目的:观察小青龙汤对哮喘寒饮蕴肺证小鼠环磷酸腺苷(cAMP)、囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)、黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响,探讨小青龙汤基于cAMP通路对CFTR离子通道改善黏液纤毛清除功能的作用机制.方法:常规卵清白蛋白(OVA)加寒性刺激干预建立小鼠哮喘寒饮蕴肺证模型,于末次激发后取肺组织进行苏木素-伊红(HE)及阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色,收集支气管肺泡灌洗液及肺组织上清液,检测肺泡灌洗液中MUC5AC水平及肺组织上清液中cAMP、CFTR水平.结果:成功构建哮喘小鼠寒饮蕴肺证模型,小鼠肺泡灌洗液中MUC5AC表达上升,肺组织上清液中cAMP、CFTR表达均下降,肺组织病理切片见气道周围炎症细胞浸润,气道黏液分泌及杯状细胞增生.与模型组比较,地塞米松组、小青龙汤组肺泡灌洗液中MUC5AC表达均下降,小青龙汤组肺泡灌洗液中MUC5AC表达下降幅度小于地塞米松组,差异均有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,cAMP组、小青龙汤组肺组织上清液中cAMP、CFTR表达均上升,小青龙汤组肺组织上清液中cAMP、CFTR表达上升幅度均小于cAMP组,差异均有统计学意义(P＜0.05).病理切片见,小青龙汤组支气管周围基本无炎性细胞浸润,支气管管壁及肺泡保持较完整,平滑肌增生、支气管增厚与cAMP组、地塞米松组相比程度较轻,管腔内未见黏液栓及脱落的肺泡上皮.小青龙汤组支气管管壁清晰,杯状细胞增生较少,气道内黏液分泌少于cAMP组、地塞米松组.结论:小青龙汤可以减轻哮喘寒饮蕴肺证小鼠气道黏液高分泌及保障黏液纤毛清除功能运行,作用机制为通过cAMP通路提高CFTR离子通道.

目的 探究冷刺激对哮喘大鼠气道炎症的影响以及平喘宁对寒性哮喘大鼠气道炎症的治疗作用及机制.方法 将72只大鼠随机分成正常组,卵清蛋白(ovalbumin,OVA)组,模型组(OVA+冷刺激),平喘宁低、中、高剂量组,桂龙咳喘宁组以及地塞米松组,每组9只.除正常组外,其余各组大鼠采用OVA或OVA联合冷刺激建立哮喘及寒性哮喘大鼠模型,模型复制完成后,分别给予生理盐水及对应药液灌胃21 d.观察记录各组大鼠的一般行为学情况;采用HE染色检测大鼠肺组织病理变化;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)水平;Western blot法检测瞬时受体电位美拉塔素8(transient receptor potential melastatin subtype 8,TRPM8)、粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(granule macrophage-colony stimulating factor,GM-CSF)、TSLP蛋白表达水平.结果 与正常组比较,OVA组、模型组大鼠均出现呼吸急促、腹部收缩明显等行为学表现;病理结果显示支气管管壁增厚、肺组织及支气管周围可见大量炎症细胞浸润;BALF中IL-1β、IL-6、TSLP水平显著升高(P<0.05);肺组织TRPM8、GM-CSF、TSLP蛋白表达水平显著升高(P<0.05).与模型组比较,平喘宁可改善大鼠的行为学表现,减轻支气管管壁增厚、肺组织及支气管周围炎症细胞浸润,显著降低大鼠BALF中IL-1β、IL-6、TSLP水平(P<0.05),显著降低肺组织TRPM8、GM-CSF、TSLP蛋白表达水平(P<0.05).结论 冷刺激会加重哮喘大鼠气道炎症反应,平喘宁可能通过调控寒性哮喘大鼠TRPM8及相关蛋白表达水平,减轻寒性哮喘大鼠气道炎症反应,进而达到治疗哮喘的作用.

