p)与lncRNA CASC9的靶向关系。方法:收集2017年4月至2018年5月间湖北省襄阳市中西医结合医院40例行手术切除并经组织病理学确诊的胰腺癌组织及相应癌旁正常胰腺组织，选取4株胰腺癌细胞(AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1)和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7，采用实时定量PCR法检测胰腺癌组织和各株细胞lncRNA CASC9表达。将BxPC-3细胞分为si-CASC9组(转染靶向lncRNA CASC9的siRNA)、si-control组(转染与lncRNA CASC9不匹配的siRNA)和CASC9组(转染lncRNA CASC9过表达质粒)、CASC9/miR-195-5p组(共转染CASC9过表达质粒和miR-195-5p mimics)。采用MTT法检测各组细胞增殖活性，采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达，采用生物信息学和荧光素酶实验分析CASC9和miR-195-5p的靶向关系。结果:胰腺癌组织lncRNA CASC9表达量显著高于癌旁正常胰腺组织(4.70±1.25比2.15±0.82， P＝0.04)，胰腺癌细胞株AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1细胞lncRNA CASC9表达量分别为1.43±0.12、1.86±0.13、2.03±0.14、1.73±0.15，均显著高于HPDE6-C7细胞的1.00±0.10( P值均<0.001)，其中以BxPC-3细胞的表达量最高。si-CASC9组细胞较si-control组细胞的增殖活性显著下降(细胞培养第3天0.57±0.05比0.72±0.04， P＝0.01；第4天0.75±0.07比0.95±0.07， P＝0.02)；Bax表达上调(1.39±0.13比1.07±0.11， P＝0.03)，Bcl-2表达显著下调(1.44±0.11比1.71±0.12、 P＝0.04)。CASC9/miR-195-5p组细胞增殖活性较CASC9组显著下降( P值<0.005)；Bax表达水平显著高于CASC9组(0.68±0.04比0.56±0.03， P＝0.01)，Bcl-2表达显著低于CASC9组(1.05±0.03比1.47±0.04， P<0.001)。 结论:lncRNA CASC9靶向结合miR-195-5p可逆转CASC9促进胰腺癌细胞增殖和抑制胰腺癌细胞凋亡的作用。

目的:探讨丙泊酚对人胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度丙泊酚对人胃癌MGC-803和HGC-27细胞活力的影响。将MGC-803细胞分为对照组和丙泊酚组，Hoechst 33258染色和电镜检测两组细胞凋亡率，Transwell实验检测两组细胞迁移率和侵袭率。随后将细胞分为对照组、丙泊酚组和丙泊酚＋miR-195i组，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-195相对表达量，蛋白质印迹法检测细胞中Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)信号通路蛋白的表达。结果:0、1、5、10、20 mg/L丙泊酚作用24 h，MGC-803细胞活力分别为(100.00±4.96)%、(94.63±3.15)%、(77.38±6.73)%、(63.82±8.42)%和(35.94±7.01)%，组间差异具有统计学意义( F＝5.148， P<0.001)，与0 mg/L丙泊酚相比，5、10和20 mg/L丙泊酚作用下细胞活力显著降低(均 P<0.05)。同时丙泊酚作用48和72 h也可显著降低MGC-803细胞活力。HGC-27细胞中也检测到类似的结果。Hoechst 33258染色结果显示，对照组阳性细胞百分率为(3.73±1.81)%，丙泊酚组为(25.44±1.05)%，两组间差异具有统计学意义( t＝6.415， P<0.001)。电镜结果显示，对照组细胞凋亡率为(4.60±1.36)%，丙泊酚组为(28.15±1.99)%，两组间差异具有统计学意义( t＝10.729， P<0.001)。Transwell结果显示，对照组细胞迁移率为(53.94±4.62)%，丙泊酚组为(21.28±3.98)%；对照组细胞侵袭率为(62.38±6.75)%，丙泊酚组为(33.81±4.92)%，两组间差异均具有统计学意义( t＝4.628， P<0.001； t＝6.418， P<0.001)。qRT-PCR结果显示，对照组、丙泊酚组、丙泊酚＋miR-195i组miR-195相对表达量分别为0.58±0.09、1.24±0.22、0.63±0.16，3组间差异具有统计学意义( F＝1.547， P＝0.001)；与对照组相比，丙泊酚组细胞miR-195表达显著增加( P<0.001)。与丙泊酚组相比，丙泊酚＋miR-195i组细胞miR-195表达显著降低( P<0.001)。蛋白质印迹检测结果显示，对照组、丙泊酚组、丙泊酚＋miR-195i组磷酸化Janus激酶1(p-JAK1)蛋白相对表达量分别为1.18±0.36、0.27±0.08、0.58±0.11，3组磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)蛋白相对表达量分别为0.83±0.16、0.21±0.07、0.72±0.13，差异均有统计学意义( F＝1.655， P<0.001； F＝2.520， P<0.001)；与对照组相比，丙泊酚组细胞p-JAK1和p-STAT3蛋白相对表达量显著降低( P<0.001； P＝0.001)；与丙泊酚组相比，丙泊酚＋miR-195i组细胞p-JAK1和p-STAT3蛋白相对表达量显著增加( P＝0.003； P＝0.004)。 结论:丙泊酚可抑制胃癌细胞MGC-803的细胞增殖、迁移和侵袭，促进其凋亡，其机制可能与丙泊酚促进miR-195表达并抑制JAK/STAT信号通路活性有关。

