目的:通过高氧诱导建立新生大鼠支气管肺发育不良(BPD)模型，动态观察其肺组织病理改变并检测肺组织中miR-876-3p的表达，探讨miR-876-3p在BPD发生发展中的作用。方法:选取新生SD大鼠80只按随机数字表法随机分为高氧组(FiO 2 60%)及空气组(FiO 2 21%)。分别于生后第1、7、14、21天取大鼠肺组织标本，观察肺组织病理变化，应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测miR-876-3p的表达。 结果:生后21 d内，随高氧暴露时间延长，高氧组大鼠较空气组大鼠一般生长情况差，体重低[14 d：(35.46±1.62)g比(37.08±1.25)g；21 d：(51.92±1.83)g比(58.87±2.43)g]，差异有统计学意义( P<0.05)。生后第14、21天，高氧组大鼠辐射状肺泡计数较空气组大鼠明显减少，差异有统计学意义( P<0.05)；生后第7、14、21天，空气组大鼠与高氧组大鼠肺泡间隔厚度相比均偏低，差异有统计学意义( P<0.05)。高氧组miR-876-3p的表达在生后第7、14、21天较同时间点空气组明显降低[7 d：(14.97±1.13)比(16.64±0.89)；14 d：(11.92±0.71)比(16.85±0.79)；21 d：(11.39±0.79)比(17.52±1.17)]，差异均有统计学意义( P均<0.01)。 结论:通过高氧诱导可构建新生大鼠新型BPD模型，该模型中miR-876-3p的表达水平降低，其差异性表达可能在BPD的发生发展中有一定作用。

支气管肺发育不良(BPD)是早产儿常见的呼吸系统疾病，感染、炎症反应、氧化应激等是BPD主要的致病机制。研究发现，肺部微生物定植可能从围生期就开始，并受多种因素的影响而动态变化。呼吸道微生态失调可能通过触发氧化应激反应、抑制miR-876-3p表达、改变肺部代谢及减弱局部屏障功能等机制参与BPD的发生与进展；同时，肺发育异常及肺损伤也会对呼吸道微生态产生影响，这种影响甚至会持续到成年后。益生菌具有抗炎、抗感染及抗氧化等作用，补充益生菌制剂可能通过调节呼吸道微生态，促进肺发育、改善肺损伤。现对新生儿呼吸道微生态的建立及动态变化进行阐述，并探讨呼吸道微生态在BPD发病机制及防治中的作用。

目的:探讨长链非编码RNA MCM3AP-AS1（MCM3AP antisense RNA 1，MCM3AP-AS1）靶向调控微小RNA-876-5p（miR-876-5p）对卵巢癌SKOV3细胞增殖和转移的影响。方法:选取2017年4月至2018年5月温州市中心医院妇产科收治的40例卵巢癌患者癌组织和相应癌旁组织标本，及卵巢癌细胞系（CaOV3、SKOV3、OVCAR3、OV90）和正常卵巢上皮细胞系（HOSE）。采用实时定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测卵巢癌组织和细胞中lncRNA MCM3AP-AS1的表达水平；建立lncRNA MCM3AP-AS1低表达模型，采用MTT实验检测卵巢癌细胞增殖，采用transwell检测卵巢癌细胞的迁移和侵袭水平；采用生物信息分析、荧光素酶实验、qRT-PCR验证lncRNA MCM3AP-AS1和miR-876-5p的靶向关系。结果:lncRNA MCM3AP-AS1在卵巢癌组织中的水平为（8.45±0.86），高于癌旁组织（4.45±0.45）；在卵巢癌细胞中的水平为CaOV3（1.53±0.12），SKOV3（1.82±0.23），OVCAR3（1.34±0.12），高于正常卵巢上皮细胞HOSE（1.00±0.10）；下调lncRNA MCM3AP-AS1能降低卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭；lncRNA MCM3AP-AS1能与miR-876-5p相互作用并下调其表达。结论:lncRNA MCM3AP-AS1可通过靶向抑制miR-876-5p促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

