目的:探讨骨髓增生异常肿瘤(MDS)伴单纯5q－进展为肥大细胞白血病(MCL)-MDS患者的临床特征及诊治，并进行相关文献复习。方法:选择2021年4月6日广元市中心医院血液科收治的1例MDS伴单纯5q－进展为MCL-MDS的66岁男性患者为研究对象。采用回顾性分析方法，对本例患者的病史、临床特征、实验室及辅助检查结果等临床资料进行分析。根据患者临床表现、实验室及辅助检查结果，对其进行诊断和治疗。对本例患者的随访截至2022年12月9日。本研究以"骨髓增生异常综合征""骨髓增生异常肿瘤""肥大细胞白血病""原癌基因蛋白质类c-kit""5q－"" ASXL1""myelodysplastic syndromes""myelodysplastic neoplasm""mast-cell leukemia""proto-oncogene proteins c-kit"为中、英文关键词，在中国知网数据库、万方数据服务知识平台及PubMed数据库中检索MCL-MDS患者相关文献，并对文献报道的MCL-MDS患者进行分析和总结。文献检索时间为2001年1月1日至2022年12月8日。本研究获得广元市中心医院伦理委员会审批(批准文号：GYZXLL202379)，并与患者签署临床研究知情同意书。 结果:①本例患者因"气促、乏力5个月，加重1 +个月"入院。院外就诊时发现血红蛋白(Hb)值显著降低，予悬浮红细胞输注后症状好转，但是气促、乏力症状反复。②入院后本例患者血常规检查结果示，大细胞性贫血，Hb值为41 g/L，平均红细胞体积(MCV)为119.7 fL。腹部彩色多普勒超声检查结果示，轻度脾大。骨髓细胞形态学检查和骨髓病理活组织检查结果示，红系、粒系、巨核系均存在病态造血。核型分析结果显示5q－。MDS全基因组芯片检测结果显示，5q－嵌合。二代测序结果示，存在 ASXL1、 KIT突变。③本例患者被诊断为MDS伴单纯5q－、 KIT及 ASXL1突变。予地西他滨(10 mg/d×7 d，6周为1个疗程)+来那度胺(10 mg/d×21 d，4周为1个疗程)治疗7个疗程后，患者病情好转，脱离输血依赖，Hb值维持为88~90 g/L。2022年1月起继续接受来那度胺单药治疗(25 mg/d)，并定期复查，Hb值为80~90 g/L，无其他血细胞减少症状。13个月后患者出现皮疹、乏力、腹痛。再次行腹部彩色多普勒超声检查结果示，脾体积明显增大(长径为18 cm)。复查骨髓涂片细胞学、骨髓细胞流式细胞术(FCM)免疫分型及骨髓活组织检查发现异常肥大细胞。依据患者临床表现及相关检查结果，本例患者被诊断为MCL-MDS，予达沙替尼(100 mg/d)联合DA3+7(柔红霉素40 mg/d，d1~3+阿糖胞苷100 mg/d，d1~7)方案治疗。治疗后患者脾体积缩小，输血间隔时间延长。复查骨髓细胞形态学检查结果示，肥大细胞比例为8.5%。患者出院后因不能耐受胃肠道不良反应自行停用达沙替尼。截至随访结束，患者仍存活。④按照本研究设定的文献检索策略，纳入2篇MCL-MDS相关文献。共计纳入包括本研究1例患者在内的3例由MDS进展为MCL-MDS病例。其中，1例患者未行 KIT突变检测，伴t(9；22)及20q－，予泼尼松50 mg/d治疗，生存期为2个月。另1例患者不伴 KIT D816V，染色体核型正常，予伊马替尼100 mg/d治疗，生存期为3个月。本研究患者伴5q－、 ASXL1及 KIT突变，予达沙替尼100 mg/d联合DA3+7方案，生存期>5个月。 结论:本例患者为MDS进展为MCL-MDS，考虑与伴 KIT及 ASXL1突变相关。MCL-MDS患者预后非常差，单用糖皮质激素、酪氨酸激酶抑制剂(TKI)疗效欠佳，TKI联合化疗可能延长患者生存期。

