目的:基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q/TOF-MS）的高分辨多反应监测扫描模式，建立虎杖中10种酚类物质［虎杖苷、白藜芦醇、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、氧化白藜芦醇、2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、儿茶素和表儿茶素］的同时定量分析方法。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸为二元梯度洗脱系统，梯度洗脱，流速0.2 ml/min，高分辨多反应监测扫描模式用于定量分析。结果:虎杖中10种酚类物质在考察浓度范围内线性关系良好（ r2>0.999），批内和批间精密度及重复性 RSD均小于5%，回收率在96.28%～103.23%范围内。10批样本中虎杖苷含量最高，其次是白藜芦醇和大黄素，大黄酚和氧化白藜芦醇含量较低，在个别批次中未实现定量测定。不同批次间待测成分含量差异较大。 结论:本研究建立的同时定量虎杖中10种酚类物质的UPLC-Q/TOF-MS方法简便、准确，可为虎杖的质量评价提供参考。

基于网络药理学、组分结构理论剖析独一味抗炎有效成分(环烯醚萜苷类:山栀子苷甲酯、8-O-乙酰山栀子苷甲酯;黄酮苷类:木犀草苷;苯乙醇苷类:连翘酯苷B)的协同作用与配伍结构.网络药理学:利用CTD、SwissTargetPrediction、Pharm-Mapper数据库收集并筛选了各有效成分抗炎靶点;通过CTD、GeneCards数据库获得炎症相关靶点;利用Venny 2.1、STRING和Cytoscape 3.9.1得到核心靶点;通过DAVID数据库对核心靶点进行GO功能注释及KEGG通路富集分析.组分结构:基于二甲苯致小鼠耳肿胀模型和均匀设计法,以炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleu-kin-6,IL-6)为因变量,通过二次多项式逐步回归,探究独一味抗炎成分间的配伍关系,并进行体内药效实验验证.网络药理学研究表明,与单一组分相比,3类组分共同作用可通过更多生物过程、通路、靶点协同发挥抗炎作用.组分结构研究表明,环烯醚萜苷组分内(山栀子苷甲酯∶8-O-乙酰山栀子苷甲酯)最佳结构比例为1.21∶1;3类组分间(环烯醚萜苷∶苯乙醇苷∶黄酮苷类)最佳结构比例为4.8∶1.6∶1.综上,独一味各抗炎成分可协同增效,且成分间存在最优配伍比例关系,为独一味内在质量控制提供了新的实验依据.

目的 研究大苞藤黄Garcinia bracteata叶化学成分.方法 采用正、反相硅胶柱色谱及高效液相色谱等多种技术进行分离纯化,并通过NMR、HR-ESI-MS以及量子化学计算鉴定化合物结构.通过CCK-8方法,评价了所有化合物对人非小细胞肺癌细胞A549体外抗增殖活性.结果 从大苞藤黄叶醋酸乙酯提取物中分离得到了 12个化合物,分别鉴定为1,3,5-三羟基-5,6,7,8-四氢(口山)酮(1)、1,3-二羟基-5-羰基-5,6,7,8-四氢(口山)酮(2)、1,3,5,6-四羟基-8-异戊烯基缩酚酸环醚(3)、松脂醇(4)、对羟基苯丙烯酸(5)、3-甲氧基-4,4',5-三羟基联苯(6)、(2S)-2,9-巨豆二羟基-6-烯-1-酮(7)、(2R)-2,9-巨豆二羟基-6-烯-1-酮(8)、(5Z)-9-羟基-1,5-巨豆二烯-2-酮(9)、2-氧代-α-紫罗兰醇(10)、黑麦草内酯(11)、gardeterpenone A(12).结论 化合物1、2为新的(口山)酮类化合物,化合物3为新的缩酚酸类化合物,分别命名为大苞藤黄甲素、大苞藤黄乙素和大苞藤黄丙素(garbractinones A-C);化合物7～10为降倍半萜类化合物,化合物11、12为单萜类化合物,均是首次从大苞藤黄叶中分离得到.所有化合物(50μmol/L)对A549细胞没有表现明显的抗增殖活性,其抑制率小于50％.

