目的:探讨微小核糖核酸876-5p(micro ribonucleic acid-876-5p, miR-876-5p）通过靶向叉头盒蛋白M1(forkhead box M1，FOXM1）对儿童髓母细胞瘤（medulloblastoma ，MB）细胞增殖的影响。方法:收集2018年1月至2020年10月在湖南省儿童医院进行手术治疗的30例MB患儿临床资料，其中男21例，女9例，年龄为（10.42±2.17）岁，范围为5~14岁。通过qPCR检测肿瘤组织和癌旁组织标本中miR-876-5p和FOXM1、TAp73、Beclin1、Livin、Cyclin D1在mRNA水平的表达情况；通过CCK8和Transwell实验观察过表达miR-876-5p后对MB细胞的增殖和侵袭能力的影响；通过qPCR和WB实验检测过表达miR-876-5p前后，FOXM1、TAp73、Beclin1、Livin、Cyclin D1在蛋白或mRNA水平表达的变化。结果:miR-876-5p在MB中表达显著降低（ P<0.001），过表达miR-876-5p能够显著抑制MB细胞的增殖和侵袭能力（ P<0.01）。FOXM1在MB中表达上调，其表达与miR-876-5p呈负相关（ r=-0.527， P=0.013 ）。在MB细胞中过表达miR-876-5p能够抑制FOXM1的表达。此外，在MB中，miR-876-5p的表达与TAp73和Beclin1呈正相关（ r=0.506， P=0.008； r=0.535， P=0.003），与Livin和Cyclin D1 mRNA呈负相关（ r=-0.496， P= 0.011； r=-0.574 ， P=0.005 ）。与之相反，FOXM1的表达与TAp73和Beclin1呈负相关（ r=-0.554 ， P=0.007 ； r=-0.497， P=0.016 ），与Livin和Cyclin D1呈正相关（ r=0.502， P=0.009 ； r=0.476， P=0. =0.015 ）。此外，miR-876-5p在MB细胞中可以下调Livin和Cyclin D1的表达，上调TAp73在Beclin1的表达。 结论:miR-876-5p具有抑制MB增殖和侵袭的作用，而FOXM1可能促进MB增殖和侵袭。miR-876-5p可能通过靶向调控FOXM1促进机体内抑癌基因的表达并抑制致癌基因表达，最终抑制MB细胞增殖和侵袭。

目的:探讨长链非编码RNA MCM3AP-AS1（MCM3AP antisense RNA 1，MCM3AP-AS1）靶向调控微小RNA-876-5p（miR-876-5p）对卵巢癌SKOV3细胞增殖和转移的影响。方法:选取2017年4月至2018年5月温州市中心医院妇产科收治的40例卵巢癌患者癌组织和相应癌旁组织标本，及卵巢癌细胞系（CaOV3、SKOV3、OVCAR3、OV90）和正常卵巢上皮细胞系（HOSE）。采用实时定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测卵巢癌组织和细胞中lncRNA MCM3AP-AS1的表达水平；建立lncRNA MCM3AP-AS1低表达模型，采用MTT实验检测卵巢癌细胞增殖，采用transwell检测卵巢癌细胞的迁移和侵袭水平；采用生物信息分析、荧光素酶实验、qRT-PCR验证lncRNA MCM3AP-AS1和miR-876-5p的靶向关系。结果:lncRNA MCM3AP-AS1在卵巢癌组织中的水平为（8.45±0.86），高于癌旁组织（4.45±0.45）；在卵巢癌细胞中的水平为CaOV3（1.53±0.12），SKOV3（1.82±0.23），OVCAR3（1.34±0.12），高于正常卵巢上皮细胞HOSE（1.00±0.10）；下调lncRNA MCM3AP-AS1能降低卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭；lncRNA MCM3AP-AS1能与miR-876-5p相互作用并下调其表达。结论:lncRNA MCM3AP-AS1可通过靶向抑制miR-876-5p促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

