目的:采用超高效液相色谱法建立布渣叶药材指纹图谱，并对3种黄酮类成分含量进行测定，评价不同产地布渣叶药材质量的差异。方法:采用Agilent ZORBAX SB C18柱（2.1 mm×150 mm，1.8 μm），流动相为乙腈-0.1%乙酸溶液，梯度洗脱，流速为0.30 ml/min，柱温为30 ℃；检测波长为315 nm，建立布渣叶药材指纹图谱；采用超高效液相色谱-质谱联用技术对共有峰进行指认，采用对照品比对，对指认结果进行确证。采用Waters Cortecs T3 C18柱（2.1 mm×100 mm，1.6 μm），流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液，梯度洗脱，流速0.35 ml/min，柱温30 ℃，检测波长339 nm，测定15批不同产地布渣叶药材中牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷含量。结果:布渣叶指纹图谱共有11个共有峰，经质谱指认和对照品确证，指认出其中10个化学成分，分别为咖啡酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸、牡荆苷、异牡荆苷、山柰酚-3- O-芸香糖苷、紫云英苷、水仙苷、异鼠李素-3- O-葡萄糖苷和椴树苷。15批布渣叶样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.95，表明不同产地的布渣叶药材指纹图谱整体相似度较高。广东省阳江市、湛江市及广西壮族自治区玉林市、海南省五指山市产布渣叶药材3种有效成分总含量为3.23~5.64、3.60~5.78、4.68~5.73、3.87~5.21 mg/g，不同产区布渣叶3种有效成分含量差异并不明显。 结论:所建立的指纹图谱及多成分含量测定方法稳定可行，可用于布渣叶的质量评价。

目的 基于指纹图谱和多指标定量测定对鲜地黄中地黄汁、地黄片、地黄渣的化学成分进行分析与比较,阐明鲜地黄药材不同加工方法指标性成分的分布规律.方法 采用HPLC法建立10批地黄汁、地黄片和地黄渣指纹图谱,相似度分析结合化学模式识别法进行分析.采用HPLC法,HPLC-蒸发光散射检测(ELSD)法分别测定地黄样品中苷类、糖类成分含量.结果 建立的HPLC指纹图谱共标定14个共有峰,聚类分析将样品分为3类;经主成分分析,主成分1～3是影响鲜地黄样品质量的主要因子;采用正交偏最小二乘-判别法标记了鲜地黄样品中8个差异性成分.苷类、糖类成分总含量测定均表明地黄汁＞地黄片＞地黄渣,苷类成分中除地黄苷A外,地黄汁中梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷D、益母草苷含量都高于地黄片和地黄渣,质量分数为7.43％～7.78％、0.10％～0.11％、0.59％～0.66％、0.69％～0.72％;糖类成分除棉子糖外,地黄汁中果糖、葡萄糖、蔗糖、水苏糖的含量都高于地黄片和地黄渣,质量分数为2.40％～2.55％、1.84％～2.02％、12.33％～12.77％、33.03％～33.45％.结论 通过指纹图谱和含量测定方法,明确了鲜地黄不同加工方式化学成分变化,为临床上地黄汁、地黄片的使用提供参考,并为地黄渣的回收利用提供科学依据.

研究布渣叶饮片到标准汤剂量值传递规律,为布渣叶配方颗粒及其相关制剂质量标准的制定提供参考.采用15批布渣叶饮片制备标准汤剂,测定标准汤剂出膏率、浸出物含量,建立布渣叶饮片和标准汤剂超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,采用Thermo Fisher QE高分辨质谱对共有峰进行指认,并采用对照品确证.以相对峰面积为变量,对布渣叶饮片和标准汤剂指纹图谱进行正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),寻找差异变量,并对布渣叶标准汤剂中3种黄酮类成分的含量和转移率进行测定.结果显示,15批布渣叶标准汤剂出膏率范围在9.32％～14.22％,浸出物范围在37.61％～62.52％,建立15批布渣叶饮片和标准汤剂指纹图谱,相似度均在0.95以上,饮片和标准汤剂指纹图谱均标识出12个保留时间相一致的共有峰,并指认出其中10个化学成分,OPLS-DA分析共找到5个相对峰面积变化较大的色谱峰,分别为峰1、2、3、4、6,为酚酸和黄酮类成分.15批标准汤剂3种黄酮类成分的含量均在均值±3倍SD范围内.其中牡荆苷的转移率最高,其次为水仙苷和异牡荆苷.该研究能够为布渣叶配方颗粒及其相关制剂质量标准的制定提供重要参考.