目的 探讨LINC00707 对缺氧缺血脑损伤后海马神经元凋亡及氧化应激的影响及其可能作用机制.方法 采用谷氨酸与D-Hanks液处理大鼠海马神经元细胞HT-22 建立缺氧缺血脑损伤模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-876-5p mimics、anti-miR-NC+si-LIN C00707、anti-miR-876-5p+si-LINC00707 分别转染至HT-22 细胞后进行缺氧缺血处理;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00707、miR-876-5p的表达量;利用试剂盒检测丙二醛(MDA)水平与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测LINC00707 与miR-876-5p的靶向关系;Western印迹检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶(Cleaved-caspase)-3 蛋白表达量.结果 缺氧缺血脑损伤后HT-22 细胞中LINC00707 的表达量显著升高(P＜0.05),miR-876-5p的表达量显著降低(P＜0.05);缺氧缺血脑损伤后HT-22 细胞中转染si-LINC00707 或转染 miR-876-5p mimics 后,MDA 的水平、细胞凋亡率和 Cleaved-caspase-3 蛋白水平显著降低(P＜0.05),SOD、CAT 的活性显著升高(P＜0.05);LINC00707 可靶向调控 miR-876-5p 的表达;共转染 anti-miR-876-5p+si-LINC00707 可降低转染si-LINC00707 对缺氧缺血脑损伤后HT-22 细胞凋亡及氧化应激的作用.结论 干扰LINC00707 表达可通过靶向调控miR-876-5p表达而抑制缺氧缺血脑损伤后海马神经元凋亡及氧化应激.

本研究利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)基因表达综合数据库(GEO)下载获取甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC) mRNA表达谱芯片(7例PTC样本VS 7例正常组样本,登录号为GSM85-215～GSM85228)及miroRNA高通量测序数据(3例PTC样本VS 3例正常组样本,GSM 1388420～GSM 138-8425).通过Qlucore Omics Explorer (QOE) 3.2、DAVID 6.7、STING 9.1、miRecords等分析软件对PTC差异基因及microRNA进行综合生物信息学分析.筛选出来497个甲状腺乳头状癌相关致病基因及86个相关microRNAs;其中,致病基因中上调表达的有257个,下调表达的有240个;microRNAs中上调表达的有47个,下调表达的有39个.对其进行生物信息学分析发现,ERBB3、TNNT1、MYL1、POSTN基因及hsa-miR-183-5p (ERBB4)、hsa-miR-139-5p (SUV39H1)、hsa-miR-152 (MAML 1)、hsa-miR-1 (FOXD3)、hsa-miR-146b-5p(MEF2C)、hsa-miR-152 (DOT1L)、hsa-miR-493-5p (FBXW7)、hsa-miR-876-5p (PIK3R1)、hsa-miR-183-3p(MDM2)、hsa-miR-382-3p (CD80)、hsa-miR-18 lb-5p (SIRTl)、hsa-miR-874-5p (MTOR)、hsa-miR-876-5p(GPRC6A)等microRNAs-靶基因参与涉及ErbB信号通路、细胞凋亡信号通路、B细胞受体信号通路、磷脂酰肌醇代谢信号通路等,在PTC疾病发生发展中可能起着重要作用.从分子水平上分析甲状腺乳头状癌相关致病基因及microRNAs,为揭示PTC发病机制、药物研发及临床诊断治疗提供新的思路和依据.

背景:目前已有研究发现lncRNA GAS5激活了退变椎间盘髓核细胞(nucleus pulposus cels,NPC)内的线粒体凋亡通路,进而促进髓核细胞的凋亡.目的:探索有关椎间盘退变的ceRNA网络调控机制,寻找治疗椎间盘退变的潜在靶点.方法:计算机检索GEO数据库,下载lncRNA微阵列芯片GSE56081,重注释比对平台文件中的探针核酸序列,运用Perl软件将芯片系列矩阵文件中的探针ID转化为基因名,并添加基因属性.运用R软件分析系列矩阵文件得到差异的lncRNA与mRNA.在miRcode平台下载高度保守的miRNA家族文件,比对后得出lncRNA-miRNA关联.根据miRDB数据库、miRTarBase数据库和TargetScan数据库预测miRNA调控的mRNA,与芯片数据差异分析得到的差异mRNA取交集,得出miRNA-mRNA关联.构建ceRNA网络,运用String数据库分析蛋白互作关系,筛选关键蛋白互作模块.使用DAVID数据库分析关键蛋白模块的功能与相关通路,挖掘关键ceRNA网络.结果与结论:退变椎间盘的髓核细胞中差异lncRNA与mRNA竞争miRNA,从而调控蛋白合成,最终影响泛素介导的蛋白水解、Wnt信号通路和PI3K-Akt信号通路.并发现7种miRNA(hsa-miR-107、hsa-miR-449c-5p、hsa-miR-301b-3p、hsa-miR-135a-5p、hsa-miR-17-5p、hsa-miR-20b-5p、hsa-miR-876-3p)可能在导致椎间盘退变的蛋白质分解代谢与细胞凋亡的过程中发挥关键作用.

