目的 探究癫痫病人外周血中三磷酸腺苷结合盒转运子A7(ABCA7)、髓样细胞触发受体2(TREM2)的表达水平及与认知功能的关系.方法 选取商丘市中心医院2017年6月至2021年7月收治的132例癫痫病人为研究对象,根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)得分将癫痫病人分为两组,认知功能正常组(MoCA≥26分,60例)和认知功能障碍组(MoCA 0～25分,72例).采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清ABCA7、TREM2水平;Spearman法分析相关性、logistic回归分析影响因素、受试者操作特征曲线(ROC曲线)评估预测价值.结果 相较于认知功能正常组,认知功能障碍组血清ABCA7[(1.17±0.26)μg/L比(1.53±0.37)μg/L]水平升高,TREM2[(25.14±3.47)ng/L比(20.58±2.52)ng/L]水平降低(t=6.34、8.73,P<0.05).认知功能障碍病人血清ABCA7水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.55,P<0.001),血清TREM2水平与MoCA评分呈正相关(r=0.56,P<0.001).TREM2、发作持续时间、病程、ABCA7是癫痫病人发生认知功能障碍的影响因素.血清ABCA7、TREM2水平单独及联合预测癫痫病人认知功能障碍的曲线下面积分别为0.79、0.84、0.93,血清ABCA7、TREM2水平联合预测的曲线下面积明显高于二者单独预测(P<0.05).结论 癫痫病人血清中ABCA7的表达水平显著升高,TREM2表达水平显著降低,均为癫痫病人发生认知功能障碍的影响因素,与癫痫病人的认知功能密切相关.

目的:探究同时伴有低密度脂蛋白受体衔接蛋白1（LDLRAP1）及胆固醇转运蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体G8（ABCG8）基因异常的家族性高胆固醇血症（FH）一家系的临床及分子生物学特征。方法:2020年9月于上海交通大学医学院附属瑞金医院收治1例FH患者，采集该家系成员外周静脉血样本，检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）；用高效液相色谱法检测血清豆固醇和谷固醇含量。二代基因测序检测先证者及家系成员基因变异情况。采用Pymol软件对基因变异位点进行致病性分析，并使用Uniprot Modelling软件行蛋白结构建模。结果:先证者表现为贫血合并多部位黄色瘤、早发急性冠状动脉综合征。冠状动脉造影示冠状动脉三支严重病变；腹部超声示脾肿大；血涂片示异型红细胞、大血小板散在可见；血清TC、LDL-C、豆固醇和谷固醇浓度均升高［分别为8.54 mmol/L（正常值2.3~5.7 mmol/L）、4.84 mmol/L（正常值1.3~4.3 mmol/L）、44 μmol/L（正常值1.0~10 μmol/L）、28 μmol/L（正常值1.0~15 μmol/L）］。基因测序示：LDLRAP1：NM_015627.2：exon 4 c.415 C>T（p.Q139X），该纯合突变形成的蛋白截断体丢失多个稳定蛋白结构区域，不具备正常功能。同时，先证者发现ABCG8基因变异：exon13 c.1895T>C（p.V632A），exon8 c.1199C>A（p.T400K）。2例家系成员HDL-C增高（Ⅱ5：2.33 mmol/L，Ⅱ6：2.96 mmol/L）；3例带ABCG8基因变异的成员豆固醇（Ⅱ8：23 μmol/L，Ⅱ7：24 μmol/L，Ⅰ2：18 μmol/L）、谷固醇（Ⅱ8：41 μmol/L，Ⅱ7：33 μmol/L，Ⅰ2：45 μmol/L）轻度增高。结论:同时伴有LDLRAP1及ABCG8基因异常的FH患者，可出现植物固醇浓度异常，其临床表现更加复杂，应综合考虑家族史及LDL-C、植物固醇水平及基因检测结果。

