免疫球蛋白E(IgE)介导的食物过敏是全球共同面对的健康问题，我国的食物过敏发病率也在逐年升高。传统的特异性IgE抗体(sIgE)检测方法是基于完整变应原提取物的体内和体外检测，特异性及敏感性较低，提供的诊断信息有限，临床确诊食物过敏需要进行口服食物激发试验，增加了患者的痛苦和风险。而随着食物变应原组分研究的不断进展，使得人们在分子水平上可以定量检测针对单个变应原组分的IgE抗体，从而产生了"变应原组分诊断"这一概念，使得食物过敏诊断更精确，帮助人们分辨交叉反应，判断疾病的严重程度及发生严重过敏反应的风险，预测免疫治疗疗效，大大提高了诊断的准确性，减少了对口服食物激发试验的依赖。现对常见食物变应原组分诊断的新进展分别进行总结，并讨论变应原组分诊断的优势。

过敏性疾病严重威胁儿童健康和生命，给社会带来了沉重的经济负担，被世界卫生组织列为了21世纪重点研究和防治的三大疾病之一。儿童过敏性疾病的临床诊断主要基于病史、体格检查、过敏原特异性体内试验以及体外试验。一些新方法和潜在标志物有望提升儿童过敏性疾病诊断的准确性和可靠性。过敏原分子组分研究及基于多组学的新的过敏相关标志物的筛选将成为未来儿童过敏性疾病实验室检查的发展方向。

目的:探讨IgE介导的牛奶蛋白过敏（CMPA）患儿的临床特征，为疾病的管理和预防提供依据。方法:采用横断面研究的方法，纳入2020—2022年于首都儿科研究所附属儿童医院确诊IgE介导的0~12岁142例CMPA患儿为研究对象，男79例（55.6%），女63例（44.4%），平均月龄为14（8，27）月，其中<1岁组61例（43.0%），1~3岁组54例（38.0%），>3岁组27例（19.0%）。收集人口学资料、临床表现、牛奶皮肤点刺试验平均风团直径和血清特异性IgE等数据，采用ImmunoCAP全自动荧光酶联免疫检测系统测定血清牛奶蛋白sIgE和牛奶蛋白组分sIgE，使用卡方检验、非参数检验、相关性分析等进行统计分析。结果:142例患儿以皮肤症状为首发且最为多见（97.9%，139/142例），其次为消化（29.6%，42/142例）和呼吸系统症状（27.5%，39/142例）。3岁以上儿童组患儿进食牛奶后出现呼吸系统症状的比例明显高于婴儿组和幼儿组（66.7% vs 19.7%， χ 2= 18.396， P<0.01；66.7% vs 16.7%， χ 2=20.250， P<0.01），且累积≥3个系统的比例亦显著高于另外两组（37.0% vs 13.1%， χ 2=6.597， P<0.05；37.0% vs 7.4%， χ 2=12.120， P<0.01）。3岁以上儿童组牛奶SPT平均风团直径和血清sIgE水平显著高于婴儿组和幼儿组［（ Z=-4.682， P<0.01； Z=-3.498， P<0.01）；（ Z=-4.463， P<0.01； Z=-6.463， P<0.01）］。最常见的牛奶蛋白组分是β-乳球蛋白（65.1%，56/86例）和酪蛋白（57.0%，49/86例）。54.9%的患儿存在多重变应原致敏，最常见合并致敏的食物变应原是鸡蛋白（43.7%，62/142例），吸入变应原为霉菌（12.7%，18/142例）和杂草花粉（12.7%，18/142例）。儿童组出现多重吸入变应原致敏比例最高（51.9%，14/27例），其次为幼儿组（29.6%，16/54例），婴儿组最少（3.3%，2/61例），三组之间出现多重吸入变应原致敏的比例存在显著差异（ χ 2=7.476， P<0.05）。 结论:CMPA患儿以皮肤黏膜症状最为常见。随年龄增长，呼吸系统和多系统受累症状的比例增加，牛奶皮肤测试的风团直径和血清sIgE水平升高。>3岁CMPA患儿出现吸入变应原致敏和患有气道过敏性疾病的比例最高。

宠物变应原存在于皮屑、毛发、唾液、尿液等，可引起特应性个体发生Ⅰ型变态反应，表现为皮肤黏膜和呼吸道症状，且可发生严重过敏反应。近年，我国居民家庭饲养宠物显著增多，使宠物相关过敏反应的发生相应增加，宠物变应原致敏也是其他过敏性疾病发生和发展的重要危险因素之一，对宠物过敏已成为严重的公共卫生问题。本文从流行病学、变应原组分、临床表现、诊断和管理、预防等方面进行阐述，以期为宠物过敏的防治提供参考。

