目的 分析梧州地区女性人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染率、亚型分布及其年龄分布特点.方法 采取随机抽样方法,抽取2019年7月至2022年7月在梧州市工人医院门诊受检的2 237例女性宫颈分泌物标本.采用聚合酶链反应(PCR)-反向杂交法进行HPV基因分型检测,分析HPV感染率、亚型分布,并将所有受检者分为10个年龄组,分析不同年龄组女性的HPV感染情况.采用SPSS 25.0软件进行统计分析.结果 ①梧州市16～82岁妇女HPV的感染率为34.3％.②HPV感染亚型的分布特点:总体感染率由高到低位于前 5 位的亚型分别为 HPV-52(29.6％)、HPV-16(15.1％)、HPV-58(14.2％)、HPV-51(9.6％)和HPV-53(9.6％);以单一感染(76.2％)和双重感染(17.3％)为主.③ HPV感染的年龄分布特点:不同年龄组HPV感染率差异有统计学意义(x2=24.53,P=0.004),其中≥61岁组感染率最高(44.7％),其次为21～25岁组(44.4％),再次是≤20岁组(41.2％);感染率最低为41～45岁(25.6％),其余年龄段组感染率较为均衡,约34.0％.结论 梧州地区女性HPV感染以52、16、58亚型为主,且不同年龄段女性HPV感染存在差异,在16-82岁年龄段,提示应加大对25岁以下及60岁以上女性的筛查力度.

目的:分析山东省三个城市食源性腹泻病例中胃肠炎病毒病原谱的分布和流行特征。方法:于2017年1—12月，以山东省济南、烟台和临沂市的6家哨点医院为研究现场，收集1 397例食源性腹泻病例的粪便标本，同时获取其基本信息和临床症状。采用双重荧光定量RT-PCR分别检测如病毒基因Ⅰ组（NoV GⅠ）和Ⅱ组（NoV GⅡ）、札如病毒（SaV）和人星状病毒（HAstV），采用单重荧光定量RT-PCR检测轮状病毒A组（RVA），采用荧光定量PCR检测肠道腺病毒（EAdV），对病毒的特异性片段进行测序、分型。比较不同特征病例胃肠炎病毒阳性率以及阳性和阴性病例间临床症状的差异。结果:年龄 M（ P25， P75）为23（1，42）岁；以男性为主，占57.48%（803例）；≤5岁儿童居多，占36.36%（508例）。胃肠炎病毒阳性率为33.93%（474例），济南、临沂和烟台市分别为32.03%（147/459）、41.54%（189/455）和28.57%（138/483）（ P<0.001）；NoV GⅡ组的阳性率最高，为16.54%（231例），5月（24.75%，50/202）和6月（19.59%，38/194）出现高峰，以GⅡ.P16/GⅡ.2型（48.28%，56/116）为主。阳性病例中，44.51%（211/474）出现呕吐症状，高于阴性病例（34.13%，315/923），差异有统计学意义（ P<0.001）。 结论:山东省食源性腹泻病例中男性、5岁以下儿童居多；NoV GⅡ流行强度较高，发病高峰为春夏季，病毒性胃肠炎临床症状不典型。

目的:验证末端尿苷基转移酶(TUT4)通过影响miR132/212簇的尿苷化作用影响食管上皮细胞(HEEC)的放射敏感性。方法:本研究通过PCR的方法检测0、2、4、6和8 Gy X射线照射后0、6、18、24和48 h HEEC中TUT4的表达。将细胞分为阴性对照组、下调TUT4表达组(shTUT4组)、单纯6 Gy照射组(6 Gy组)、6 Gy照射+下调TUT4表达组(6 Gy+shTUT4组)分别检测TUT4对细胞放射敏感性、细胞增殖、细胞周期、线粒体损伤、氧自由基产生的影响；通过PCR检测下调TUT4表达对miR132/212尿苷化的影响；克隆形成和增殖实验检测过表达miR132/212及miR132/212+UUU(末端添加3个尿嘧啶的miR132/212)时HEEC的放射敏感性；增殖实验检测在下调TUT4表达且过表达miR132/212及尿苷化miR132/212时HEEC的增殖情况。结果:PCR结果显示，2、4、6和8 Gy X射线照射后TUT4表达增加，差异有统计学意义( t＝12.84、62.06、27.86、32.43， P<0.05)。下调TUT4表达可增加HEEC的放射敏感性， D0、 Dq、 SF2值分别为0.79、1.61、0.47，与对照组比较差异有统计学意义( t＝13.2、5.85、7.31， P<0.05)，放射增敏比(SER D0)为1.41；且经6 Gy照射后，低表达TUT4组细胞增殖减少( t＝7.12、13.63， P<0.05)、S期细胞增加( t＝11.98， P<0.05)、线粒体损伤增加( t＝11.98， P<0.05)、氧自由基产生增加( t＝15.65， P<0.05)。进一步研究结果表明，下调TUT4表达可使miR132/212表达增加，miR132/212+UUU表达减少( t＝27.90、60.99， P<0.05)；而过表达miR132/212和miR132/212+UUU也可影响HEEC的放射敏感性，SER D0分别为1.20、0.71。双重转染实验证明，TUT4低表达且miR132/212过表达细胞的增殖能力较单纯TUT4低表达时更弱( t＝4.76、7.65， P<0.05)；同时TUT4低表达且过表达miR132/212+UUU时细胞增殖能力较单纯TUT4低表达更强，差异有统计学意义( t＝7.22， P<0.05)。 结论:X射线可增加HEEC中TUT4的表达，TUT4可降低HEEC放射敏感性、减轻放射损伤，其机制与miR132/212的尿苷化相关。

