目的:构建氯化镁(MgCl 2)微米缓释抗钙化的组织工程小口径血管。 方法:联合应用Triton X-100+脱氧胆酸钠盐、DNA/RNA核酶对绵羊颈动脉行脱细胞处理，制成组织工程小口径血管支架，HE染色，电镜下观察脱细胞情况和血管支架性能。采用复乳法超声破碎高速搅拌挥发法，制备载有MgCl 2的微米抗钙化缓释微球颗粒。检测缓释微球的粒径、包封率、载药量(率)及测出缓释曲线。应用碳二亚胺盐酸盐/琥珀酸亚胺(EDC/NHS)交联人工小口径血管，采用冷冻干燥技术将载有MgCl 2的微米缓释微球与血管支架结合，电镜下观察结合情况。检测标本血管厚度、拉力强度和压力承受值。 结果:羊颈动脉经脱细胞处理后能去除各类细胞，并保持支架原有性能。载有MgCl 2的微米抗钙化缓释微球粒径(1.31±0.02)μm，相对均匀，微球颗粒包封率82.79%，载药量(率)2.98%，25天内存在缓慢释放，释放率达81.08%。载有MgCl 2的缓释微球颗粒与小口径组织工程血管能有效紧密结合。 结论:以聚乳酸-羟基乙酸共聚物为载体制成的载有MgCl 2的缓释微球颗粒可缓释镁离子，这为构建抗钙化组织工程小口径血管奠定了基础。

目的:克隆幽门螺杆菌(Hp)hp0169基因并进行晶体学研究,分析其二级结构和三维结构.方法:由UniProt数据库中检索Hp NCTC26695菌株hp0169基因及其编码蛋白序列,采用生物信息学方法分析Hp重组胶原蛋白酶(HpPrtC)蛋白理化性质,SOPMA和DNAStrar软件预测HpPrtC蛋白二级结构特征,SWISS-MOPEL软件构建HpPrtC蛋白三维结构,IEDB和ABCpred软件预测HpPrtC蛋白B淋巴细胞抗原表位,SYFPEITHI网站预测T淋巴细胞抗原表位,专家库(EP)算法和随机森林(RF)算法预测HpPrtC蛋白可结晶性.原核表达HpPrtC重组蛋白,经Ni2+亲和层析和分子筛技术纯化蛋白,结晶试剂盒筛选HpPrtC的结晶条件.结果:hp0169基因共包含1 269个碱基配对,编码蛋白全长422个氨基酸,理论等电点为7.64,相对分子质量为47 300.HpPrtC蛋白为亲水性、可溶性蛋白.HpPrtC蛋白α螺旋的氨基酸数量占全部氨基酸数量百分率为35.78%,β片层为18.72%,β转角为 6.87%,无规则卷曲为 38.63%.抗原表位分析,HpPrtC蛋白含有B淋巴细胞的 5个优势线性表位和 3个构象表位及多个T淋巴细胞潜在优势抗原表位.同源建模,HpPrtC蛋白呈二聚体,单体由β折叠围成桶状结构,周围被α螺旋和无规则卷曲围绕.HpPrtC蛋白为中等难度结晶,且无信号肽和跨膜螺旋,在 0.2 mol·L-1 氯化镁、0.1 mol·L-1 三羟甲基氨基甲烷(Tris)、3.4 mol·L-1 己二醇和pH 8.5条件下出现细小成簇的针状晶体.结论:HpPrtC是一种亲水型蛋白,呈二聚体构造,在适宜条件下呈细小成簇针状晶体,其具有T淋巴细胞和B淋巴细胞优势抗原表位,可作为Hp疫苗设计的抗原,用于构建多价融合疫苗或多表位疫苗,本研究结果为Hp的防治提供了实验基础.

