目的：:研究肾上腺素α受体阻滞剂妥拉唑啉控制雏鸡实验性近视的有效性和安全性，并探讨其作用机制。方法：:实验研究。于2021年3月将61只6日龄白莱航鸡随机分为形觉剥夺对照组（FDM）、形觉剥夺后妥拉唑啉组（FDM+T100）、形觉剥夺后妥拉唑啉联合L-NAME组（FDM+T100+L-NAME）和离焦诱导对照组（LIM）、离焦诱导后妥拉唑啉组（LIM+T100）、离焦诱导后妥拉唑啉联合L-NAME组（LIM+T100+L-NAME）进行有效性研究；空白对照组（Blank）、单纯妥拉唑啉干预组（Blank+T100）进行安全性研究。所有雏鸡均取右眼进行实验干预，妥拉唑啉干预组在造模的同时每天进行玻璃体腔注射12.5 μL妥拉唑啉，妥拉唑啉联合L-NAME干预组注射等量妥拉唑啉和L-NAME，对照组注射等体积0.9%氯化钠溶液，持续6 d。记录和统计分析各组处理前后的屈光度和眼球生物参数。安全性研究中，对Blank组和Blank+T100组雏鸡诱导结束后进行视网膜电图检查。雏鸡处死后眼球固定切片进行TUNEL染色观察视网膜功能损害程度。不同近视模型中对照组与T100组、T100组与T100+L-NAME组两两比较，采用独立样本 t检验和Mann-Whitney U检验。 结果：:经过6 d处理后，在形觉剥夺模型中，与FDM组相比，FDM+T100组的屈光度近视化减少（ t=-16.16， P<0.001），眼轴增长量减少（ t=12.41， P<0.001），脉络膜厚度减薄量减少（ t=-2.46， P=0.031）；与FDM+T100组相比，FDM+T100+L-NAME组屈光度近视化增加（ t=4.20， P=0.001），眼轴增长量增加（ t=-2.33， P=0.033）。在离焦诱导模型中，与LIM组相比，LIM+T100组屈光度近视化减少（ t=-5.77， P<0.001），眼轴增长量减少（ t=4.19， P<0.001）；与LIM+T100组相比，LIM+T100联合L-NAME组屈光度近视化增加（ t=3.74， P=0.001），眼轴增长量增加（ t=-3.20， P=0.005）。安全性研究中，Blank组和Blank+T100组的屈光度及眼球生物参数变化值之间差异均无统计学意义（均 P>0.05）；ERG结果显示，Blank组和Blank+T100组相比，双眼各检测指标比值之间差异均无统计学意义（均 P>0.05）。TUNEL染色显示各组均未见显著凋亡。 结论：:妥拉唑啉能够有效延缓雏鸡实验性近视的屈光度和眼轴进展，但在应用L-NAME后减弱，提示在妥拉唑啉扩张脉络膜血管时可能也有一氧化氮共同参与发挥作用。

近视作为一种全球发病率最高的屈光不正，其趋势日益增加，已成为眼科研究领域的热点。形觉剥夺性近视是实验性近视中较为成熟的造模方法。众多研究报道多巴胺作为一种调控视网膜及眼球生长微环境的神经递质，通过与多巴胺受体、途径间的相互作用，在形觉剥夺性近视的形成和抑制过程中具有重要意义。现就多巴胺对形觉剥夺性近视的影响及其生化机制进行探讨，以期为近视的实验研究提供参考。

