目的:探究过量氟暴露对小鼠睾丸微小RNA（microRNA，miRNA）表达谱的影响，并探讨氟的生殖毒性机制。方法:24只8周龄C57BL/6J雄性小鼠，体重为（23 ± 1）g，按体重采用随机数字表法分为对照组[0 mg/L氟化钠（NaF）]和氟暴露组（50 mg/L NaF），每组12只，处理90 d后麻醉处死小鼠，采集精子检测其数量、活率、畸形率，并对睾丸组织进行HE染色；提取小鼠睾丸组织RNA，利用高通量测序技术检测氟对小鼠睾丸miRNA表达谱的影响，并进行差异表达miRNA筛选及其靶基因预测，同时进行功能注释和通路富集分析；利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）验证差异表达miRNA的表达量。结果:与对照组[精子数量：（11.30 ± 2.52）× 10 6/ml、活率：（90.07 ± 4.34）%、畸形率：（15.49 ± 3.25）%]相比，氟暴露组小鼠精子数量[（9.01 ± 2.25）× 10 6/ml]和活率[（84.34 ± 4.21）%]均下降（ P = 0.041、0.003），而畸形率[（22.36 ± 6.51）%]上升（ P = 0.003）；且HE染色显示，氟暴露组小鼠睾丸间质间距增大，生精小管管腔内精子数量减少，细胞排列紊乱。通过测序，发现氟暴露组小鼠睾丸中存在34个差异表达miRNA；经qRT-PCR验证，与对照组相比，氟暴露组小鼠睾丸mmu-miR-29b-1-5p（ P < 0.001）、mmu-miR-196a-5p（ P = 0.002）和mmu-miR-196b-5p（ P = 0.031）的表达量均显著上升；而mmu-let-7a-2-3p（ P < 0.001）和mmu-miR-466n-3p（ P = 0.018）的表达量均明显下降，与测序结果一致。通过对差异表达miRNA靶基因的KEGG富集，发现氟暴露可改变小鼠睾丸中轴突导向（axon guidance）信号通路、嗅觉传导（olfactory transduction）通路、神经活动配体-受体相互作用（neuroactive ligand-receptor interaction）通路和溶酶体（lysosome）信号通路等。 结论:氟暴露可能通过改变睾丸中miRNA的表达谱，以及通过介导转录后调节的信号通路进而诱导睾丸损伤。睾丸miRNA可能是氟生殖毒性的潜在生物标志物，可为氟中毒机制的探究提供新思路和观点。

