目的:应用生物信息学技术筛选结直肠癌(CRC)关键长链非编码RNA(lncRNA)，并对筛选出的LINC00174在CRC中的作用机制进行初步分析。方法:对癌症基因组图谱(TCGA)数据库中638例CRC和51例癌旁组织的RNA数据分析，应用Wilcoxon检验识别筛选差异表达明显的RNA；Pearson相关性检验确定lncRNA-mRNA关系对；在Starbase v3.0数据库中确定与lncRNA-mRNA关系对中RNA分子存在互作关系的微小RNA(miRNA，miR)。对TCGA数据库中CRC临床数据使用R软件包的"survival"和"survminer"方法进行生存分析，探讨lncRNA-mRNA关系对预测预后的价值。用STRING数据库及metascape平台对mRNA编码蛋白(ZNF692)的功能进行分析。收集40例新鲜的CRC及癌旁组织，应用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)对筛选出的RNA检测，验证生物信息学结果。符合正态分布的计量资料采用均数±标准差( ± s)表示，各指标间关系采用 t检验及Person相关分析。 结果:与癌旁组织比较，CRC组织中上调的LncRNA为820，下调的为951；上调的mRNA为1 628，下调为3127。分析后确定2775对候选lncRNA-mRNA，其中501对与患者生存有关。进一步通过功能分析发现LINC00174-ZNF692对可能在CRC进展中有重要作用。结果显示，LINC00174、ZNF692在CRC组织中表达水平(14.52±0.97、17.12±0.72)高于癌旁组织(13.50±0.60、15.53±0.44， W＝26 747、31 438， P<0.01)；LINC00174与ZNF692呈正相关( r＝0.58， P<0.01)。生存分析结果显示，LINC00174-ZNF692对高表达是CRC患者预后差的标志( χ2＝5.52， P<0.05)，其风险比( HR)为1.51(1.05～2.20)( P<0.05)。对Starbase v3.0数据库分析显示，ZNF692通过海绵吸附miR-200b-3p与LINC00174形成内源性竞争RNA(ceRNA)机制发挥作用。富集分析显示，ZNF692蛋白在泛素介导的蛋白降解、mRNA监控、核苷酸切除修复等过程。组织验证结果显示，LINC00174、ZNF692在CRC水平(2.65±1.23、1.19±0.33)明显高于癌旁组织(0.83±0.39、0.42±0.17， t＝8.92、13.12， P<0.01)；miR-200b-3p在CRC水平(0.35±0.13)明显低于癌旁组织(0.82±0.22， t＝－11.63， P<0.01)。Pearson分析显示，CRC组织中LINC00174与ZNF692呈正相关( r＝0.81， P<0.01)；LINC00174与miR-200b-3p、ZNF692与miR-200b-3p均呈负相关( r＝－0.75、－0.53， P<0.01)。 结论:LINC00174可能通过海绵吸附机制调控miR-200b-3p/ZNF692轴在CRC进展中发挥重要作用。

目的:分析微小RNA-203(microRNA-203，miR-203)和成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factors-2，FGF-2)在儿童血管瘤(hemangioma of infancy，HOI)中的表达水平并探讨其临床意义。方法:选取2016年3月至2017年8月收治的55例HOI患者为HOI组，并将其分为增殖期(31例)与消退期(24例)，另以术后正常组织标本为对照组(34例)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组miR-203与FGF-2 mRNA表达水平，免疫组织化学法检测FGF-2蛋白表达情况。观察的临床指标包括血管生长素(angiogenin，ANG)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、糖皮质激素受体α(glucocorticoid receptor α，GRα)、糖皮质激素受体β(glucocorticoid receptor β，GRβ)。