目的:评价神经元型一氧化氮合酶(nNOS)-一氧化氮合酶1衔接蛋白(NOS1AP)复合体在瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏中的作用。方法:清洁级健康成年雄性SD大鼠40只，体质量240～260 g，2～3月龄，采用随机数字表法分为4组( n＝10)：对照组(C组)静脉输注生理盐水0.1 ml·kg －1·min －1 60 min；瑞芬太尼组(R组)静脉输注瑞芬太尼1.0 μg·kg －1·min －1 60 min；nNOS-NOS1AP抑制剂ZLc002组(C＋Z组)和瑞芬太尼＋ZLc002组(R＋Z组)每天腹腔注射ZLc002 10 mg/kg，连续3 d，然后分别静脉输注生理盐水0.1 ml·kg －1·min －1或瑞芬太尼1.0 μg·kg －1·min －160 min。分别于静脉输注前24 h和输注结束后6、24、48 h(T 0-3)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。最后一次痛阈测定结束后处死大鼠，取L 4-6脊髓组织，采用RT-PCR法检测脊髓nNOS、NOS1AP、G蛋白信号传导激活蛋白1(Dexras1)的mRNA表达；生物素转化法提取亚硝基化蛋白，Western blot法测定nNOS、NOS1AP、总体和亚硝基化Dexras1的表达；免疫共沉淀法检测nNOS-NOS1AP共表达；测定脊髓NO含量。 结果:与C组比较，R组T 1-3时MWT降低，TWL缩短，脊髓nNOS、NOS1AP及其mRNA表达上调，nNOS-NOS1AP共表达和NO生成增加，亚硝基化Dexras1表达上调( P<0.05)，C＋Z组上述各指标差异无统计学意义( P>0.05)；与R组比较，R＋Z组T 1-3时MWT升高，TWL延长，脊髓nNOS-NOS1AP共表达和NO生成减少，亚硝基化Dexras1表达下调( P<0.05)，nNOS、NOS1AP及其mRNA表达差异无统计学意义( P>0.05)；4组间脊髓Dexras1及其mRNA表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏的机制可能与上调脊髓nNOS和NOS1AP的表达，促进二者相互作用，介导NO生成和Dexras1亚硝基化修饰有关。

目的:观察依达拉奉右莰醇(edaravone dexborneol group，ED)对大鼠卒中后焦虑抑郁样行为的影响，并探讨其可能的机制。方法:120只健康成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组(sham组)、缺血再灌注组(MCAO组)、依达拉奉组(Eda组)、依达拉奉右莰醇组(ED组)，每组30只。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。造模结束后Eda组及ED组大鼠分别腹腔注射依达拉奉(8 mg·kg -1·d -1)和依达拉奉右莰醇(依达拉奉8 mg·kg -1·d -1，右莰醇2 mg·kg -1·d -1)，其余两组大鼠腹腔注射相同体积的生理盐水。部分大鼠连续给药3 d后处死，检测分子指标，剩余大鼠持续给药14 d后进行行为学检测。采用Western blot检测大鼠大脑梗死周围皮质核因子κB(neclear factor κB，NF-κB)、磷酸化NF-κB(phosphorylated NF-κB，p-NF-κB)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis α，TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β，IL-1β)的表达；RT-qPCR检测TNF-α、IL-1β、分化簇86(cluster of differentiation 86，CD86)、分化簇206(cluster of differentiation 206，CD206)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS) mRNA的相对表达水平；免疫荧光染色技术检测CD68标志的M1型小胶质细胞及离子化钙结合衔接分子1(ionized calcium binding adaptor molecule 1，Iba1)标记的小胶质细胞、微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2，MAP2)标记的神经元；TTC染色法测量脑梗死体积。采用旷场实验及高架十字迷宫实验观察大鼠卒中后抑郁焦虑行为。采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD- t检验。 结果:(1)行为学结果显示，缺血再灌注14 d后，MCAO组进入开放臂的次数、开放臂停留时间、旷场中央区活动时间均低于sham组( t＝20.77，6.02，14.63，均 P<0.05)。ED组进入开放臂的次数[(16.22±0.49)次]、开放臂停留时间[(69.11±17.08)s]、旷场中央区活动时间[(3.80±0.37)s]均多于MCAO组[(8.14±0.60)次，(41.18±9.81)s，(0.33±0.39)s]( t＝4.69，0.38，2.27，均 P<0.05)和Eda组[(11.11±0.26)次，(45.26±17.16)s，(1.14±0.19)s]( t＝8.63，2.50，7.86，均 P<0.05)。