目的:观察蓝光干预对光学离焦性近视豚鼠屈光发育的影响及其作用机制。方法:选取普通级2周龄三色豚鼠48只，采用抛硬币法随机分成蓝光组和白光组，每组各24只。所有豚鼠右眼佩戴－5.00 D镜片建立光学离焦模型，为实验眼；左眼为自身对照，不予遮盖。实验前及实验开始后8周，采用带状光检影镜测量豚鼠屈光度，A型超声测量前房深度、晶状体厚度及眼轴长度，角膜曲率计测量角膜曲率半径。实验开始后8周，采用过量麻醉法处死豚鼠，取右眼眼球并分离视网膜，采用视网膜铺片免疫荧光染色观察豚鼠视网膜S及M视锥细胞密度；采用高效液相色谱分析法检测视网膜视黄酸表达；采用实时荧光定量PCR检测视网膜视黄酸受体(RAR-β)和巩膜中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)及Ⅰ型胶原的表达；采用苏木精－伊红染色观察巩膜厚度变化。结果:实验开始后8周，蓝光组实验眼较白光组实验眼出现(0.63±0.12)D相对远视，眼轴增长延缓(0.08±0.00)mm；蓝光组对照眼较白光组对照眼出现(0.42±0.09)D相对远视，眼轴增长延缓(0.08±0.00)mm；蓝光组实验眼较蓝光组对照眼近视加深(1.52±0.09)D，眼轴增长(0.06±0.00)mm；白光组实验眼较白光组对照眼近视加深(1.66±0.07)D，眼轴增长(0.13±0.00)mm，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。蓝光组豚鼠视网膜背侧和腹侧M视锥细胞密度小于白光组，背侧和腹侧S视锥细胞密度大于白光组，差异均有统计学意义( t＝32.33、52.23、42.09、25.02，均 P<0.05)。蓝光干预后近视延缓与腹侧S视锥细胞密度增加呈强正相关( r＝0.95， P<0.01)。蓝光组视黄酸含量、RAR-β和MMP-2相对表达量较白光组减少，TIMP-2和Ⅰ型胶原相对表达量较白光组增加，差异均有统计学意义( t＝18.73、7.45、3.72、6.19、9.03，均 P<0.05)。蓝光组巩膜厚度为(125.0±7.8)μm，较白光组的(102.0±6.3)μm明显增厚，差异有统计学意义( t＝26.93， P<0.05)。 结论:蓝光可抑制豚鼠离焦性近视进展；豚鼠屈光度的改变可能通过视网膜视锥细胞密度变化影响视网膜视黄酸及巩膜胶原的表达来实现。

目的:探讨新型生物标志物尿胰岛素样生长因子结合蛋白7（IGFBP7）及组织基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）在失代偿期乙型肝炎肝硬化急性肾损伤中的应用价值。方法:选取新住院失代偿期乙型肝炎肝硬化患者45例，其中入院时合并AKI 19例（肝硬化-AKI组），无AKI 26例（肝硬化-非AKI组），健康体检者12例（正常对照组），收集晨尿标本，酶联免疫吸附法检测尿IGFBP7与TIMP-2，动态监测肝硬化-非AKI组入院后尿IGFBP7及血肌酐（SCr）。正态分布计量资料组间比较采用 t检验，非正态分布计量资料组间比较采用秩和检验，用受试者工作特征（ROC）曲线及曲线下面积（AUC）评价指标的诊断效能。 结果:肝硬化-AKI组（ n = 19）尿IGFBP7、尿IGFBP7与TIMP-2乘积（IGFBP7×TIMP-2）均高于非AKI组（ P值均< 0.05）；肝硬化-AKI组或非AKI组尿IGFBP7、尿TIMP-2、尿IGFBP7×TIMP-2均显著高于正常对照组（ P值均< 0.01）。尿IGFBP7、尿IGFBP7×TIMP-2诊断AKI的AUC分别为0.703（95% CI 0.547～0.860）、0.700（95% CI 0.541～0.859）。肝硬化-非AKI组（ n = 26）住院期间根据SCr变化新诊断AKI 5例（进展组），尿IGFBP7在诊断AKI的2天前已明显升高；进展组（ n = 5）入院时尿IGFBP7浓度高于非进展组（ n = 21）（ P < 0.05）。 结论:失代偿期乙型肝炎肝硬化患者尿IGFBP7及TIMP-2浓度明显升高，发生AKI时尿IGFBP7与尿IGFBP7×TIMP-2进一步升高；尿IGFBP7具有早期诊断AKI的价值，且可能有预测AKI发生的作用。