[目的]运用数据挖掘方法分析全国名老中医黄枫教授治疗颈椎病处方用药的规律.[方法]收集黄枫教授门诊治疗颈椎病患者的有效病例的中药处方,采用Excel、SPSS Modeler、SPSS Statistics软件对其处方药物的用药频次、性味归经进行频次分析,对高频药物进行关联规则分析及聚类分析.[结果]共纳入260首处方,涉及95味中药.其中出现频次＞30次的高频药物共有22味,分别为甘草、延胡索、桑枝、石斛、丹参、地黄、两面针、薏苡仁、葛根、玉竹、白扁豆、白芍、布渣叶、钩藤、黄芪、白术、宽筋藤、牛膝、远志、茯苓、天麻、桂枝.黄枫教授治疗颈椎病处方药物的药味以甘、苦、辛为主,药性较平和,用药多入肝、胃、脾经.关联规则分析结果得到35条药物关联规则,聚类分析得到5个核心聚类药物组合.[结论]黄枫教授认为,颈椎病为本虚标实之病,病机乃因气血阴液亏虚在内,风寒湿热之邪侵袭在外,导致局部气血凝滞;治疗时重在活血行气、健脾益气、养阴柔筋,强调三因制宜,针对患者症状调整用药,且常选用岭南道地药材,并适当结合外治法及功能锻炼.

目的:探讨布渣叶对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型小鼠的肝脏是否具有保护作用及其机制.方法:将BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、辛伐他汀组(2.5 mg·kg-1),布渣叶低、高剂量组(3.5,7.0 g·kg-1),用高糖高脂饲料喂养12周制备NAFLD模型,灌胃给药,每天1次,28 d测定甘油三酯(triglyceride,TG),胆固醇(cholesterol,TC),高密度脂蛋白(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C),低密度脂蛋白(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C),丙氨酸氨基转氨酶(alanine aminotransferase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST),计算肝指数(肝湿重/体重×100％);黄嘌呤氧化酶法测定肝匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、硫代巴比妥酸法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中脂联素受体2(adiponectin receptor 2,Adipo R2)蛋白表达;光镜观察肝组织形态改变.结果:与正常组比较,模型组小鼠TC,TG,LDL-C,AST,ALT水平及肝指数显著升高(P＜0.01),HDL-C含量下降(P＜0.01);肝组织中SOD活性下降(P＜0.01),MDA含量显著升高(P＜0.01);肝组织中Adipo R2蛋白表达减少(P＜0.01),肝脏脂肪变明显(P＜0.01).与模型组比较,布渣叶可降低血清TC,TG,LDL-C,AST,ALT水平及肝指数(P＜0.01);降低肝组织中MDA含量(P＜0.01),提高SOD活性(P＜0.01);肝组织中Adipo R2蛋白表达增加(P＜0.05);肝细胞脂肪变性程度明显减轻(P＜0.01).结论:布渣叶对NAFLD模型小鼠具有降脂、保肝作用,其机制可能与抑制氧化应激、增加Adipo R2的表达有关.

目的 从布渣叶中克隆黄酮碳苷合成途径关键酶黄烷酮-2-羟化酶(flavanone 2-hydroxylase,F2H)基因,构建原核表达载体,对其进行生物信息学和表达模式分析.方法 根据布渣叶转录组数据中注释为F2H的Unigene设计特异性引物,利用PCR法扩增MpF2H基因的开放阅读框(open reading frame,ORF),基于在线工具对cDNA序列进行生物信息学分析.同时,依据F2H序列,设计特异引物,采用RT-qPCR方法对其在芽、叶、枝、花、果等组织中的表达进行测定.结果 MpF2H基因ORF全长为1 557 bp(Genbank登录号KY652921),编码518个氨基酸;相对分子质量54 500,理论等电点5.49,含有信号肽,不含跨膜域,可能定位于叶绿体.同时,MpF2H基因在不同组织中均有表达,其中在叶中表达量最高,在枝和花中表达量最低.结论 MpF2H基因在不同组织中表达量差异较大.克隆了MpF2H基因cDNA,构建了其原核表达载体pET30a-MpF2H,为MpF2H基因的原核表达和功能验证奠定了基础.