(2)Western blot结果显示，缺血再灌注3 d后，MCAO组p-NF-κB/NF-κB、TNF-α、IL-1β表达均高于sham组( t＝15.35，12.35，7.23，均 P<0.05)。ED组梗死周围皮质p-NF-κB/NF-κB(0.49±0.02)，TNF-α(0.73±0.03)，IL-1β(0.61±0.01)相对表达量低于MCAO组[(1.14±0.05)，(1.13±0.07)，(1.34±0.14)]( t＝14.58，7.86，5.65，均 P<0.05)和Eda组[(0.93±0.03)，(0.89±0.02)，(1.04±0.36)]( t＝9.82，3.07，3.30，均 P<0.05)。(3)RT-qPCR结果显示，ED组梗死周围皮质中TNF-α mRNA(1.98±0.18)，IL-1β mRNA(2.00±0.35)，CD86 mRNA(1.56±0.20)，iNOS mRNA(2.01±0.12)表达量低于MCAO组[(5.12±0.24)，(8.15±0.22)，(6.03±0.13)，(7.20±0.09)]( t＝7.86，16.88，16.55，37.25，均 P<0.05)及Eda组[(2.85±0.07)，(5.43±0.26)，(2.67±0.27)，(3.58±0.11)]( t＝3.71，9.41，4.13，11.30，均 P<0.05)；ED组梗死周围皮质中抗炎因子CD206 mRNA表达水平(3.98±0.25)高于MCAO组(2.00±0.11)( t＝7.08， P<0.05)及Eda组(3.17±0.09)( t＝3.25， P<0.05)。(4)免疫荧光结果显示，ED组梗死周围皮质及纹状体区极化为M1型小胶质细胞与活化的小胶质细胞比值百分比[(20.36±9.23)%，(18.26±5.98)%]低于MCAO组[(83.69±12.79)%，(61.25±33.26)%]( t＝5.23，3.02， P<0.05)及Eda组[(42.16±13.13)%，(40.23±14.22)%]( t＝3.12，2.08，均 P<0.05)。此外，MCAO组梗死周围皮质神经元数量少于sham组( t＝8.02， P<0.05)，ED组梗死周围皮质MAP2标志的神经元数量[(53.07±17.90)个/视野]多于MCAO组[(26.27±9.95)个/视野]及Eda组[(38.69±12.03)个/视野]( t＝6.89，5.26，均 P<0.05)。(5)TTC染色结果显示，ED组脑梗死体积[(10.31±1.03)%]低于MCAO组[(34.71±1.74)%]( t＝15.31， P<0.05)及Eda组[(26.05±1.00)%]( t＝9.88， P<0.05)。 结论:依达拉奉右莰醇减轻缺血再灌注大鼠的焦虑抑郁样行为，可能与抑制小胶质细胞M1型极化，下调NF-κB炎性信号通路及增强神经元结构稳定性有关。

目的 探讨C-X3-C基序趋化因子配体 1(CX3CL1)/C-X3-C基序趋化因子受体 1(CX3CR1)通路调控的小胶质细胞活化对失血性休克/复苏大鼠记忆功能的影响.方法 实验分为 2 部分.第 1 部分,将大鼠随机分为假手术组,模型-0.5 h组,模型-1.5 h组,模型-3h组,每组 10 只,模型组之间失血性休克时间存在差异.第 2部分,大鼠随机分为对照组与CX3CL1 组,每组 10 只.CX3CL1 组大鼠脑室注射CX3CL1 蛋白,对照组大鼠注射生理盐水.所有大鼠在模型制作前开展Morris水迷宫训练,模型制作后 4d,开展水迷宫测试.完成后,取全脑组织进行HE染色与免疫组织化学染色,取脑脊液检测炎性细胞因子含量,取脑组织进行Real-time PCR检测与Western blotting检测.结果 与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期增加,穿越平台次数与第Ⅲ象限停留时间减少,且HE染色中显示神经元状态受损.此外,与假手术组相比,模型组大鼠脑组织中离子钙结合衔接分子 1(Iba1)表达升高,脑脊液中肿瘤细胞坏死因子α(TNF-α)与白细胞介素(IL)-6含量升高,M1 型小胶质细胞标记CD16、TNF-α、IL-1β与诱导性一氧化氮合酶(iNOS)mRNA 含量升高.与此同时,与假手术组相比,模型组大鼠脑组织中CX3CL1、CX3CR1 蛋白表达降低,磷酸化核因子 κB(p-NF-κB)与核苷酸结合寡聚结构域(NOD)样受体蛋白 3(NLRP3)蛋白表达升高.然而,与模型组相比,CX3CL1 组大鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数与第Ⅲ象限停留时间增加,且神经元状态恢复.此外,与对照组相比,CX3CL1 组大鼠脑组织中 Iba1 表达降低,脑脊液中 TNF-α与IL-6 含量降低,M1 型小胶质细胞标记CD16、TNF-α、IL-1β与iNOS mRNA含量降低,M2 型小胶质细胞标记CD206、转化生长因子β(TGF-β)、精氨酸酶 1(Arg1)、几丁质酶 3 样蛋白 1(Ym1)mRNA含量升高.结论 CX3CL1 有助于抑制小胶质细胞过度激活,诱导小胶质细胞向M2 型极化,抑制M1 型极化,降低炎性细胞因子释放,减轻失血性休克/复苏诱发的记忆功能损伤.