目的 分离甘肃祁连山冬虫夏草内生真菌,并探讨其代谢产物的生物活性.方法 采用3种不同培养基,用组织匀浆法和组织切块法对冬虫夏草不同部位内生真菌进行分离纯化.分别对其代谢产物的酶抑制活性、抗菌和抗氧化活性进行评价.利用形态学和分子生物学方法进行高活性菌株分类鉴定,利用现代色谱分离技术对高活性化学成分进行跟踪分离.结果 分离得到42株内生真菌,发酵得到84个待测样品,对腺苷脱氨酶(ADA)抑制活性>40%者占比52%.其中高活性菌株Aspergillus sp.C-1乙酸乙酯相样品ADA抑制活性>90%,对5种供试菌均有抑菌活性,二苯基苦基苯肼(DPPH)和羟自由基清除率均>85%,总还原力为(0.039±0.002)mg的L-抗坏血酸(VC)当量,分子鉴定与Aspergillus fumigatus有99%同源性.追踪分离出2个具有ADA抑制活性的化合物,其中C1被鉴定为大黄素甲醚(physcion),IC50为3.58 mmol/L.结论 甘肃祁连山冬虫夏草内生真菌资源丰富且次级代谢产物具有良好的生物活性,是活性物质发现的良好来源.

目的:何首乌致肝损伤与HLA-B?35∶01 等位基因密切相关,本研究借助机器学习和分子对接技术初步探索何首乌中潜在的HLA-B?35∶01 易感成分.方法:通过检索文献和相关数据库,收集不良反应(ADR)与人类的主要组织相容性复合体(HLA)等位基因具有相关性的药物作为阳性数据集,未发现相关性的作为阴性数据集,利用PaDEL-Descriptor软件计算分子描述符,采用朴素贝叶斯(Na?ve Bayes)构建二分类模型.利用模型预测何首乌中与HLA相关的ADR风险成分,并结合分子对接技术进一步分析其与HLA-B?35∶01 蛋白晶体的结合能力以及结合模式.结果:使用Na?ve Bayes算法构建的二分类模型平均准确率(ACC)为0.750,利用模型从何首乌41 种成分中识别出了28 种可能引起与HLA相关的ADR成分.分子对接结果显示何首乌中10 种成分与HLA-B?35∶01 均具有较好的结合能力.多肽对接结果分析,反式二苯乙烯苷、大黄素-1-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷 3 种成分能够使非 HLA-B?35∶01 呈递肽 P1(LPEPLPQGQLTAY)和P2(EECDSELEIKRY)的亲和性提高,并且与P1 和P2 间具有优势相互作用.结论:研究基于化学描述符构建分类预测模型,并结合分子对接技术预测何首乌中潜在的 3 种HLA-B?35∶01 易感成分,辅助何首乌特异质肝损伤(IDILI)成分研究.

目的:分析磨盘草石油醚部位在大鼠血浆中的成分,为磨盘草有效成分的分析提供依据.方法:采用液质联用技术分析磨盘草石油醚部位在大鼠血浆中的成分,选取不同时间点的血浆确定成分入血时间.结果:60 min抽取的血浆里具有明显的药物入血成分,与磨盘草石油醚部位样品的UPLC-QTOF-MS的比较,共有5个成分吸收入血,可将其归为4类,分别是葡萄糖苷酸类化合物、鞘脂类化合物、非离子表面活性剂类和类似于环氧千金-二萜醇-二乙酰苯乙酰酯的化合物.结论:运用UPLC-QTOF-MS技术鉴别磨盘草石油醚部位在大鼠血中移行成分,不仅得到了分离度良好的色谱峰,还可以节省时间及试剂的消耗.