目的:系统评价C-KIT基因突变与儿童核心结合因子相关急性髓系白血病（CBF-AML）预后的关系。方法:以"KIT""Acute Myeloid Leukemia""Children"为英文检索词检索PubMed数据库；以"KIT""急性髓系白血病""儿童"为检索词检索中国期刊全文数据库（CNKI）、中国生物医学文献数据库（CBM）、维普数据库、万方数据库，检索时间为建库至2020年10月1日。文献经过严格筛选后纳入分析；根据基因检测明确有无基因改变，分为C-KIT突变组和野生组，分析两组完全缓解（CR）率、无事件生存（EFS）率、总生存（OS）率的差异。结果:共纳入6篇文献，其中英文文献4篇，中文文献2篇，共667例患者。儿童CBF-AML患者中，C-KIT突变组与野生组EFS率比较，差异有统计学意义（ HR=2.40，95% CI 1.47~3.89， P=0.001）；两组CR率和OS率差异均无统计学意义（ OR=0.93，95% CI 0.48~1.80， P=0.830； HR=1.92，95% CI 0.96~3.83， P=0.065）。 结论:C-KIT基因突变可能是儿童CBF-AML患者预后不良的危险因素。

目的:探讨维奈克拉联合阿伐替尼治疗伴KIT基因突变复发难治急性髓系白血病（AML）的效果。方法:回顾性分析苏州沧浪医院2022年10月及2022年11月收治的2例接受维奈克拉联合阿伐替尼治疗的伴KIT基因突变AML患者的临床资料，并复习相关文献。结果:2例患者均为女性，分别为53、17岁，均为高危复发难治AML，均伴KIT基因突变。例1诊断为AML-M 2，基因检测示ASXL1、KIT、RUNX1基因突变均阳性；患者移植后再次复发，接受维奈克拉联合阿伐替尼治疗达到形态学无白血病状态（MLFS）。例2诊断为AML，检测到RUNX1-RUNX1T1（AML1-ETO）融合基因及KIT、DX15基因突变；复发后接受维奈克拉联合阿伐替尼方案治疗，明显降低了肿瘤负荷，桥接异基因造血干细胞移植后再次获得完全缓解。 结论:伴KIT基因突变AML具有一定的异质性，部分患者治疗难度大，预后极差；复发患者选择维奈克拉联合阿伐替尼治疗达MLFS或完全缓解后，桥接（二次）造血干细胞移植可作为此类患者的较好治疗选择。

目的:探讨干扰素、白细胞介素2（IL-2）联合来那度胺治疗微小残留病（MRD）阳性老年人急性髓系白血病（AML）的效果。方法:回顾性分析郑州大学附属肿瘤医院2019年12月收治的1例应用干扰素、IL-2联合来那度胺治疗的持续MRD阳性老年AML患者的临床资料，并复习相关文献。结果:患者为72岁男性，经实验室相关检查、流式细胞术、基因检测等确诊为AML-M 2b（伴c-kit突变，低危组）。行标准VA（维奈克拉、阿扎胞苷）方案治疗1个周期未缓解，IA（伊达比星、阿糖胞苷）方案再诱导1个周期后达完全缓解（CR）；后应用中剂量阿糖胞苷、D-CAG（地西他滨、阿糖胞苷、阿柔比星、粒细胞集落刺激因子）方案巩固治疗，其间AML1-ETO融合基因进行性升高；给予程序性死亡受体1（PD-1）抑制剂为基础的联合治疗，AML1-ETO融合基因维持阴性达1个月余，后再次升高；给予患者沙利度胺联合干扰素、IL-2方案治疗，AML1-ETO融合基因维持阴性达7个月余，后再次升高，将沙利度胺调整为来那度胺继续治疗。截至2023年5月，AML1-ETO融合基因再次维持阴性2年。 结论:干扰素、IL-2联合来那度胺对于逆转MRD阳性的效果显著且不良反应小，可成为治疗难治性AML的一种新选择。