目的 探讨超声药物透入联合蜜芽太极罐治疗小儿寒性哮喘急性发作的临床价值.方法 选取2020年8月—2021年8月温州市中西医结合医院诊治的寒性哮喘急性发作患儿100例,随机分为对照组与治疗组,每组50例,均给予平喘、抗炎等西医基础治疗,治疗组同时给予超声药物透入联合蜜芽太极罐治疗7 d.观察两组治疗前后症状积分、肺功能及血清炎症细胞因子变化.结果 治疗后,哮鸣、喘息、咳嗽、痰液、胸闷积分均低于治疗前,且治疗组均低于对照组(均P＜0.05).治疗前,两组患儿第1s用力呼气量(FEV,)、用力肺活量(FVC)及FEV1/FVC比较差异均无统计学意义(均P＞0.05);治疗后,FEV1、FVC及FEV1/FVC均较治疗前升高,且治疗组均高于对照组(均P＜0.05).治疗前,两组患儿血清白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)水平比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).治疗后,血清IL-4、TNF-α均较治疗前下降,且治疗组均低于对照组,IFN-γ较治疗前升高,且治疗组高于对照组(均P＜0.05).治疗组治疗总有效率为92.00％,高于对照组(76.00％)(t=4.762,P＜0.05).结论 超声药物透入联合蜜芽太极罐治疗小儿寒性哮喘急性发作有助于快速缓解患儿症状,改善肺功能,抑制炎症反应,提高治疗疗效,具有一定临床价值.

研究射干麻黄汤对寒性哮喘大鼠的改善作用及其作用机制.将72只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)的健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(地塞米松,0.4 mg·kg-1)组以及射干麻黄汤低、中、高剂量组(3.2、6.4、12.8 g·kg-1).除空白组予生理盐水,其他组均采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)制成的溶液腹腔注射致敏;之后将大鼠放入0～2℃可调节的寒冷箱中,同时予OVA溶液超声雾化激发,建立寒性哮喘大鼠模型.给药3周后,观察大鼠的一般行为学,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠肺组织的病理变化,过碘酸希夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色观察大鼠肺组织的黏液变化,马松(Masson)染色观察大鼠肺组织的胶原沉积变化,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎症因子白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测大鼠肺组织瞬时受体电位香草素 1(transient receptor potential vanilloid subfamily member 1,TRPV1)、核呼吸因子 1(nuclear respiratory factor 1,NRF-1)、线粒体转录因子 A(mitochondrial transcription factor A,mtTFA)mRNA 的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肺组织TRPV1、NRF-1、mtTFA的蛋白表达.结果显示,与空白组相比,模型组大鼠出现呼吸急促,大便次数增多、偏稀,毛发脏乱无光泽等行为学表现;病理结果显示肺组织炎症细胞浸润明显,支气管管腔变窄,黏液分泌增多,胶原沉积增多;血清及BALF中IL-4、VEGF水平显著升高;肺组织TRPV1、NRF-1、mtTFA mRNA及蛋白表达显著升高.与模型组相比,射干麻黄汤可改善大鼠的行为学表现,减轻肺组织病理变化、黏液生成及胶原沉积的变化;显著降低血清及BALF中IL-4、VEGF的水平;不同程度降低肺组织TRPV1、NRF-1、mtTFA mRNA的表达,以射干麻黄汤中剂量组最为显著;不同程度降低肺组织TRPV1、NRF-1、mtTFA蛋白的表达,以射干麻黄汤中剂量组最为显著.上述研究表明,射干麻黄汤可减轻寒性哮喘大鼠的气道炎症,抑制气道重塑,其机制可能与调节TRPV1/NRF-1/mtTFA信号通路相关.

目的:通过基因芯片技术观察咳喘六味合剂对寒哮型支气管哮喘患者外周血表达谱影响并对相关目标基因进行实验验证.方法:选取上海中医药大学附属龙华医院呼吸科门诊就诊的轻度寒性哮喘急性发作期患者64例,随机分为两组:咳喘六味合剂组(32例)和安慰剂对照组(32例).两组患者分别口服咳喘六味合剂及安慰剂,20 mL/次,1d3次,疗程共1周.取患者干预后外周血行基因芯片检测,通过荧光实时定量PCR技术对相关基因进行结果验证.结果:在表达谱中筛选出差异倍数1.5倍以上的基因233条.在选取的目标基因中,咳喘六味合剂组IL-8 rnRNA、PDGFR-β mRNA的表达降低;IL-10 mRNA的表达升高,与基因芯片结果趋势一致,从而验证了基因芯片结果的准确性.结论:咳喘六味合剂可能通过干预与免疫、炎症、气道重塑等相关基因的表达治疗寒性哮喘.

