目的:检测食管癌患者血清微小RNA(miRNA，miR)-28水平，探讨其临床应用价值。方法:选取2018年1月至2018年12月收治的河北医科大学第四医院初诊为食管癌并行根治性手术的患者90例为初发组，确诊为手术后复发的食管癌患者30例为复发组，以正常体检者60例为对照组。实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测各组血清miR-28的水平，同时检测各组固醇调节因子结合因子2(SREBF2)及同源异型盒基因B3(HOXB3)的水平。绘制初发组及复发组血清miR-28的受试者工作曲线(ROC)。应用SPSS 26.0统计软件，采用 t检验、单因素方差分析、 χ2检验、受试者工作曲线(ROC)等方法分析结果数据。 结果:血清miR-28水平在3组差异有统计学意义，由低到高依次为复发组(0.275±0.084)、初发组(0.337±0.186)、对照组(0.878±0.174， F＝30.873， P<0.01)；血清SREBF2、HOXB3的mRNA水平在复发组(1.005±0.199、0.814±0.113)、初发组(0.950±0.175、0.755±0.104)均高于对照组(0.264±0.074、0.332±0.092， F＝76.589、54.821， P<0.01)。初发组患者术后miR-28的水平(0.853±0.186)明显升高( t＝4.014， P<0.01)；SREBF2、HOXB3的mRNA水平(0.297±0.085、0.334±0.090)均明显下降( t＝-11.337、-9.064， P<0.01)。 Spearman相关分析显示，在初发组术前检测中miR-28与SREBF2、miR-28与HOXB3呈负相关( r＝-0.669、-0.268， P<0.05)；在复发组中血清miR-28与SREBF2、HOXB3无明显相关( r＝0.010、 r＝-0.225， P>0.05)。初发组miR-28检测的ROC曲线下面积(AUC)为0.691；复发组AUC为0.935。 结论:食管癌患者血清miR-28水平明显低于正常人，检测血清miR-28有助于诊断食管癌及预测肿瘤复发。miR-28可能通过抑制SREBF2、HOXB3而参与食管癌的进展及复发。

目的:探讨肾细胞癌患者癌组织中同源异型盒基因B3(HoxB3)、JAG1的表达水平及对临床预后的影响。方法:选取2017年1月至2020年1月在本院收治的93例肾细胞癌患者作为观察组，收集肾细胞癌患者的癌组织标本(肾细胞癌组)及对应的癌旁组织标本(癌旁组)。采用免疫组化法检测肾细胞癌患者的HoxB3、JAG1表达水平。分析HoxB3、JAG1表达与肾细胞癌患者的临床病理特征关系，采用多因素Cox回归分析影响肾细胞癌患者预后的相关因素。结果:肾细胞癌组的HoxB3阳性表达率低于癌旁组，JAG1阳性表达率高于癌旁组(均 P<0.001)。共有62例患者存活，存活率为66.67%。低分化、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、Fuhrman分级Ⅲ～Ⅳ级、有淋巴结转移、有肾包膜受侵的肾细胞癌患者的HoxB3阳性表达率及JAG1阴性表达率低于中/高分化、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、Fuhrman分级Ⅰ～Ⅱ级、无淋巴结转移、无肾包膜受侵的肾细胞癌患者。低分化、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、Fuhrman分级Ⅲ～Ⅳ级、有淋巴结转移、有肾包膜受侵的肾细胞癌患者的3年生存率均降低(均 P<0.05)。HoxB3阳性表达、JAG1阴性表达患者的3年生存率高于HoxB3阴性表达、JAG1阳性表达患者[28(80.00%)vs.34(58.62%)，18(85.71%)vs.44(61.11%)，均 P<0.05]。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、HoxB3阴性表达、JAG1阳性表达是肾细胞癌患者预后的危险因素(均 P<0.05)。 结论:HoxB3在肾细胞癌中呈低表达，JAG1在肾细胞癌中呈高表达，二者均与肾细胞癌的临床病理特征及预后密切相关，可作为肾细胞癌预后评估的生物学标志物。