Pearson法比较分析HOI组患儿各指标间的相关性；Logistic多因素回归法分析HOI发生的相关影响因素。结果:与对照组(1.01±0.15)相比，HOI组miR-203(0.73±0.24)表达水平显著降低( P<0.05)，且增殖期(0.72±0.21)显著高于消退期(0.59±0.19)( P<0.05)；HOI组FGF-2 mRNA(2.38±0.74)表达水平显著高于对照组(1.02±0.14)( P<0.05)，且消退期(2.37±0.79)显著高于增殖期(2.03±0.68)( P<0.05)；Pearson分析显示miR-203与FGF-2、ANG、VEGF、bFGF呈显著负相关( P<0.05)，而FGF-2与之呈显著正相关( P<0.05)；Logistic分析显示miR-203与FGF-2表达水平是HOI发生的影响因素。 结论:miR-203在HOI中低表达，而FGF-2呈高表达，两者在HOI分期中表达变化比较差异显著，对临床诊断HOI及治疗具有重要意义。

目的:探讨微小RNA(miR)-151a-3p在非小细胞肺组织中的表达及其与放疗敏感性的关系。方法:选取2019年12月至2023年8月商丘市第一人民医院收治的54例非小细胞肺癌患者作为研究对象，所有患者进行三维适形调强放射治疗，评价患者放疗疗效，分为完全缓解、部分缓解、稳定和进展。完全缓解和部分缓解为有效治疗组；稳定和进展为无效治疗组。分别采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析有效治疗组和无效治疗组患者肿瘤组织miR-151a-3p表达水平，根据miR-151a-3p均值，分为高表达组和低表达组，探讨miR-151a-3p表达水平与肺癌放疗敏感性的相关性。组间计量数据比较采用独立样本 t检验。 结果:54例患者，其中22例完全缓解，15例部分缓解，10例稳定，7例进展。完全缓解和部分缓解总计37例，纳入有效治疗组，稳定和进展17例患者纳入无效治疗组。放疗有效率为62.58%(37/54)。治疗有效组患者肿瘤组织miR-151a-3p表达水平(0.94±0.17)明显低于无效治疗组(1.49±0.29)，差异有统计学意义( t＝8.807， P<0.05)。直径>5 cm和直径≤5 cm患者组三维适形调强放疗有效率[69.56%(16/23)、67.74%(21/31)]比较，差异无统计学意义( χ2＝1.008， P>0.05)。肺腺癌组患者和鳞状细胞癌组患者三维适形调强放疗有效率[65.0%(13/20)、70.59%(24/34)]比较，差异无统计学意义( χ2＝1.008， P>0.05)。低分化肿瘤患者组三维适形调强放疗有效率[87.5%(21/24)]明显高于中高分化肿瘤组放疗有效率[53.33%(16/30)]，差异有统计学意义( χ2＝8.694， P<0.05)。淋巴结转移组患者三维适形调强放疗有效率[54.29% (19/35)]明显低于未淋巴结转移组患者[94.74%(18/19)]，差异有统计学意义( χ2＝8.694， P<0.05)。miR-151a-3p低表达组患者三维适形调强放疗有效率[75.00%(30/40)]明显高于miR-151a-3p高表达组患者[50.00%(7/14)]，差异有统计学意义( χ2＝8.694， P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示，低分化程度、无淋巴结转移、miR-151a-3p低表达水平是非小细胞肺癌三维适形调强放疗敏感性的预测因素[比值比( OR)＝3.412、3.876、2.985， P<0.05]。相关性分析显示，非小细胞肺癌组织中miR-151a-3p表达水平与三维适形调强放疗敏感性呈负相关( r＝－0.479， P<0.05)。 结论:肺癌患者肿瘤组织中miR-151a-3p表达水平与放疗敏感性密切相关，可用于临床放疗效果的评价。

