目的:探讨微小RNA(miR)-135b-5p在食管鳞癌发生发展中的调节作用和机制。方法:通过收集食管鳞癌患者的组织标本28例，检测miR-135b-5p在食管鳞癌组织中的表达水平，分析比较高表达与低表达组的差异，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验、Transwell实验及蛋白质印迹法(Western blot)实验探究miR-135b-5p在食管鳞癌细胞中的调节作用，利用生物信息学技术从数据库中寻找miR-135b-5p的下游信号通路。组间比较采用T检验或卡方检验。结果:miR-135b-5p在食管鳞癌患者中低表达(0.004比0.014， Z＝－2.89， P<0.01)且与T分期相关( χ2＝5.82， P<0.05)。此外，划痕实验发现24 h后对照组划痕空白面积低于高表达组(ECA109：0.22±0.02比0.26±0.01， t＝2.21， P<0.05；KYSE150：0.33±0.01比0.54±0.02， t＝9.77， P<0.01)，Transwell实验说明24 h后高表达组细胞迁移数量低于对照组(ECA109：47.17±4.98比136.00±7.78， t＝9.62， P<0.01；KYSE150：25.83±2.10比153.00±7.49， t＝16.34， P<0.01)，48 h后高表达组细胞侵袭数量低于对照组(ECA109：171.00±24.02比382.30±15.34， t＝7.42， P<0.01；KYSE150：244.00±27.33比493.70±53.23， t＝4.17， P<0.01)，高表达组p-smad2/3蛋白表达低于对照组(ECA109：0.82±0.02比1.10±0.03， t＝7.70， P<0.01；KYSE150：0.28±0.02比0.73±0.02， t＝14.12， P<0.01)。 结论:miR-135b-5p可能通过下调smad2/3磷酸化水平抑制食管鳞癌细胞的迁移与侵袭。

目的:探讨消化性溃疡合并幽门螺杆菌（ Hp）感染患者血清微小RNA（miR）-155和miR-135b-5p表达水平及其临床意义。 方法:采用前瞻性研究的方法，连续选取济宁医学院附属医院2021年7月至2023年2月消化性溃疡患者263例。其中，经 14C呼气试验确定为 Hp感染146例（ Hp感染组），未合并 Hp感染117例（非 Hp感染组）；免疫印迹法确定Ⅰ型 Hp感染110例，Ⅱ型 Hp感染36例。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清miR-155和miR-135b-5p表达水平，放射免疫法检测血清胃泌素水平，酶联免疫吸附法检测血清胃蛋白酶原（PG）Ⅰ和PG Ⅱ水平；记录患者基本临床资料。采用多因素Logistic回归分析影响消化性溃疡患者发生 Hp感染的独立危险因素；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-155和miR-135b-5p对消化性溃疡患者发生 Hp感染的诊断价值。 结果:Hp感染组胃泌素、PG Ⅰ、PG Ⅱ、溃疡出血率和复发比例明显高于非 Hp感染组[（108.47 ± 15.35）ng/L比（79.63 ± 10.58）ng/L、（295.41 ± 37.26）pg/L比（236.75 ± 29.17）pg/L、（44.08 ± 8.52）pg/L比（39.29 ± 6.74）pg/L、25.34%（37/146）比15.38%（18/117）和21.92%（32/146）比11.97%（14/117）]，差异有统计学意义（ P<0.01或<0.05）。 Hp感染组血清miR-155和miR-135b-5p明显高于非 Hp感染组（1.94 ± 0.63比0.95 ± 0.29和1.86 ± 0.57比1.03 ± 0.31），差异有统计学意义（ P<0.01）。Ⅰ型 Hp感染患者血清miR-155和miR-135b-5p明显高于Ⅱ型 Hp感染患者（2.05 ± 0.66比1.60 ± 0.54和1.97 ± 0.61比1.52 ± 0.45），差异有统计学意义（ P<0.01）。多因素Logistic回归分析结果显示，血清miR-155、miR-135b-5p、胃泌素、PG Ⅰ是影响消化性溃疡患者发生 Hp感染的独立危险因素（ OR = 1.443、1.436、1.452和1.438，95% CI 1.165～1.787、1.146～1.799、1.187～1.777和1.150～1.798， P<0.01）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-155和miR-135b-5p联合诊断消化性溃疡患者发生 Hp感染的曲线下面积明显大于血清miR-155和miR-135b-5p单独诊断（0.907比0.839和0.836， Z = 2.57和2.81， P = 0.010和0.005）。 结论:消化性溃疡合并 Hp感染患者血清miR-155和miR-135b-5p水平较高，两者联合检测对消化性溃疡患者发生 Hp感染具有较高的诊断价值。