目的:探究磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路在胰高血糖素样肽链-1(GLP-1)拮抗晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导妊娠滋养细胞凋亡的保护作用机制。方法:体外培养妊娠滋养细胞HTR-8/SVneo，将细胞分为对照组、AOPP组、GLP-1组、AOPP+GLP-1组、AOPP+GLP-1+LY294002组。对照组采用1640培养基培养；AOPP组采用200 μg/ml AOPP刺激；GLP-1组采用50~100 nmol/L GLP-1刺激1 h后进行实验；AOPP+GLP-1组采用200 μg/ml AOPP刺激48 h后再加入GLP-1(50~100 nmol/L)1 h后进行实验；AOPP+GLP-1+LY294002组在AOPP+GLP-1组干预基础上再加入PI3K抑制剂LY294002。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PI3K/Akt通路相关蛋白磷酸化蛋白激素B(p-Akt)的表达。CCK-8比色法检测细胞活力。酶联免疫吸附法(ELISA)检测凋亡启动蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(caspase-9)，caspase-3的含量，及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyto-C)的含量。结果:AOPP刺激后，AOPP组的p-AKT表达低于对照组( P<0.05)；经50、100 nmol/L两个浓度GLP-1干预后，AOPP+GLP-1组p-AKT表达显著高于AOPP组(均 P<0.05)。经100 nmol/L GLP-1干预24、48 h后，AOPP+GLP-1组p-AKT表达显著高于AOPP组(均 P<0.05)。AOPP刺激后，AOPP组的细胞活力低于对照组( P<0.05)；经GLP-1干预后，AOPP+GLP-1组细胞活力显著高于AOPP组( P<0.05)，加入PI3K抑制剂LY294002处理后，AOPP+GLP-1+LY294002组的细胞活力显著低于AOPP+GLP-1组( P<0.05)。ELISA结果发现，AOPP刺激后，AOPP组的凋亡启动蛋白caspase-3、caspase-9，凋亡蛋白Bax及Cyto-c含量高于对照组(均 P<0.05)，抗凋亡蛋白Bcl-2含量低于对照组(均 P<0.05)；经GLP-1干预后，AOPP+GLP-1组caspase-3、caspase-9、Bax及Cyto-c含量显著低于AOPP组(均 P<0.05)，Bcl-2含量高于AOPP组( P<0.05)，加入PI3K抑制剂LY294002处理后，AOPP+GLP-1+LY294002组的Bcl-2含量低于AOPP+GLP-1组，Bax及Cyto-c含量高于AOPP+GLP-1组(均 P<0.05)。 结论:GLP-1可能介导PI3K/Akt通路拮抗AOPP诱导妊娠滋养细胞HTR-8/SVneo的凋亡。

目的:探索高糖培养下内皮细胞c-Casitas B谱系淋巴瘤原癌基因蛋白(c-Cbl)表达与活性变化对其成管的影响。方法:将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分别以5.5 mmol/L正常浓度葡萄糖(NG)、15.2 mmol/L中等浓度葡萄糖(MG)和25.0 mmol/L高浓度葡萄糖(HG)的培养基处理24 h，采用锁核酸修饰的反义寡核苷酸间隔物(LNA Gapmers)下调c-Cbl表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测c-Cbl表达及磷酸化水平。侵袭小室(Transwell)、细胞计数试剂盒(CCK-8)试验检测细胞迁移、增殖能力，成管实验判断细胞的成管能力，并通过 t检验评估两组间差异。 结果:HG组细胞c-Cbl在Y731位点的相对磷酸化水高于NG组(3.27±0.18比1.00±0.19， t＝15.140， P<0.01)，HG组细胞迁移数低于NG组[(38.33±6.51)个比(180.67±16.17)个， t＝-14.147， P<0.01]，HG组CCK-8吸光度值低于NG组(0.45±0.05比1.25±0.05， t＝-19.596， P<0.01)，HG组细胞成管水平低于NG组[相对总长度(0.42±0.08)比(1.00±0.11)；相对结节数(0.36±0.07)比(1.00±0.07)；相对网眼结构(0.32±0.08)比(1.00±0.10)； t＝-7.119、-10.870、-9.114， P<0.01]。另外，高糖下调c-Cbl(HG+c-Cbl KD)组CCK-8吸光度值高于高糖对照(HG+NC)组(0.81±0.06比0.46±0.06， t＝6.906， P<0.01)、其迁移细胞数也高于HG+NC组[(85.00±9.00)个比(43.67±9.30)个， t＝5.534， P<0.01]，并且HG+c-Cbl KD组细胞的成管能力高于HG+NC组[相对总长度(0.72±0.05)比(0.42±0.10)；相对结节数(0.64±0.08)比(0.33±0.12)；相对网眼结构(0.62±0.08)比(0.34±0.08)； t＝4.874、3.734、4.266， P<0.05]。 结论:高糖培养下c-Cbl磷酸化激活可抑制血管内皮细胞成管能力。

目的 探索仁青常觉通过干细胞因子(SCF)/细胞生长因子受体(c-kit)基因信号通路对胃动力低下大鼠的效应及机制.方法 无特定病原体(SPF)级SD大鼠30只,用随机数字表法分为5组(每组 6 只):模型组;阳性对照(西沙必利 0.4 mg/ml)组;仁青常觉低剂量(0.1 g/kg)组;仁青常觉中剂量(0.2 g/kg)组;仁青常觉高剂量(0.4 g/kg)组.建立胃动力低下大鼠模型,检测小肠推进率.酶联免疫吸附试验测定血液SCF的浓度;并对5-羟色胺(5-HT)和c-kit蛋白的表达进行免疫组织化学检测.结果 与阳性对照组相比,模型组大鼠仁青常觉高剂量组大鼠小肠活动推进率、5-HT蛋白、血清中SCF含量及c-kit蛋白质均明显增高(P<0.01).结论 高剂量仁青常觉治疗可以缓解大鼠胃动力低下的情况.其机制可能与信号通路SCF/c-kit有关.