目的 探讨布渣叶提取物对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用.方法 将50只小鼠随机分为五组(每组10只):正常对照组、CCl4模型组、布渣叶低剂量组(100mg/kg)、布渣叶中剂量组(200mg/kg)和布渣叶高剂量组(400mg/kg).布渣叶低剂量组、中剂量组和高剂量组以不同浓度相同剂量的布渣叶提取物灌胃,正常对照组和CCl4模型组以等量的生理盐水灌胃,连续7d.第七天灌胃后2h,CCl4模型组、布渣叶低剂量组、中剂量组和高剂量组分别腹腔注射CCl4,建立CCl4所致小鼠急性化学性肝损害模型.12h后采血定量测定各组小鼠血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的活性和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力,并观察肝组织病理学变化,以评价肝损害的程度和药物的保护作用.结果 布渣叶提取物能明显降低CCl4所致急性肝损伤小鼠血清GPT、GSH水平,提高GSH活性及SOD活力,肝脏组织病理损伤得到明显改善,且呈明显的量效关系.结论 布渣叶提取物对CCl4所致的急性化学性肝损伤有良好的保护作用.

目的:分析李惠东教授治疗肝郁脾虚证型胆囊切除术后综合征的临床用药规律.方法:回顾性分析2015年10月至2016年10月59例患者105份电子病历及处方,采取药味频数、频率统计和聚类分析方法分析用药规律.结果:柴胡、灸甘草、茯苓、白术、熟党参、陈皮、法半夏、王指毛桃、当归使用频率超过50.0％,枳壳、醋延胡索、麦芽、丹参、白芍、砂仁使用频率介于20.0％～50.0％,姜厚朴、鸡内金、布渣叶、广金钱草、木香使用频率低于20.0％.20味药共分为4大类.结论:李惠东教授治疗肝郁脾虚证胆囊切除术后综合征的用药规律主要从肝经论治,兼顾脾胃,重视药物性味归经,临证用药"知常达变",因人因地制宜,具有岭南地域特色.

为了解矿业活动对农田土壤Hg富集的影响,采集铜陵市新桥矿区周边村庄(新建村、叶湖村、新湖村、湖城村)农田土壤样品.应用原子荧光光度计测定土壤总汞(THg)及各形态汞含量,采用地累积指数法评价污染水平.结果表明:新桥矿区周边农田土壤中总汞的平均浓度为(0.137±0.078) mg·kg-1,超过铜陵市土壤背景值.4个村庄的土壤总汞平均浓度为新建村(0.221 mg·kg-1)＞新湖村(0.118 mg·kg-1)＞叶湖村(0.115 mg·kg-1)＞湖城村(0.096mg·kg-1).其中新建村不同形态汞的平均含量顺序为残渣态(0.036 mg·kg-1)＞碱溶态(0.031 mg·kg-1)＞过氧化氢溶态(0.022 mg·kg-1)＞酸溶态(0.020 mg·kg-1)＞水溶态(0.012mg·kg-1).分析表明,距矿区远近是影响农田土壤汞含量分布的主要因素,受污染的新桥河流加大了该地区农田土壤汞污染程度,而有机质影响总汞及过氧化氢溶态汞在土壤中的积累和转化.土壤汞污染地累积指数为新建村(1.559)＞新湖村(0.654)＞叶湖村(0.616)＞湖城村(0.356),其中新建村农田土壤汞污染达到中度污染水平,需加以重视.

目的:建立布渣叶HPLC指纹图谱,并同时测定布渣叶中阿魏酸、牡荆苷、异牡荆苷、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷和水仙苷的含量.方法:采用phenomenex Kinetex(R) XB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.5％磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长为332 nm;柱温为30℃;流速为0.8 mL/min.结果:建立了分离度和重现性较好的布渣叶HPLC指纹色谱图,相似度均在0.900以上;标定37个共有色谱峰;5种指标成分中阿魏酸在2.048～20.480 μg/mL、牡荆苷在4.494～44.940 μg/mL、异牡荆苷在16.020～ 80.100 μg/mL、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷在12.816～89.712 μg/mL、水仙苷在117.800～265.050 μg/mL范围内线性关系良好,γ均＞0.9990,平均加样回收率分别为99.32％、98.76％、96.94％、97.47％、99.53％.14批布渣叶样品中阿魏酸含量为0.178～0.250 mg/g、牡荆苷含量为0.173～0.617 mg/g、异牡荆苷含量为0.446～1.247 mg/g、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷含量为0.967～2.727 mg/g、水仙苷含量为2.803～5.872 mg/g.结论:所建立的布渣叶HFLC指纹图谱和5种指标成分定量测定分析方法简单、准确、专属性强、重复性好,可以有效地综合评价布渣叶的质量.