目的 筛选改善脑缺血的加味佛手散复方,确定处方组成和最佳剂量.方法 运用数据挖掘方法筛选治疗高血压性脑出血(HICH)常用中药,进行聚类分析,获得加味佛手散复方;按混合均匀设计U14(42×33×22),采用小鼠耳廓动脉扩张实验和饱和氯化镁致小鼠急性脑缺血实验分别观察小鼠耳廓动脉指数和存活时间,评价各组方改善脑缺血的药理效应,在药效学直观分析的基础上进行逐步多元回归分析,用回归方程计算加味佛手散处方组成及剂量,对优化的处方采用小鼠急性脑缺血实验验证.结果 经数据挖掘筛选出治疗HICH的方剂共51首,包含103味中药,总频次535次;混合均匀设计U14(42×33×22)试验显示,加味佛手散各组方小鼠耳廓动脉指数均有不同程度增加,处方4、8、12、13组间差异显著(P<0.05),处方3、7、9、11、14组间差异极显著(P<0.01);处方2-14组小鼠急性脑缺血存活时间均有延长,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.01),根据回归方程确定新加味佛手散处方为黄芪60 g、当归60 g、川芎24 g、赤芍15 g、地龙9 g;验证结果显示,新加味佛手散高、中剂量均能延长小鼠急性脑缺血的呼吸时间,增加呼吸次数,延长常压耐缺氧时间(P<0.01,P<0.05).结论 混合均匀设计结合脑缺血效应指标能确定加味佛手散的处方组成和最佳剂量,新加味佛手散具有改善脑缺血的作用.

目的 建立石墨炉原子吸收光谱法(AAS)测定透析用盐类药用辅料中铝元素的含量.方法 样品加硝酸超声处理,采用铝空心阴极灯,波长:309.3 nm,电流:15 mA,光谱狭缝宽度:0.5 nm,塞曼偏振背景校正,基体改进剂:0.1％硝酸镁,进样测定,采用外标法计算.结果 铝离子在5～40ng·mL-1内与响应值线性关系良好(r=0.9995);检测限为1ng·mL-1;乳酸钠、氯化钙、醋酸钠、氯化钾、氯化镁、氯化钠中铝平均回收率在81.8％～98.4％.结论 本方法准确度高、重现性好,可用于透析用盐类药用辅料中铝元素的含量测定.

11α,17α-二羟基黄体酮(11α,17α-dihydroxy progesterone)作为甾体激素类药物的重要中间体,其生物合成主要以17α-羟基黄体酮作为底物转化生成.为探究不同微生物对17α-羟基黄体酮的转化能力,以11株具有甾体羟化能力的菌株为研究对象,通过全细胞生物转化实验,筛选得到了 一株转化能力最强的菌株亚麻刺盘孢SF-307.通过单因素实验和正交设计进行菌株发酵培养基组分优化,确定了最适发酵培养基:15 g/L可溶性淀粉、1.8 g/L氯化铵、0.6 g/L氯化镁、3 g/L玉米浆.优化培养基后的亚麻刺盘孢SF-307转化产物唯一,当底物投料量为0.5 g/L,添加1％(V/V)乙醇进行助溶,转化56 h时,底物转化率为93.2％,11 α,17α-二羟基黄体酮的最高浓度为224.1 mg/L,较优化前提高61.1％.上述结果表明:亚麻刺盘孢SF-307作为一株全新的17α-羟基黄体酮羟化菌株,发酵优化可显著增强17α-羟基黄体酮转化产物的选择性,缩短转化周期,对11α,17α-二羟基黄体酮的工业生产意义重大.

目的 探讨三磷酸腺苷二钠氯化镁对宫内窘迫胎鼠肾脏的保护作用.方法将15只成年雌性 SD孕鼠随机分为缺氧缺血再灌注组、假手术组和干预组,每组5只.于妊娠第19天以3.5%水合氯醛腹腔注射麻醉,缺氧缺血再灌注组和干预组通过无损伤动脉钳钳夹双侧子宫、卵巢动脉建立缺氧缺血宫内窘迫模型,缺氧20 min后拆除动脉夹以恢复血供,并逐层关腹.假手术组只开关腹,不钳夹子宫、卵巢动脉.干预组缺血前30 min给予三磷酸腺苷二钠氯化镁45 mg/kg腹腔注射,缺氧缺血再灌注组、假手术组于相同时间给予同等体积的0.9%氯化钠注射液腹腔注射.各组均于手术后24 h剖宫取胎,计算胎鼠死亡率.每组随机抽取10只胎鼠取肾组织制备标本,检测组织中丙二醛(MDA)水平,行HE染色高倍镜下观察胎鼠肾组织病理情况.结果 缺氧缺血再灌注组胎鼠死亡率明显高于假手术组(P<0.05),干预组胎鼠死亡率明显低于缺氧缺血再灌注组(P<0.05).缺氧缺血再灌注组胎鼠肾组织中 MDA含量明显高于假手术组(P<0.05),干预组胎鼠肾组织中 MDA含量明显低于缺氧缺血再灌注组(P<0.05).干预组肾小管上皮细胞水肿样变性明显轻于缺氧缺血再灌注组.结论 三磷酸腺苷二钠氯化镁能够减轻宫内窘迫胎鼠肾组织的损伤,对缺氧缺血肾细胞有保护作用.