目的:探讨高通量基因拷贝数变异（CNV）检测在前庭水管扩大（EVA）诊断中的应用价值。方法:设计一种基于双重连接和多重荧光PCR的高通量连接探针扩增（HLPA）分析方法，对2014年5月至2016年12月就诊于中南大学湘雅医院的46例非综合征型EVA患者行3个EVA相关基因（SLC26A4、FOXI1和KCNJ10基因）的拷贝数变异检测，用GeneMapper v4.1进行数据分析。对照组为100名听力正常，无其他遗传疾病的健康志愿者。结果:共检测46例EVA患者，男32例，女14例，年龄1~26岁。在4例EVA患者中检测到SLC26A4基因1~3号外显子缺失（4/46，8.7%），该CNV在健康人群DGV（人类基因组结构变异数据库）以及文献中未见报道，且在100名正常对照中未检出。未检测到FOXI1和KCNJ10基因的拷贝数变异。结论:本研究应用HLPA技术以EVA的已知基因为靶向区域进行CNV检测，是对耳聋基因点突变检测的补充，有助于实现EVA的精准基因诊断。

目的:建立重组人甘露聚糖结合凝集素蛋白（M1蛋白）磁珠富集病原体结合重组酶辅助聚合酶链式反应（RAP）巢式核酸扩增技术检测血液中白色念珠菌和热带念珠菌的方法，以实现对白色念珠菌血症和热带念珠菌血症的早期诊断。方法:针对白色念珠菌和热带念珠菌的内转录间隔区的高度保守区域的设计引物探针，建立检测白色念珠菌和热带念珠菌的RAP检测方法；用梯度稀释的标准菌株核酸和临床常见的血流感染病原体核酸检验灵敏度、重复性、特异性；用模拟样本进行M1蛋白磁珠富集血浆白色念珠菌和热带念珠菌RAP和实时荧光PCR的检测，并对结果进行比较。结果:建立的双重RAP方法灵敏度为2.4~2.8拷贝/反应，重复性好，特异性高；M1蛋白磁珠富集病原体结合双重RAP方法可在4 h内完成对血浆中白色念珠菌和热带念珠菌的检测，<10 CFU/ml的病原体富集后进行RAP检测样本数较PCR检测样本数多。结论:本研究建立了检测血液中白色念珠菌和热带念珠菌的双重RAP方法，该检测方法具备准确、快速、减少污染物的优点，在念珠菌血症快速检测中具有较好的应用潜力。