目的:脓毒症相关认知功能障碍是脓毒症患者常见的并发症,目前病理机制不明,缺乏有效的防治手段.盐诱导激酶(salt-induced kinase,SIK)是调节代谢、免疫、炎症反应等的重要分子,与多种神经系统疾病的发生和发展相关.本研究旨在探讨SIK在脓毒症小鼠海马中的表达,以及SIK抑制剂HG-9-91-01在脓毒症相关认知功能障碍中的作用及其机制.方法:首先,将C57BL/6 小鼠随机分为对照组(Con组)和脓毒症模型组[脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组].LPS组小鼠以8 mg/kg的剂量腹腔注射LPS,Con组小鼠予注射等体积生理盐水.在注射后1、3、6 d取小鼠海马组织,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative PCR,qPCR)和蛋白质印迹法检测SIK1、SIK2、SIK3的mRNA和蛋白质的表达水平.然后,将小鼠随机分为Con组、LPS组、SIK抑制剂组(HG组).LPS组和HG组注射LPS构建脓毒症模型,HG组在注射LPS后的第3～6天以10 mg/kg的剂量腹腔注射HG-9-91-01,LPS组注射等体积溶媒.在注射LPS后的第7～11天进行Morris水迷宫实验(Morris water maze,MWM)以评估3组小鼠的认知功能.行为学检测后取3组小鼠的海马组织,采用qPCR检测炎症因子和小胶质细胞标志分子的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、CD68、离子钙结合衔接分子1(ionized calcium binding adaptor molecule 1,Iba-1)、N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体(NMDA receptor,NR)亚型、cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein,CREB)调控的转录共激活因子1(CREB-regulated transcription coactivator 1,CRTC1)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)的蛋白质表达水平,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测海马CA1区、CA3区、齿状回(dentate gyrus,DG)Iba-1阳性细胞的表达,并进行Sholl分析.结果:与Con组比较,LPS组小鼠海马组织SIK1、SIK2、SIK3的mRNA和蛋白质表达水平均上调(均P<0.05).与Con组比较,LPS组小鼠的逃避潜伏期明显延长,目标象限停留时间百分比降低,运动速度下降(均P<0.05);与LPS组相比,HG组小鼠的逃避潜伏期明显缩短,目标象限停留时间百分比增加(均P<0.05).与Con组比较,LPS组海马组织炎症因子[肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)]和Ⅰ型小胶质细胞标志分子iNOS、CD68的mRNA表达均上调,而Ⅱ型小胶质细胞标志分子CD206和精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)的mRNA表达均下调;与LPS组比较,HG组TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS的mRNA表达均下调,而CD206和Arg-1的mRNA表达均上调(均P<0.05).与Con组比较,LPS组海马组织iNOS、CD68、Iba-1的蛋白质表达均上调;与LPS组比较,HG组iNOS、CD68、Iba-1的蛋白质表达均下调(均P<0.05).与Con组比较,LPS组海马组织CA1、CA3、DG区Iba-1阳性细胞数量均增加;与LPS组比较,HG组CA1、CA3、DG区Iba-1阳性细胞数量均减少(均P<0.05).Sholl分析结果显示:距离小胶质细胞胞体8～38 μm半径范围内,LPS组小胶质细胞突起与同心圆的交点较Con组明显减少(均P<0.05);在距离小胶质细胞胞体14～20 μm半径范围内,HG组小胶质细胞突起与同心圆的交点较LPS组明显增多(均P<0.05).与Con组比较,LPS组小鼠海马突触相关蛋白NR亚型NR1、NR2A、NR2B及IGF-1的蛋白质表达下调,磷酸化的CRTC1(phosphorylated CRTC1,p-CRTC1)的蛋白质表达上调;与LPS组比较,HG组小鼠海马突触相关蛋白NR1、NR2A、NR2B及IGF-1的蛋白质表达上调,p-CRTC1的蛋白质表达下调(均P<0.05).结论:脓毒症小鼠海马组织SIK表达上调,SIK抑制剂HG-9-91-01可改善小鼠脓毒症相关认知功能障碍,其机制可能与激活CRTC1/IGF-1通路,抑制神经炎症,增强突触可塑性有关.

