新冠病毒等高致病性病原体必须在生物安全三级(BSL-3)实验室进行研究，并且毒株获取困难，给科研和防治工作的开展带来了限制。假病毒是一种嵌合型病毒颗粒，结构与野生病毒相似，具有类似活病毒的生物特性，但没有活病毒的致病性，可以在BSL-2实验室进行研究，并且可通过插入报告基因，实现假病毒的定量和定性检测。假病毒技术已经被广泛应用于中和抗体检测和疫苗免疫效果评价、病毒受体研究、动物模型建立、抗病毒药物筛选和核酸诊断试剂的质控等研究。为了更好的开展新型冠状病毒等新发、突发、烈性传染病病原体中和抗体检测、疫苗的研发与评价和药物筛选等研究，本文就假病毒技术研究进展和应用进行综述。

目的 探索汽化过氧化氢在动物生物安全三级实验室(ABSL-3实验室)终末消毒中对空间和风口型排风高效过滤器原位消毒的最优空间分布浓度和方案.方法 分别采用5、8、10和15 g/m3的过氧化氢对不同体积的空间进行消毒处理,通过化学指示卡和生物指示菌法对汽化过氧化氢灭菌效果进行验证,并观察其对室内彩钢板的腐蚀性;分别采用10、12和15 g/m3的过氧化氢对排风高效过滤器进行原位消毒并筛选最佳空间分布浓度.结果 10 g/m3的汽化过氧化氢可有效对≤200 m3的实验室空间进行消毒处理,对彩钢板无腐蚀.在消毒循环风机的辅助下,15 g/m3的汽化过氧化氢可对实验室风口型排风高效过滤器进行原位有效消毒.结论 汽化过氧化氢消毒机配合消毒循环风机的消毒方案可在ABSL-3实验室终末消毒时实现对房间和排风高效过滤器的同步消毒.

动物生物安全三级实验室(ABSL-3实验室)是可以开展高致病性病原微生物感染实验动物的生物安全防护水平为三级的高级别生物安全实验室.近年来随着新发、再发传染病的不断出现,高级别生物安全实验室在病原致病机理、药物和疫苗研发等方面发挥了越来越重要的硬件支撑作用,ABSL-3实验室的需求与日俱增.与此同时,对于能够胜任ABSL-3实验室工作的人员需求也越来越多,岗前培训的系统化、规范化、标准化成为进入ABSL-3实验室开展工作的人员生物安全的重要保证.ABSL-3实验室的岗前培训工作需要在特定的场所——模拟实验室内开展,因此有必要建立ABSL-3模拟实验室,并建立科学有效的运行标准和机制.本文全面介绍了 ABSL-3模拟实验室的设计、建设、运行及作用.

目的 依据《病原微生物菌(毒)种国家标准株评价技术标准》(WS/T812-2022)建立高等级生物安全实验室终末消毒评价用枯草芽孢杆菌标准菌株.方法 选择4株国内分离的枯草芽孢杆菌,通过对标准菌株菌落形态、染色特性、生化特性以及全基因组测序,对标准菌株进行生物学特性和分子特征分析;再将4种标准菌株制成一定浓度的菌片,与市售的菌片一起对动物生物安全三级实验室及关键防护设备进行终末消毒效果的评价.结果 候选4株菌株均鉴定为枯草芽孢杆菌,全基因组均为环形,不含质粒;在相同消毒条件下,与ATCC9372 一样,置于房间、生物安全柜和小鼠通风笼架4种候选菌株的菌片均可完全被杀灭.结论 本研究建立了高等级生物安全实验室终末消毒评价用枯草芽孢杆菌标准菌株,这些标准菌株的建立为消毒评价用菌株的国产化奠定了物质基础.

目的 研究汽化过氧化氢对生物安全三级实验室内具有内循环功能设备的消毒效果.方法 采用载体定性杀菌试验法,观察汽化过氧化氢对Ⅱ级A2型生物安全柜、换笼机、动物饲养隔离器的灭菌效果.结果 汽化过氧化氢发生器以12 ml/m3的喷雾量(30％过氧化氢),消毒作用120 min,对在密闭空间运行的Ⅱ级A2型生物安全柜、换笼机、动物饲养隔离器内不同部位染菌布片上的枯草杆菌黑色变种芽孢可达到完全杀灭.结论 汽化过氧化氢对具有内循环功能设备具有良好的消毒效果,可用于生物安全实验室相关设备的消毒灭菌.