目的:应用网络药理学和分子对接技术探索丹参在近视中的作用靶点并验证。方法:采用TCMSP数据库提取丹参作用靶点，采用GeneCards、DisGeNET、Malacard和OMIM数据库提取近视相关靶点并取交集。选取交集靶点提取对应中药活性成分，采用Cytoscape构建中药药理调控网络。采用String数据库对关键靶点基因构建蛋白质互作网络图，选取相关蛋白从PubChem数据库下载活性成分的三维结构，采用AutoDockvina软件进行分子对接。选取清洁级3周龄三色豚鼠12只，右眼采用透镜离焦诱导型近视(LIM)进行实验性近视诱导，采用计算机随机数法将其分为生理盐水组和丹参素钠组，每组6只，分别在LIM维持同时每天球周注射1 ml生理盐水或丹参素钠，对侧眼为阴性对照。实验第0、14、28天采用A型超声测量眼轴长度，采用带状光检影镜检测屈光度。为规避个体差异，采用相对等效球镜度数(处理眼等效球镜度数－对侧眼等效球镜度数)、相对眼轴长度(处理眼眼轴长度－对侧眼眼轴长度)比较。实验第28天，采用Western blot法检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白相对表达量。结果:筛选出近视与源自丹参的中药成分靶点交集关键靶点16个，构建以丹参为候选药物的中药网络药理图和蛋白质互作图，筛选出基质金属蛋白酶2( MMP2)、 TGFB1、 MMP9靶点基因的对应蛋白可与木犀草素、丹参素、丹参酮ⅡA等活性成分进行分子对接。诱导后14 d，丹参素钠组和生理盐水组相对等效球镜度分别为(－4.67±1.03)和(－6.30±1.22)D，相对眼轴长度分别为(0.67±0.26)和(1.08±0.34)mm，丹参素钠组近视程度加深较轻，眼轴长度增长较少，差异均有统计学意义( t＝2.412， P＝0.039； t＝2.750， P＝0.049)。阴性对照组、生理盐水组和丹参素钠组HIF-1α蛋白相对表达量分别为0.20±0.01、1.29±0.05和0.63±0.02，TGF-β1蛋白相对表达量分别为0.93±0.05、0.25±0.01和0.74±0.05，其中丹参素钠组HIF-1α蛋白相对表达量高于阴性对照组，低于生理盐水组，TGF-β1蛋白相对表达量低于阴性对照组，高于生理盐水组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:源于丹参提取的天然化合物可作为抗巩膜缺氧和改善巩膜细胞外基质重塑的潜在候选药物。

通过对高三学生近视发生情况问卷调查,发现近视早发率与父母近视率之间具有相关性,鼓励学生提出问题"近视早发的原因是什么?"并围绕该问题展开思考与讨论.援引"实验性小鼠近视诱导"科研资料,组织学生设计并评价实验方案,锻炼科学探究能力,体验科学研究的缜密;分析实验数据,进行逻辑推理,磨砺科学思维;深化"表观遗传"概念,重建基因、环境与性状三者之间的关系,养成爱眼、护眼的意识和习惯.

目的 观察豚鼠频闪光诱导性近视和形觉剥夺性近视模型中外侧膝状体多巴胺(DA)含量的变化,并进行对比分析,初步探讨比较不同近视模型的中枢发病机制.方法 24只普通级2周龄豚鼠随机分成3组(n=8):频闪光照(FLM)组、形觉剥夺(FDM)组、对照组,各组均饲养8周.在造模前后分别测量各组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度,8周实验结束后采用高效液相色谱电化学检测法(HPLC-ECD)对左脑外侧膝状体DA进行定量.结果造模前,各组屈光度和眼轴长度差异无显著性(P>0.05).造模第8周,与对照组相比,FLM组和FDM组右眼屈光度变化值(P<0.001)、眼轴长度变化值(P<0.05)差异均有显著性,提示近视建模成功.HPLC-ECD结果显示:豚鼠左脑外侧膝状体DA含量FLM组>对照组>FDM组;对照组为(37.04 ± 1.18)pg/μL;FDM组为(24.27 ± 3.46) pg/μL,与对照组相比差异有显著性(P=0.021);FLM组为(45.58 ± 1.98)pg/μL,与对照组相比差异有显著性(P=0.01).结论 频闪光诱导性近视模型外侧膝状体DA含量增加,而形觉剥夺性近视模型中DA含量减少,说明DA在两种实验性近视外侧膝状体中的表达不一致,两种近视模型的发生机制可能不同.