目的:评价海马β淀粉样蛋白42(Aβ 42)沉积诱发中性粒细胞聚集在七氟烷麻醉导致老龄大鼠血脑屏障损伤中的作用。 方法:取鞘内置管成功的健康雄性Wistar大鼠72只，18~20月龄，体重600~650 g，采用随机数字表法分为4组( n＝18)：对照组(C组)、γ-分泌酶抑制剂DAPT组(D组)、七氟烷麻醉组(S组)和DAPT+七氟烷麻醉组(DS组)。C组和S组鞘内注射二甲基亚砜10 μl，30 min后C组吸入60%氧气2 h，S组吸入3.6%七氟烷+60%氧气2 h，同时行胫骨骨折手术。D组和DS组鞘内注射100 μmol/L DAPT 10 μl，30 min后D组吸入60%氧气2 h，DS组吸入3.6%七氟烷+60%氧气2 h，同时行胫骨骨折手术。分组处理结束后12 h时行条件恐惧实验，计算僵直时间比率。行为学测试结束后处死大鼠，取海马组织，采用Western blot法测定Aβ 42、Occludin和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平，采用免疫组化法计数中性粒细胞，采用伊文思蓝(EB)染色法测定EB含量。 结果:与C组比较，S组和DS组僵直时间比率下降，海马Aβ 42和MMP-9表达上调，Occludin表达下调，中性粒细胞计数和EB含量增加( P<0.05)，D组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与S组比较，DS僵直时间比率升高，海马Aβ 42表达和MMP-9表达下调，Occludin表达上调，中性粒细胞计数和EB含量降低( P<0.05)。 结论:七氟烷麻醉导致老龄大鼠术后认知功能障碍的机制与海马Aβ 42沉积诱发中性粒细胞聚集，造成血脑屏障损伤有关。

目的:观察麝香乌龙丸对膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis，KOA)患者血清中白细胞介素1(interleukin-1, IL-1)、转化生长因子β 1(transforming growth factor-β，TGF-β 1)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase3，MMP3)、基质金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitors of metalloproteinase1，TIMP-1)表达的影响。 方法:采用前瞻性队列研究方法，观察对象来自于2016年3月至2018年6月华北理工大学附属医院风湿免疫科门诊的KOA患者，应用随机数字表分为两组，即治疗组(麝香乌龙丸治疗)46例和对照组(抗骨增生片治疗)46例。治疗组采用麝香乌龙丸治疗，每次30粒，2次/d；对照组采用抗骨增生片治疗，每次4片，2次/d。治疗周期均为8周。取治疗组和对照组患者血清，采用酶联免疫吸附试验法检测血清中IL-1、TGF-β 1 、MMP3、TIMP-1的含量，并统计分析两组治疗后相关指标的差异。 结果:治疗组完成46例，对照组完成44例。治疗后，IL-1水平分别为治疗组(30.99±2.80) μg/L、对照组(32.90±2.84) μg/L，两组间比较差异有统计学意义( t＝3.21， P<0.001)；TGF-β 1水平分别为治疗组(214.87±17.30) μg/L 、对照组(208.85±15.53) μg/L ，两组间比较差异无统计学意义( t＝1.73， P＝0.08)；TIMP-1水平治疗组(139.60±6.79) μg/L 、对照组(135.09±6.16) μg/L ，两组间比较差异有统计学意义( t＝3.29， P<0.001)；MMP3水平治疗组(1.19±0.10) μg/L、对照组(1.23±0.06) μg/L ，两组间比较差异有统计学意义( t＝2.28， P＝0.03)；TIMP1/MMP3比值治疗组111.04±8.81、对照组118.46±12.06，差异有统计学意义( t＝3.34， P<0.001)。 结论:麝香乌龙丸可以降低IL-1 、MMP3水平；升高TGF-β 1 、TIMP-1和TIMP1/MMP3比值的表达水平，从而起到保护关节软骨、改善KOA患者膝关节功能的作用。