目的 对不同品种藏药"榜间"HPLC指纹图谱进行研究,比较分析不同品种"榜间"的化学成分差异并进行分类探讨,为其质量控制、临床安全用药提供参考.方法 采用HPLC法建立不同品种的"榜间"指纹图谱,UPLC-Q-TOF-MS法分析主流品种化学成分的异同并确定特征鉴别峰,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对指纹图谱数据进行相似度评价.采用化学计量学进行聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA).结果 93批"榜间"样品共鉴别出11个色谱峰.HCA与PCA可将93批"榜间"分为2类,OPLS-DA可更为细致的将其分为3类,并根据VIP>1的原则筛选出4个主要差异成分.UPLC-Q-TOF-MS和化学计量学结果表明藏药"榜间"可根据化学型分为以大花龙胆为代表的含苯甲酰基片段的环烯醚萜化学型和以蓝玉簪龙胆为代表的单环环烯醚萜化学型,其中后者根据成分含量又可分为高山龙胆组亚型和多枝组华丽系亚型.化学型分类证明"榜间"传统分类有一定的物质基础科学性但也存在纰漏.结论 本次研究表明建立的HPLC指纹图谱可将复杂基原的"榜间"有效分类,以期为"榜间"质量标准的提升和临床安全用药提供有效参考.

目的 建立首乌藤药材高效液相色谱指纹图谱,并同时测定4种有效成分的含量,评价不同产地首乌藤药材质量的差异.方法 采用高效液相色谱法进行测定,色谱柱为Waters Xselect HSS T3 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.1％甲酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃,波长为290 nm,进样量为10 μL;建立15批首乌藤药材指纹图谱,通过对照品比对,对共有峰进行指认,并对4种有效成分的含量进行测定;对15批首乌藤药材指纹图谱进行相似度评价和主成分分析(PCA),并利用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)寻找不同产地首乌藤药材的差异性成分.结果 首乌藤药材指纹图谱有8个共有峰,指认出其中4个峰,分别为2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素和大黄素甲醚;除四川产区的样品外,同一省份样品的相似度值均大于0.80;PCA分析将15批首乌藤药材聚成5类,分别对应5个不同的产区,OPLS-DA法确定4个差异标志物.不同产地首乌藤主要化学成分含量差异很大,说明不同产地间首乌藤的化学成分存在较大的差异.结论 该方法能有效地分析不同产地首乌藤药材质量的差异性,为不同产地首乌藤药材质量的评价提供参考.

有毒中药效-毒转换机制的研究一直是中药合理应用的难点,以蒽醌类、二苯乙烯苷类成分及含有该类成分的中药为研究对象,梳理了这2类效-毒同源物质及其体内代谢规律与产物,分析了效-毒同源物质原型及其代谢产物的构-效与构-毒关系,整合并总结了含蒽醌、二苯乙烯苷类有毒中药的药效与毒性作用机制及毒-效转换关系与规律.为进一步阐释中药效-毒转换机制的研究,基于蛋白组学技术、药物靶点及药物作用机制研究方法,提出了以蒽醌类、二苯乙烯苷类成分为例的中药效-毒转换靶点与机制研究的策略与展望,为中药效-毒转换机制与转换规律的探究提供思路与方法借鉴.

本文采用顶空固相微萃(HS-SPME)和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术测定白花泡桐、兰考泡桐、楸叶泡桐、毛泡桐和白花泡桐天然杂种花中的挥发性成分,分析不同种间挥发性成分组成和相对含量,并对其进行聚类和主成分分析.结果表明,5个不同种泡桐花中共鉴定出45种挥发性物质,主要包括12种萜类、8种醇类、7种酯类、3种酚类、6种醛类、2种木脂素、2种苯类、2种酮类、2种烷烃和1种醚类共10类物质;5个泡桐种共有挥发性组分7种,包括1种萜类、2种醇类、1种酯类、2种酚类、1种酮类,且其特有物质分别为9、1、4、3、0种;5个泡桐种均以醇类化合物的相对含量最高,且醇类化合物中均以1-辛烯-3-醇和3-辛醇的相对含量较高;聚类分析结果表明楸叶泡桐和毛泡桐相似性较高,而白花泡桐与其他种泡桐相似性均较低;第一主成分(PC1)和第二主成分(PC2)之和为70.7％,PC1的主要贡献物质为酯类、烷烃、萜类、醚类、酮类、醇类和苯类,PC2的主要贡献物质为酚类、醇类、醛类、酮类、醚类、苯类和木脂素;偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)筛选出1-辛烯-3-醇、1,2,4-三甲氧基苯和顺式茴香烯等11种标志性差异挥发性成分.本研究可为不同种泡桐花挥发性成分的精准评价及高效利用提供参考依据.