[目的]探讨同源异型盒蛋白 2B(PHOX2B)在外周神经母细胞性肿瘤(pNTs)4 种分型组织中的表达差异.[方法]回顾性分析 2019 年 1 月至 2022 年 12 月本院收治的 65 例pNTs患儿的临床资料,根据免疫组化综合评分方法对 pNTs 4 种分型中 PHOX2B的表达情况进行分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估PHOX2B免疫组化综合评分预测神经母细胞瘤(NB)、节细胞性神经母细胞瘤(GNB)混杂型(GNBi)、节细胞性神经母细胞瘤结节型(GNBn)和节细胞性神经瘤(GN)的价值.[结果]男、女患儿病例数分别为 33 例、32 例,无明显的性别差异;年龄分布主要为 6 岁以下患儿,其所占比例为 75.38%(49/65);腹膜后为常见原发部位,其次为纵隔和肾上腺.PHOX2B在 NB中免疫组化综合评分最高,其次为 GNBn,GNBi 和 GN 表达最弱,NB免疫组化综合评分显著高于 GNBn、GNBi、GN,GNBn免疫组化综合评分显著高于 GNBi、GN,差异均有统计学意义(P<0.05).ROC曲线结果显示,PHOX2B免疫组化综合评分为 5 分时可作为诊断 NB 的参考阈值,PHOX2B 免疫组化综合评分为 3 分可作为诊断 GNBn的参考阈值(P<0.05).[结论]PHOX2B在 pNTs 不同类型的表达有显著差异,其表达强度可作为 pNTs病理分型的依据.

目的 探讨三结构域蛋白 14(TRIM14)、同源异型盒基因B7(HOXB7)蛋白在口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者癌组织中的表达水平与患者临床病理特征及预后的关系.方法 收集 2016 年 1 月至 2018 年 1 月行手术治疗的OSCC患者 148 例的癌组织与癌旁正常组织,免疫组化法分析组织中TRIM14、HOXB7 表达情况;Kaplan-Meier生存曲线分析OSCC患者癌组织TRIM14、HOXB7 表达水平与生存率之间的关系;COX回归分析OSCC患者预后不良的影响因素.结果 OSCC癌组织TRIM14、HOXB7 高表达率均高于癌旁正常组织(P<0.05).OSCC癌组织TRIM14、HOXB7表达与肿瘤T分期、M分期、淋巴结转移、周围组织浸润、分化程度相关(P<0.05).OSCC患者 5 年生存率为 49.32%(73/148),Kaplan-Meier生存曲线表明 TRIM14、HOXB7 高表达患者生存率低于 TRIM14、HOXB7 低表达患者(χ2 = 14.480、24.841,P<0.001).多因素COX分析结果显示,T3-T4 分期、M1 分期、淋巴结转移、周围组织浸润、癌组织TRIM14、HOXB7 高表达均是OSCC患者预后不良的危险因素(P<0.05).结论 OSCC患者癌组织TRIM14 与HOXB7蛋白表达水平均上调,其表达与患者临床病理特征和 5 年生存预后明显相关.

目的 探讨miR-224通过调控同源异型盒基因B3(HoxB3)表达对大肠癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 采用RT-PCR法检测miR-224在大肠癌细胞株及人正常结肠直肠黏膜上皮细胞HIEC中的表达,大肠癌细胞转染miR-224 inhibitor,并通过双荧光素酶实验、Western blot及RT-PCR证实HoxB3是miR-224的靶基因.MTT及AnnexinV-PI法检测miR-224及HoxB3表达量下调后分别对大肠癌细胞活力的影响.流式细胞术检测miR-224 inhibitor对大肠癌细胞周期的影响;Western blot检测miR-224 inhibitor对大肠癌细胞中细胞分裂周期相关蛋白3(CDCA 3)、细胞周期蛋白D1(CyclinD 1)、p21及p27表达的影响.结果 大肠癌细胞中miR-224表达量高于人正常结肠直肠黏膜上皮细胞HIEC,且HCT 116中的表达量最高,因此选为后续细胞株.双荧光素酶报告基因证实HoxB3是miR-224下游靶基因,Western blot及RT-PCR结果证实下调miR-244的表达水平后HoxB3蛋白及mRNA表达量均显著下降(P＜0.01).下调miR-224及干扰HoxB3表达都能显著降低HCT116细胞活力(P＜0.01),促进细胞凋亡(P＜0.01).下调miR-224还能使HCT116细胞周期阻滞在G1期,抑制CDCA3及CyclinD1表达(P＜0.01),促进p21及p27表达(P＜0.01).结论 miR-224在大肠癌细胞中高表达,并能通过调控靶基因HoxB3的表达及调节细胞周期相关蛋白的表达而参与大肠癌细胞的增殖与凋亡.