目的:探讨富血小板血浆（PRP）经TGF-β1/Smad2/3介导MMP/TIMP表达，治疗大鼠椎间盘退变（IVDD）的作用机制。方法:将40只IVDD大鼠随机分为4组，每组10只，PRP组：腰椎间盘（L4/5、L5/6）内注射10 μl PRP；PRP+TGF-β1抑制组：10 μl PRP+10 μl TGF-β1抑制剂混合物；TGF-β1抑制剂组：10 μl TGF-β1抑制剂；生理盐水对照组：10 μl理盐水。各组治疗后2、4周采用HE、Masson染色观察椎间盘退变情况；RT-qPCR检测TGF-β1，Smad2/3，MMP1、3，TIMP1 mRNA表达水平；免疫组化检测椎间盘内TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白表达丰度；通过分析比较不同组间、不同时间椎间盘内各种指标的变化，评估大鼠椎间盘退变情况。结果:治疗2、4周后HE、Masson染色观察发现PRP组优于另外3组；免疫组化检测PRP组TGF-β1表达优于另外3组，而Ⅰ型胶原蛋白表达少于另外3组；治疗2周后RT-qPCR检测PRP组大鼠椎间盘内TGF-β1（2.14±0.11），Smad2（3.47±0.18）、Smad3（1.77±0.09），TIMP1（2.80±0.18）的mRNA相对表达量明显高于其他3组（ P<0.05），MMP1（0.70±0.07）、MMP 3（0.67±0.06）的mRNA相对表达量明显低于生理盐水组和TGF抑制剂组（ P<0.05）；在治疗4周后PRP组TGF-β1（2.45±0.23），Smad2（3.82±0.06）、Smad 3（3.22±0.15），TIMP1（2.96±0.06）的mRNA相对表达量进一步升高，明显高于其他3组（ P<0.05），MMP1（0.39±0.05）、MMP3（0.51±0.07）的mRNA相对表达量逐渐减少，明显低于生理盐水组和TGF抑制剂组（ P<0.05）。 结论:PRP通过TGF-β1/Smad2/3介导MMP/TIMP表达，改善退变椎间盘理化指标，从而延缓椎间盘退变。

目的:探讨左卡尼汀对心肌细胞纤维化增殖、凋亡及迁移的影响作用机制。方法:2022年6-12月，采用基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)过表达载体及siRNA-TIMP1转染大鼠心肌细胞H9c2(中国科学院细胞库)，并用荧光定量反转录聚合酶链(RT-qPCR)检测转染效率。用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理H9c2细胞后，通过RT-qPCR检测细胞中基质金属蛋白酶3(MMP3)、TIMP-1基因的表达情况。使用CCK8试剂盒检测TIMP-1过表达和敲低后，检测左卡尼汀干预对心肌细胞纤维化增殖的影响。通过流式凋亡检测和Transwell检测左卡尼汀对心肌细胞纤维化的凋亡及迁移影响。结果:RT-qPCR结果表明AngⅡ处理24 h的心肌细胞中MMP3基因表达水平为(1.38±0.05)，呈升高趋势( P<0.01)，TIMP-1基因表达水平为(0.71±0.03)，呈下调趋势( P<0.01)；同时TIMP-1过表达为(905.98±24.17)，敲低(0.18±0.01)%的H9c2细胞构建成功。CCK-8检测结果表明，TIMP-1敲低后表达量为(86.56±7.98)%可促进左卡尼汀诱导H9c2细胞增殖( P<0.01)。细胞凋亡实验结果表明，抑制TIMP-1表达为(23.22±2.69)，抑制了左卡尼汀诱导的H9c2细胞凋亡水平( P<0.01)。迁移实验结果表明，抑制TIMP-1表达为(217.67±23.44)可促进左卡尼汀诱导的H9c2细胞迁移能力( P<0.01)。 结论:通过干预降低TIMP-1表达后，左卡尼汀可促进纤维化心肌细胞增殖，抑制纤维化心肌细胞凋亡，促进纤维化心肌细胞迁移，可能从而改善心肌纤维化。