目的:探讨过敏原皮下特异性免疫治疗（subcutaneous immunotherapy，SCIT）在治疗早期对患者免疫指标和代谢水平的影响，深入了解SCIT治疗在调节免疫反应和代谢水平方面的作用，为进一步发现潜在生物标志物提供参考数据。方法:采用纵向研究方法，纳入2017年11月至2022年2月期间于广州医科大学附属第一医院儿科接受尘螨过敏原SCIT的受试者40例，其中单螨制剂治疗（single mite subcutaneous immunotherapy，SM-SCIT）和双螨制剂（double mite subcutaneous immunotherapy，DM-SCIT）治疗受试者各20例。本研究检测了受试者治疗前和治疗12个月后的尘螨过敏原特异性抗体和多元不饱和脂肪酸代谢水平，同时进行了肺功能检查，并通过症状视觉模拟量表（visual analogue scale，VAS）、哮喘控制测试问卷（asthma control test，ACT）和用药总评分（total medication scores，TMS）对患者的疗效进行随访，采用 t检验、Mann-Whitney U检验等方法进行结果统计分析。 结果:经SCIT治疗12个月后，两组的VAS总分（SM-SCIT： Z=-2.298， P<0.05；DM-SCIT： Z=-3.411， P<0.001）显著下降；ACT总分（SM-SCIT： Z=-2.054， P<0.05；DM-SCIT： Z=-2.014， P<0.05）和总用药评分（SM-SCIT： Z=-3.799， P<0.000 1；DM-SCIT： Z=-3.474， P<0.001）显著升高，此外，双螨治疗组MMEF75/25值显著升高（ t=-2.253， P<0.05）。单螨治疗组的sIgE无明显变化（ P>0.05），Der p、Der f、p 1、p 2、f 2和p 21组分sIgG 4水平均显著升高（ Z分别为-2.651、-3.771、-2.949、-2.912、-2.725、-2.128、-3.285， P均<0.05）；双螨治疗组的 Der p 2、f 2、p 7和p 23 组分sIgE（ Z分别为-1.965、-2.028、-2.406、-2.134， P均<0.05）和Der p、Der f、p 1、p 2、f 1、f 2、p 10、p 21和p 23组分sIgG 4水平均显著升高（ Z分别为-3.808、-3.845、-3.061、-2.688、-2.464、-3.211、-2.371、-2.091、-2.427， P均<0.05）。代谢组学分析显示，在治疗初期，SM-SCIT治疗后花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十二碳五烯酸、二十碳五烯酸、5，9，12-十八碳三烯酸、5（S）-羟化二十烷四烯酸、二高-γ-亚麻酸显著升高（ Z分别为-2.191、-2.497、-1.988、-2.090、-2.19、-2.803、-2.073， P均<0.05）；DM-SCIT组治疗后5（S）-羟化二十烷四烯酸显示升高，α-亚麻酸、二十碳二烯酸、二十碳一烯酸显著下降（ Z分别-1.988、-2.090、-2.497、-1.988， P均<0.05）。相关性分析表明，花生四烯酸与尘螨特异性IgG 4的变化呈显著负相关（ r=-0.499， P<0.05），α-亚麻酸、5，9，12-十八碳三烯酸、二十碳五烯酸与尘螨der p 2的ΔsIgG 4（ r分别为0.451、0.420、0.474， P均<0.05）呈正相关。 结论:SCIT期间过敏原特异性抗体水平和多不饱和脂肪酸代谢水平发生显著变化，并且两者之间可能相互影响、相互作用。