目的 探讨神经管缺陷(NTDs)家系中全基因组DNA甲基化改变情况及其意义.方法 收集3个NTDs家系,共12例研究对象纳入本研究,以NTDs患者作为病例组,家系中表型正常的成员为对照组.抽取12例研究对象的外周血,提取基因组DNA.使用重亚硫酸盐处理基因组DNA,全基因组扩增方式扩增片段化,置Illumina Infinium人类甲基化450k芯片上,进行杂交、洗脱、延伸、成像,使用iScan软件扫描芯片,Genome Studio读取扫描图像结果.使用Illumina甲基化分析器软件进行数据分析.结果 基因差异甲基化分析显示:差异性甲基化基因位点仅占检出CpG位点的0.2％,617个差异性DNA高甲基化的位点(P＜0.05),其中63个DNA甲基化位点P＜1×10-4,包括E盒结合锌指蛋白2基因、5,10-亚甲基四氢叶酸脱氢酶1基因等;l04个差异性DNA低甲基化的位点(P＜0.05),其中65个DNA甲基化位点P＜0.01,包括同源异型盒B7基因、runt相关的转录因子3基因等.聚类分析显示:NTDs患儿呈DNA高甲基化改变的趋势较一致,而对照组呈DNA低甲基化改变的趋势较一致.结论 在NTDs家系中,DNA甲基化异常可能是NTDs发生的危险因素之一.

目的:探讨卡西塔斯B细胞淋巴瘤谱系b(Cbl-b)调控CD4+T细胞活化的机制.方法:用CCK8试剂盒检测过表达微小RNA(miR)-99a和miR-125b的小鼠淋巴瘤细胞(EL4)细胞增殖活性.取抗CD3和抗CD28抗体活化野生型(WT)和Cbl-b缺失型(Cbl-b-/-)CD4+T细胞,激光共聚焦观察WT和Cbl-b-/-CD4+T细胞中同源异型盒蛋白A10(HOXA10)的入核情况.用双荧光素酶报告系统检测HOXA10对miR-99 a和miR-125 b的表达调控作用.用蛋白质印迹法和双荧光素酶报告系统检测miR-99 a和miR-125b对靶基因的表达水平影响.结果:在Cbl-b-/-CD4+T细胞中,HOXA10在抗CD3抗体单独刺激时即可入核.HOXA10入核后促进miR-99 a和miR-125 b表达,而过表达miR-99 a和miR-125 b则抑制蛋白激酶B2和3(AKT2、AKT3)、磷酸肌醇-3-激酶催化亚基A和D(PIK3CA、PIK3CD)的表达.结论:Cbl-b通过阻止HOXA10核转位来抑制miR-99a和miR-125b表达,导致AKT2、AKT3、PIK3CA、PIK3CD(AKT/PI3K)表达增加,最终抑制CD4+T细胞活化.