目的 构建人泛素连接酶Cbl-b基因短发卡RNA(shRNA)重组慢病毒载体,探讨其对人黑素瘤A375细胞生物学行为的影响.方法 设计并合成3条沉默Cbl-b基因的特异性shRNA及1条阴性对照shRNA,构建慢病毒载体.将A375细胞分成5组,即分别用3条特异性shRNA转染的CBLB-shRNA-1组、CBLB-shRNA-2组、CBLB-shRNA-3组,阴性对照组(阴性对照shRNA转染),空白对照组(转染空载体).应用实时荧光定量PCR和Western印迹检测转染后72 h各组A375细胞沉默效率;CCK8法检测转染后24、48、72及96 h细胞增殖能力;流式细胞仪检测转染后72 h细胞凋亡情况、细胞周期,Transwell法检测转染后72 h细胞侵袭能力.结果 成功构建3条Cbl-b shRNA慢病毒载体,Western印迹示CBLB-shRNA-3蛋白沉默效率最高.CCK8检测表明,CBLB-shRNA-3组A375细胞增殖能力在转染后72 h和96 h较阴性对照组、空白对照组明显降低(均P＜0.01).流式细胞仪检测示,CBLB-shRNA-3组凋亡率[(22.73±6.58)％]明显高于阴性对照组[(6.08±1.35)％]和空白对照组[(6.34±1.07)％,均P＜0.01].CBLB-shRNA-3组G1期细胞比例明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜ 0.01),而S期细胞比例明显低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.01).Transwell检测示,阴性对照组、空白对照组和CBLB-shRNA-3组转染后72 h时穿膜细胞数分别为76.60±1.82、73.20±3.83、19.60±1.14,差异有统计学意义(F=794.50,P＜0.01).结论 成功构建能高效沉默Cbl-b蛋白的CBLB-shRNA-3重组shRNA慢病毒载体,其可促进A375细胞凋亡,抑制A375细胞增殖、细胞周期进程和侵袭能力.

目的 探讨乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)、C-KIT与子宫内膜息肉发病的关系.方法 选择子宫内膜息肉患者60例和同期体检的无子宫内膜病变的妇女(对照组)60例,采用病理学方法进行分期(分泌期和增生期各30例),采用免疫组织化学方法检测ALDH1和C-KIT基因和蛋白质的表达情况.结果 增生期和分泌期子宫内膜息肉组ALDH1、C-KIT基因和蛋白质的表达阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ALDH1、C-KIT与子宫内膜息肉发病有一定的关系,研究ALDH1与C-KIT基因和蛋白质的表达情况可以实时监测子宫内膜息肉的发病,对临床有重要意义.

目的 研究标本类型对急性髓系白血病(AML)患者c-KIT基因外显子17突变检测结果的影响.方法 回顾性研究.收集2016年6月至2018年8月送检北京大学人民医院的骨髓标本共51份,采集自37例AML患者初诊或治疗后,其中男17例,女20例,送检时中位年龄33岁(1～82岁).t(8;21)AML 24例,inv(16)/t(16;16)AML11例,非CBF-AML2例.标本同时提取RNA和DNA,采用Sanger测序法分别检测cDNA及DNA标本的c-KIT外显子17突变,比较配对标本的检测结果.结果 (1)51对标本中14对均检出c-KIT突变,17对均未检出突变,其余20对均为cDNA检出而DNA未检出突变,不一致率为39.2％,cDNA突变检出率明显高于DNA标本(66.7％vs 27.5％,χ2=15.74,P=0.000073).(2)t(8;21)AML、inv(16)AML及非CBF-AML患者的配对标本均存在突变结果不一致现象,不一致率分别为36.4％(12/33)、27.2％(3/11)和71.4％(5/7).(3)治疗后标本的不一致率明显高于初诊标本(72.7％vs 13.8％,χ2=18.22,P=0.00003).(4)5例具有c-KIT突变患者治疗随访中均可见cDNA与DNA标本结果不一致现象.结论 对于Sanger测序法检测AML患者c-KIT外显子17突变,cDNA比DNA标本具有更高的检出率,在治疗后尤其普遍.