目的 验证运用有机溶剂/去污剂(S/D)处理法和膜过滤法对人凝血因子Ⅸ中辛德毕斯病毒(Sindbis virus)和猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)的灭活/去除效果.方法 采用S/D处理法灭活人凝血因子Ⅸ中添加的Sindbis virus,噬斑滴定法检测灭活前后的病毒滴度;膜过滤法去除添加的PPV,细胞病变法检测去除前后的病毒滴度.结果 经S/D处理法灭活后,3 批人凝血因子Ⅸ中Sindbis virus降低量分别为>4.62 lgPFU/mL、>4.64 lgPFU/mL、>4.50 lgPFU/mL.经Planova 15N膜过滤后,3 批人凝血因子Ⅸ中PPV降低量分别为≥4.50 lgTCID50/0.1 mL、≥4.56 lgTCID50/0.1 mL、≥4.38 lgTCID50/0.1 mL.结论 通过对指示病毒的验证效果评估,证明运用S/D法和膜过滤法对人凝血因子Ⅸ中的Sindbis virus和PPV均有较好的灭活/去除效果.

目的:探讨京尼平交联对采用不同方法[曲拉通处理法（TPM）和去污剂联合酶法（DEM）]获得的兔脱细胞气管基质生物相容性的影响。方法:分别采用TPM和DEM对新西兰兔气管行脱细胞处理，随后利用京尼平进行交联。万能拉力试验机测定各气管样本的力学性能，扫描电镜观察其结构，细胞接触毒性实验检测其细胞毒性。将15只健康无特定病原体级成年新西兰兔按随机数字表法分为原生气管移植组、京尼平交联TPM脱细胞气管基质移植组和京尼平交联DEM脱细胞气管基质移植组，每组5只。移植后30 d处死各组动物，获取移植物样本，采用苏木素-伊红染色和CD68分子免疫组化染色观察样本的微观结构。结果:生物力学测试结果表明，京尼平交联脱细胞气管基质的力学性能与原生气管相似。扫描电镜结果显示，京尼平交联脱细胞气管基质的结构更为致密，且京尼平交联DEM脱细胞气管基质外表面形成的网孔状超微结构有利于细胞黏附。细胞接触毒性实验结果显示，京尼平交联DEM脱细胞气管基质的生物相容性更佳。同种异体气管移植实验与组织学染色结果表明，与京尼平交联TPM脱细胞气管基质相比，京尼平交联DEM脱细胞气管基质的免疫原性更低。结论:京尼平可在不引起体内炎症反应的基础上改善脱细胞气管基质的超微结构，且京尼平交联DEM脱细胞气管基质具有更好的生物相容性与更低的免疫原性，适合用于组织工程气管替代。

放射性核素体表污染去除是防止放射性核素进一步损伤人体的关键措施，笔者结合国内外对放射性核素体表污染去除的策略，总结了目前已上市和正在研究的放射性核素体表污染去除制剂，从壳聚糖衍生物、有机磷酸类、高分子聚合物、有机骨架材料等几个方面综述了有潜力成为放射性核素体表污染去除的候选制剂，旨在为后续研究放射性核素体表污染去除新制剂提供参考。

放射性核素体表污染去除是防止放射性核素进一步损伤人体的关键措施,笔者结合国内外对放射性核素体表污染去除的策略,总结了目前已上市和正在研究的放射性核素体表污染去除制剂,从壳聚糖衍生物、有机磷酸类、高分子聚合物、有机骨架材料等儿个方面综述了有潜力成为放射性核素体表污染去除的候选制剂,旨在为后续研究放射性核素体表污染去除新制剂提供参考.

蛋白质复合物参与植物多种次生代谢物的合成,其分离对阐明植物次生代谢及提高体外催化效率至关重要.该研究构建了过表达丹参酮合成途径关键酶CYP76AH1的转基因毛状根株系,通过Western杂交筛选得到高表达CYP76AH1蛋白的丹参转基因毛状根,并以此作为后续提取丹参酮合成途径中蛋白质复合物的组培材料.通过优化蛋白提取缓冲液中的去污剂种类和浓度,筛选出含0.5％ Triton X-100的缓冲液为最佳提取缓冲液,并分离得到相对大量的可溶性CYP76AH1蛋白质.该研究为后续进一步分离纯化与CYP76AH1相互作用的蛋白质复合物奠定了基础,也为深度解析丹参酮合成代谢通路提供思路.