目的 探究微小RNA(microRNA,miR)-876-5p通过靶向F-box蛋白31 (FBXO31)促进卵巢癌细胞增殖和侵袭的机制.方法 对TCGA数据库中,miR-876-5p和FBXO31在卵巢癌患者中的表达特点和与预后的关系进行分析.通过双荧光素酶报告验证miR-876-5p靶向FBXO31.将卵巢癌细胞系SKOV-3分为4组:对照组、mimic组、mimic+FBXO31组和FBXO31组.通过质粒转染技术过表达miR-876-5p和(或)FBXO31.qPCR和Western blot检测RNA或蛋白的表达水平.分别通过CCK-8法、Transwell实验检测各组的细胞生长和侵袭能力.通过荷瘤裸鼠实验在体内验证miR-876-5p和FBXO31对肿瘤生长的影响.结果 在TCGA数据库中,miR-876-5p高表达的患者的生存率显著低于miR-876-5p低表达患者(P＜0.05).卵巢癌患者FBXO31水平显著降低,卵巢癌分期的越高FBXO31水平越低,并且FBXO31高表达卵巢癌患者的生存率显著高于FBXO31低表达(P＜0.05).miR-876-5p直接靶向FBXO31.过表达miR-876-5p抑制FBXO31 mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.05),过表达FBXO31显著逆转miR-876-5p对FBXO31的抑制作用(P＜0.05).Mimic组的细胞活力和细胞迁移能力显著高于对照组(P＜0.05),FBXO31组的细胞活力和细胞迁移能力显著低于对照组(P＜0.05),并且mimic+FBXO31组的细胞活力和细胞迁移能力显著低于mimic组(P＜0.05).miR-876-5p组荷瘤裸鼠的肿瘤体积和质量均显著高于对照组(P＜0.05),miR-876-5p+FBXO31组肿瘤体积和质量显著低于miR-876-5p组(P＜0.05).结论 miR-876-5p具有促进卵巢癌进展的作用,而FBXO31可能抑制卵巢癌进展.miR-876-5p直接靶向FBXO31,并且miR-876-5p过表达可通过抑制FBXO31促进卵巢癌细胞生长、侵袭,起到抑制卵巢癌生长的作用.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)微小染色体维持蛋白3相关蛋白-反义链1(MCM3AP-AS1)靶向调控miR-876-5p对结直肠癌(CRC)细胞的增殖和迁移的作用.方法 实时定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测CRC组织和细胞中MCM3AP-AS1的表达;用MTT法、划痕愈合实验和Transwell小室法检测CRC细胞的增殖和迁移;采用生物信息分析、双荧光素酶基因报告实验、RT-qPCR验证MCM3AP-AS1和miR-876-5p的靶向关系.结果 与非肿瘤组织和正常结直肠上皮细胞系相比,MCM3AP-AS1在CRC组织和细胞系中表达上调(P<0.05);敲低MCM3AP-AS1能抑制CRC细胞增殖和迁移(P<0.05);生物信息学分析、双荧光素酶基因报告实验和RT-qPCR表明MCM3AP-AS1与miR-876-5p可相互作用;miR-876-5p可削弱MCM3AP-AS1对CRC细胞增殖和迁移的促进作用(P<0.05).结论 MCM3AP-AS1可以通过吸附miR-876-5p促进CRC细胞的增殖和迁移.

