目的:探讨血清免疫球蛋白G（IgG）、T-框蛋白21（TBX21）、微小RNA-335（miR-335）联合检测诊断狼疮性肾炎（LN）的临床价值。方法:选取柘城中医院2021年1月至2023年1月收治的95例LN患者为观察组，取同期95例健康体检人员为对照组，另根据入院时系统性红斑狼疮疾病活动度（SLEDAI）将LN患者分为活动期（51例，SLEDAI评分>4分）和稳定期（44例，SLEDAI评分0~4分）2个亚组。比较2组血清IgG、TBX21、miR-335水平，比较不同活动度血清IgG、TBX21、miR-335、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、补体C3、补体C4水平及SLEDAI评分，分析血清IgG、TBX21、miR-335水平与BUN、Scr、补体C3、补体C4水平及SLEDAI评分相关性，并分析血清IgG、TBX21、miR-335对LN的诊断价值。结果:与对照组相比，入院时观察组血清IgG、TBX21、miR-335水平均较高（均 P<0.05）；入院时活动期患者血清IgG、TBX21、miR-335水平均高于稳定期患者（均 P<0.05）；入院时活动期患者BUN、Scr、SLEDAI评分均高于稳定期患者，补体C3、补体C4水平均低于稳定期患者（均 P<0.05）；入院时血清IgG、TBX21、miR-335水平与BUN、Scr、SLEDAI评分均呈正相关，与补体C3、补体C4水平均呈负相关（均 P<0.05）；血清IgG、TBX21、miR-335水平联合诊断LN的曲线下面积（AUC）大于单一检测（ P<0.05）。 结论:血清IgG、TBX21、miR-335与疾病活动度密切相关，临床上可将其作为诊断和预测LN的参考指标，以便早期制定有针对性的治疗方案。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:探讨lncRNA SNHG8对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其分子作用机制。方法:选取本院2017年1月至2019年1月收治的30例膀胱癌患者的癌组织及相应的癌旁组织；将膀胱癌T24细胞分为si-NC组、si-SNHG8组、miR-NC组、pcDNA组、pcDNA-SNHG8组、miR-335-5p组、si-SNHG8+anti-miR-NC组及si-SNHG8+anti-miR-335-5p组。对各组细胞采用qRT-PCR、MTT、Transwell、Western blot和双荧光素酶报告实验等检测并进行比较分析。结果:与癌旁组织比较，膀胱癌组织中SNHG8的表达水平升高，miR-335-5p表达水平下降(均 P<0.001)。抑制lncRNA SNHG8或过表达miR-335-5p后，T24细胞的活力、迁移和侵袭能力显著下降，CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平降低，p21蛋白表达水平升高(均 P<0.001)。lncRNA SNHG8靶向调控miR-335-5p的表达水平。与si-SNHG8+anti-miR-NC组比较，si-SNHG8+anti-miR-335-5p组的细胞活性、迁移能力、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平升高，p21蛋白表达水平降低(均 P<0.001)，即下调miR-335-5p表达可逆转抑制lncRNA SNHG8表达对T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响。 结论:下调lncRNA SNHG8可通过促进miR-335-5p表达抑制T24细胞的增殖、迁移和侵袭。

目的:探讨三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer, TNBC）患者血清外泌体中微小RNA（microRNA-335-5p, miR-335-5p）和重组人血管内皮生长因子受体1（human vascular endothelial growth factor receptor 1, VEGFR-1, FLT1）表达水平及其诊断价值。方法:高通量基因表达数据库（Gene Expression Omnibus database, GEO）分析并筛选乳腺癌组织中差异表达的miRNA，于2016年1月至2017年11月收集宁波大学附属人民医院的56例TNBC患者的外周血标本，分离外泌体并鉴定。生物信息学分析筛选出FLT1作为miR-335-5p的靶基因。qRT-PCR分别检测miR-335-5p、FLT1在血清外泌体中的表达水平。分析miR-335-5p与TNBC患者临床病理参数的关系，受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic, ROC）评估miR-335-5p的诊断价值，Kaplan-Meier生存曲线对miR-335-5p和FLT1做生存预后分析。结果:TNBC患者血清外泌体中miR-335-5p表达低于对照组，FLT1在血清外泌体中的表达高于对照组（均 P<0.05）。miR-335-5p表达情况与TNBC患者组织分级（ χ2=22.02， P<0.000 1）、分化程度（ χ2=20.67, P<0.000 1）、淋巴结转移有关（ χ2=4.667, P=0.030 8）；miR-335-5p诊断ROC下面积为0.809 8（95% CI: 0.726 3~0.893 2, P<0.000 1）。Kaplan-Meier生存分析显示，miR-335-5p低表达组患者的总生存期较高表达组明显缩短（ P=0.004 5）。其靶基因FLT1的高表达与低生存率相关（ P=0.048 0）。 结论:血清外泌体源性miR-335-5p可作为预测TNBF预后的重要指标，有望在TNBC的诊断和治疗中发挥作用。