目的:探讨血浆微小RNA（miR）-122和miR-33a与2型糖尿病合并冠心病患者冠状动脉病变程度的相关性。方法:回顾性分析2019年1月至2021年10月徐州市第一人民医院196例2型糖尿病患者的临床资料。其中，合并冠心病81例（合并组），未合并冠心病115例（对照组）。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测血浆miR-122、miR-33a水平，采用酶联免疫吸附法检测血浆N末端B型利钠肽前体（NT-proBNP）水平。合并组患者根据冠状动脉造影结果确定冠状动脉病变支数，并进行Gensini积分评价。采用线性回归模型分析血浆miR-122、miR-33a和NT-proBNP与2型糖尿病患者发生冠心病的关系。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，分析血浆miR-122和miR-33a预测2型糖尿病患者发生冠心病的效能。合并组采用Spearman相关法分析血浆miR-122和miR-33a与冠状动脉病变支数的关系，采用Pearson相关法分析血浆miR-122和miR-33a与血浆NT-proBNP和Gensini积分的关系。结果:合并组血浆miR-122、miR-33a和NT-proBNP明显高于对照组[5.76 ± 1.35比1.18 ± 0.33、1.39 ± 0.37比0.65 ± 0.11和（786.87 ± 156.39）ng/L比（103.45 ± 19.27）ng/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。线性回归分析结果显示，2型糖尿病患者血浆miR-122、miR-33a和NT-proBNP与冠心病发生呈正相关（ P<0.01）；ROC曲线分析结果显示，血浆miR-122、miR-33a单独和联合预测2型糖尿病患者发生冠心病的曲线下面积为0.816、0.845和0.912（95% CI 0.744~0.865、0.768~0.892和0.836~0.967）。冠状动脉造影结果显示，单支病变46例，2支病变25例，3支病变10例。3支病变患者血浆miR-122、miR-33a、NT-proBNP及Gensini积分明显高于2支病变患者和单支病变患者[6.52 ± 0.96比4.95 ± 0.85和3.74 ± 0.52、1.45 ± 0.31比1.06 ± 0.25和0.81 ± 0.13、（829.78 ± 62.59）ng/L比（627.48 ± 47.12）和（502.64 ± 38.24） ng/L、（63.89 ± 12.71）分比（42.18 ± 6.03）和（22.36 ± 2.41）分]，2支病变患者明显高于单支病变患者，差异均有统计学意义（ P<0.05）。Spearman相关分析结果显示，合并组血浆miR-122和miR-33a与冠状动脉病变支数呈正相关（ r = 0.879和0.825， P<0.05）；Pearson相关分析结果显示，合并组血浆miR-122和miR-33a与血浆NT-proBNP和Gensini积分呈正相关（miR-122： r = 0.896和0.788，miR-33a： r = 0.871和0.765； P<0.05）。 结论:血浆miR-122、miR-33a水平与2型糖尿病患者冠心病发生及冠状动脉病变程度均相关，可用于指导2型糖尿病患者冠心病的防治。

目的 探讨老年冠心病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后血清细胞间黏附分子(ICAM)-1、微小RNA(miR)-19b、视黄醇结合蛋白(RBP)4 水平变化及意义.方法 选取因行PCI术住院治疗的老年冠心病患者 115 例,根据PCI术后6 个月的随访结果分为预后不良组 24 例,预后良好组 91 例.收集老年冠心病患者的性别、年龄、体质量指数(BMI)、饮酒史、吸烟史、发病至球囊扩张时间、多支病变、病程、支架长度、支架直径,病变部位(右冠状动脉、左前降支、左回旋支),冠状动脉Gensini评分.分别于PCI术前、术后 3 d采集外周静脉血5 ml,分离血清,检测血清ICAM-1、RBP4 水平及miR-196 表达.PCI术后进行 6 个月随访,记录主要不良心血管事件发生情况.结果 预后不良组发病至球囊扩张时间、多支病变比例、冠状动脉Gensini评分明显高于预后良好组(P＜0.05).老年冠心病患者PCI术后3 d血清ICAM-1、RBP4 浓度明显低于术前,血清miR-19b表达水平明显高于术前(P＜0.01).预后不良组血清ICAM-1、RBP4 水平明显高于预后良好组,血清miR-19b表达水平明显低于预后良好组(P＜0.05).多支病变比例、冠状动脉Gensini评分及血清ICAM-1、miR-19b、RBP4 水平是PCI预后的独立影响因素.受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清ICAM-1、miR-19b、RBP4 对老年冠心病患者PCI预后均具有较高的预测价值(P＜0.01).将血清ICAM-1、miR-19b、RBP4 纳入Logistic回归模型结果显示,各指标联合检测的预测价值最高[曲线下面积(AUC)= 0.942].结论 老年冠心病患者PCI术后3 d血清ICAM-1、RBP4 浓度明显下降,血清miR-19b表达水平明显升高;血清ICAM-1、miR-19b、RBP4 联合检测可用于患者PCI预后评估.