目的 研究豚鼠近视模型中屈光度眼轴长度变化及后极部巩膜中Ⅰ型胶原纤维的变化.方法 取出生1周的豚鼠75只,利用6号半透明乳胶气球作为头套诱导形觉剥夺性近视(FDM)动物模型.随机分为空白对照组、形觉剥夺(FDM)组和自身对照组.分别测量记录实验豚鼠不同时空点的双眼屈光度及眼轴长度.形觉剥夺实验组分为遮盖2周、遮盖4周、遮盖4周去遮盖1周及遮盖6周4个亚组,左眼为遮盖眼(FDM组),采用半透明面罩遮盖诱导形觉剥夺性近视,右眼不予处理(自身对照组).对遮盖前后实验组和对照组双眼屈光度、眼轴长度进行测量,并对后极部巩膜中Ⅰ型胶原进行免疫组化分析.结果 FDM组由遮盖前远视(+2.09 ±0.31)D 逐渐变成遮盖6周时近视(-7.07 ±0.56)D,眼轴也由遮盖前(5.93 ±0.39)mm 到6周时(7.99 ± 0.32)mm,且后极部巩膜中Ⅰ型胶原含量也逐渐降低.结论 形觉剥夺法可成功制造豚鼠实验性近视模型,在豚鼠形觉剥夺性近视的形成过程中伴随着眼球近视度数逐渐增加和眼轴长度不断增长,且后极部巩膜中Ⅰ型胶原随着近视度数加深逐渐降低.

目的 探讨实验性高度近视眼巩膜组织的胶原及弹性模量的变化,进一步明确高度近视眼的发生机制.方法 1月龄新西兰大白兔20只随机单侧眼球眼睑缝合建立高度近视眼动物模型,另一侧眼球为正常对照眼,建模60d后,测量眼轴长度确定建模成功;获取不同部位巩膜组织(前部、赤道部和后部巩膜),一部分巩膜制成巩膜条带,用Instron 5544试验机检测巩膜的弹性模量,一部分巩膜组织固定后进行HE染色观察巩膜结构,一部分巩膜组织固定后通过电镜观察胶原原纤维,一部分巩膜组织匀浆检测羟脯氨酸浓度,确定胶原含量.结果 随着月龄增加,巩膜组织弹性模量和胶原含量不断增加,胶原原纤维的直径不断增大.高度近视眼后部巩膜的弹性模量、羟脯氨酸含量明显小于正常眼,且胶原原纤维的直径小于正常眼,而前部和中部巩膜未见明显差异.结论 在高度近视发生过程中,后部巩膜发生重塑,胶原原纤维的排布和胶原含量发生变化,导致后部巩膜生物力学性能降低,容易发生扩张和变形,进而引起近视.研究结果为后续以胶原为靶点,在生长发育早期防治高度近视眼奠定基础.

目的 评估口服核黄素联合脉冲和持续紫外线A(UVA)照射加速巩膜交联对实验性豚鼠进展性近视的治疗作用以及对巩膜生物力学和组织学改变作用. 方法 30只4周龄豚鼠按照随机数字表法分为空白对照组、非交联组、传统交联组、脉冲光加速交联组和持续光加速交联组,每组均为6只.3个组巩膜交联组豚鼠均连续服用核黄素和维生素C3d后,进行右眼近视眼建模和UVA照射.照射参数分别为传统交联组波长370 nm,功率为0.67 mW/cm2,连续照射1h;脉冲光加速交联组波长370 nm,功率为10 mW/cm2,共照射8 min,脉冲模式为1 s开/1 s关;持续光加速交联组波长370 m,功率为10 mW/cm2,连续照射4 min.非交联组仅接受右眼近视眼建模,但未服用核黄素及维生素C,也不接受UVA照射;空白对照组不接受任何处理.分别测量5个组基线及建模后的屈光度和眼轴长度.2周后颈椎脱臼法处死豚鼠,摘除右眼行巩膜生物力学和组织病理学检查.结果 实验2周后,与空白对照组相比较,非交联组眼轴明显伸长,近视屈光度明显增加,巩膜最大载荷及最大应力显著下降,巩膜胶原纤维粗细不均匀,部分溶解,巩膜Collagen 1 A及TIMP-2阳性染色减少,MMP2阳性染色增加,提示近视造模成功.传统交联组、脉冲光加速交联组和持续光加速交联组,交联组豚鼠眼球眼轴长度短于非交联组,和近视屈光度明显高于非交联组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);3个交联组豚鼠眼球最大载荷值及最大应力值均高于非交联组[最大应力:(2.20±0.03)、(2.67±0.05)、(2.41±0.04) Mpa vs.(1.30±0.02) Mpa;最大载荷:(1.93±0.03)、(2.33±0.28)和(1.91±0.03)P vs.(1.54±0.06)P],差异均有统计学意义(均P＜0.01);巩膜组织病理学检查显示脉冲光加速交联组和持续光加速交联组巩膜胶原纤维粗细均匀,更接近空白对照组巩膜形态.免疫组织化学染色显示,与非交联组比较,3个组交联组巩膜Collagen1A阳性染色均增多,脉冲光加速交联组和持续光加速交联组MMP2阳性染色减少及TIMp-2阳性染色增加.结论 口服核黄素联合脉冲和持续UVA照射加速巩膜交联可以通过增强巩膜生物力学强度,有效地阻止豚鼠实验性近视的进展.