目的:探讨miR-497通过靶向调节Yes相关蛋白1（Yes-associated protein 1，YAP1）表达对甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）细胞生物学行为的影响。方法:将人PTC细胞株TPC-1细胞分为对照组、miR-497组、si-YAP1组和miR-497+si-YAP1组，采用LipofectamineTM3000脂质体转染，荧光素酶报告实验验证miR-497和YAP1靶向关系。MTT法检测各组细胞增殖活性，流式细胞仪分析细胞凋亡率，Transwell检测侵袭细胞数，划痕实验检测细胞迁移率。Western blot检测细胞周期素D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）和活化的半胱天冬酶3（cleaved Caspase-3）表达。采用SPSS 22.0分析数据，正态分布计量资料以均数±标准差（ ± s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两组间比较采用SNK-q。 结果:与对照组比，miR-497组和si-YAP1组细胞YAP1 mRNA和蛋白表达下降（ q=14.682、14.597，23.743、23.571； P<0.05），细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降（ q=4.724、4.568、3.841，4.216、3.952、3.274； P<0.05），凋亡率升高（ q=3.783、4.336， P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降（ q=5.823、5.981、6.036、6.485，5.934、6.110、6.573、6.614； P<0.05），TIMP-1蛋白表达升高（ q=6.071、6.148， P<0.05）；与si-YAP1组相比，miR-497+si-YAP1组细胞miR-497水平升高（ q=14.726， P<0.05），YAP1 mRNA和蛋白表达下降（ q=3.089、3.126， P<0.05），细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降（ q=2.654、2.537、2.246， P<0.05），凋亡率升高（ q=2.875， P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降（ q=4.371、4.365、4.383、4.368， P<0.05），TIMP-1蛋白表达升高（ q=4.275， P<0.05）。 结论:miR-497可靶向负调控YAP1表达，抑制TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移。

目的:探讨槲皮苷通过调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/smads信号通路抑制结肠癌细胞迁移与侵袭。方法:HCT116结肠癌细胞分为对照组、槲皮苷低、中、高剂量组，分别使用0、5、10、20 μmol/L槲皮苷处理48 h，噻唑蓝(MTT)实验检测细胞活力，迁移实验检测细胞迁移能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，蛋白质印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、TGF-β1、p-Smad2及p-Samd3蛋白表达，采用 F检验分析组间差异。 结果:槲皮苷低、中、高剂量组细胞活力(0.48±0.01、0.41±0.01、0.34±0.01比0.54±0.02， F＝26.354， P<0.05)、细胞迁移数目[(117.62±3.49)、(43.36±2.53)、(35.56±1.32)个比(176.48±9.35)个， F＝35.624， P<0.05]、细胞侵袭数目[(86.31±3.83)、(41.28±2.26)、(30.41±1.26)个比(182.43±9.21)个， F＝36.520， P<0.05]、MMP-9 (0.98±0.05、0.46±0.02、0.32±0.01比0.35±0.01， F＝26.546， P<0.05)、Vimentin (0.53±0.03、0.41±0.03、0.20±0.01比0.08±0.00、 F＝27.649， P<0.05)、TGF-β1(0.82±0.05、0.74±0.04、0.70±0.04比0.35±0.01， F＝30.325， P<0.05)、p-Smad2(1.78±0.09、1.56±0.10、0.84±0.05比0.41±0.03， F＝33.654， P<0.05)及p-Smad3蛋白表达量(1.94±0.12、0.87±0.07、0.56±0.04比0.28±0.01， F＝35.674， P<0.05)低于对照组，槲皮苷低、中、高剂量组中TIMP-1(0.21±0.01、0.31±0.02、0.46±0.03比0.64±0.04， F＝28.413， P<0.05)、E-cadherin蛋白表达量(0.09±0.00、0.22±0.01、0.43±0.02比0.89±0.07， F＝28.561， P<0.05)高于对照组。 结论:槲皮苷能抑制HCT116细胞迁移及侵袭，可能与抑制TGF-β1/smad2/3信号通路有关。

目的:观察小干扰RNA(siRNA)沉默精子相关抗原9(SPAG9)基因对肾癌细胞生物学功能的影响。方法:体外培养人肾癌细胞786-O和OS-RC-2(购自中国科学院上海细胞库)；应用siRNA转染下调SPAG9在786-O和OS-RC-2的表达；分组采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)分析转染后SPAG9在786-O和OS-RC-2中mRNA及蛋白的表达水平；细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染24、48、72、96 h后786-O及OS-RC-2的增殖活性；Transwell法检测转染后786-O、OS-RC-2的迁移与侵袭能力；Western blot分析转染后786-O、OS-RC-2中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的蛋白表达量；利用小管形成实验观察SPAG9基因沉默后，786-O血管形成能力的变化。采用 t检验。 结果:(1)RT-PCR及Western蛋白印迹结果提示siRNA能够有效沉默786-O及OS-RC-2中SPAG9 mRNA和蛋白的表达。si-Ctrl组表达量为参照和786-Osi-SPAG9组、OS-RC-2si-SPAG9组mRNA及蛋白的表达量为(0.41±0.02、0.12±0.03， t＝14.420， P<0.01)、(0.64±0.02、0.13±0.01， t＝36.690， P<0.01)；(1.36±0.13、0.83±0.04， t＝6.816， P<0.05)、(0.93±0.01、0.63±0.04， t＝12.410， P<0.05)。(2)SPAG9基因沉默后对786-O以及OS-RC-2增殖能力无明显影响，差异无统计学意义( t＝3.182、6.674， P>0.05)。(3)SPAG9敲低后的786-O以及OS-RC-2迁移、侵袭能力显著降低，si-Ctrl组和786-Osi-SPAG9组、OS-RC-2si-SPAG9组迁移细胞数目为(105.32±10.13)、(53.34±5.17)个( t＝9.232， P<0.05)、(132.00±11.23)、(65.45±7.23)个( t＝11.161， P<0.05)；侵袭细胞数目为(88.33±16.56)、(32.08±6.79)个( t＝6.093， P<0.05)、(90.67±13.01)、(28.67±4.02)个( t＝5.924， P<0.05)。(4)SPAG9基因沉默后，786-O血管形成能力明显降低。si-Ctrl组、786-Osi-SPAG9组中平均管样结构数为12.56±2.40、3.05±0.86( t＝2.254， P<0.05)。(5)Western blot显示转染后的786-O和OS-RC-2细胞中，MMP-2的蛋白表达量显著降低。si-Ctrl组和786-Osi-SPAG9组、OS-RC-2si-SPAG9组中MMP-2的相对表达量为0.37±0.02、0.24±0.01( t＝8.712， P<0.001)、0.26±0.01、0.21±0.02( t＝4.558， P<0.05)；而TIMP-2的表达量显著升高，其相对表达量为0.52±0.03、0.59±0.03( t＝2.720， P>0.05)、0.52±0.01、0.54±0.01( t＝2.102， P>0.05)。 结论:SPAG9基因具有促进肾癌细胞迁移、侵袭及血管形成的能力，其机制可能与MMP-2的激活有关。

目的:探讨核因子E2相关因子2（Nrf2）在镧活化基质金属蛋白酶9（MMP9）致脉络丛上皮细胞紧密连接蛋白表达改变中的作用研究。方法:于2020年10月，采用永生化大鼠脉络丛上皮细胞（Z310细胞）体外模拟血脑脊液屏障，分为对照组和0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧处理组。不同浓度氯化镧处理Z310细胞24 h后，倒置显微镜观察细胞形态学变化，细胞免疫荧光法观察MMP9、闭合蛋白（occludin）和胞质附着蛋白1（ZO-1）蛋白表达水平，蛋白免疫印迹法检测MMP9、组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP1）、occludin、ZO-1和Nrf2蛋白表达水平，流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平。结果:与对照组比较，氯化镧处理组Z310细胞体积变小，细胞间连接变少，死亡细胞、细胞碎片逐渐增多。0.25、0.5 mmol/L氯化镧处理组细胞内MMP9蛋白表达水平明显高于对照组（ P<0.05），且TIMP1及紧密连接蛋白occludin、ZO-1蛋白表达水平较对照组明显降低（ P<0.05）；而与对照组比较，0.25、0.5 mmol/L氯化镧处理组细胞内ROS产生水平明显增加（ P<0.05），0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧处理组细胞内Nrf2蛋白表达水平明显下降（ P<0.05）。 结论:镧可能通过下调Nrf2表达造成细胞内ROS水平增加，从而活化MMP9致细胞间紧密连接蛋白occludin、ZO-1表达水平下降。