目的:研究高脂饮食小鼠腹脂微小RNA(miRNA)的差异表达，探讨高表达miR-335在脂类代谢过程中作用。方法:对高脂饮食的小鼠腹脂进行miRNA芯片分析，检测小鼠腹脂miRNA的差异表达；采用生物信息学方法预测miR-335靶基因，双荧光素酶报告系统及点突变实验验证靶基因外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶4(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphordiester-ase4, ENPP4)和脂肪酸去饱和酶1(fatty acid desaturase1, FADS1)；3T3L1细胞中转染miR-335模拟体，检测靶基因mRNA和蛋白表达量；实时荧光定量PCR检测miR-335和靶基因在高脂饮食小鼠不同组织中的表达量。结果:高脂饮食后，模型组小鼠体型明显大于对照组，小鼠血清总胆固醇( P＝0.016)和三酰甘油( P＝0.014)水平显著上升。高脂饮食的小鼠脂肪组织中多种miRNA发生差异表达，其中miR-335表达上升尤为明显( P＝0.024)。通过Targetscan预测miR-335靶基因，结合其功能，筛选出ENPP4和FADS1。报告基因试验显示miR-335通过"种子区"与ENPP4和FADS1预测靶位点结合从而抑制ENPP4和FADS1基因的表达，点突变实验证实了结合的靶位点；设计合成miR-335模拟体转染3T3L1细胞，培养48 h后，FADS1 mRNA表达水平显著下降( P＝0.038)，ENPP4和FADS1蛋白水平均显著下降( P＝0.033, P＝0.007)。与对照组相比，高脂饮食后miR-335在肝脏、白棕脂肪组织和脑中显著性高表达( P＝0.017, P＝0.002, P＝0.003, P＝0.031)；而ENPP4和FADS1在脑( P＝0.006, P＝0.034)和棕色脂肪组织( P＝0.014, P＝0.037)中表达量显著下降，同时ENPP4在肝脏中的表达量也极显著下降( P<0.001)。 结论:miR-335是与脂类代谢和脂肪沉积相关的miRNA，ENPP4和FADS1基因是miR-335的靶基因。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异转录物(XIST)对胃癌细胞增殖、迁移的影响及其作用机制。方法:收集2018年1月至2019年12月来自宜昌市中心人民医院的胃癌患者42例，采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测XIST在胃癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中表达，分析XIST表达与患者临床病理参数的相关性。采用qPCR检测XIST在胃癌细胞系中的表达，通过转染小干扰RNA(si-XIST)敲低XIST在胃癌细胞SGC-7901和AGS中的表达，分别将胃癌细胞分为si-XIST组和si-NC组，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖活性，细胞划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力，双荧光素酶验证XIST与微小RNA(miR)-335的靶向关系。组间比较采用 t检验。 结果:XIST在胃癌组织中相对表达量为1.86±0.24，显著高于癌旁正常组织的0.98±0.11，差异有统计学意义( P<0.05)，同样，胃癌细胞系中XIST的相对表达显著上调( P<0.05)，差异有统计学意义。组织样本中XIST的表达与患者的TNM分期和淋巴结转移明显相关( P<0.05)，差异有统计学意义，敲低XIST表达可显著降低胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，XIST可负向调控miR-335的表达。 结论:lncRNA XIST可负向调控miR-335的表达，从而抑制胃癌的增殖、迁移和侵袭能力。