目的 探讨微小RNA(miR)-152和miR-146b-5p在子宫内膜息肉中的表达,及其对术后复发的预测价值.方法 收集2021年1月至2022年10月在石家庄市第六医院接受宫腔镜息肉切除术的196例子宫内膜息肉患者作为子宫内膜息肉组,根据患者术后6个月的复发情况分为复发组(53例)和未复发组(143例),另选取同期因不孕症进行宫腔镜检查的196例患者作为对照组.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测子宫内膜息肉组织和正常子宫内膜组织中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平,并进行组间比较;采用多因素Logistic回归分析子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析子宫内膜息肉中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平对子宫内膜息肉患者术后复发的预测价值.结果 复发组miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、孕激素受体(PR)水平明显低于未复发组和对照组(P<0.05),血管内皮生长因子(VEGF)、雌激素受体(ER)水平明显高于未复发组和对照组(P<0.05);未复发组 miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、PR水平明显低于对照组(P<0.05),VEGF、ER水平明显高于对照组(P<0.05).进一步研究显示,miR-152、miR-146b-5p、VEGF、ER、PR是子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素(P<0.05).miR-152、miR-146b-5p二者联合预测子宫内膜息肉患者术后复发的曲线下面积(AUC)为0.949,灵敏度为96.23%,特异度为74.02%,优于二者各自单独预测(Z联合检测-miR-152=4.854、Z联合检测-miR-146b-5p=3.431,P<0.001).结论 子宫内膜息肉组织中miR-152、miR-146b-5p表达明显下调,二者联合对预测子宫内膜息肉患者术后复发有较好的参考价值.

目的:探讨精神分裂症患者及正常人群血浆外泌体微小RNA(miRNA)的差异表达,初步了解差异表达miRNA在精神分裂症病程发展中的作用.方法:采用高通量测序技术检测48 例精神分裂症患者和48 名健康对照者的血浆外泌体miRNA的表达水平,构建miRNA差异表达谱.预测表达差异显著的miRNA的靶基因,再对靶基因进行GO功能注释和KEGG通路分析,确定差异表达miRNA的主要生物学功能及其可能参与的信号通路.结果:与对照组相比,精神分裂症患者血浆外泌体共筛选出353 个miRNA显著异常表达,其中157 个表达上调,196 个表达下调.通过GO富集和KEGG分析,上述差异表达的miRNAs主要涉及神经元细胞体、谷氨酸能突触、神经元间突触、突触前和突触膜等细胞组成,并主要参与轴突新生、化学突触传递调节、跨突触信号调节等生物过程,可能通过MAPK信号通路、PI3K Akt信号通路、TNF信号通路、Wnt信号通路、FoxO信号通路、多巴胺能突触及Hippo等信号通路参与精神分裂症的发生和发展过程.结论:经药治疗精神分裂症患者血浆外泌体中miRNAs存在显著的差异性表达,miRNA-206、miR-142-5p、miR-139-5p、miR-133b等miRNA可能通过MAPK信号通路、PI3K Akt信号通路等在精神分裂症的发生发展过程中发挥重要作用.

目的 分析急性髓系白血病(AML)患者血清LncRNA XIST、miR-196b表达与临床病理特征以及预后的关系.方法 选取2016 年3 月—2020 年3 月内蒙古医科大学附属医院血液内科收治AML患者 88 例为AML组,同期医院健康体检志愿者 41 例为健康对照组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测血清 LncRNA XIST、miR-196b表达.比较不同临床病理特征AML患者血清LncRNA XIST、miR-196b表达差异,分析LncRNA XIST与miR-196b之间相关性以及LncRNA XIST、miR-196b与AML患者预后的关系.结果 AML组血清LncRNA XIST、miR-196b表达高于健康对照组(t/P =12.820/<0.001、14.405/<0.001).NCCN分级高危、髓外浸润、白细胞计数≥10×109/L的AML患者血清LncRNA XIST、miR-196b表达显著高于NCCN分级低中危、无髓外浸润、白细胞计数<10×109/L的 AML 患者(LncRNA XIST:t/P = 8.410/<0.001、5.830/<0.001、5.430/<0.001;miR-196b:t/P = 7.261/<0.001、5.658/<0.001、10.329/<0.001).AML患者血清LncRNA XIST与miR-196b表达呈正相关(r/P = 0.423/<0.001).高LncRNA XIST表达、高miR-196b表达AML患者OS率低于低LncRNA XIST表达、低miR-196b表达(χ2/P =12.290/<0.001、5.413/0.012).Cox回归分析显示,NCCN分级高危、髓外浸润、白细胞计数≥10×109/L、高LncRNA XIST表达、高 miR-196b 表达是影响 AML 患者预后不良的危险因素[OR(95%CI)= 1.881(1.201～2.947)、1.540(1.113～2.133)、1.484(1.180～1.767)、1.655(1.172～2.337)、1.508(1.171～1.942)].结论 AML患者血清LncRNA XIST、miR-196b表达均增高,且与AML恶性临床病理特征以及不良预后的发生有关.