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MINCR靶向微小RNA(miR)-876-5p调控膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的分子机制.方法 体外培养人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1与膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3,采用反转录与荧光定量聚合酶链反应法检测LncRNA MINCR和miR-876-5p的表达量;将 si-NC、si-MINCR、miR-NC、miR-876-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-876-5p、si-MINCR+anti-miR-NC、si-MINCR+anti-miR-876-5p 转染入 T24细胞,分别记为si-NC 组、si-MINCR 组、miR-NC 组、miR-876-5p 组、anti-miR-NC 组、anti-miR-876-5p 组、si-MINCR+anti-miR-NC 组、si-MINCR+anti-miR-876-5p 组;采用噻唑蓝法检测细胞活力;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA MINCR与miR-876-5p的靶向关系;蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9、天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达量.结果 与SV-HUC-1细胞比较,膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3中LncRNA MINCR的表达水平升高[(2.25±0.20)、(1.84±0.18)、(1.61±0.12)比(1.00±0.10)],miR-876-5p 的表达水平降低[(0.38±0.03)、(0.46±0.04)、(0.51±0.05)比(1.02±0.12)](均P＜0.05).与 miR-NC 组比较,miR-876-5p 组细胞活力降低,迁移及侵袭细胞数减少,凋亡率升高,CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低,Cleaved-caspase-3蛋白水平升高(均P＜0.05).双荧光素酶报告实验证实LncRNA MINCR能够靶向结合miR-876-5p.与si-MINCR+anti-miR-NC组比较,si-MINCR+anti-miR-876-5p组细胞活力升高,迁移及侵袭细胞数增多,凋亡率降低,CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高,Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(均P＜0.05).结论 抑制LncRNA MINCR表达可减弱膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,并诱导细胞凋亡,其作用机制与靶向调控miR-876-5p的表达有关.

目的 探讨长链非编码RNA(LnCRNA)溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员4A1反义RNA1(SLCO4A1-AS1)调控miR-876-3p对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 qRT-聚合酶链反应(PCR)检测正常宫颈细胞株Ect1/E6E7和4种宫颈癌细胞株(SiHa、HeLa、C33a、Caski)中miR-876-3p和SLCO4A1-AS1的表达水平.以HeLa细胞为研究对象,分别构建沉默SLCO4A1-AS1或过表达miR-876-3p的HeLa细胞株,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活力,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,Western印迹检测增殖相关蛋白和迁移侵袭相关蛋白的表达.双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证SLCO4A1-AS1和miR-876-3p的靶向关系.结果 与NC组和si-con组比较,si-SLCO4A1-AS1组HeLa细胞SL-CO4A1-AS1的表达水平显著下降(P<0.05),表明沉默SLCO4A1-AS1的宫颈癌细胞株构建成功.与NC组和si-con组比较,si-SLCO4A1-AS1组HeLa细胞p21蛋白表达水平显著升高,细胞周期素(Cyclin)D1蛋白表达水平显著降低,细胞增殖活力显著降低(均P<0.05).与NC组和si-con组比较,si-SLCO4A1-AS1组HeLa细胞MMP-2和MMP-9蛋白的表达均显著降低,迁移和侵袭细胞数目均显著较少(P<0.05).生物信息学分析发现,SLCO4A1-AS1和miR-876-3p存在部分连续特异性互补的核苷酸序列.miR-876-3p组SLCO4A1-AS1-WT水平显著低于miR-con组(P<0.001).si-con组HeLa细胞miR-876-3p的表达水平(1.00±0.09)显著低于si-SLCO4A1-AS1组(4.36±0.44,P<0.05);pcDNA组HeLa细胞miR-876-3p的表达水平(0.96±0.08)显著高于pcDNA-SLC04A1-AS1组(0.53±0.05,P<0.05).与NC组和miR-con组比较,miR-876-3p组HeLa细胞miR-876-3p的表达水平显著升高(P<0.05),表明过表达miR-876-3p的宫颈癌细胞株构建成功.与NC组和miR-con组比较,miR-876-3p组HeLa细胞p21蛋白的表达水平显著升高,CyclinD1、MMP-9、MMP-2蛋白的表达水平显著下降,细胞增殖活力显著降低,迁移和侵袭数目显著减少(均P<0.05).与si-con组比较,si-SLCO4A1-AS1组HeLa细胞miR-876-3p和p21表达显著升高,Cy-clinD1、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著下降,细胞增殖活力显著降低,迁移和侵袭数目显著减少(均P<0.05);与si-SL-CO4A1-AS1+anti-miR-con组比较,si-SLCO4A1-AS1+anti-miR-876-3p组HeLa细胞miR-876-3p和p21表达显著降低,CyclinD1、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著升高,细胞增殖活力显著升高,迁移和侵袭数目显著增加(P<0.05).结论 沉默SLCO4A1-AS1通过靶向上调miR-876-3p抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭.