目的 优化中药复方三白汤的提取工艺和醇沉工艺,制备均匀、稳定、有效的三白纳米口服液.方法 通过单因素考察和正交试验优化三白汤水煎煮提取和醇沉工艺,以芍药苷和甘草酸含量作为指标确定三白纳米口服液制备参数.考察三白纳米口服液的外观、粒径、Zeta电位和粒子形态,进行感官评价和含糖量测试,考察其对2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)阳离子自由基的消除能力.结果 三白纳米口服液的最佳制备工艺为药材加12倍水浸泡1h,煎煮1.5h,煎煮3次,合并提取液用75％乙醇进行沉淀,浓缩、离心处理后,加入0.4g·kg-1山梨酸钾和0.1 g·kg-1甜菊糖苷即可.所得口服液中含有平均粒径133.5 nm、PDI值0.108、Zeta电位为-17.7 mV的类球形纳米粒子,口服液的含糖量为3.1 g·L-1,其对ABTS阳离子自由基消除IC50为1.235 mg·mL-1.结论 本研究成功制备了三白纳米口服液,其美白活性成分芍药苷和甘草酸含量高,具有良好自由基消除活性,为经典美白复方三白汤新产品的开发提供了技术参数和科学试验依据.

目的:探究通腑理肺汤(Tongfu Lifei Decoction,TLD)对脓毒症大鼠肠黏膜免疫屏障的保护作用及其机制.方法:通过盲肠结扎穿刺术(cecal ligation puncture,CLP)制备大鼠脓毒症模型,随机分为模型组(Model)、通腑理肺汤低剂量组(3.6 g/kg,TLD-L)、通腑理肺汤高剂量组(7.2 g/kg,TLD-H),同时设假手术组(Sham)作为对照,分组给药,1次/日,连续给药7 d.ELISA检测血清IL-1β、TNF-α含量,流式细胞仪检测脾脏细胞Th17、Treg细胞百分比变化,HE染色观察肠组织病理变化,qPCR检测肠组织caspase-3(胱天蛋白酶 3)和caspase-9(胱天蛋白酶3)mRNA的表达水平.Western blot检测肠组织caspase-3和caspase-9蛋白表达水平.结果:与Sham组相比,Model组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量、脾脏细胞Th17、Treg细胞数量极显著升高(P＜0.01).与Model组相比,通腑理肺汤组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量、Th17细胞数目极显著降低(P＜0.01),Treg细胞数量显著升高(P＜0.05).HE染色结果显示通腑理肺汤可减少炎症细胞浸润,改善肠黏膜损伤.qPCR检测结果显示通腑理肺汤可下调caspase-3、caspase-9 mRNA表达水平.Western blot检测结果显示通腑理肺汤可下调caspase-3、caspase-9蛋白表达水平.结论:通腑理肺汤可保护脓毒症大鼠肠黏膜免疫屏障,其可能是通过维持Th17/Treg平衡、下调IL-1β、TNF-α含量及caspase-3、caspase-9的mRNA和蛋白表达水平发挥肠黏膜免疫屏障保护作用.

目的 探讨滋阴疏肝汤对卵巢储备功能不全模型小鼠卵巢颗粒细胞(GCs)凋亡的影响.方法 研究起止时间为2020年1月至2022年12月.将30只雌性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照(NC)组、环磷酰胺模型(CTX)组、低剂量(ZY-L)组及高剂量(ZY-H)组滋阴疏肝汤组、辅酶Q10(Q10)组,实验结束前,抽取小鼠外周血,利用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测相关激素及氧化应激相关指标水平.实验结束后处死小鼠,提取卵巢原代颗粒细胞.采用化学发光法测定ATP水平,利用DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况.采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法检测线粒体功能相关基因及细胞凋亡信号调节激酶1抗体(ASK1)/应激活化蛋白激酶(JNK)信号通路相关基因的表达水平.结果 滋阴疏肝汤干预可显著降低小鼠外周血促卵泡生成素(FSH)和促黄体生成素(LH)水平(P<0.05),提高抗米勒管激素(AMH)、雌二醇(E2)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)水平(P<0.05).与CTX组相比,ZY-H组及Q10组GCs中神经萎缩蛋白1(OPA1)(NC:1.00±0.05;ZY-H:0.78±0.41;Q10:0.89±0.46)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)(NC:1.00±0.04;ZY-H:0.65±0.23;Q10:0.81±0.51)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)(NC:1.00±0.08;ZY-H:0.43±0.16;Q10:0.72±0.23)的信使RNA(mRNA)/蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而靶向线粒体分裂蛋白(Drp1)(NC:1.00±0.03;ZY-H:2.03±0.53;Q10:1.52±0.41)和线粒体裂变1蛋白抗体(Fis1)(NC:1.00±0.03;ZY-H:1.32±0.13;Q10:1.44±0.26)的mRNA/蛋白表达水平明显降低(P<0.05).RT-qPCR及蛋白质印迹法检测显示,经滋阴疏肝汤和辅酶Q10处理后,GCs中胱天蛋白酶3/9(caspase-3/9)、ASK1、JNK、细胞色素C(Cyt-c)的mRNA及蛋白水平均下降(P<0.05).TUNEL检测显示,滋阴疏肝汤干预可明显减少卵巢凋亡细胞的数量.结论 滋阴疏肝汤可降低小鼠体内氧化应激水平,保护线粒体功能,使卵巢储备功能免受CTX诱导的损伤.

目的:研究肾安汤通过调节TLR4/NF-κB信号通路对顺铂诱导的大鼠肾损伤的保护作用，探讨其作用机制。方法:将60只SD大鼠按体重分为空白组、模型组、阳性对照组、肾安汤高剂量组、肾安汤中剂量组、肾安汤低剂量组，每组10只。除空白组外，其余各组采用腹腔注射顺铂7.5 mg/kg制备急性肾损伤大鼠模型。造模后，肾安汤高、中、低剂量组分别灌胃肾安汤水煎液0.698、1.395、2.790 g/ml，阳性对照组灌胃盐酸贝那普利混悬液5 mg/kg，1次/d，连续灌胃14 d。采用HE染色观察各组大鼠肾组织病理学改变，采用ELISA法检测各组大鼠血清BUN、肌酐(Cr)、胱抑素C(Cys-c)及TNF-α、IL-6水平，Western-blot法检测肾组织TLR-4、NF-κB p65、髓样分化因子(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)蛋白表达。结果:与模型组比较，肾安汤低、中、高剂量组大鼠一般生长情况明显改善，肾脏系数降低( P<0.05)；肾安汤低、中、高剂量组大鼠血清BUN、Cr、Cys-c、TNF-α、IL-6水平降低( P<0.05)，肾组织中TLR-4[(0.54±0.07)、(0.52±0.09)、(0.41±0.04)比(0.86±0.06)]、NF-κB p65[(0.74±0.02)、(0.72±0.06)、(0.67±0.05)比(0.93±0.03)]、MyD88[(0.86±0.02)、(0.82±0.03)、(0.61±0.02)比(1.04±0.03)]、TRAF-6[(0.65±0.04)、(0.58±0.08)、(0.54±0.07)比(0.90±0.06)]蛋白表达下调( P<0.05)，且具有一定的浓度依赖性。 结论:肾安汤可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路，减轻顺铂诱导的大鼠肾损伤病理改变，从而保护大鼠肾功能。

目的:探讨补中益气汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549/DDP细胞中核因子红系2 相关因子2（Nrf2）及其下游抗氧化蛋白的影响。方法:将60只大鼠按随机数字表法分为空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组15只。低、中、高剂量组分别灌胃3.29、6.57、13.13 g/kg补中益气汤，1次/d，持续7 d。末次给药后1 h，腹主动脉取血，制备补中益气汤含药血清。将A549/DDP细胞按随机数字表法分为空白组（空白组大鼠血清）、模型组（空白组大鼠血清+顺铂）、低剂量组（低剂量含药血清+顺铂）、中剂量组（中剂量含药血清+顺铂）、高剂量组（高剂量含药血清+顺铂），相应药物干预24 h后，采用CCK-8法检测各组A549/DDP细胞对顺铂的半数抑制浓度（IC 50）；共聚焦荧光定位法检测p-Nrf2荧光表达强度；RT-qPCR法检测Nrf2 mRNA水平；Western blot法检测各组A549/DDP细胞中Nrf2、p-Nrf2、过氧化物还原酶1（PRX1）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、SOD蛋白相对表达。 结果:与模型组比较，低、中、高剂量组A549/DDP细胞对顺铂的IC 50降低（ P<0.01）；p-Nrf2荧光强度降低（ P<0.01）；Nrf2 mRNA水平降低（ P<0.01）；Nrf2、p-Nrf2、SOD、PRX1、GPX4蛋白表达下调（ P<0.01），尤以中、高剂量组效果更显著（ P<0.05）。 结论:补中益气汤含药血清通过抑制A549/DDP细胞中Nrf2活性表达及下调其靶基因SOD、PRX1、GPX4蛋白表达，改善肺腺癌顺铂耐药。

目的:动态观察重型颅脑损伤（sTBI）急性期大鼠神经功能缺损评分（NSS）、Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路、脑源性神经营养因子（BDNF）与神经生长因子（NGF）的表达规律，探讨活血化瘀方剂的干预作用。方法:将126只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组（生理盐水2 kg/L）、模型组（生理盐水2 kg/L）、脑蛋白水解物组（BP组，5.6 g/kg）、桃红四物汤组（TH组，10.2 g/kg）、血府逐瘀汤组（XF组，15.6 g/kg）、通窍活血汤组（TQ组，9.6 g/kg）、补阳还五汤组（BY组，28.7 g/kg）7组，每组18只。采用改良Feeney自由落体法建立sTBI大鼠模型；对照组不予创伤处理。各组分别于伤后6 h灌胃相应药物，伤后1、3、7 d进行NSS评分；取大鼠海马组织，采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Wnt3a和β-catenin的mRNA表达；采用免疫组化法检测BDNF和NGF的阳性表达。结果:与对照组比较，模型组大鼠伤后1 d即出现明显的颅脑损伤症状，表现为NSS评分明显升高，Wnt3a和β-catenin的mRNA表达明显上调，BDNF和NGF阳性表达明显增加，说明sTBI大鼠模型制备成功，并随时间延长呈现一定自我修复能力。与模型组相比，XF组、TQ组和BY组NSS评分于伤后1 d即明显下降（分：6.6±1.5、6.1±2.0、5.7±2.4比9.4±1.5，均 P<0.05），而BP组及TH组NSS评分于伤后7 d才明显下降，且TQ组和BY组NSS评分下降幅度较其他药物组更加显著。与模型组比较，BP组海马组织Wnt3a和β-catenin的mRNA表达分别于伤后1 d、3 d明显升高，并随时间延长持续升高；4个活血化瘀方剂组Wnt3a和β-catenin的mRNA表达于伤后1～3 d均有不同程度的波动，但均于伤后7 d明显高于模型组，以BY组升高更为显著〔Wnt3a mRNA（2 -ΔΔCt）：154.7±4.1比17.4±1.0，β-catenin mRNA（2 -ΔΔCt）：17.05±0.45比2.74±0.13，均 P<0.05〕，其次为TQ组〔Wnt3a mRNA（2 -ΔΔCt）：126.6±2.8比17.4±1.0，β-catenin mRNA（2 -ΔΔCt）：8.70±1.19比2.74±0.13，均 P<0.05〕。与模型组比较，BP组BDNF和NGF的阳性表达在伤后1 d升高，但3 d达峰值后有所下降；4个活血化瘀方剂组BDNF和NGF的阳性表达于伤后1～3 d均有不同程度的波动，但均于伤后7 d明显高于模型组，其中TQ组和BY组在伤后1 d即明显高于模型组〔BDNF阳性细胞（个/MP）：56.4±6.2、61.6±7.0比37.4±2.0，NGF阳性细胞（个/MP）：58.4±5.0、62.4±4.4比53.4±3.6，均 P<0.05〕，且伤后7 d时升高幅度较其他药物组更为显著。 结论:桃红四物汤、血府逐瘀汤、通窍活血汤和补阳还五汤对sTBI急性期大鼠的神经再生修复均有一定疗效，但作用强度有所不同，以补阳还五汤和通窍活血汤起效更快、效果更好。

目的:观察芪附理中灌肠方对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜机械屏障的影响，探讨其作用机制。方法:将70只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、美沙拉嗪组及芪附理中灌肠方高、中、低剂量组，空白组10只，其余各组12只。除空白组外，其余各组采用苦寒泻下法（大黄煎剂）合并三硝基苯磺酸（TNBS）/55%乙醇复合法诱导法制备UC大鼠模型。造模成功后，空白组和模型组灌肠生理盐水1 ml，芪附理中灌肠方高、中、低剂量组灌肠芪附理中汤药液3.00、1.50、0.75 g/kg，美沙拉嗪组灌肠美沙拉嗪溶液0.03 g/kg，1次/d，连续干预14 d。14 d后进行疾病活动指数（DAI）评分，采用HE染色观察结肠病理组织，免疫组化染色和Western blot法检测结肠组织闭合蛋白（Occludin）及连接黏附分子A（JAM-A）蛋白表达。结果:HE染色结果显示，模型组黏膜结构破坏，炎症细胞浸润，可见水肿和溃疡灶；美沙拉嗪组及芪附理中灌肠方各剂量组黏膜结构较完整，可见新生上皮炎症浸润、水肿、溃疡均有好转。与模型组比较，芪附理中灌肠方各剂量组DAI评分降低（ P<0.01），芪附理中灌肠方高、中剂量组结肠组织Occludin、JAM-A蛋白表达升高（ P<0.05）。 结论:芪附理中灌肠方可缓解UC大鼠症状及病理形态，其修复肠黏膜屏障的作用机制可能与上调Occludin、JAM-A蛋白表达有关。

目的:探究清肺渗湿汤对支气管哮喘小鼠肺组织MMP-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响。方法:将50只BALB/C雄性小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、地塞米松组、清肺渗湿汤低剂量组、清肺渗湿汤高剂量组，每组10只。采用卵清蛋白激发法制备哮喘模型小鼠。造模成功后，地塞米松组灌胃地塞米松1.56 mg/kg，清肺渗湿汤低、高剂量组灌胃清肺渗湿汤14.235、28.470 g/kg，对照组、模型组灌胃等体积的0.9%氯化钠溶液。干预4周后，检测各组小鼠气道反应性（Penh值）；HE染色观察肺组织病理学改变；ELISA检测肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平；Western blot法检测肺组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达。结果:与模型组比较，清肺渗湿汤各剂量组小鼠肺组织气管壁、肺泡壁损伤明显减轻。与模型组比较，清肺渗湿汤低、高剂量组小鼠Penh值降低（ P<0.05），肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低（ P<0.05），肺组织MMP-9、MMP-2、TIMP-1表达降低（ P<0.05），且具有一定的剂量依赖性。 结论:清肺渗湿汤可有效缓解哮喘模型小鼠气道炎症，减轻气道高反应性、改善肺功能，抑制气道重塑，其作用机制可能与下调MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达有关。

目的:探究茶皂素（TS）对志贺菌感染性肠炎的保护作用及其机制研究。方法:实验分体外实验和体内实验。体外实验：通过微量肉汤稀释法检测TS对志贺菌的抗菌活性；使用酶标仪检测不同浓度TS作用下菌液的600 nm下的吸光度（ A600），绘制生长曲线；通过平板菌落计数检测细菌数。体内实验：将15只小鼠分为对照组、福氏2a志贺菌301株（Sf301）组和TS组，每组5只。Sf301组和TS组连续8 d分别灌胃无菌水或TS，于第3天制备志贺菌感染小鼠模型。用疾病活动指数（DAI）评价小鼠的一般情况。于第8天处死小鼠，测量各组小鼠结肠长度，取结肠组织行HE染色，观察病理学变化；取小鼠盲肠内容物与粪便进行平板计数，检测志贺菌载量；用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测结肠炎症因子的mRNA表达水平。 结果:（1）体外实验：TS的最小抑菌浓度（MIC）为1 024 μg/ml，不同浓度的TS（256、512、1 024 μg/ml）的平板菌落计数、 A600依次减小，与对照组比较，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。（2）体内实验：对照组、TS组小鼠结肠分别为（7.70±0.24）、（7.35±0.41） cm，与Sf301组［（6.13±0.05） cm］比较，差异有统计学意义（ P<0.05）。组织病理学结果显示Sf301组结肠上皮细胞脱落，杯状细胞减少，炎性细胞浸润。而TS组结肠黏膜较完整，无炎性细胞浸润。与Sf301组比较，TS组小鼠盲肠内容物细菌载量更低（ P<0.05）。TS组的肿瘤坏死因子-α水平低于Sf301组，白细胞介素-10水平高于Sf301组（均 P<0.05）。 结论:TS可有效抑制志贺菌，通过减少志贺菌载量和抑制炎症缓解志贺菌感染性肠炎。

目的:观察半夏秫米汤对痰湿内阻慢性失眠模型大鼠5-羟色胺1A受体（5-HT 1AR）、5-羟色胺2A受体（5-HT 2AR）及5-羟色胺（5-HT）、5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）的影响，探讨该方化痰通利、引阳入阴安神的作用机制。 方法:将48只Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组，模型组，半夏秫米汤低、中、高剂量组，地西泮组，每组8只。除正常组外，其余各组采用“高脂饲料+单平台水环境法”制备痰湿内阻慢性失眠大鼠模型，半夏秫米汤低、中、高剂量组灌胃半夏秫米汤4.69、9.38、18.75 g/kg，地西泮组灌胃地西泮水溶液0.52 mg/kg，1次/d，连续灌胃2周。正常组、模型组灌胃等体积生理盐水。采用qPCR法检测大鼠脑干5-HT 1AR、5-HT 2AR mRNA水平，采用Western blot法检测大鼠中缝核5-HT 1AR、5-HT 2AR蛋白表达，采用高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）法检测大鼠脑干5-HT、5-HIAA含量。 结果:与模型组比较，半夏秫米汤低、中、高剂量组及地西泮组5-HT 1AR mRNA水平升高（ P<0.01）；半夏秫米汤高剂量组、地西泮组5-HT 2AR mRNA水平降低（ P<0.05），5-HT 1AR、5-HT 2AR蛋白表达升高（ P<0.05或 P<0.01）；半夏秫米汤中、高剂量组及地西泮组5-HT水平升高（ P<0.05或 P<0.01）；半夏秫米汤各剂量组及地西泮组5-HIAA水平升高（ P<0.05或 P<0.01）。 结论:半夏秫米汤可能通过调控5-HT 1AR、5-HT 2AR、5-HT、5-HIAA对痰湿内阻慢性失眠模型大鼠进行干预。