目的 探讨原发性肝癌(primary carcinoma of the liver)患者血清微小核糖核酸(microRNA,miR)-196b,微小核糖核酸(microRNA,miR)-520f表达水平及其临床诊断价值.方法 选择 2020 年 6 月～2022 年 6 月攀枝花学院附属医院收治的 73 例原发性肝癌患者作为研究组,患者均符合《原发性肝癌诊疗规范》中的诊断标准;选择同期医院体检的 80 例健康人群作为对照组.抽取研究对象清晨空腹外周静脉血 5ml,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测两组血清miR-196b和miR-520f表达水平.分析不同临床病理特征原发性肝癌患者血清miR-196b和miR-520f表达水平差异,采用Pearson相关性分析探讨血清miR-196b与miR-520f的关系,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-196b和miR-520f对原发性肝癌的诊断价值.结果 研究组血清miR-196b表达水平(2.73±0.56)明显高于对照组(0.99±0.24),miR-520f表达水平(1.69±0.44)明显低于对照组(3.34±0.64),差异具有统学意义(t=30.578,12.690,均P＜0.05).与Ⅰ～Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移、肿瘤直径＜5cm患者相比,Ⅲ～Ⅳ期、低分化、淋巴结转移和肿瘤直径≥5cm患者血清miR-196b表达水平均升高,miR-520f表达水平均降低,差异具有统计学意义(tmiR-196b=6.919～13.229,tmiR-520f=3.873～7.814,均P＜0.05).Pearson相关性分析显示,原发性肝癌患者血清miR-196b表达水平与miR-520f表达水平呈负相关(r=-0.445,P=0.006).ROC曲线分析显示,血清miR-196b预测原发性肝癌的曲线下面积、截断值、敏感度、特异度及95%置信区间(95%confidence interval,95%CI)分别为0.842,2.55,91.78%,62.50%和 95%CI(0.810～0.874);miR-520f预测原发性肝癌的的曲线下面积、截断值、敏感度、特异度及95%置信区间分别为 0.872,2.43,91.78%,67.50%和 95%CI(0.848～0.906);血清miR-196b联合miR-520f预测原发性肝癌的曲线下面积、敏感度、特异度及95%置信区间分别为0.923,86.30%,87.50%和95%CI(0.891～0.955).结论 原发性肝癌患者血清miR-196b表达水平上调,miR-520f表达水平下调,其表达水平变化与肿瘤直径、临床分期、分化程度和淋巴结转移密切相关,联合检测血清miR-196b与miR-520f能有效提高原发性肝癌的诊断效能.

目的:研究微小RNA(miR)-196b在结直肠癌患者中的表达及其临床意义,探讨过表达miR-196b的结直肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性.方法:在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)公共数据库下载结直肠癌患者miRNA测序数据及其对应的临床病理资料,运用SPSS 17.0分析miR-196b在结直肠癌患者中的表达水平以及临床特征;采用瞬时转染的方法在人结直肠癌HCT116细胞中过表达miR-196b,并用MTS法分析过表达miR-196b的细胞对5-FU药物敏感性的变化.结果:miR-196b高表达与结直肠癌患者淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05),与年龄和性别等无相关性.淋巴结转移和远处转移是直肠癌患者生存的独立影响因子(P<0.05),miR-196b的表达水平与患者生存状况无关.过表达miR-196b的HCT116细胞在不同浓度的5-FU作用下,细胞存活率均明显高于对照组(P<0.05).结论:miR-196b可能是结直肠癌患者肿瘤分期和淋巴结转移的分子标志物,并可降低结直肠癌细胞对5-FU的敏感性.