目的 探究香萱益神方对大脑中动脉栓塞(MCAO)法复制的血管性认知障碍(VCI)模型大鼠海马小胶质细胞炎症反应的调节作用.方法 42只Wistar大鼠随机挑选12只作为假手术组,其余采用MCAO法建立VCI大鼠模型,造模成功的24只大鼠分为模型组和香萱益神方组,每组12只.香萱益神方组大鼠给予香萱益神方7.46 g/kg灌胃,假手术组和模型组给予等量纯净水灌胃,每日1次,连续6周.分别于造模2周后和中药干预6周后行新物体识别实验检测大鼠认知功能,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察香萱益神方干预后大鼠脑组织缺血区域大小的变化;苏木精-伊红(HE)染色法检测香萱益神方对VCI大鼠海马CA1区及齿状回(DG)区神经元结构的影响;免疫组织化学染色法观察香萱益神方对VCI大鼠海马CA1区及DG区小胶质细胞离子钙结合衔接分子1(Iba1)的激活情况;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组大鼠海马组织小胶质细胞标记物Iba1、M1型促炎症因子诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞分化抗原86(CD86)和M2型抑炎症因子精氨酸-1(Arg-1)、C型凝集素CD206蛋白的表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测大鼠海马组织Iba1、iNOS、CD86、Arg-1和CD206 mRNA的表达.结果 新物体识别结果显示,与模型组大鼠比较,香萱益神方组大鼠新物体探索次数识别指数与探索时间识别指数提高(P<0.05),提示VCI模型大鼠认知功能改善.TTC染色结果显示,与模型组大鼠比较,香萱益神方组大鼠脑梗死面积减少(P<0.05).HE染色结果显示,与模型组比较,香萱益神方组大鼠海马CA1区和DG区锥体细胞形态改善,核固缩减少,细胞间隙缩小,断裂带减少,深染程度降低.免疫组织化学结果显示,与模型组比较,香萱益神方组大鼠海马CA1区和DG区Iba1阳性细胞数减少(P<0.05),胞体形态变细.Western blot结果显示,与模型组比较,香萱益神方组大鼠海马组织Iba1、iNOS、CD86蛋白水平显著下降(P<0.05),Arg-1、CD206蛋白水平升高(P<0.05).RT-qPCR结果显示,与模型组比较,香萱益神方组大鼠海马组织Iba1、iNOS、CD86 mRNA水平下降(P<0.05),Arg-1、CD206 mRNA水平升高(P<0.05).结论 香萱益神方可能通过调节小胶质细胞促炎表型M1型和抗炎表型 M2型极化,抑制海马小胶质细胞炎症反应,从而保护海马神经元,改善大鼠认知功能.