目的:探讨缺氧条件下，中介素(IMD)和肾小球系膜细胞(HMC)对内皮细胞的影响。方法:内皮细胞分为4组：(1)内皮细胞与系膜细胞共培养，加IMD处理作为HEMI组；(2)内皮细胞与系膜细胞共培养，无处理作为HEM组；(3)内皮细胞加IMD处理作为HEI组；(4)内皮细胞无处理作为HE组；将各组细胞在1%O 2、94%N 2、5%CO 2条件下缺氧培养12 h后，蛋白质印迹法(Western blot)、免疫细胞化学技术检测相关蛋白表达，实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因mRNA相对表达量，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管内皮生长因子A(VEGFA)含量，体外血管形成实验检测内皮细胞的成管分支数。实验结果两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:上皮型钙黏分子(VE-cadherin)表达量HEMI(1.629±0.197、1.557±0.066、10.552±0.523)高于HEM(1.116±0.118、1.340±0.161、8.128±0.542)、HEI(1.278±0.096、1.078±0.088、7.523±1.211)、HE组(1.000±0.000， F＝0.734、1.244、6.134， P<0.05)，差异有统计学意义；血小板内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)表达量HEMI(1.309±0.234、1.203±0.105、1.654±0.462)高于HEM(1.067±0.379、1.038±0.035、1.601±0.397)、HEI(1.225±0.091、1.101±0.038、1.605±0.207)、HE组(1.000±0.000)，差异无统计学意义( F＝5.083、5.434、6.428， P>0.05)；VEGF表达量HEMI(0.904±0.005、1.922±0.457)高于HEM组(0.690±0.071、1.000±0.000， F＝8.307、10.896， P<0.01)，ELISA中加入IMD组(1.018±0.319)VEGFA浓度比值高于对照组(0.921±0.294， F＝0.132， P<0.05)，差异有统计学意义；体外血管形成中HEMI(22.289±0.131)、HEM(21.318±0.594)、HEI(21.533±0.867)、HE(20.755±1.798)高于NE组(18.731±0.525， F＝5.926、0.030、1.033， P<0.05； F＝6.753， P>0.05)。 结论:缺氧条件下，IMD可以直接或通过系膜细胞间接双重影响内皮细胞，促进血管形成。

目的:探讨2015—2019年青岛市女性人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染情况及基因型分布特点，为青岛女性HPV感染宫颈癌的防治提供科学支持。方法:收集2015年1月至2019年10月期间在青岛大学附属医院体检的26 396例女性宫颈脱落细胞标本，采用PCR体外扩增-DNA反向点杂交方法检测HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82共17种高危亚型和HPV6、11、42、43、81、83共6种低危亚型，分析HPV感染率以及年份分布、基因型分布、年龄分布特征等。结果:HPV总感染率为18.17%(4795/26396)，不同基因亚型单一感染、双重感染、多重感染的感染率分别为13.41%、3.40%、1.35%。7种HPV高危亚型(HPV52、16、58、53、56、51、68)和3种HPV低危亚型(HPV81、42、43)感染率超过1%。不同年龄组HPV感染率差异有统计学意义，HPV感染率呈双峰型，在≤25岁组和46～50岁组有2个高点，分别为23.61%和19.63%。各年龄组感染者中基因型分布差异无统计学意义。结论:青岛地区女性HPV感染率处于中等水平，不同基因型和年龄组均以单一感染为主。除疫苗覆盖亚型外，本地区其他亚型如HPV53、56、51、68型感染率也较高，因此，接种疫苗后仍需定期HPV筛查以发现疫苗未覆盖HPV基因型感染，建议优化HPV疫苗基因亚型以预防HPV感染宫颈癌的发生。

目的:了解北京市儿童A族链球菌(GAS)M蛋白基因( emm基因)型别及药敏特征变化。 方法:回顾性研究。收集2018年、2019年、2021年北京市16区猩红热病原学监测哨点医院儿童临床诊断猩红热及咽部感染病例咽拭子样本分离的GAS菌株。采用PCR扩增及测序进行 emm基因分型，采用微量肉汤稀释法测定10种抗生素最低抑菌浓度(MIC)。采用 χ2检验和 Fisher′ s确切概率法进行组间比较。 结果:共收集GAS菌株557株，检测到11种 emm基因型( emm1、 emm3、 emm4、 emm6、 emm11、 emm12、 emm22、 emm75、 emm89、 emm128、 emm212)。其中 emm1型42.73%(238/557株)， emm12型48.65%(271/557株)，其他 emm型8.62%(48/557株)。 emm1、 emm12、其他 emm型2018年分别为37.50%(105/280株)、57.14%(160/280株)、5.36%(15/280株)；2019年分别为49.05%(129/263株)、39.54%(104/263株)、11.41%(30/263株)；2021年分别为28.57%(4/14株)、50.00%(7/14株)、21.43%(3/14株)。2018年和2019年≤6岁儿童组中感染 emm12型的构成比均高于>6岁儿童组(62.50%比46.88%，46.36%比30.36%)，差异均有统计学意义(χ 2＝7.182、6.973，均 P<0.05)。选取225株GAS进行药敏检测，结果对青霉素、左氧氟沙星、美罗培南、利奈唑胺、头孢噻肟、头孢吡肟、万古霉素7种抗生素敏感率均为100.00%，对红霉素、四环素、克林霉素的耐药率分别为：2018年88.57%(93/105株)、87.62%(92/105株)、86.67%(91/105株)；2019年94.34%(100/106株)、94.34%(100/106株)、87.74%(93/106株)；2021年3种抗生素耐药率100.00%(14/14株)。2018年青霉素MIC 50、MIC 90均为0.03 mg/L；2019年分别为0.03 mg/L、0.06 mg/L；2021年均为0.06 mg/L。225株GAS中207株存在耐药，且均为联合耐药，红霉素-四环素-克林霉素三重耐药占94.69%(196/207株)，红霉素-克林霉素双重耐药占4.35%(9/207株)，红霉素-四环素双重耐药占0.97%(2/207株)。 结论:北京市2018年、2019年、2021年儿童GAS的 emm基因型别多样，优势基因型为 emm12与 emm1，以 emm12为主导流行型别。GAS菌株对红霉素、克林霉素、四环素维持较高耐药率，对青霉素等抗生素保持敏感，但青霉素MIC 50和MIC 90呈递增趋势。