目的 探讨保留软骨的去细胞全喉支架的制备方法及在大鼠喉软骨缺损中的修复效果.方法 取6只大鼠用于支架的制备,分离颈总动脉,结扎分支,经颈总动脉灌注去污剂(SDS、Triton X-100、PBS离子型),3只大鼠去除喉黏膜、肌肉、韧带的同时,保留细胞外基质和软骨细胞制备保留软骨的去细胞全喉支架,其余3只用于制备对照组支架.另取34只大鼠,建立0.5 cm×0.5 cm全层喉软骨缺损模型,根据处理方法不同随机分为对照组(n=17)和保留软骨组(n=17),对照组植入未经处理的异体喉骨支架,保留软骨组植入保留软骨的去细胞全喉支架,比较两组的修复效果.结果 ①两种支架经过脱细胞灌注处理后,全喉大体结构完整,体积未发生明显的变化;②保留软骨的去细胞全喉支架未见表面细胞组织填充,可见胶原、细胞外基质成分组成的腔隙,细胞之间结构紧密,存在于会厌、声带、环状软骨等表面;对照组支架组织中的细胞成分被完全去除,但是依稀可见网状连接,结构之间不紧密;③免疫荧光结果显示:保留软骨的去细胞全喉支架除了有肌肉、软骨细胞外,主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ、MHC-Ⅱ染色均为阴性;对照组支架免疫荧光染色下MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ染色均为阳性;④保留软骨组大鼠修复6 w后缺损部位存在少许不成熟的软骨细胞,极少的软骨形成陷窝,表面存在纤维组织及炎症细胞;修复12 w 后缺损部位得到修复,形成软骨陷窝,炎症反应减少;对照组修复6 w后缺损部位周围软骨细胞较少,缺损部位与周围组织边界明显,存在大量炎症细胞;修复12 w后存在少量纤维组织,存在炎症因子.结论 保留软骨组植入保留软骨的去细胞全喉支架在喉软骨缺损中具有良好的修复效果.

目的:比较离子型洗涤剂十二烷基磺酸钠(SDS)与脱氧胆酸钠针对肺去细胞支架制备的性能,寻找一种合适的肺去细胞方法以得到模拟可以促进细胞附着和分化天然细胞外基质的肺功能架构.方法:SD大鼠随机分成正常对照组、去细胞SDS组、去细胞脱氧胆酸钠组,分别取心、肺联合体,两组去细胞组均经右心室置入留置针至肺主动脉.去细胞SDS组使用肝素、Triton X-100、SDS溶液和去离子水依次灌注;去细胞脱氧胆酸钠组使用肝素、Triton X-100、脱氧胆酸钠溶液和去离子水依次灌注.各组分别采用扫描电镜观察支架结构;H-E染色、Masson三色染色观察残留细胞、细胞核成分;免疫荧光染色观察肺组织层黏连蛋白、纤维连接蛋白保留情况,并进行DNA含量测定.结果:扫描电镜显示去细胞SDS组支架肺泡结构较去细胞脱氧胆酸钠组完整;H-E染色显示去细胞SDS组肺支架未见明显细胞及细胞核成分残留,去细胞脱氧胆酸钠组可见少量细胞核成分残留;Masson染色显示去细胞SDS组弹性纤维保留优于去细胞脱氧胆酸钠组;免疫荧光显示去细胞SDS组层黏连蛋白和纤维连接蛋白结构较去细胞脱氧胆酸钠组完整,保留度较高;去细胞SDS组DNA含量为(35.28±8.20) ng/mg,明显低于去细胞脱氧胆酸钠组(52.33±7.67) ng/mg,差异有统计学意义.结论:两种去污剂均可有效清除肺内细胞成分,较好地保留细胞外基质,其中SDS溶液灌注法优于脱氧胆酸钠溶液灌注法.