目的:探讨乳腺癌患者血清微小RNA-135b(miR-135b)、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果的相关性.方法:选取116例乳腺癌患者为病例组,均接受新辅助化疗,以21 d为1个周期,共化疗8个周期,根据化疗反应将患者分为耐药组(32例)和敏感组(84例),另选128例体检健康女性为对照组.比较病例组和对照组,耐药组和敏感组血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平.采用Pearson相关性分析血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p水平间的相关性.乳腺癌患者化疗效果的影响因素采用Logistic回归分析.血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p对乳腺癌患者化疗耐药的预测价值通过受试者工作特征(ROC)曲线分析.结果:与对照组比较,病例组miR-135b、miR-148a-3p水平升高,血清miR-186-5p水平降低(均P＜0.05).耐药组血清miR-135b、miR-148a-3p水平高于敏感组,血清miR-186-5p水平低于敏感组(均P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,血清miR-135b与miR-148a-3p呈正相关,与miR-186-5p呈负相关,血清miR-148a-3p与miR-186-5p呈负相关(均 P＜0.05).多因素 Logistic 回归分析显示,血清 miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p 是乳腺癌患者化疗效果的影响因素(均P＜0.05).ROC曲线分析结果显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p联合预测化疗耐药的曲线下面积(AUC)高于三者单独预测AUC(均P＜0.05).结论:乳腺癌患者血清miR-135b、miR-148a-3p水平呈高表达,血清miR-186-5p水平呈低表达,三者水平变化与新辅助化疗效果有关,且三者联合检测对患者新辅助化疗耐药的预测价值更高.

目的:检测非编码微小RNA135b在宫颈癌中的表达,并初步探讨其可能的作用机制.方法:Real-time PCR检测19例宫颈癌组织和癌旁组织中miR-135b-5p的表达量,并和患者年龄、细胞分化程度、临床分期、淋巴结转移的相关进行分析;同时通过软件预测miR-135b-5p的目的基因KLF4,Western Blot检测靶基因蛋白的表达变化.结果:Real-time PCR结果显,和癌旁组织相比,宫颈癌中miR-135b-5p的表达量明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);而且和宫颈癌患者的细胞分化程度、临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05);Western Blot检测结果显KLF4在宫颈癌组织中表达量较癌旁组织减低(P<0.05).结论:miR-135b-5p能够促进宫颈癌的发生和发展,可能和抑制KLF4的表达有关.

目的 探讨微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)通过调控SMAD家庭成员4(Smad4)表达而调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞的增殖及凋亡.方法 体外培养人卵巢颗粒细胞KGN与人正常卵巢上皮细胞IOSE80,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测miR-135a-5p、Smad4的表达量;分别用anti-miR-con、anti-miR-135a-5p、anti-miR-135 a-5p与si-con、anti-miR-135a-5p与si-Smad4转染至卵巢颗粒细胞;甲基噻唑基四唑法(MTT)检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测过表达miR-135a-5p对野生型和突变型Smad4荧光素酶活性的影响;Western blot检测细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)、细胞周期依赖蛋白激酶2(CDK2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达量.结果 与正常卵巢上皮细胞IOSE80比较,KGN细胞中miR-135a-5p的表达水平显著升高,Smad4 mRNA及蛋白表达量显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与anti-miR-con组比较,anti-miR-135a-5p组细胞活力显著降低,克隆形成数显著减少,细胞凋亡率显著升高,Cyclin D1、CDK2、Bcl-2蛋白水平显著降低,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).双荧光素酶报告实验证实miR-135a-5p能够抑制Smad4的3'-UTR区荧光素酶活性;与anti-miR-135a-5p+si-con组比较,anti-miR-135a-5p+si-Smad4组细胞活力显著升高,克隆形成数显著增多,细胞凋亡率显著降低,CyclinD1、CDK2、Bcl-2蛋白水平显著升高,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著降低,差异均有统计学意义(P,＜0.05).结论 干扰miR-135a-5p可能通过靶向调控Smad4的表达从而抑制卵巢颗粒细胞增殖及促进细胞凋亡.