目的:探讨冠心病(CHD)患者冠状动脉旁路移植术(CABG)治疗后血清微小RNA(miR)-335、miR-193b水平与预后的关系。方法:选取阜外华中心血管病医院2018年6月至2020年6月收治的106例CHD患者作为研究对象，全部患者均行CABG治疗，术后进行为期12个月的随访，根据患者预后情况(是否发生不良心血管事件)分为预后不良组和预后良好组。检测并比较两组入院时血清miR-335、miR-193b水平，经Logistic回归、ROC曲线分析入院时血清miR-335、miR-193b水平对CHD患者CABG治疗预后的关系。结果:106例CHD患者经CABG治疗、随访后，有34例发生不良心血管事件，占32.08%；预后不良组胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)水平高于预后良好组[(6.02±0.87) mmol/L比(4.45±0.62) mmol/L、(1.87±0.40) mmol/L比(1.53±0.31) mmol/L]，miR-335、miR-193b水平低于预后良好组(0.55±0.29比0.81±0.27、0.46±0.25比(0.76±0.24)，差异有统计学意义( t＝10.577、4.940、4.571、5.869， P<0.05)；组间其他资料对比，差异无统计学意义( P>0.05)；经单项Logistic回归分析后，将 P值放宽至<0.1，纳入符合条件的因素，建立多项Logistic回归模型，结果显示，TC[ B＝3.666，比值比( OR)＝39.106，95%可信区间( CI)：8.551~178.831]、TG( B＝2.888， OR＝17.959，95% CI：4.516~71.423)过表达可能作为CHD患者CABG治疗预后的风险因子( P<0.05)，miR-335( B＝-3.324， OR＝0.036，95% CI：0.007~0.190)、miR-193b( B＝-5.068， OR＝0.006，95% CI：0.001~0.054)水平高表达可能作为CHD患者CABG治疗预后的保护因子( OR<1， P<0.05)；绘制ROC曲线，结果显示，入院时血清miR-335、miR-193b水平预测CHD患者CABG治疗预后不良的AUC均>0.70，具有一定预测价值，且以入院时血清miR-335、miR-193b的截点(cut-off)值取0.640、0.660时，可获得最佳预测价值。 结论:血清miR-335、miR-193b水平与CHD患者CABG治疗预后密切相关，两者联合检测有利于预测CHD患者预后。

目的:探讨胃癌患者微小RNA（miRNA）-21和miRNA-335-5p表达与胃蛋白酶原（PG）和胃泌素17（G-17）的相关性。方法:选择临海市第二人民医院2019年1月至2021年1月收治的胃癌患者61例为研究对象，选择同期该院健康体检者60例作为对照组。采用乳胶增强免疫比浊法测定PGⅠ、PGⅡ和G-17水平；采用qRT-PCR法测定miRNA-21和miRNA-335-5p表达。比较两组PGⅠ、PGⅡ和G-17水平，miRNA-21和miRNA-335-5p表达；miRNA-21和miRNA-335-5p诊断胃癌灵敏度和特异度；分析miRNA-21和miRNA-335-5p与PGⅠ、PGⅡ和G-17的相关性。结果:胃癌组血清PGⅠ[（54.36±9.89）μg/L］、G-17［（13.74±1.89）pg/mL］均低于对照组的（112.31±23.24）μg/L和（18.75±2.36）pg/mL；PGⅡ[（24.35±4.53）μg/L］高于对照组的（20.37±3.28）μg/L，两组差异均有统计学意义（ t=17.89、12.90、5.52，均 P < 0.05）。胃癌组miRNA-21 mRNA相对表达量［（3.42±0.61）］高于对照组的（0.53±0.12）；miRNA-335-5p mRNA相对表达量［（0.32±0.17）］低于对照组的（1.65±0.35），两组差异均有统计学意义（ t=30.01、26.65，均 P < 0.05）。受试者工作特征（ROC）曲线分析显示，miRNA-21诊断胃癌灵敏度为74.36%，特异度为68.18%；miRNA-335-5p诊断胃癌灵敏度为79.49%，特异度为60.90%。miRNA-21与PGⅠ和G-17呈线性负相关（ r=-0.82、-0.74），而与PGⅡ呈线性正相关（ r=0.76）；miRNA-335-5p与PGⅠ和G-17呈线性正相关（ r=0.79、0.72），而与PGⅡ呈线性负相关（ r=-0.70）。 结论:胃癌患者miRNA-21高表达，而miRNA-335-5p低表达，且与PG和G-17具有明显相关性，可作为诊断胃癌有效指标，研究成果具备显著创新性和科学性。

目的:探讨血清miR-378与miR-335在2型糖尿病和糖尿病肾病患者中的表达差异及临床意义。方法:选取2019年12月至2020年12月在本院收治的100例2型糖尿病(T2DM)患者，根据世界卫生组织T2DM和糖尿病肾病(DKD)的诊断标准将其分为T2DM组(42例)和DKD组(58例)，同时选取同期30例健康体检者作为对照组。检测所有研究对象的血清miR-378与miR-335的表达水平。绘制出受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-378与miR-335对T2DM和DKD的预测价值。