目的 探讨肝癌组织miR-196b在肝癌发生发展中的作用.方法 选择肝癌患者137例,取手术切除的肝癌组织及癌旁正常组织,采用qRT-PCR法检测miR-196b表达.分析miR-196b表达与肝癌患者临床病理参数及预后的关系.结果 肝癌组织及其癌旁组织miR-196b相对表达量分别为1.853(1.173~4.706)、1.032(0.451~1.886),二者比较P<0.01.肝癌组织miR-196b表达与肿瘤直径、静脉侵犯有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肝功能Child-pugh分级等临床病理参数无关(P均>0.05).以肝癌组织miR-196b相对表达量的中位值(1.853)为截断值,将肝癌患者分为miR-196b高表达者69例、低表达者68例.miR-196b高表达者总体生存期(OS)为21 (1~58)个月,miR-196b低表达者为40.5(4~60)个月,二者比较P<0.01.结论 肝癌组织miR-196b高表达可促迸肝癌的发生及发展.

目的 探讨铁蓄积小鼠骨量下降与微小RNA(miRNA,miR)差异性表达的关系.方法 12周龄雄性ICR小鼠(n=12)随机分为两组:铁蓄积组(FAC组)及对照组(Con组),分别腹腔注射枸橼酸铁胺(FAC)及等量生理盐水,干预8周后检测血清铁蛋白,微计算机断层扫描技术(Micro-CT)检测小鼠股骨骨量,并分析相关骨结构参数.小鼠全血分离白细胞提取RNA,进行TaqmanmiRNA芯片检测表达谱差异,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测验证差异miRNA.利用Targetscan及miRDB数据库预测差异miRNA的下游靶基因,并对预测的下游靶基因进行生物信息学分析,包括细胞成分、生物过程、分子功能和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路分析.结果 FAC组干预8周后,血清铁蛋白[(218.2 ±29.5) μg/L]相较于对照组[(30.6±9.9)μg/L]明显升高(P =0.000).股骨三维重建示铁蓄积小鼠骨质结构破坏,骨量、骨小梁厚度(Tb.Th)及骨体积分数(BV/TV)显著下降(P=0.001、0.005、0.021),而骨小梁间隙(Tb.Sp)升高(P=0.000).miRNA芯片结果:初步筛选出20个miRNA表达上调:mmu-miR-29b-3p、mmu-miR-324-3p、mmu-miR-133a-5p、mmu-miR-214-5p、mmu-miR-22-3p、mmu-miR-34a-5p、mmu-miR-31-5p、mmu-miR-143-5p、mmu-miR-423-3p、mmu-miR-223、mmu-miR-155、mmu-miR-106a、mmu-miR-2861、mmu-miR-148a、mmu-miR-96、mmu-miR-449a-5p、mmu-miR-423-Sp、mmu-miR-204-5p、mmu-miR-211、mmu-miR-23b及7个miRNA表达下调:mmu-miR-1 8a-3p、mmu-miR-223-3p、mmu-miR-199a-5p、mmu-miR-196a-5p、mmu-miR-30c-5p、mmu-miR-15b、mmu-miR-130b.其中mmu-miR-423-5p表达差异最为显著,q-PCR验证结果显示miR-423-5p的表达趋势与测序结果一致.Targetscan和miRDB预测并筛选miR-423-5p下游靶基因共91个.生物信息学分析表明miR-423-5p的靶基因在磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)、Rap1、Ras及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路上出现聚集.结论 铁蓄积导致的骨量下降可能与miR-423-5p差异性表达相关.