目的:探讨血浆微小RNA-30b-5p（miR-30b-5p）联合血管外肺水指数（EVLWI）对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者预后的评估价值。方法:选择2016年1月至2019年6月儋州市人民医院收治的120例ARDS患者作为研究对象。收集患者的性别、年龄、体重指数（BMI）、基础疾病、病因以及心率（HR）、呼吸频率（RR）、氧合指数（OI）、动脉血二氧化碳分压（PaCO 2）和急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEⅡ）等基线值，根据住院期间生存情况分为存活组和死亡组，根据OI分为轻中度组（OI>100 mmHg，1 mmHg＝0.133 kPa）和重度组（OI≤100 mmHg）。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测血浆miR-30b-5p表达，并测定EVLWI。绘制受试者工作特征曲线（ROC），分析血浆miR-30b-5p及EVLWI预测ARDS患者死亡的价值；用Pearson相关法分析住院期间不同预后ARDS患者血浆miR-30b-5p与EVLWI的相关性。 结果:120例ARDS患者均纳入分析，死亡组42例，存活组78例；轻中度组67例，重度组53例。死亡组患者APACHEⅡ评分高于存活组，但两组性别、年龄、BMI、基础疾病、病因及HR、RR、OI和PaCO 2基线值比较差异均无统计学意义。死亡组患者血浆miR-30b-5p表达水平及EVLWI均明显高于存活组〔miR-30b-5p（2 -ΔΔCt）：2.28±0.74比0.52±0.06，EVLWI（mL/kg）：15.38±4.60比10.24±2.15，均 P<0.01〕。重度组血浆miR-30b-5p表达水平、EVLWI及住院病死率均明显高于轻中度组〔miR-30b-5p（2 -ΔΔCt）：2.05±0.65比0.93±0.17，EVLWI（mL/kg）：14.65±4.20比11.36±2.28，住院病死率：58.5%（31/53）比16.4%（11/67），均 P<0.01〕。ROC曲线分析显示，血浆miR-30b-5p及EVLWI预测ARDS患者住院期间死亡的最佳截断值分别为1.62和13.28 mL/kg，两项指标联合预测的ROC曲线下面积（AUC）明显高于二者单独预测（0.897比0.827和0.785），且联合预测的敏感度和特异度均较高，分别为90.5%和84.2%。Pearson相关分析显示，ARDS死亡患者血浆miR-30b-5p与EVLWI呈显著正相关（ r＝0.768， P<0.01）；而存活者二者无明显相关性（ r＝0.118， P>0.05）。 结论:血浆miR-30b-5p和EVLWI与ARDS患者病情严重程度及预后相关，二者联合对ARDS患者预后具有一定评估价值。

目的:探究动态对比增强磁共振成像（DCE-MRI）联合血清微小RNA（miR）-486-5p对胰腺癌诊断及手术可切除性评估价值。方法:选取2019年6月至2023年6月烟台市烟台山医院收治136例胰腺占位患者为研究对象，患者均接受DCE-MRI扫描及血清miR-486-5p检测，以手术病理为诊断金标准，以实际手术切除为手术可切除性标准，通过诊断试验四格表评价DCE-MRI、血清miR-486-5p及两者联合对胰腺癌诊断、手术可切除性评估价值，组间比较采用Mann-Whitney U检验和 χ2检验。 结果:136例患者经病理诊断确诊胰腺癌（胰腺癌组）98例，非胰腺癌（良性病变组）38例。胰腺癌组血清miR-486-5p表达为3.48（1.41～7.64），显著高于良性病变组的1.02（0.36～1.58）（ Z＝3.162， P<0.05）。DCE-MRI联合血清miR-486-5p诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度、与病理诊断的一致性Kappa值分别为97.95%（96/98）、81.58%（31/38）、93.38%（127/136）、0.829。98例胰腺癌患者中，最终实际行手术切除35例（可切除组），不可切除63例（不可切除组）。可手术组血清miR-486-5p表达为2.05（1.01～3.72），显著低于不可切除组的4.88（2.95～10.01）（ Z＝3.882， P<0.05）。DCE-MRI联合血清miR-486-5p预测胰腺癌可切除的敏感度、特异度、准确度、与实际手术切除的一致性Kappa值分别为77.14%（27/35）、100.00%（63/63）、91.84%（90/98）、0.813。 结论:DCE-MRI联合血清miR-486-5p能提高胰腺癌诊断敏感度及准确度，且预测手术可切除性与实际手术切除一致性更高。