目的 探讨微小RNA-135b-5p(miR-135b-5p)是否通过靶向血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)影响白介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤.方法 使用IL-1β诱导SD大鼠膝关节软骨细胞损伤.使用10 ng/ml IL-1β处理软骨细胞48 h,论为IL-1β组,同时以未经任何处理的软骨细胞设为对照(Con组).在软骨细胞中转染miR-135b-5p并使用IL-1β损伤软骨细胞.实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-135b-5p和ANGPTL2 mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)水平,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blot)检测ANGPTL2、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)抗体、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,Targetscan预测结合双荧光素酶报告实验分析miR-135b-5p与ANGPTL2的靶向关系.共转染miR-135b-5p和pcDNA-ANGPTL2,并使用IL-1β损伤软骨细胞,观察ANGPTL2过表达对miR-135b-5p过表达诱导的IL-1β损伤软骨细胞凋亡、炎症的影响.结果 与Con组比较,IL-1β诱导的软骨细胞中miR-135b-5p表达量、Bcl-2蛋白表达量明显减少(P<0.05),ANGPTL2 mRNA、ANGPTL2蛋白表达量、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平、细胞凋亡率、Bax蛋白水平显著升高(P<0.05).miR-135b-5p过表达明显降低IL-1β诱导软骨细胞ANGPTL2蛋白表达量、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平、凋亡率、Bax蛋白表达量(P<0.05),显著提高Bcl-2蛋白水平(P<0.05).miR-135b-5p靶向调控ANGPTL2的表达.ANGPTL2过表达逆转了miR-135b-5p过表达抑制IL-1β损伤的软骨细胞凋亡、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平、Bax蛋白表达的作用,和促进Bcl-2蛋白表达的作用.结论 miR-135b-5p通过靶向调控ANGPTL2表达保护IL-1β诱导的软骨细胞损伤.

目的 探索miR?135b?5p在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)及癌旁组织中的表达及其临床意义,预测miR?135b?5p靶基因并进行相关生物信息学分析.方法 通过肿瘤与癌症基因图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库分析miR?135b?5p在OSCC组织和癌旁组织中的表达并分析其临床意义;临床收集新鲜组织标本,采用实时荧光定量PCR验证不同组织中miR?135b?5p的表达情况.采用生物信息学方法预测miR?135b?5p的靶基因并进行通路富集分析.构建蛋白互作网络筛选关键靶基因.结果 OSCC组织中miR?135b?5p表达量较癌旁组织上调,差异有统计学意义(P<0.001);miR?135b?5p表达量对OSCC组织具有良好的诊断效能(AUC=0.960,P<0.001);OSCC组织中miR?135b?5p表达水平与组织病理分级相关(P=0.011);生信分析结果显示,miR?135b?5p的靶基因富集在与肿瘤相关的钙离子、cGMP?PKG、cAMP信号通路中;筛选得到10个关键靶基因:DLG2、ANK3、ERBB4、SCN2B、NBEA、GABRB2、ATP2B2、SNTA1、CACNA1D、SPTBN4.结论 miR?135b?5p可作为一种促癌基因参与OSCC的发生发展,并具有成为OSCC诊断标志物及治疗靶点的潜在应用价值.

三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)是指雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)及人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)均阴性的乳腺癌,为极具侵袭力的恶性肿瘤,预后差、生存率低并缺乏进行有效鉴定的生物标志物.微小RNA(microRNA,miRNA)在细胞癌症发生、发展的各项进程中发挥了调节作用,其异常表达被证明与癌症相关.特异性表达的miRNA具有作为生物标志物的潜能,许多miRNA的表达在TNBC及非TNBC中存在差异,因此,可作为TNBC的生物标志物,其中miR-200、miR-199a-5p在TNBC中表达下调,miR-21、miR-135b、miR-93、miR-221在TNBC中表达上调.该文着重介绍其在TNBC中发挥的调节作用,为临床的诊断治疗提供新思路.