目的:筛查老年间质性肺疾病(ILDs)患者中三磷酸腺苷结合盒转运子A3(ABCA3)基因突变情况，分析老年ILDs患者的临床特征。方法:回顾性研究，对2015年9月至2018年12月在中南大学湘雅二医院呼吸与危重症医学科诊断为ILDs的老年患者(≥60岁)进行影像学分析筛选后，对其中愿意提供外周血标本且签署知情同意书的103例患者进行外周血DNA提取，进行全外显子测序，筛查ABCA3基因的突变情况，并对患者的临床资料进行总结归纳。结果:在6例患者中鉴定到ABCA3基因的7个罕见变异，这6例患者平均年龄为67岁(60~72岁)，性别分布相当，吸烟者占33.3%(2/6)，其肺功能主要表现为弥散功能受损，最终诊断包括特发性肺纤维化(3/6)、非特异性间质性肺炎(1/6)和IgG4相关肺病(2/6)。同时，在其中1例患者中首次鉴定到导致特发性肺纤维化的ABCA3基因的复合杂合突变：p.Asp1465Asn、p.Leu39Val和p.Val93Ile3。结论:ABCA3变异相关老年人ILDs具有可变性，即发病年龄、临床表现、诊断、预后在不同患者表现不同。引发早发型ILDs的ABCA3突变多为纯合子或复合杂合子，且多为致病性更强的无义突变，而引起老年人ILDs的ABCA3突变多为杂合子错义突变，这可能是引起ABCA3变异相关的老年人ILDs可变性的原因。由于目前已知治疗方案对ABCA3变异导致的ILDs患者反应欠佳，早期遗传学诊断可能通过加强疾病认知等方面使患者获益。

阿尔茨海默病(AD)是渐进性神经系统退行性疾病.在关于AD发病机制的研究中,大脑中胆固醇的代谢异常受到越来越多的关注.诸多研究表明三磷酸腺苷结合盒转运子7(ABCA7)与膜胆固醇含量和分布的调节、β-淀粉样蛋白(Aβ)的产生或沉积密切相关.ABCA7常见位点的单核苷酸多态性(SNPs)与散发性AD的发生有关.本文将ABCA7基因与散发性AD易感性的研究进展作一综述.

目的:基于网络药理学筛选中药葛根抗高脂蛋白血症的活性成分,预测葛根抗高脂蛋白血症的潜在作用靶点及信号通路,探讨其作用机制.方法:采用TCM数据库收集葛根的化学成分;采用Drugbank数据库基于结构相似性原理,筛选与葛根药效分子结构相似的药物,并预测其作用靶点;采用OMIM数据库筛选高脂蛋白血症的相关蛋白.借助STRING数据库和Cytoscape 3.6.0软件构建疾病蛋白-靶点网络、药物活性成分-靶点-疾病蛋白网络.通过网络拓扑分析和聚类分析法预测葛根治疗高脂蛋白血症的关键蛋白.通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)对靶点进行通路富集分析,预测葛根抗高脂蛋白血症的关键信号通路.结果:葛根抗高脂蛋白血症的主要活性成分有7种,即4-甲氧基葛根素、黄豆苷、大豆黄素4'-7二葡萄糖苷、蝙蝠葛碱、γ-谷甾醇和甲基对羟基肉桂.葛根治疗高血蛋白脂症有20个潜在作用靶点,即酪氨酸蛋白激酶(Src)、核因子κB(NF-κB)、过氧化物体增殖物激活受体(PPARs)、雌激素受体α(Esr1)、芳香烃受体(AHR)、载脂蛋白A(APOAⅠ、APOAⅡ、APOAⅤ)、载脂蛋白B(APOB)、载脂蛋白C(APOCⅠ、APOCⅡ)、载脂蛋白E(APOE)、低密度脂蛋白受体(LDLR)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、溶血磷脂酸(LPA)、糖基磷脂酰肌醇高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)、纤维蛋白原A(FGA)、细胞色素P450(Cyp158A2)和雄激素受体(AR).KEGG通路有8条,主要是PPAR信号转导通路.结论:采用网络药理学筛选出葛根治疗高脂蛋白血症的7种可能的药效分子,通过活性成分-靶点-疾病网络特征分析,得到20个潜在治疗靶点和8条相关通路,借此预测葛根可能通过PPARs、AR、LDLR等受体和相关蛋白调节胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白(LDL)的代谢,以发挥抗高脂蛋白血症的作用.