目的:初步比较6种品牌肠道病毒EV-A71/CVA16/肠道通用核酸检测试剂盒CVA6/CVA10核酸检测试剂盒的灵敏度和特异性，为检测试剂的选择及疾病监测提供参考。方法:选择EV-A71、CVA16、CVA6和CVA10四种血清型毒株作为样本盘，分别10倍梯度稀释。使用数字PCR对梯度稀释的病毒进行核酸定量后，制备混合样本盘并进行倍比稀释，使用实时荧光PCR方法检测。分析各试剂盒的检出限及灵敏度；检测非肠道病原的核酸，分析其特异度；通过分组打分和量化评分法评价扩增曲线特征及Ct值结果，进行综合评分。结果:对灵敏度的比较分析中，试剂盒E、A和F检测较为灵敏；在扩增曲线及Ct值分析中，按分值排名检测EV通用的试剂前3为A、C、E；检测EV-A71中前3名为E、A、F；检测CVA16的试剂中，前3名为A、D、E；检测CVA6的试剂前3名为E、D、F；检测CVA10的试剂中，前3名的为E、A、C。各品牌的特异性均较好。结论:在EV-A71/CVA16/EV通用3重荧光PCR检测试剂盒中，A、E、C和D综合评分较高，在CVA6/CVA10双重荧光PCR检测试剂盒中E、F综合评分较高，建议在检测肠道病毒相关的监测及疫情样本时，常备两种品牌及以上试剂盒对检测结果相互比较验证，并对扩增曲线和Ct值结果综合判断。本研究的量化评分方法可为其他荧光PCR检测试剂盒评价提供参考。

目的:分析成都地区0~18岁患儿地中海贫血基因突变类型及频率。方法:选取2018年9月至2021年7月在成都市及周边地区接诊的贫血患儿中地中海贫血初筛阳性的568例患儿，其中男308例，女260例。采用PCR-反向点杂交法，分析纳入研究患儿的α、β各型地中海贫血的基因突变类型及分布等。结果:568例初筛阳性地中海贫血的患儿中，基因检出地中海贫血356例，总阳性率为62.68%，其中α地中海贫血140例，阳性率为24.65%，β地中海贫血202例，阳性率为35.56%，α复合β地中海贫血基因携带者14例，阳性率为2.46%。α地中海贫血基因突变类型以αα/--sea（79.29%，111/140）、α/-α3（7.86%，11/140）、-α3.7/--sea（7.14%，10/140）基因型较多，占全部类型的94.29%；在202例β地中海贫血患儿中，单纯杂合子199例，以cd17（A?T）（36.13%，73/202）、cd41-42（-TCTT）（32.68%，64/202）、IVS-2-654（C?T）（20.79%，42/202）基因型较多，占全部基因突变类型的88.61%（179/202），β-地中海贫血双重杂合子3例（1.48%，3/202），未检出β地中海贫血纯合子；α复合β地中海贫血占14例，其中cd41-42（-TCTT）/-α3.7、VS-2-654（C?T）/--sea、cd17（A?T）/-α3.7、cd41-42（-TCTT）/--sea各2例。男性、女性患α、β地中海贫血差异无统计学意义（ P>0.05），但α复合β地中海贫血则以男性较多（13/14比1/14， χ2=8.532， P=0.003）。 结论:成都地区α地中海贫血基因突变以αα/--sea为主，β地中海贫血以cd17（A?T）突变多见，男性的α复合β地中海贫血较常见，为成都地区制定地中海贫血防治策略提供参考依据。