目的 识别变应性鼻炎(AR)疾病进展的差异表达基因,探索其竞争性内源RNA(ceRNA)网络调控机制,并筛选潜在的治疗靶点.方法 检索GEO数据库,下载AR的微阵列芯片GSE46171.借助R语言等软件分析得到差异的长链非编码RNA (lncRNA)与信使RNA(mRNA),并通过公共数据库预测与差异lncRNA互作的微小RNA (miRNA)及其调控的mRNA,再与差异mRNA取交集,整合得到lncRNA-miRNA-mRNA关系,构建ceRNA网络.随后采用STRING数据库和cytoscape软件筛选关键基因,利用DAVID数据库分析关键基因的基因功能与相关通路,挖掘关键ceRNA网络.结果 ①与正常鼻黏膜组织对比,AR患者鼻黏膜组织35个lncRNA和2071个mRNA存在差异表达;②筛选出CREB1、PPARG、ETS1、IRF4、JAK2共5个关键基因;③关键基因所富集的功能包括髓细胞分化、DNA结合的正调控等生物学过程,涉及Longevity、AMPK、IL-17等信号通路;④6种miRNA(miR-27a-3p、miR-125a-5p、miR-135a-5p、miR-125b-5p、miR-17-5p、miR-20b-5p)可能在导致AR发生发展过程中发挥关键作用.结论 通过对AR相关lncRNA介导的ceRNA网络进行分析,识别出潜在的治疗靶点及信号通路,为进一步阐明其发病机制,并为后续的实验研究提供参考依据.

目的 探究血浆微小RNA-135(miR-135)、miR-103、miR-34b在前列腺癌中的表达水平,分析三者与临床病理特征、临床预后的关系.方法 前瞻性选取2018年5月至2021年6月临沂市肿瘤医院收治的前列腺癌患者87例(前列腺癌组)、良性前列腺增生患者83例(良性前列腺增生组)、体检健康者85名(健康对照组)为研究对象.采用实时荧光定量PCR测定3组研究对象的血浆miR-135、miR-103、miR-34b水平;比较前列腺癌患者治疗前后血浆miR-135、miR-103、miR-34b水平,分析血浆miR-135、miR-103、miR-34b表达与临床病理特征及预后的关系.结果 前列腺癌组血浆miR-135水平明显高于良性前列腺增生组及健康对照组,miR-103、miR-34b水平明显低于良性前列腺增生组及健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).治疗后,前列腺癌患者血浆miR-135水平相比治疗前明显降低,miR-103、miR-34b水平相比治疗前明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).前列腺癌患者血浆miR-135、miR-103、miR-34b表达与病理分级Gleason评分、TNM分期有关(P<0.05).随访12～48个月,平均(27.63±4.89)个月;发生骨转移13例(14.94％,死亡3例),复发10例(11.49％,死亡4例);miR-135在有骨转移患者中表达高于无骨转移患者,在复发患者中表达高于无复发患者;miR-103、miR-34b在有骨转移患者中表达低于无骨转移患者,在复发患者中表达低于无复发患者,差异均有统计学意义(P<0.05).miR-34b、miR-103降低是前列腺癌患者预后不良的危险因素(P<0.05),miR-135降低是前列腺癌患者预后不良的保护性因素(P<0.05).受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,3项联合预测前列腺癌预后的曲线下面积(AUC)为0.984,高于miR-135、miR-103、miR-34b单项检测(0.828、0.899、0.850)(Z=3.515、2.202、2.776,P=0.000、0.028、0.005).结论 前列腺癌患者血浆miR-135呈相对高表达,miR-103、miR-34b水平呈相对低表达;miR-135、miR-103、miR-34b与前列腺癌患者病理分级、TNM分期有关,可能参与肿瘤的病理生理过程;且3项联合检测对前列腺癌患者的预后具有较高预测价值.