目的 平喘方治疗急性发作期的哮喘患儿,临床疗效显著,现拟进一步评价该方治疗小儿哮喘急性发作期寒哮、热哮、外寒里热型哮喘的临床疗效,以验证其痰瘀互结学说,丰富中医药治疗小儿哮喘的理论和治法.方法 将200例哮喘发作期患儿随机分为对照组和观察组,每组100例.对照组寒性哮喘选小青龙汤加减,热性哮喘选麻杏石甘汤加减,外寒里热选大青龙汤加减;观察组用平喘方加味治疗,寒性哮喘选平喘方合小青龙汤加减,热性哮喘选平喘方合麻杏石甘汤加减,外寒里热型选平喘方合大青龙汤加减,疗程均为1周,比较治疗前后症状、体征和肺功能等方面的差异.结果 最终共180例患儿完成本次研究,观察组和对照组各90例.治疗后2组中医证候积分改善率(%)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后2组FEV1数值、FEV1/FVC预计值、PEF预计值比较,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后寒性哮喘组与热性哮喘、外寒里热组比较哮鸣音消失时间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 平喘方治疗哮喘急性期有较好疗效,尤其对哮喘咳痰、肺功能和哮鸣音的改善方面具有优势,且用药安全.

目的 通过观察平喘宁干预后哮喘模型大鼠ERK信号转导通路相关蛋白以及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达,探讨平喘宁调节寒性哮喘大鼠气道重塑的机制.方法 采用SPF级雄性SD大鼠复制寒性哮喘模型.将大鼠随机分成正常对照组,模型组,地塞米松组,桂龙咳喘宁组以及平喘宁高、中、低剂量组.连续给药4周后,光镜下观察肺组织病理形态学变化,采用免疫组织化学法检测肺组织中TIMP-1、MMP-9表达水平;采用Western blot法检测大鼠肺组织血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)、细胞外信号调节激酶-1(extracellular signal-regulated kinase 1,ERK1)、磷酸化细胞外信号调节激酶-1(phosphorylated ERK1,p-ERK1)的表达水平.结果 与正常对照组比较,模型组有明显炎性细胞浸润、气管上皮脱落增多、气管平滑肌增厚等气道重塑现象;与模型组比较,各治疗组炎性细胞浸润减少,气管上皮脱落减少,平滑肌增厚情况改善,气道重塑均得到适当缓解.与正常对照组比较,模型组MMP-9、TIMP-1的表达水平显著升高(P＜0.05);而与模型组比较,平喘宁各剂量组MMP-9、TIMP-1表达水平均显著下降(P＜0.05),尤其是平喘宁高剂量组下降最为明显.与正常对照组比较,模型组PDGF以及ERK1、p-ERK1蛋白的表达水平显著升高(P＜0.05);而与模型组比较,药物治疗组PDGF以及ERK1、p-ERK1蛋白的表达水平均显著下降(P＜0.05).结论 平喘宁可通过调节ERK信号通路减轻哮喘大鼠气道炎性反应,延缓气道重塑.

中医药内服汤剂和外用贴敷治疗寒性哮喘有着悠久的历史和良好的疗效.笔者近年来运用小青龙汤合穴位贴敷为主治疗寒性哮喘患儿收到满意效果,报道如下.1 临床资料1.1 一般资料:选取2014年12月至2017年12月期间住院治疗属于寒性哮喘的患儿90例,随机分为治疗组和对照组各45例.对照组男23例,女22例;年龄在5～12岁,平均7.3±1.7岁.治疗组男24例,女21例;年龄在5～13岁,平均7.7±1.6岁.两组患儿在年龄、性别等方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性.

寒喘祖帕颗粒源自维吾尔经典名方,有镇咳、化痰、温肺止喘的功效,主治急性感冒,寒性乃孜来所致的咳嗽及异常黏液质性哮喘.近年来,通过化学成分研究、质量标准控制、药理研究及多项临床观察试验,综合表明寒喘祖帕颗粒能改善患者的呼吸系统体征状况,降低咳嗽缓解时间、喘憋消失时间、呼吸困难缓解时间、肺湿性啰音消失时间等,从而增强患者肺功能,达到治疗呼吸系统疾病的目的.但对其作用机制和机理的研究较少,仍需进一步深入研究.

目的:观察小青龙汤加味治疗儿童肺寒型哮喘疗效观察.方法:将98例肺寒型哮喘患儿随机数字表法分为两组,对照组采用西医常规方法治疗,治疗组在对照组的基础上采用小青龙汤加味治疗,比较两组的临床疗效,记录两组患儿血清IL-6、IL-4,IFN-γ水平,比较两组咳嗽气喘、肺部哮鸣音、X线肺部阴影消失时间.结果:观察组临床疗效明显优于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,观察组的IL-6、IL-4水平均明显降低,而IFN-γ水平明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).患儿咳嗽气喘、肺部哮鸣音、X线肺部阴影消失时间明显短于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:小青龙汤加味治疗儿童寒性哮喘,能有效的下调IL-6、IL-4水平,上调IFN-γ水平,改善患儿气道炎症,临床疗效明显.