目的 研制一种可以有效清除皮肤钴(Co2+)、锰(Mn2+)放射性物质沾染的去污剂.方法 采用单因素考察和正交试验,研究去污剂配方组成;采用国家标准《消毒技术规范》中的皮肤刺激试验考察去污剂配方的皮肤刺激强度,按该标准中的评分方法评价其刺激性;采用常规去污沐浴露制备工艺制备去污剂;采用国标推荐的化学方法测定去污剂pH值、总活性物质、乙二胺四乙酸(EDTA)含量和稳定性;采用志愿者手背皮肤进行CO2+和Mn2+稳定性核素沾染的去污效率测定.结果 筛选获得放射性沾染皮肤去污剂配方组成,制备获得高效去污剂.理化性质分析显示去污剂pH值为6.99,总活性物质含量为20.49％,EDTA含量为5.99％.稳定性试验结果显示,去污剂经-5℃和40℃环境放置24h后,无异味,无沉淀和变色现象,产品透明不混浊.皮肤冷态去污试验结果显示,去污剂对CO2+和Mn2+皮肤沾染的去污效率(分别为103.13％±0.05％和100.62％±0.09％)明显高于蒸馏水对照的去污率(分别为81.77％ ±0.23％和79.63％ ± 0.23％,P＜0.01).结论 所研制的放射性沾染皮肤去污剂对冷态钴、锰核素沾染具有显著的去污效果,有望开发成放射性沾染皮肤的高效去污剂.

背景:制备脱细胞肺支架的一个困难在于必须充分去除细胞同时尽可能保留细胞外基质.灌注去污剂-核酸酶法已被广泛应用于脱细胞支架的制备.目的:对比脱氧胆酸钠和十二烷基硫酸钠两种去污剂用于制备脱细胞肺支架的效果.方法:取出24只雄性SD大鼠肺脏,分3组,正常对照组不进行任何干预;脱氧胆酸钠组灌注去污剂脱氧胆酸钠联合核酸酶,制备脱细胞肺支架;十二烷基硫酸钠组灌注去污剂十二烷基硫酸钠联合核酸酶,制备脱细胞肺支架;取3组肺组织,进行组织学染色、免疫荧光染色及DNA含量测定.将A549细胞分别接种于两组脱细胞肺支架上培养7 d,进行苏木精-伊红染色.将两组脱细胞肺支架分别埋于SD大鼠背部皮下,2周后进行移植组织Masson 染色.结果与结论:①正常对照组肺组织布满细胞,两脱细胞肺支架均没有残留的细胞和细胞核,但脱氧胆酸钠组肺支架内肺泡形态结构较十二烷基硫酸钠组完整;两组肺支架的DNA含量均低于正常对照组(P < 0.01);②培养7 d,两组肺支架上的细胞均是由边缘向组织中间生长、浸润,脱氧胆酸钠组肺支架内的细胞生长、浸润速度明显优于十二烷基硫酸钠组;③肺支架移植2周后,十二烷基硫酸钠组肺支架与周围组织融合欠佳,边界清楚,可见大量细胞浸润,分布较均匀,血管内血细胞清晰可见;脱氧胆酸钠组肺支架内新生血管数量明显多于十二烷基硫酸钠支架,并且新生血管直径更大;④结果表明与十二烷基硫酸钠相比,采用去污剂脱氧胆酸钠制备的脱细胞肺支架生物相容性更好,与周围组织融合速度更快,细胞浸润和新生血管形成更明显.

[目的]研制一种回收式皮肤洗消装置及配合使用的去污剂,对β表面污染进行去除(不包括T),在实现既能快速有效消除污染的同时,又不至于造成二次污染.[方法]以市售中性洗涤剂为溶剂,配制EDTA-2Na质量分数为3％的洗消剂,再以去离子水为溶剂,分别配成质量分数为0.15％、0.30％和0.50％的洗消液,利用设计的回收式洗消装置,对受沾染的新鲜去毛猪皮进行洗消,分别测定去污效果.受污染猪皮表面污染值事先已设置为50、100、200、1 000 Bq/cm24种,各3块.[结果]去污过程中,洗消装置回收压力控制有效,全程无废水流出,12块去毛猪皮的污染去除率均在90％以上,去污因子在10以上.[结论]该回收式洗消装置及去污剂具有较理想的去污效果,且在操作过程中无废水流出,不对环境造成二次污染.