目的:探索黄花蒿花粉变应性小鼠鼻炎模型维持稳定的激发条件。方法:以BALB/c小鼠为实验动物，选用黄花蒿花粉变应原提取物为致敏蛋白质，于1 d、4 d、7 d对每只小鼠皮下注射0.1 ml的以Art a1计浓度为20 μg/ml的黄花蒿花粉变应原提取液。致敏结束后停息1周，用以Art a1计浓度为500 μg/ml的黄花蒿花粉变应原提取液对小鼠进行首次滴鼻激发，每鼻孔10 μl。将模型组分为3组分别连续激发7 d、10 d、14 d，每隔4周再激发7 d，探索首次激发时间。空白对照组小鼠以生理盐水进行免疫和滴鼻激发。造模后观察各组小鼠行为学和鼻部病理学变化，检测致敏小鼠体液免疫和细胞免疫应答变化。确定最佳首次滴鼻激发周期后，进一步比较不同激发频次对致敏效果的影响。结果:抗原首次激发后，10 d组小鼠过敏症状明显高于7 d和14 d组，且10 d和14 d组小鼠血清特异性IgE抗体水平明显高于7 d组。与空白对照组比较，二次激发后3个模型组小鼠组仍维持明显过敏症状；鼻部均有明显的上皮细胞增生、鼻甲肿大、炎细胞增多等病理变化；血清特异性IgE抗体水平均显著增高；抗原特异性IL-4和IL-6淋巴细胞增殖明显，其中10 d和14 d组高于7 d组。不同激发频次对过敏模型的稳定性有较大影响，每隔2周激发一次的致敏小鼠过敏症状以及血清中抗原特异性抗体水平均显著高于每隔4周激发的小鼠。结论:本研究通过对比不同首次抗原激发时间以及不同激发频次对黄花蒿致敏小鼠模型的影响，最终优化了过敏小鼠评价模型建立的参数，为脱敏治疗药物疗效评价体系的建立提供参考。

近年来花粉症患病率呈逐年攀升之势，风媒花粉是导致花粉症的最重要变应原，其中蒿属花粉是最常见气传变应原之一。本文主要从蒿属花粉主要致敏蛋白组分的免疫生物学特征阐述蒿属花粉的变应原组成，从免疫学角度阐述蒿属花粉致病的主要作用机制及临床特点，为制定精准有效的蒿属花粉致病防控策略提供参考依据，以期为患者提供科学有效的预防及控制建议。

当前过敏性疾病的发病率逐年递增,但现有的诊断技术未见显著改进.过敏反应涉及免疫系统内多种细胞和分子之间的复杂相互作用.未能鉴别特定过敏原并不排除过敏性疾病的诊断可能,而识别出特定过敏原并不一定引发过敏性疾病的发生.过敏原激发试验被视为诊断的"金标准",过敏原特异性IgE(sIgE)检测则用于评估致敏状态,而非直接诊断过敏性疾病.成分解析诊断技术通过采用特定的天然过敏原蛋白或重组变应原组分进行检测,以确定主要致敏原.同时小分子过敏原也应引起重视.在诊断过程中,临床医师必须结合患者的临床表现、病史和检测结果进行综合评估,做出最终诊断.

目的 本文旨在对季节性变应性鼻炎(AR)患儿进行变应原组分筛查,了解AR患儿代表性蒿属植物花粉变应原致敏组分.方法 采集黄花蒿和大籽蒿花粉,提取花粉蛋白,以临床确诊为AR且艾蒿特异性免疫球蛋白E(sIgE)检测为阳性患儿血清为一抗,通过蛋白质免疫印迹法筛查花粉中变应原组分.结果 蛋白质免疫印迹显示2种蒿属植物花粉蛋白提取物中主要有3条带能与血清IgE特异性结合,相对分子量(Mr)分别为12、25和70kDa.黄花蒿花粉中70 kDa变应原为AR儿童最常见的变应原分子,阳性检出率为85.19％,25 kDa和12 kDa变应原分别为37.04％和14.81％.大籽蒿花粉中70 kDa变应原阳性检出率低于黄花蒿(P＜0.05),为51.85％,25 kDa和12 kDa变应原阳性检出率与黄花蒿相似(P＞0.05).另外,同一个体血清对2种蒿属植物同源变应原阳性反应存在差异,不同患儿对1种或多种变应原分子敏感.结论 AR患儿黄花蒿花粉致敏率更高,推荐增加黄花蒿花粉组分蛋白进行诊断和免疫治疗,尤其是70 kDa变应原分子.

本研究制备并鉴定了鼠抗粉尘螨变应原Der f 5的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb).将质粒pET28a(+)Der f 5转化ArcticExpress (DE3)感受态细胞,取单个菌落接种培养,加入IPTG诱导表达,经纯化获得Der f 5重组蛋白.利用Der f 5重组蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏细胞与其骨髓瘤细胞融合.通过间接ELISA法筛选特异性分泌抗体的杂交瘤细胞.用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化.通过间接ELISA、Western blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性.最终获得3株稳定分泌鼠抗粉尘螨变应原Der f 5的高效价单克隆抗体.研究分析表明该3株单抗均能识别重组Der f 5蛋白和天然的粉尘螨提取物.本实验成功制备了3株鼠抗粉尘螨变应原Der f 5的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Der f 5检测及纯化方法奠定了基础.