目的 研究生长分化因子11(GDF11)对巨噬细胞胆固醇逆转运的影响,并探究GDF11发挥作用的具体机制.方法 提取小鼠腹腔巨噬细胞后给予氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、GDF11和激活素受体样激酶7(ALK7)抑制剂SB431542孵育24 h.利用油红O染色观察细胞脂质蓄积,提取总mRNA和总蛋白后,利用realtime PCR和Western blot检测GDF11、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)和三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)的mRNA和蛋白表达水平.给予小鼠腹腔注射外源GDF11,提取腹腔巨噬细胞用3H标记的胆固醇孵育后注射回小鼠腹腔内,每8h收集一次小鼠粪便,48 h后收集小鼠肝脏和血液样本,检测样本3H含量,计算胆固醇逆转运水平.结果 ox-LDL孵育24 h显著诱导巨噬细胞内脂质蓄积,同时抑制GDF11 mRNA及蛋白的表达.GDF11处理能有效抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞脂质蓄积,同时显著诱导ABCA1 mRNA及蛋白的表达.经外源补充GDF11后显著提高小鼠体内胆固醇逆转运水平.GDF11孵育巨噬细胞后,在给予巨噬细胞ALK7抑制剂SB431542孵育后,GDF11对ox-LDL诱导细胞内脂质蓄积的抑制作用被拮抗,对ABCA1表达的调控作用也被抑制.结论 GDF11通过ALK7调节ABCA1的表达,从而促进巨噬细胞胆固醇逆转运.

目的 研究一种由鼠李糖乳杆菌DM9054和植物乳杆菌86066构成的降脂益生菌组合对非酒精性脂肪性肝病 (NAFLD) 小鼠胆固醇代谢的影响及其可能机制.方法 24只雄性LDLR-/-小鼠随机分为对照组、模型组和益生菌干预组.高脂饮食 (HFD) 15周建立小鼠NAFLD模型, 造模同时干预组给予鼠李糖乳杆菌DM9054联合植物乳杆菌86066灌胃, 对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃.实验过程中监测各组小鼠体重变化.实验结束后, 检测小鼠血清甘油三酯 (TG) 、总胆固醇 (TC) 、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL) 和高密度脂蛋白胆固醇 (HDL) 的水平差异.检测小鼠肝脏组织病理变化.使用Realtime PCR检测小鼠肠道内法尼脂受体 (FXR) mRNA、顶端膜钠依赖的胆汁酸转运体 (ASBT) mRNA、纤维生长因子15 (FGF-15) mRNA和三磷酸腺苷结合盒转运体G5 (ABCG-5) mRNA表达水平.Western blot检测小鼠肝脏胆固醇7α-羟化酶 (CYP7A1) 、FXR、三磷酸腺苷结合盒转运体G8 (ABCG-8) 、清道夫受体BI (SR-BI) 、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 (HMGCR) 、胆盐输出泵 (ABCB-11) 、纤维生长因子受体4 (FGFR-4) 和胆固醇调节元件结合蛋白-2 (SREBP-2) 蛋白表达水平.结果 与模型组相比, 降脂益生菌干预组小鼠体重减轻 (P＜0.05);小鼠血清TC、TG、LDL水平降低, HDL水平升高 (P＜0.05);小鼠肝脏脂肪变性和炎性细胞浸润的现象显著减少;小鼠肠道ASBT mRNA和ABCG-5mRNA表达水平明显降低 (Ps＜0.05), FGF-15mRNA表达水平明显升高 (P＜0.05), FXR mRNA表达水平差异无统计学意义 (P＞0.05);小鼠肝脏FGFR-4蛋白表达水平升高 (P＜0.05), SREBP-2和HMGCR蛋白表达水平降低 (Ps＜0.05), FXR、CYP7A1、SR-BI、ABCG-8和ABCB-11蛋白表达水平差异无统计学意义 (Ps＞0.05) .结论 降脂益生菌可能通过激活FXR-FGF15通路调节胆汁酸代谢;通过下调SREBP-2表达水平, 抑制HMGCR表达, 减少胆固醇的生成, 从而起到改善非酒精性脂肪肝的作用.

维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)是终末期肾病患者维持长期生存的主要治疗方式[1].MHD患者通常出现继发性甲状旁腺功能异常及钙磷代谢紊乱,导致患者心血管事件的发生率和病死率增加[2].心血管事件的发生与血管内皮细胞功能异常密切相关[3],体外血液净化过程会造成患者血管内皮细胞功能进一步紊乱[4].研究表明腺苷三磷酸结合盒转运体A1 (ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)参与胆固醇的逆转运,其与动脉粥样硬化的发生密切相关[5].MHD患者处于微炎症状态,而核转录因子-κB (NF-κB)是引发炎症反应的关键转录因子[6].左卡尼汀又称左旋肉碱,具有抗氧化、抑制凋亡和保护线粒体功能的作用[7].研究发现MHD患者补充左卡尼汀后,能够减低心脏并发症和低血压的发生率[8].本文探讨左卡尼汀联合超纯透析治疗对MHD患者血管内皮细胞功能及ABCA1、NF-κB表达的影响,报道如下.