微小RNA(miRNA)是一类广泛存在于真核生物中的非编码单链小分子RNA,长度为19～25个核苷酸(nt),可在转录后调控基因的表达.miRNA-10b长度为23 nt,基因位于人类2号染色体短臂3区1带1亚带同源异型盒D基因簇(HOXD)中,靠近HOXD4基因.近年来,越来越多的研究指出,miRNA-10b通过靶向抑制HOXD10、细胞黏附分子1(CADM1)、磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)等与细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭相关的基因,在多种肿瘤的发生发展中扮演着重要的角色.本文就miRNA-10b在肿瘤发生发展中的作用及其分子机制的研究进展作一综述.

目的 探讨微小RNA(miR)-373靶向调控同源异型盒基因B3(HOXB3)表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 本研究起止时间为2018年2月至2019年6月,将体外培养的Ishikawa细胞分为抑制剂阴性对照(inhibitor-NC)组(转染inhibitor-NC)、miR-373抑制剂(inhibitor)组(转染miR-373 inhibitor)、miR-373 inhibitor+siNC组(共转染miR-373 in?hibitor和NC siRNA)和miR-373 inhibitor+siHOXB3组(共转染miR-373 inhibitor和HOXB3 siRNA),采用实时荧光定量PCR检测Ishikawa细胞中miR-373的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-373和HOXB3的靶向关系,采用免疫印迹法检测Ishikawa细胞中HOXB3蛋白的表达,细胞计数(CCK-8)法、Transwell实验和膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法检测各组细胞增殖、侵袭和凋亡能力.结果 HOXB3是miR-373的靶基因.与inhibitor-NC组相比,miR-373 inhibitor组、miR-373 inhib?itor+siNC组和miR-373 inhibitor+siHOXB3组细胞中miR-373表达水平[(1.00±0.11)比(0.32±0.02)/(0.36±0.03)/(0.34±0.03)]和细胞增殖活力[24 h(0.63±0.04)比(0.41±0.03)/(0.43±0.03)/(0.52±0.03);48 h(0.97±0.06)比(0.68±0.05)/(0.72±0.06)/(0.85±0.05);72 h(1.35±0.11)比(0.88±0.08)/(0.92±0.07)/(1.12±0.09)]、穿膜细胞数[(85.26±8.72)个比(37.64±2.85)个/(40.55±3.23)个/(61.38±3.64)个]均明显降低,而细胞凋亡率[(8.75±1.23)％比(25.64±3.38)％/(28.48±3.26)％/(14.25±2.02)％]和细胞中HOXB3蛋白的表达水平[(0.27±0.03)比(0.77±0.06)/(0.73±0.06)/(0.51±0.03)]均明显升高(P<0.05);且miR-373 inhibitor+siHOXB3组中各指标的变化强度明显低于miR-373 inhibitor组(P<0.05);而miR-373 inhibitor+siNC组和miR-373 inhibitor组之间无明显差异(P>0.05).结论 下调miR-373表达可通过靶向HOXB3抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭并促进细胞凋亡.

目的 探讨胃癌组织中巨噬细胞加帽蛋白G(CapG)、同源异型盒基因转录因子1(Prox-1)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)的表达对胃癌淋巴结转移(LNM)及预后的影响.方法 回顾性分析2014年1月至2015年4月在锦州医科大学附属第一医院术前活检确诊并行根治术治疗的110例胃癌患者临床资料.于术前对胃癌活检组织中巨噬细胞加帽蛋白G(CapG)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)、同源异型盒基因转录因子1(Prox-1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)及血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)的表达进行检测.采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)与Kaplan-Meier生存曲线分析不同分子生物标志物对胃癌LNM及预后的影响.结果 LNM患者CapG、Prox-1、TrkB、MMP-2、VEGF-C及VEGFR-3的阳性表达率均明显高于无LNM患者(P<0.05).CapG、Prox-1、TrkB对胃癌LNM的预测价值较高.CapG、Prox-1及TrkB的阳性表达患者总生存率均明显低于阴性表达患者(P<0.05).CapG阳性表达(HR=6.524,95％CI:1.012～36.362,P=0.027)是胃癌患者预后的独立危险因素.结论 术前检测CapG、Prox-1及TrkB表达对胃癌LNM及预后具有较高的预测价值.