目的 观察养血补肾方对实验性近视眼视网膜p-Stat3表达变化的影响,为治疗近视眼提供相关实验依据.方法 取2周龄健康的豚鼠,用半透明眼罩行右眼遮盖60d制备形觉剥夺性近视模型,将造模成功的豚鼠随机分为对照组和治疗组,并测量豚鼠造模前后双眼的屈光度(D)和眼轴(L).治疗组给予养血补肾方水煎液(生药量12.7 g/kg)连续灌胃21d,每日一次,对照组不进行干预.采用HE染色法观察视网膜组织形态学变化,采用免疫组化、Western-blot等方法检测视网膜p-Stat3的表达变化.结果 半透明眼罩遮盖豚鼠右眼60 d后成功制备实验眼剥夺性近视模型,与自身对照眼相比屈光度明显增加,剥夺前屈光度为(3.924±3.392)D,剥夺后(-2.583±2.954)D,P=0.001,差异有统计学意义.造模前右眼(形觉剥夺眼)眼轴平均长度为(7.557±0.176)mm,造模后右眼眼轴平均长度为(8.278±0.250)mm,眼轴长度明显增加,P=0.01,差异具有统计学意义.与对照组相比,治疗组灌胃21 d后,p-Stat3在未遮盖豚鼠眼视网膜中有微弱表达,遮盖后p-Star3表达相比遮盖前上调,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 p-Stat3信号通路均参与了实验性近视的形成和发展,而养血补肾方对视网膜p-Stat3蛋白的表达变化无影响.

目的 研究近视巩膜重塑中转录活性蛋白1(specificity protein 1,Sp1)作为转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)下游信号转录因子的表达情况和调节Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)表达的作用.方法 出生7d的有色豚鼠75只,随机选取50只左眼使用6号无色半透明乳胶气球作为头套诱导形觉剥夺性近视(form deprivation myopia,FDM)动物模型为FDM组,右眼作为自身对照组,另外25只不作处理为正常组.记录各组豚鼠屈光度及眼轴长度变化.Western blot和RT-PCR检测正常组和FDM组豚鼠遮盖后0周(遮盖前)、2周、4周、6周及遮盖4周去遮盖1周(4/-1周)时巩膜中Spl和Collagen Ⅰ蛋白和mRNA的表达变化,并分析两者的关系.结果 FDM组豚鼠眼随着遮盖时间延长,由遮盖前远视状态逐渐变为近视状态,眼轴长度也逐渐增长.与正常组相比,FDM组巩膜内Spl和Collagen Ⅰ的蛋白和mRNA表达均下调,且随遮盖时间的延长,其表达不断减弱.正常组及FDM组遮盖后0周、2周、4周、4/-1周、6周,Spl蛋白相对表达量分别为1.864±0.014、1.856±0.016、1.215±0.016、0.752±0.013、0.945±0.017、0.518±0.012;Collagen Ⅰ蛋白相对表达量分别为2.922±0.005、2.836±0.001、2.336±0.002、1.500±0.003、1.754±0.006、1.082±0.001;Spl mRNA:0.599±0.025、0.557±0.024、0.510±0.013、0.349 ±0.013、0.457±0.009、0.168±0.012;Collagen Ⅰ mRNA:1.071±0.014、1.010±0.021、0.947±0.006、0.626±0.010、0.770±0.020、0.331±0.004.遮盖2周后各时间点与正常组相比,Sp1和Collagen Ⅰ蛋白和mRNA表达差异均有统计学意义(均为P＜0.05).Sp1与Collagen Ⅰ的蛋白和mRNA表达均呈明显正相关(均为r=1.00,P＜0.05).结论 Sp1作为TGF-β1的下游信号转录因子可能参与了近视巩膜重塑中Collagen Ⅰ的调控,提示Sp1信号转录因子可能通过TGF-β1-Sp1-Collagen Ⅰ信号通路在近视巩膜重塑中发挥重要作用.