结果:与对照组比较，DKD组的舒张压(DBP)、收缩压(SBP)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿酸(UA)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿微量白蛋白(UMA)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)较高，而估算的肾小球滤过率(eGFR)、白蛋白(ALB)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)较低，T2DM组的FBG、HbA1c、UMA较高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与T2DM组比较，DKD组患者的SBP、Scr、BUN、UMA较高，而HbA1c、FBG、eGFR、ALB较低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。DKD组和T2DM组的血清miR-378、miR-335均低于对照组，DKD组的血清miR-378、miR-335均低于T2DM组(均 P<0.05)。血清miR-378、miR-335水平与UMA呈负相关( r＝-0.754、-0.736， P<0.001)，miR-335水平与FBG负相关( r＝-0.842， P<0.05)。logistic回归分析结果发现高UMA、低miR-378和miR-335水平是T2DM患者出现DKD的独立危险因素( P<0.05)。血清miR-378预测糖尿病患者出现DKD的ROC曲线下面积(AUC)为0.830(95% CI：0.741~0.969， P<0.05)，灵敏度为75%，特异度为96%。miR-335预测糖尿病患者出现DKD的AUC为0.751(95% CI：0.668~0.847， P<0.05)，灵敏度为77%，特异度为71%。miR-378、miR-335联合检测在预测糖尿病肾病患者出现DKD的AUC为0.932(95% CI：0.871~0.985， P<0.05)，灵敏度为85%，特异度为97%。 结论:血清miR-378、miR-335有作为无创性诊断DKD新标志物的潜力。

目的:探讨补肾启智方通过调控微小RNA-335(microRNA-335,miR-335)靶向Rho家族相关蛋白激酶2(Rho associ-ated protein kinase 2,ROCK2)蛋白,对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤HT22 细胞焦亡与应激颗粒的影响.方法:取对数生长期的HT22 细胞,随机分为空白组、模型组、补肾启智方组、miR-335 抑制组、空病毒对照组、补肾启智方+miR-335 抑制组.除空白组外,其余各组细胞均建立OGD/R损伤模型.采用CCK-8 法检测细胞存活率,qRT-PCR法检测细胞miR-335 mRNA表达水平,Western blot检测细胞ROCK2、T细胞胞内抗原 1(T cell intracellular antigen 1,TIA1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(c-Caspase-1)、消皮素D-N(gasdermin D-N,GSDMD-N)蛋白表达水平,ELISA法检测细胞上清液白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)水平.结果:与空白组比较,模型组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.05).与模型组比较,补肾启智方组细胞存活率、miR-335 mRNA水平升高,miR-335 抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.01).与空病毒对照组比较,miR-335 抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.01).与miR-335 抑制组比较,补肾启智方+miR-335 抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平升高(P<0.01).与空白组比较,模型组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平升高,TIA1 蛋白表达水平降低(P<0.01).与模型组比较,补肾启智方组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平降低,TIA1 蛋白表达水平升高,而miR-335 抑制组细胞上述蛋白的表达趋势与之相反(P<0.05).与空病毒对照组比较,miR-335 抑制组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平升高,TIA1 蛋白表达水平降低(P<0.05);相较于miR-335 抑制组,补肾启智方+miR-335 抑制组细胞上述蛋白的表达趋势与之相反(P<0.01).与空白组比较,模型组细胞IL-1β、IL-18 水平升高(P<0.01).与模型组比较,补肾启智方组细胞IL-1β、IL-18 水平降低(P<0.01),miR-335 抑制组细胞则与之相反(P<0.05).与空病毒对照组比较,miR-335 抑制组细胞IL-1β、IL-18 水平升高(P<0.05);相较于miR-335 抑制组,补肾启智方+miR-335 抑制组细胞上述因子的表达趋势与之相反(P<0.01).结论:补肾启智方可能通过调控miR-335/ROCK2 活性,促进应激颗粒形成,抑制炎症反应以及NLRP3 介导的细胞焦亡,从而发挥神经保护作用.