目的:探讨黄芪甲苷对人内皮祖细胞(EPC)分泌外泌体及外泌体中微小RNA-126(miRNA-126)表达的影响。方法:取湖南中医药大学第一附属医院妇产科2019年出生的1名足月健康新生儿脐带血，采用密度梯度离心法分离单个核细胞并培养7 d，其间行形态学观察；取第3代细胞，采用CD31免疫磁珠分选法和双荧光染色法鉴定。将鉴定成功的EPC按照随机数字表法分为黄芪甲苷组和磷酸盐缓冲液(PBS)组。黄芪甲苷组细胞加入终质量浓度100 mg/L的黄芪甲苷培养24 h，PBS组细胞加入等体积的PBS培养24 h。培养结束后收集2组细胞培养上清液中的外泌体，采用蛋白质印迹法检测外泌体特征性标志物CD9、CD63和CD81表达，于透射电子显微镜下观察EPC外泌体(EPC-Exo)形态，采用纳米颗粒跟踪分析技术检测EPC-Exo的粒径，采用二辛丁酸法测定EPC-Exo的浓度(样本数为3)，采用反转录PCR法测定EPC-Exo中与血管新生相关miRNA-126-3p和miRNA-126-5p的表达(样本数为3)。对数据行独立样本 t检验。 结果:(1)培养第4天，细胞开始贴壁生长，圆形、梭形、条形等多形态同时出现；继续培养至第7天时，细胞边缘清晰，呈铺路石样排列，中央细胞呈圆形，周边细胞呈梭形。(2)CD31免疫磁珠分选法显示细胞膜染绿色，细胞核染蓝色；双荧光染色法显示细胞呈橙黄色。经以上鉴定，细胞被证实为EPC。(3)培养24 h，2组EPC-Exo的CD9、CD63和CD81表达均呈阳性，证实本实验已成功提取EPC-Exo。(4)培养24 h，2组EPC-Exo均呈圆形膜囊泡，形态无明显差异。(5)培养24 h，黄芪甲苷组中98.7%的EPC-Exo粒径为84.7～143.1 nm，PBS组中98.0%的EPC-Exo粒径为88.7～123.5 nm。(6)培养24 h，黄芪甲苷组EPC-Exo的质量浓度为(310±5)μg/mL，明显高于PBS组的(257±5)μg/mL， t＝13.369， P<0.01。(7)培养24 h，黄芪甲苷组EPC-Exo中miRNA-126-3p( t＝16.062， P<0.01)和miRNA-126-5p( t＝3.252， P<0.05)均明显多于PBS组。 结论:黄芪甲苷可改善人EPC分泌外泌体的功能，且所分泌的外泌体负载miRNA-126。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-30a通过诱导血管内皮细胞间质化(EndMT)，促进血管内膜增生，影响下肢动脉硬化闭塞症(ASO)进程。方法:苏木精-伊红染色法(HE)检测ASO病变动脉形态、内膜中膜厚度；免疫荧光检测EndMT标志物表达。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，构建EndMT细胞模型。将体外培养的HUVECs分为转染miR阴性对照(miR-NC组)和转染miR模拟物(miR-30a组)。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测EndMT标志物表达。细胞增殖实验检测HUVECs(EndMT)增殖能力、小室细胞迁移实验、划痕实验检测其迁移能力。采用GraphPad Prism 7进行统计学分析， t检验分析实验结果。 结果:ASO动脉内膜增生且呈间质化改变[内膜厚度，对照组(178.40±29.61) μm，ASO (422.10±39.47) μm， t＝4.940， P<0.01， n＝6；中膜厚度，对照组 (315.80±48.46) μm，ASO (656.80±43.91) μm， t＝5.200， P<0.01， n＝6]，差异有统计学意义，miR-30a在HUVECs(EndMT)和ASO内膜中高表达，miR-30a表达上调能够抑制HUVECs的内皮标志物表达，同时促进其间质标志物表达[CD31，对照：3.535±0.116，miR-30a：1.360±0.185， t＝9.966， P<0.01， n＝3；人血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)，对照：2.453±0.075，miR-30a：0.793±0.106， t＝12.830， P<0.01， n＝3；α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)，对照：0.792±0.121，miR-30a：6.296±0.380， t＝13.820， P<0.01， n＝3；Ⅰ型胶原(COL1)，对照：0.2413±0.063，miR-30a：2.859±0.142， t＝16.840， P<0.01， n＝3]，差异有统计学意义，并促进HUVECs(EndMT)的增殖迁移能力[细胞迁移率，对照：(50.160±1.210)%，miR-30a：(68.560±1.918)%， t＝8.115， P<0.01， n＝6]，差异有统计学意义。 