目的 研究表面活性物质功能障碍的基因突变与儿童间质性肺疾病(ILD)的关系.方法 将2012年1月至2017年12月首都医科大学附属北京儿童医院收治的26例2岁前发病或病理诊断仍未明确病因的ILD患儿进行相关基因,如表面活性物质蛋白B基因(surfactant protein B,SFTPB、表面活性物质蛋白C基因(surfactant protein C,SFTPC)、三磷酸腺苷结合盒转运子A3基因(ATP binding cassette transporter A3,ABCA3)的全部外显子和相邻的内含子的基因突变检测,对基因突变结果及临床资料进行研究分析.基因分析方法:对检测基因进行PCR扩增,并进行Sanger测序.结果 1.共发现4例确定的表面活性物质功能障碍的基因突变病例,其中发现3例有致病意义的SFTPC3基因突变,即c.218T＞C突变、IVS4,+1G＞C突变;c.115G ＞T各1例.发现1例ABCA3基因复合杂合突变,即c.3913 T＞C和外显子13-18存在杂合缺失.2.不能确定或可疑的7例病例,包括4例不确定意义SFTPC基因突变,分别为c.406G＞C,IVS4,+12 T＞G,c.364T＞C,c.68G＞A突变.3例检测到2个ABCA3的杂合突变,但未行父母验证.1例患儿同时有SFTPC的IVS4,+12 T＞G和ABCA3 c.737C＞T杂合突变,该患儿的肺病理为淀粉样变,有类似疾病家族史.3.有15例未找到致病意义表面活性物质功能障碍的基因突变.未测到SFTPB基因的有意义突变.确定致病基因突变2例(1例SFTPC c.115G＞T和1例ABCA3复合杂合突变)进行了肺组织活检,肺组织均为非特异性间质性肺炎(nonspecific interstitial pneumonia,NSIP),其中SFTPC c.115G＞T、IVS4,+1G＞C各1例突变已死亡,死亡年龄分别为14岁和11个月,仅1例SFTPC c.218T＞C突变有家族史,激素治疗后治愈.另1例ABCA3复合杂合突变出生后即出现新生儿呼吸窘迫综合征,之后呼吸困难、乏力,经激素治疗稍有改善.4例胸部CT/高分辨计算机断层扫描表现为弥散性磨玻璃样改变;2例有囊泡影,均为SFTPC死亡的病例.结论 表面活性物质功能障碍的基因突变与儿童ILD有关,病理可以表现为NSIP,部分预后不良,少部分激素治疗可能有效.

目的:研究miR-520a-3p对乳腺癌细胞多西他赛敏感性的影响,并探索潜在的分子机制.方法:收集2015年4月至2017年10月在我院乳腺外科确诊的45例乳腺癌标本,实时荧光定量PCR法检测乳腺癌组织中miR-520a-3p的表达水平.分析miR-520a-3p与乳腺癌化疗耐受和肿瘤生物学特征的相关性.采用实时荧光定量PCR检测乳腺癌细胞MCF-7、MCF-7/Doc和MDA-MB-231中miR-520a-3p和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白(ABCG2) mRNA的表达,采用蛋白质免疫印迹实验检测ABCG2的表达.转染miR-520a-3p mimic后,采用细胞毒性实验观察乳腺癌细胞对多西他赛敏感性的变化.采用实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹实验观察miR-520a-3p升高后,ABCG2 mRNA和蛋白的表达变化.进一步采用双荧光素酶活性实验验证miR-520a-3p对ABCG2的靶向作用.结果:化疗耐药组新辅助化疗后肿瘤原发部位的miR-520a-3p表达水平明显降低(P＜0.05),同时相关性分析发现,miR-520a-3p低表达与高TNM分期(Ⅲ期)和淋巴结转移相关(P＜0.05).miR-520a-3p在MCF-7/Doc和MDA-MB-231细胞中表达较在MCF-7细胞中下降(P＜0.05),而ABCG2的表达水平则明显升高(P均＜0.05).上调miR-520a-3p后,MCF-7和MCF-7/Doc细胞对多西他赛的敏感性增强(P＜0.05),而ABCG2在mRNA和蛋白水平的表达均下降(P＜0.05).双荧光素酶报告基因结果则证实ABCG2是miR-520a-3p的靶基因.结论:miR-520a-3p可逆转MCF-7/Doc对多西他赛的耐药性,这一作用可能与负调控肿瘤耐药相关蛋白ABCG2的表达从而抑制药物外排有关.