目的 探究微小RNA(microRNA,miR)-876-5p通过靶向F-box蛋白31 (FBXO31)促进卵巢癌细胞增殖和侵袭的机制.方法 对TCGA数据库中,miR-876-5p和FBXO31在卵巢癌患者中的表达特点和与预后的关系进行分析.通过双荧光素酶报告验证miR-876-5p靶向FBXO31.将卵巢癌细胞系SKOV-3分为4组:对照组、mimic组、mimic+FBXO31组和FBXO31组.通过质粒转染技术过表达miR-876-5p和(或)FBXO31.qPCR和Western blot检测RNA或蛋白的表达水平.分别通过CCK-8法、Transwell实验检测各组的细胞生长和侵袭能力.通过荷瘤裸鼠实验在体内验证miR-876-5p和FBXO31对肿瘤生长的影响.结果 在TCGA数据库中,miR-876-5p高表达的患者的生存率显著低于miR-876-5p低表达患者(P＜0.05).卵巢癌患者FBXO31水平显著降低,卵巢癌分期的越高FBXO31水平越低,并且FBXO31高表达卵巢癌患者的生存率显著高于FBXO31低表达(P＜0.05).miR-876-5p直接靶向FBXO31.过表达miR-876-5p抑制FBXO31 mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.05),过表达FBXO31显著逆转miR-876-5p对FBXO31的抑制作用(P＜0.05).Mimic组的细胞活力和细胞迁移能力显著高于对照组(P＜0.05),FBXO31组的细胞活力和细胞迁移能力显著低于对照组(P＜0.05),并且mimic+FBXO31组的细胞活力和细胞迁移能力显著低于mimic组(P＜0.05).miR-876-5p组荷瘤裸鼠的肿瘤体积和质量均显著高于对照组(P＜0.05),miR-876-5p+FBXO31组肿瘤体积和质量显著低于miR-876-5p组(P＜0.05).结论 miR-876-5p具有促进卵巢癌进展的作用,而FBXO31可能抑制卵巢癌进展.miR-876-5p直接靶向FBXO31,并且miR-876-5p过表达可通过抑制FBXO31促进卵巢癌细胞生长、侵袭,起到抑制卵巢癌生长的作用.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)微小染色体维持蛋白3相关蛋白-反义链1(MCM3AP-AS1)靶向调控miR-876-5p对结直肠癌(CRC)细胞的增殖和迁移的作用.方法 实时定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测CRC组织和细胞中MCM3AP-AS1的表达;用MTT法、划痕愈合实验和Transwell小室法检测CRC细胞的增殖和迁移;采用生物信息分析、双荧光素酶基因报告实验、RT-qPCR验证MCM3AP-AS1和miR-876-5p的靶向关系.结果 与非肿瘤组织和正常结直肠上皮细胞系相比,MCM3AP-AS1在CRC组织和细胞系中表达上调(P<0.05);敲低MCM3AP-AS1能抑制CRC细胞增殖和迁移(P<0.05);生物信息学分析、双荧光素酶基因报告实验和RT-qPCR表明MCM3AP-AS1与miR-876-5p可相互作用;miR-876-5p可削弱MCM3AP-AS1对CRC细胞增殖和迁移的促进作用(P<0.05).结论 MCM3AP-AS1可以通过吸附miR-876-5p促进CRC细胞的增殖和迁移.

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MINCR靶向微小RNA(miR)-876-5p调控膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的分子机制.方法 体外培养人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1与膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3,采用反转录与荧光定量聚合酶链反应法检测LncRNA MINCR和miR-876-5p的表达量;将 si-NC、si-MINCR、miR-NC、miR-876-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-876-5p、si-MINCR+anti-miR-NC、si-MINCR+anti-miR-876-5p 转染入 T24细胞,分别记为si-NC 组、si-MINCR 组、miR-NC 组、miR-876-5p 组、anti-miR-NC 组、anti-miR-876-5p 组、si-MINCR+anti-miR-NC 组、si-MINCR+anti-miR-876-5p 组;采用噻唑蓝法检测细胞活力;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA MINCR与miR-876-5p的靶向关系;蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9、天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达量.结果 与SV-HUC-1细胞比较,膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3中LncRNA MINCR的表达水平升高[(2.25±0.20)、(1.84±0.18)、(1.61±0.12)比(1.00±0.10)],miR-876-5p 的表达水平降低[(0.38±0.03)、(0.46±0.04)、(0.51±0.05)比(1.02±0.12)](均P＜0.05).与 miR-NC 组比较,miR-876-5p 组细胞活力降低,迁移及侵袭细胞数减少,凋亡率升高,CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低,Cleaved-caspase-3蛋白水平升高(均P＜0.05).双荧光素酶报告实验证实LncRNA MINCR能够靶向结合miR-876-5p.与si-MINCR+anti-miR-NC组比较,si-MINCR+anti-miR-876-5p组细胞活力升高,迁移及侵袭细胞数增多,凋亡率降低,CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高,Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(均P＜0.05).结论 抑制LncRNA MINCR表达可减弱膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,并诱导细胞凋亡,其作用机制与靶向调控miR-876-5p的表达有关.