目的:探究二氢杨梅素(DMY)通过蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录活化因子3(STAT3)通路调控小胶质细胞活化对异氟醚所致成年小鼠早期认知功能障碍的影响.方法:将50只雄性C57BL/6小鼠分为对照组、异氟醚组、DMY-L组(100 mg/kg DMY)、DMY-H组(200 mg/kg DMY)、DMY-H+AG490组(JAK2抑制剂AG490 0.4 mg/kg),DMY-L组、DMY-H组、DMY-H+AG490组小鼠灌胃相应剂量DMY或AG490,对照组、异氟醚组灌胃等量生理盐水,为时1周(1次/d);通过旷场实验、新旧事物识别实验及水迷宫实验观察各组小鼠行为学变化情况;免疫组化法测定海马组织离子钙结合衔接分子1(Iba1)表达;ELISA检测海马组织IL-10及IL-1β水平;Western blot检测海马组织CD68、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶蛋白及JAK2/STAT3通路蛋白水平.结果:与对照组相比,异氟醚组小鼠站立次数、运动路程、穿越平台次数、IL-10水平、精氨酸酶表达显著减少,逃避潜伏期、海马组织Iba1阳性细胞数、IL-1β水平、CD68、iNOS、p-STAT3/STAT3及p-JAK2/JAK2表达显著增加(P<0.05);与异氟醚组相比,DMY-L组、DMY-H组小鼠站立次数、运动路程、穿越平台次数、IL-10水平、精氨酸酶表达显著增加,逃避潜伏期、海马组织Iba1阳性细胞数、IL-1β水平、CD68、iNOS、p-STAT3/STAT3及p-JAK2/JAK2表达显著减少(P<0.05);与DMY-H组相比,DMY-H+AG490组站立次数、运动路程、穿越平台次数、IL-10水平、精氨酸酶表达显著增加,逃避潜伏期、海马组织Iba1阳性细胞数、IL-1β水平、CD68、iNOS、p-STAT3/STAT3、p-JAK2/JAK2表达显著减少(P<0.05).结论:DMY可能通过抑制JAK2/STAT3通路抑制小胶质细胞活化,从而改善异氟醚所致的成年小鼠早期认知功能障碍.

目的 探究金雀异黄素对脑卒中大鼠小胶质细胞激活及高迁移率族蛋白(HMG)B1/Toll样受体(TLR)4 通路的影响.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量组(5 mg/kg金雀异黄素)、高剂量组(10 mg/kg金雀异黄素)、高剂量+甘草酸组(10 mg/kg金雀异黄素+0.03 g/kg HMGB1 抑制剂)各 10 只;通过颈内动脉线栓法建立脑卒中大鼠模型,对照组仅暴露左侧颈内、外动脉,不进行插线及结扎;Longa评分对大鼠神经功能进行评分;原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测脑组织神经细胞凋亡情况;免疫组化法检测脑组织小胶质细胞标志物离子钙结合衔接分子(Iba)1 表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠脑组织白细胞介素(IL)-1β及IL-10 水平;Western印迹检测脑组织中精氨酸酶(Arginase)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白及HMGB1/TLR4 通路蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分、神经细胞凋亡、Iba1 阳性细胞数、IL-1β、iNOS、HMGB1、TLR4 水平显著增加,IL-10、Arginase水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,低剂量组及高剂量组神经功能缺损评分、神经细胞凋亡、Iba1 阳性细胞数、IL-1β、iNOS、HMGB1、TLR4 水平显著降低,IL-10、Arginase水平显著增加(P<0.05);与高剂量组比较,高剂量+甘草酸组神经功能缺损评分、神经细胞凋亡、Iba1 阳性细胞数、IL-1β、iNOS、HMGB1、TLR4 水平显著降低,IL-10、Arginase水平显著增加(P<0.05).结论 金雀异黄素可能通过抑制HMGB1/TLR4 通路来降低脑卒中大鼠小胶质细胞激活,促进其M1 向M2 型的转变.