结论:miR-30a在ASO增生内膜中表达上调，miR-30a能够诱导内皮细胞间质化，增强其增殖迁移能力，导致ASO内膜增生、促进ASO病情进展。

目的:探讨miR-497在碱烧伤诱导的角膜新生血管(CNV)形成过程中的作用及其机制。方法:选用健康清洁级6~8周龄野生型(WT)C57BL/6小鼠42只以及成功鉴定为CRISPR/Cas9介导的miR-497敲除(KO)和过表达转基因(TG)小鼠各42只，分别作为WT组、KO组和TG组。构建角膜碱烧伤模型，分别于造模后第3、7、14、21天行裂隙灯显微镜检查并进行角膜上皮损伤评分和角膜基质混浊评分，测量CNV面积；采用组织病理染色法观察角膜结构变化和炎症细胞的表达；采用免疫组织化学染色法检测角膜组织中CD31的表达；采用荧光素酶报告基因检测miR-497与信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)之间的靶向结合关系；采用实时荧光定量PCR法检测各时间点小鼠角膜组织中miR-497以及血管内皮生长因子A(VEGFA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1 mRNA的相对表达量变化；采用Western blot法检测各组造模后14 d角膜组织中STAT3、p-STAT3蛋白的表达。结果:小鼠角膜碱烧伤后出现角膜损伤和炎症细胞浸润，同时出现CNV。角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分和CNV面积呈现先升高后降低的趋势，并在造模后第14天时达峰值。各组造模后不同时间点角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分、CNV面积和CD31阳性细胞数总体比较差异均有统计学意义( F分组＝49.19、34.56、44.56、77.56，均 P<0.01； F时间＝51.62、65.62、71.32、46.12，均 P<0.01)；其中KO组各时间点角膜上皮损伤评分、角膜基质混浊评分、CNV面积和CD31阳性细胞数均高于WT组和TG组，TG组各指标均低于WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在野生型STAT3共转染细胞中，miR-497组荧光素酶活性明显低于miR-阴性对照组和正常对照组，差异有统计学意义(均 P<0.05)；在突变型STAT3转染细胞中，各组间荧光素酶活性比较，差异无统计学意义( F＝0.69， P＝0.56)。WT组、KO组、TG组造模后14 d角膜组织中miR-497的相对表达量分别为0.68±0.11、0.41±0.06、1.05±0.14，均明显低于造模前的1.00±0.04、0.56±0.07、1.34±0.11，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。造模后第14天，KO组STAT3及p-STAT3蛋白相对表达量均明显高于WT组和TG组，TG组各蛋白相对表达量低于WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。各组造模后各时间点VEGFA、TNF-α、IL-6、IL-1β和MCP-1 mRNA相对表达量均明显高于造模前，KO组各mRNA相对表达量明显高于同时间点WT组和TG组，TG组各mRNA相对表达量明显低于同时间点WT组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:MiR-497可抑制碱烧伤诱导的角膜炎症反应及CNV形成，其可能通过靶向STAT3抑制炎症信号通路的激活。