目的:探讨circXPO1对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及分子机制。方法:RT-qPCR检测肝癌组织及癌旁组织中circXPO1和miR-195-5p的表达水平，并分析circXPO1表达水平与肝癌患者临床病理特征的相关性；将肝癌HCC9204细胞分别转染si-circXPO1、si-NC、miR-195-5p mimic、miR-NC、si-circXPO1和miR-195-5p Inhibitor、si-circXPO1和anti-miR-NC后，MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，划痕实验检测细胞划痕愈合率，双荧光素酶报告实验检测circXPO1和miR-195-5p的靶向关系。构建裸鼠移植瘤模型，验证circXPO1对肝癌HCC9204细胞体内生长的影响。两组间比较采用配对样本t检验或独立样本t检验。结果:与癌旁组织比较，肝癌组织中circXPO1呈高表达（2.14 ± 0.30比0.87 ± 0.13），miR-195-5p呈低表达（0.46 ± 0.08比1.12 ± 0.17），且circXPO1表达水平与肝癌的肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移有关（P均< 0.05）。与si-NC或miR-NC比较，si-circXPO1和miR-195-5p mimic中HCC9204细胞增殖抑制率[（56.63 ± 2.13）%比（0.00 ± 0.00）%、（42.93 ± 1.52）%比（0.00 ± 0.00）%]、凋亡率[（23.91 ± 1.21）%比（7.44 ± 0.74）%、（20.02 ± 0.84）%比（7.40 ± 0.55）%]升高，划痕愈合率[（24.02 ± 1.55）%比（65.54 ± 2.53）%、（34.95 ±1.69）%比（65.66 ± 2.68）%]和克隆形成数[（53.67 ± 2.16）比（122.11 ± 5.74）个、（72.44 ± 3.69）比（120.56 ± 8.00）个]、侵袭细胞数[（30.92 ± 5.01）比（83.06 ± 7.54）个、（32.05 ± 4.66）比（85.43 ± 8.17）个]及裸鼠移植瘤体积与质量降低（P均< 0.05）。circXPO1靶向调控miR-195-5p （0.45 ± 0.05比1.03 ± 0.13，P < 0.05）；与si-circXPO1+anti-miR-NC比较，si-circXPO1+miR-195-5p Inhibitor中细胞增殖抑制率[（15.22 ± 1.32）%比（56.37 ± 2.32）%]、凋亡率[（11.96 ± 0.80）%比（23.81 ± 1.35）%]降低，划痕愈合率[（48.92 ± 3.15）%比（23.83 ± 1.55）%]、克隆形成数[（108.56 ± 3.86）比（54.44 ± 2.50）个]和侵袭细胞数[（77.08 ± 7.95）比（29.65 ± 3.42）个]及裸鼠移植瘤体积与质量升高（P均< 0.05）。结论:沉默circXPO1可通过上调miR-195-5p抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭，促进凋亡。

目的 探讨长链非编码核糖核酸(lncRNA)AFAP1-AS1及微小核糖核酸-195-5p(miR-195-5p)对肝细胞癌(HCC)细胞生物学行为的影响.方法 常规培养人HCC细胞系(HepG2、Hep3B、SMMC-7721、Bel7402、SK-hep1细胞)和正常人肝细胞(HL-7702细胞),用实时荧光定量PCR法检测AFAP1-AS1、miR-195-5p并筛选实验细胞.将对数生长期实验细胞随机分为si-AFAP1-AS1组、si-NC组,miR-195-5p mimics组、mimics-NC组,miR-195-5pinhibitor+si-NC组、miR-195-5p inhibitor+si-AFAP1-AS1 组、inhibitor-NC+si-AFAP1-AS1 组、inhibitor-NC+si-NC组,用Lipofectamine 2000试剂将相应质粒按照分组转染入细胞.用CCK-8实验、菌落形成实验检测细胞增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,用Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,用双荧光素酶报告基因实验验证AFAP1-AS1与miR-195-5p的靶向关系.结果 HCC细胞中AFAP1-AS1表达高于正常人肝细胞(P均<0.05),HCC细胞中miR-195-5p表达低于正常人肝细胞(P均<0.05).由于SK-hep1细胞中AFAP1-AS1表达最高、miR-195-5p表达最低,因此,后续研究均采用SK-hep1细胞进行实验.与si-NC组比较,si-AFAP1-AS1组中AFAP1-AS1表达低、细胞增殖能力低、迁移和侵袭细胞少、G0/G1期细胞比例高、细胞凋亡率高(P均<0.05).通过Starbase v3.0在线数据库预测发现,AFAP1-AS1与miR-195-5p有互补的结合位点.双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-NC组、miR-195-5p组共转染WT-AFAP1-AS1后相对荧光素酶活性比较差异有统计学意义(P<0.05),共转染MUT-AFAP1-AS1后相对荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05).与inhibitor-NC+si-NC组比较,si-NC+miR-195-5p inhibitor组细胞增殖能力高、迁移和侵袭细胞多、G0/G1 期细胞比例低、细胞凋亡率低(P均<0.05),而si-AFAP1-AS1+miR-195-5p inhibitor组上述细胞生物学行为则相反.结论 lncRNA AFAP1-AS1可能通过竞争性结合miR-195-5p参与调控HCC细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等生物学行为.