目的 探讨蛤蚧定喘丸的抗炎机制,推测蛤蚧定喘丸发挥抗炎功效的关键活性成分.方法 依次采用石油醚、无水乙醇、超纯水对蛤蚧定喘丸不同极性的化学成分进行提取:利用2、4、8、16、32、64、128 μg·mL-1的醚提物、醇提物、水提物处理RAW264.7细胞,分别通过CelITiter-Lumi(CTL)发光法和钙黄绿素/碘化丙啶(Calcein/PI)染色法检测细胞活力,确定提取物的安全浓度;利用各提取物处理脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型,通过格里斯试剂(Griess)测定一氧化氮(NO)释放量,通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌,筛选具有抗炎活性的提取物.利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术(UHPLC-ESI-QE-Orbitrap-MS)对有抗炎活性的提取物进行物质分析,推测抗炎活性物质及作用机制,并利用蛋白免疫印迹法(Western blotting)进一步验证其对硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/p-核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)/核因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路相关蛋白表达的影响.结果 醚提物、醇提物、水提物在质量浓度低于64 μg·mL-1时均未影响细胞活力.与模型组相比,醇提物在质量浓度大于8μg·mL-1时显著降低NO释放量(P＜0.05),醚提物和醇提物在质量浓度高达64μg·mL-1时仍未产生抗炎效果;醇提物显著降低了 TNF-α、IL-1β的释放量(P＜0.05).醇提物中共分析出36种主要化学成分.经Western blotting实验验证,与模型组比较,蛤蚧定喘丸醇提物对RAW264.7细胞炎症模型内NLRP3炎症小体、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、p-IκBα的表达均有显著降低作用(P＜0.05),而对TXNIP、Toll样受体4(TLR4)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白的影响并不显著.结论 蛤蚧定喘丸通过抑制TRIF/p-IκBα/NF-κB/NLRP3信号通路以及iNOS、MCP-1的合成发挥抗炎功效,推测巴马汀、麻黄碱、伪麻黄碱、小檗碱、甘草素、药根碱、小檗红碱为其抗炎活性成分.

目的 研究四氢姜黄素(THC)抗焦虑及抗抑郁的作用机制.方法 将小鼠随机分为正常组、模型组及THC低、中、高剂量组(5、10、20 mg·kg-1),每日将小鼠置离心管中4 h,建立慢性束缚应激抑郁模型;灌胃给予THC,正常组和模型组给予等体积的橄榄油;造模21 d后,进行行为学检测;检测后,处死小鼠,取海马体,用于生化和病理检测.结果 THC可明显改善小鼠的多项行为学指标;改善抑郁小鼠海马体内脑源性神经营养因子、Toll样受体-4、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子α、一氧化氮合成酶、离子钙结合衔接分子1蛋白的表达.结论 THC可缓解小鼠焦虑及抑郁行为,其机制可能与对海马体的抗炎作用有关.

目的 探讨芍药苷( PF)对高糖刺激的小鼠骨髓来源的巨噬细胞( BMDMs) Toll 样受体4 ( TLR4)信号通路的影响.方法 分离骨髓来源的巨噬细胞作为研究对象,高糖作为刺激因素,芍药苷作为干预因素分组.将BMDMs分为7组:正常糖对照组( LG 组)、正常糖对照 +PF 组( LG +PF组)、高糖刺激组(HG组)、高糖刺激+PF组( HG+PF组)、TLR4 -/ -对照组(TLR4 -/-组)、TLR4 -/ -对照+高糖刺激组(TLR4 -/ -+ HG 组)、 TLR4 -/ -对照 + 高糖刺激 + PF 组(TLR4-/ -+HG+PF组).流式细胞术鉴定巨噬细胞的纯度及成熟度;CCK-8 检测 PF对 BMDMs活力的影响;Transwell检测各组BMDMs 的趋化功能;激光共聚焦法检测各组的TLR4和诱生型一氧化氮合酶( iNOS)的协同表达;qRT-PCR测定各组细胞中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及iNOS mRNA的转录表达;Western blot法检测各组总蛋白中iNOS、TLR4、髓样分化因子88( MyD88)、TIR结构域衔接蛋白( Trif)、磷酸化白介素-1受体相关激酶(p-IRAK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、核因子κB(NF-κB)p65和NF-κBp-p65蛋白的表达;ELISA法检测各组细胞培养上清液中促炎因子TNF-α、IL-1β和MCP-1的分泌情况.结果 与LG组比较,高糖刺激可以增加巨噬细胞的趋化功能;明显上调细胞TNF-α、IL-1β、MCP-1及iNOS mRNA的转录表达(P＜0. 01);同时HG组的iNOS 及 TLR4、MyD88、Trif、p-IRF3、NF-κBp65 和 NF-κBp-p65等信号通路蛋白表达水平明显增强(P＜0. 01);细胞培养上清液中分泌的 TNF-α、 IL-1β 及 MCP-1 水平增高( P ＜0. 01). PF和敲除TLR4基因均可以抑制高糖刺激导致的巨噬细胞的激活效应.结论 高糖可以诱导BMDMs细胞内的TLR4及下游信号传导通路表达上调,同时使巨噬细胞激活导致促炎因子表达上调;PF和敲除TLR4基因均可抑制TLR4信号通路的激活,并且使巨噬细胞促炎因子的表达下调.