目的:检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清细胞外囊泡（EV）中3′末端2′- O-甲基化（3′t-2′Ome）修饰的微小RNA（miR）-21-5p和miR-125a-5p水平的变化，评估其作为NSCLC患者辅助筛查分子标志物的价值。 方法:回顾性分析2023年5月1日至 10月31日于东部战区总医院确诊的69例NSCLC患者及65名同期年龄、性别匹配的健康体检对照者资料。采用茎环法和加Poly（A）尾法两种实时荧光定量（RT-qPCR）技术检测NSCLC患者及对照血清EV中3′t-2′Ome-miR-21-5p和3′t-2′Ome-miR-125a-5p表达变化，分析两种3′t-2′Ome-miRNA水平与患者临床分期、病理分型间差异及其他肿瘤指标的相关性。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清EV 3′t-2′Ome-miR-21-5p和3′t-2′Ome-miR-125a-5p及二者联合诊断NSCLC的效能。结果:与对照组相比，NSCLC患者血清EV中3′t-2′Ome-miR-21-5p水平较高，3′t-2′Ome-miR-125a-5p水平较低［（0.30±0.05）比（0.35±0.09）， t=3.32， P=0.001；（0.33±0.06）比（0.25±0.06）， t=7.45， P<0.001］，差异均有统计学意义。EV中3′t-2′Ome-miR-21-5p水平在NSCLC42例0~Ⅱ期患者、56例腺癌患者、12例鳞癌患者中表达水平均升高，且腺癌和鳞癌患者间差异有统计学意义［（0.34±0.85）比（0.40±0.12）， P<0.05］；ROC曲线分析结果显示，血清EV中3′t-2′Ome-miR-21-5p、3′t-2′Ome-miR-125a-5p水平及二者联合用于诊断NSCLC患者AUC分别为0.647（95% CI 0.550~0.743）、0.825（95% CI 0.756~0.894）和0.860（95% CI 0.797~0.923），敏感度分别为92.3%、80.0%、89.2%，特异度分别为46.4%、73.9%、78.3%。 结论:NSCLC患者血清EV中存在2′Ome-miR-21-5p和2′Ome-miR-125a-5p水平变化，二者联合检测具备作为NSCLC患者辅助筛查分子标志物的潜能。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-185在骨肉瘤患者中的表达，探讨其在骨肉瘤诊断及预后中的价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测54对骨肉瘤患者和健康对照者(性别和年龄匹配)的miR-185表达。根据miR-185的中位数(2.381)，将所有患者分为两组：高miR-185表达组(21)和低miR-185表达组(33)。然后分析miR-185表达与患者临床病理因素的相关性。血清样本在郑州大学第一附属医院2012年1月1日至2014年12月份从接受手术但未接受化学疗法或放射疗法的患者中收集，并分析miR-185表达与骨肉瘤患者的临床病理特征和总体生存率的关系。使用Manne Whitney U检验比较骨肉瘤患者和正常对照组血清miR-185水平的差异。对数秩检验和Kaplan-Meier方法评估骨肉瘤患者的总体生存率。采用Cox回归和多因素分析评估预后价值。 结果:与正常对照组比较，骨肉瘤患者血清中的miR-185表达显著降低( U＝373.000, P<0.05)，差异有统计学意义。miR-185的低表达与较大的肿瘤体积(直径<5 cm比直径≥5 cm的miR-185：3.100±0.359比1.806±0.226， P<0.01)，较高的TNM分期(一、二期比三、四期的miR-185：2.986±1.562比1.566±1.305， P<0.01)和远处转移(未转移比转移的miR-185：3.014±1.660比1.590±1.148， P<0.01)密切相关，差异有统计学意义。Kaplan-Meier曲线生存分析和对数秩检验显示，miR-185的低表达与骨肉瘤患者的总生存率降低有关。此外，多变量分析表明，miR-185表达降低是骨肉瘤患者总体生存的独立预后生物标志物( P<0.01)，差异有统计学意义。 结论:血清miR-185可作为一种肿瘤抑制因子，有助于骨肉瘤患者的诊断、预后。