目前,全球爆发新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染人类事件,疫苗研制、防治药物筛选及感染机制研究迫在眉睫,而相关研究又离不开实验动物.本文以在动物生物安全三级实验室(animal bio-safety level 3 laboratory,AB?SL-3)开展的SARS-CoV-2感染猕猴实验为例,结合工作实际,对生物安全管理工作中几个重要环节进行探讨,为正在或即将开展此项工作的同仁们提供参考.

ABSL-3实验室是国家应对新发再发传染病的生物安全体系基础支撑平台,是研究新型冠状病毒生物学特性、预防和治疗手段的重要硬件基础.新型冠状病毒的应急工作中,在人类对病毒有限认知的前提下,系统、规范化的生物安全管理措施是生物安全三级实验室高效、有序运行的重要保障,是规避和降低实验室意外事故发生的关键要素.本文就动物生物安全三级实验室内紧急开展新型冠状病毒动物实验活动的生物安全管理展开讨论,旨在为相关实验室的应急管理工作提供思路.

2019 新型冠状病毒的暴发给实验管理带来了新的挑战,鉴于目前形势下疫情的风险,建议各实验室务必提高工作中的风险意识,增强防护,加强管理,特提出以下建议:一、加强科研实验室开放管理1.加强入室人员的培训,除传统的实验室生物安全培训外,增加新型冠状病毒的传播和防控知识培训,并进行考核,未通过者不得进入实验室开展实验.2.新型冠状病毒培养、动物感染等实验操作应当在生物安全三级实验室内进行,实验室开展相关活动前,应当报经国家卫生健康委批准,取得开展相应活动的资质;未经培养的感染性材料的操作应当在生物安全二级实验室进行,同时采用生物安全三级实验室的个人防护;感染性材料或活病毒在采用可靠的方法灭活后进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等操作应当在生物安全二级实验室进行;分子克隆等不含致病性活病毒的其他操作,可以在生物安全一级实验室进行[1-2].

目前国内多个机构已建立了BSL-3实验室,这些实验室能够满足细胞水平和动物水平的病原微生物实验活动.医学病毒学生物安全三级动物实验室(ABSL-3)可分为小动物实验室和中(大)动物实验室.小动物实验室主要开展小鼠、大鼠、仓鼠等啮齿类动物的感染性实验活动;中(大)动物实验室主要开展小型猪、猴等实验.动物三级实验室特别是开展中(大)动物实验的高等级实验室,其实验室布局,设备设施,管理体系及流程会有很大的差别.本文从使用者的角度,通过所在机构医学病毒学生物安全三级动物实验室(ABSL-3)的建设与实践,对于筹备和建立以及使用过程中的所面对的问题以及应对,进行了提炼和归纳,分析和探讨,旨在为建设和使用医学病毒学高致病性生物安全三级动物实验室提供借鉴和参考.

目的 在动物生物安全三级(ABSL-3)实验室内以指示微生物对恒河猴饲养及冲洗过程所产生的浮游菌气溶胶进行模拟检测.方法 采用赛多利斯Airport MD 8便携式浮游菌采样仪对ABSL-3实验室猴笼地面排泄物及排水口滤篮处进行采样检测.检测方法包括:气溶胶活细胞检测及浮游菌PCR检测.结果 (1)静止状态下有<5个细菌生长;(2)饲养状态下,地面细菌培养计数达约30个/皿,酵母生长数为1个/皿,排水口的细菌计数>300个/皿,伴有>10个/皿酵母生长;(3)对比试验结果显示,严格按照清洁处理SOP操作较未遵循SOP而言,细菌及酵母生长明显减少,且在吸水垫上未检测到细菌DNA.结论 在ABSL-3实验室严格执行恒河猴饲养清洁SOP能够有效控制微生物污染的风险.