目的 分析基于H19/微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/糖皮质激素调节激酶1(SGK1)通路的金银花提取物对子宫内膜癌术后感染大鼠的干预效果.方法 选取70只SPF级Wistar雌性大鼠,取其中30只进行LD35试验,确定致死量后,选取80 mg/kg的剂量进行给药及观察;剩余40只中10只作为空白组,30只建立子宫内膜癌术后感染模型,共有26只大鼠建模成功,将其分为模型组8只、药物对照组9只、金银花提取物组9只;药物对照组给予阿莫西林克拉维酸钾,金银花提取物组给予金银花提取物,空白组、模型组不做处理,干预14 d后观察大鼠变化.检测各组小鼠白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、金黄色葡萄球菌菌落数水平和H19、miR-195-5p、糖皮质激素调节激酶1(SGK1)mRNA表达量及相对表达量.结果 与空白组相比,模型组、药物对照组、金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mR-NA表达量及相对表达量上升,miR-195-5p mRNA表达量及相对表达量下降(P＜0.05);与模型组相比,药物对照组、金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mRNA表达量及相对表达量下降,miR-195-5p mRNA表达量及蛋白相对表达量上升(P＜0.05);与药物对照组相比,金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mRNA表达量及相对表达量下降,miR-195-5p mRNA表达量及相对表达量上升(P＜0.05).结论 金银花提取物可减轻子宫内膜癌术后感染大鼠炎性反应,减少金黄色葡萄球菌菌落数,其机制可能与H19/miR-195-5p/SGK1得到调节有关.

目的 探讨血清miR-195-5p和DRD1在妊娠期糖尿病合并高血压孕妇中的表达水平及意义.方法 前瞻性选取2022年2月至2023年1月在本院定期产前检查并分娩的GDM患者269例,根据患者是否并发HDP,将患者分为GDM组(n=171)和GDM-HDP组(n=98),另选取正常健康的孕妇100例作为对照组.采用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖,qRT-PCR检测血清中miR-195-5p和DRD1相对表达水平,观察对照组、GDM组及GDM-HDP组的miR-195-5p、DRD1及空腹血糖水平;观察不同疾病严重程度血清miR-195-5p、DRD1及空腹血糖水平;Logistic回归模型分析GDM合并HDP的影响因素;Spearman秩相关分析血清miR-195-5p、DRD1和空腹血糖的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-195-5p、DRD1在GDM合并HDP中的诊断价值.结果 与对照组相比,GDM组和GDM-HDP组中miR-195-5p的水平明显降低(P＜0.001),DRD1及空腹血糖水平明显升高(P＜0.001);与GDM组相比,GDM-HDP组中miR-195-5p的水平显著降低(P＜0.001),DRD1及空腹血糖水平显著升高(P＜0.001);GDM-HDP组患者血清中miR-195-5p水平明显高于轻度子痫前期、重度子痫前期患者,轻度子痫前期患者血清miR-195-5p水平显著高于重度子痫前期患者(P＜0.001);GDM-HDP组患者血清中DRD1及空腹血糖水平明显低于轻度子痫前期、重度子痫前期患者,轻度子痫前期患者血清DRD1及空腹血糖水平显著低于重度子痫前期患者(P＜0.001);miR-195-5p是GDM合并HDP发生的保护因素(P＜0.001),而DRD1和空腹血糖是GDM合并HDP发生的危险因素(P＜0.001);miR-195-5p与空腹血糖呈负相关(r=-0.276,P＜0.001),DRD1与空腹血糖呈正相关(r=0.309,P＜0.001);血清miR-195-5p诊断GDM合并HDP的AUC值为0.826,95％CI 为 0.769～0.883,血清 DRD1 诊断 GDM 合并 HDP 的 AUC 值为 0.884,95％CI 为 0.837～0.929,miR-195-5p 和DRD1联合诊断AUC值为0.952,95％CI为0.924～0.981,miR-195-5p和DRD1联合检测的AUC值、灵敏度、准确性明显高于miR-195-5p和DRD1单独检测,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 GDM合并HDP患者血清中miR-195-5p明显降低,DRD1显著升高,与GDM合并HDP发生密切相关,且miR-195-5p和DRD1联合检测诊断GDM合并HDP时具有较高的临床价值.