目的:利用生物信息学方法分析与葡萄膜恶性黑色素瘤转移相关的非编码RNA,以及它们作为竞争性内源RNA的作用机制.方法:从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载80例葡萄膜恶性黑色素瘤患者的RNA测序数据和临床资料,采用edgeR算法分析转移与非转移患者组织中差异表达(differentially expressed,DE)的长链非编码RNA(lncRNA)、微小RNA(miR)和mRNA,并构建lncRNA-miR-mRNA的竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络,基因富集分析和通路分析研究网络中mRNA的生物学功能.Kaplan-Meier生存曲线分析ceRNA网络中核心RNA与生存率的关系.结果:从发生远处转移的葡萄膜恶性黑色素瘤样本中,共鉴定出346个上调的mRNA,118个下调的miR和45个上调的lncRNA.其中67个mRNA,7个miR和30个lncRNA相互组合形成616个ceRNA单元,并形成了一个具有181条边线ceRNA网络.基因富集分析表明:网络中的mRNA富集在肿瘤生成和转移相关的几个基因本体(Gene Ontology)和信号通路.拓扑分析确定了6个核心lncRNA(LINC00861、LINC02421、BHLHE40-AS1、LINC01252、LINC00513和LINC02389)和3个核心mRNA(UNC5D、BCL11B和MTDH).所有核心lncRNA、核心mRNA的表达水平和5个miR(miR-221、miR-222、miR-506、miR-507、miR-876)的表达水平均与总体生存率显著相关(均P<0.05).结论:本研究揭示了几种lncRNA及其相关的ceRNA网络在葡萄膜恶性黑色素瘤转移中的作用,为进一步研究葡萄膜恶性黑色素瘤的发生和/或转移提供了新的方向.

目的 探讨直肠癌患者血清微小RNA-144-5p(miR-144-5p)、miR-876-5p表达变化及其与临床病理特征和预后的关系.方法 选择直肠癌患者85例(观察组)、健康志愿者52例(对照组),采集所有研究对象外周静脉血,离心留取血清,采用RT-qPCR法检测血清miR-144-5p、miR-876-5p表达.分析血清miR-144-5p、miR-876-5p表达与直肠癌患者临床病理特征和预后的关系.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-144-5p、miR-876-5p表达对直肠癌患者预后不良的预测价值.结果 观察组血清miR-144-5p、miR-876-5p表达均显著低于对照组(P均<0.05).血清miR-144-5p、miR-876-5p表达与直肠癌浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有关(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤最大径、组织分化程度无关(P均>0.05).随访3年,85例直肠癌患者3年生存率为76.47％(65/85).miR-144-5p、miR-876-5p高表达者3年生存率均显著高于其低表达者(P均<0.05).ROC曲线分析显示,血清miR-144-5p、miR-876-5p表达单独和联合预测直肠癌患者预后不良的曲线下面积分别为0.781、0.795、0.888,血清miR-144-5p、miR-876-5p表达联合预测直肠癌患者预后不良的曲线下面积大于血清miR-144-5p、miR-876-5p表达单独(P均<0.05).结论 直肠癌患者血清miR-144-5p、miR-876-5p低表达,二者表达与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移以及患者预后密切相关,并可作为预测直肠癌患者预后不良的生物标志物.

目的 探讨结直肠癌组织中微小RNA-876-5p(miR-876-5p)、配对框基因6(PAX6)mRNA的表达变化及意义.方法 选取86例结直肠癌患者,术中留取部分癌组织和癌旁组织.用RT-qPCR法检测组织中miR-876-5p、PAX6 mRNA表达;用TargetScan数据库预测miR-876-5p与PAX6的关系,用Pearson相关法分析二者的相关性;随访3年,统计患者3年累积生存率,根据结直肠癌组织中miR-876-5p、PAX6 mRNA表达水平将患者分为miR-876-5p高表达组、miR-876-5p低表达组,PAX6 mRNA高表达组、PAX6 mRNA低表达组,比较各组3年累积生存率.结果 结直肠癌组织中miR-876-5p相对表达量低于癌旁组织,PAX6 mRNA相对表达量高于癌旁组织(P均<0.05).经在线网站https://www.targetscan.org/预测,miR-876-5p与PAX6的3'-非翻译区691-697存在结合位点.Pearson相关分析显示,结直肠癌组织中miR-876-5p表达与PAX6 mRNA表达呈负相关(r=-0.754,P<0.05).结直肠癌组织中miR-876-5p、PAX6 mRNA表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤最大径无关(P均>0.05).miR-876-5p高表达组3年累积生存率90.48％(38/42)高于miR-876-5p低表达组的68.18％(30/44),PAX6 mRNA高表达组3年累积生存率70.21％(33/47)低于PAX6 mRNA低表达组的89.74％(36/39),比较差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 结直肠癌组织中miR-876-5p高表达、PAX6 mRNA低表达,二者表达变化与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及预后有关.