目的 分析河南省4家大型屠宰场中预冷后肉鸡胴体沙门菌污染水平及耐药状况.方法 以河南省4家屠宰量为15000~50000羽/日的大型屠宰场为采样点,共采集269份预冷后肉鸡胴体进行沙门菌污染检测,对样品中沙门菌进行检测和分离,采用微量半同体氯化镁孔雀绿最可能数(MPN)法对样品中沙门菌进行定量检验,采用微量肉汤稀释法测定分离株对8种抗生素的最低抑菌浓度(MIC),并进行药敏试验.结果 共分离出沙门菌131株,污染率为48.7%,平均污染水平为1.32 MPN/g.131株沙门菌共检出8种血清型,其中肠炎沙门菌最多,为93株(71.0%),其次为印第安纳沙门菌21株(16.0%).只有2株肠炎沙门菌(1.5%)对所有测试的抗生素敏感,其余129菌株对8种抗生素均有不同程度的耐药,其中对奈啶酸(NAL)的耐药率最高,为79.4%(104株),多重耐药菌株为51株(38.9%).结论 河南省4家大型屠宰场中预冷后肉鸡胴体沙门菌污染率较高,污染水平较为严重,血清型复杂.

目的 研究三磷酸腺苷二钠氯化镁对宫内窘迫胎鼠脑组织自由基的影响和病理组织学变化,探讨三磷酸腺苷二钠氯化镁对宫内窘迫胎鼠脑组织的保护作用.方法 成年雌性Sprague-Dawley大鼠15只,孕鼠随机分为 Sham组、I/R组和T/M组三组,每组各5只.于妊娠第19天以3.5%水合氯醛腹腔注射麻醉,通过无损伤动脉钳钳夹双侧子宫、卵巢血管20 min建立缺血缺氧宫内窘迫模型.T/M组缺血前30 min,45 mg· kg-1三磷酸腺苷二钠氯化镁腹腔注射,Sham组和I/R组于相同时间给予同等体积的0.9%氯化钠注射液.Sham组只进行开关腹手术,不钳夹子宫卵巢动脉.各组孕鼠缺氧20 min后拆除动脉夹以恢复血供,并逐层关腹.各组均于手术后24 h取标本.计算胎鼠死亡率.每组随机抽取10只胎鼠取脑组织制备标本,检测组织丙二醛水平;行HE染色高倍镜下观察胎鼠脑组织病理改变.结果 胎鼠死亡率:I/R组胎鼠死亡率明显高于Sham组(P<0.05);T/M治疗组胎鼠死亡率较I/R组显著降低(P<0.05).MDA含量:与Sham组比较,I/R组胎鼠脑组织MDA含量显著增高(P<0.05),但T/M组胎鼠脑组织MDA活性显著降低(P<0.05).结论 三磷酸腺苷二钠氯化镁能够减轻对宫内窘迫胎鼠脑组织细胞损伤,对缺血缺氧脑细胞有保护作用.

目的 研究发酵培养基主要组分的种类和浓度对海洋石油降解菌Acinetobacter sp.Y9生长的影响.方法 采用单因子实验及正交实验对海洋石油降解菌Acinetobacter sp.Y9发酵培养基中的碳源、氮源及磷源进行筛选和优化,并用优化后的发酵培养基在10 L发酵罐中进行Y9菌株的初步发酵培养.结果 经优化,Y9菌株的最适发酵培养基配方为:葡萄糖1％,蛋白胨2％,磷酸盐缓冲溶液(磷酸氢二钠+磷酸二氢钾)0.1 mol/L,氯化钠0.05％,氯化钙0.001％,氯化镁0.019％.在10 L发酵罐中培养12h后,OD600值达8.24.结论 优化后的发酵培养基可用于Y9菌株的中试发酵生产,提高了菌体产量,为大规模发酵生产奠定了基础.

1 临床资料患者,男,63岁,主因“乏力、腹泻、尿黄、身黄半月”于2017年2月10日急诊入院.该患者于2013年发现乙肝肝硬化,既往无“心、脑、肺、肾”等脏器慢性病史.人院查体:体温(T)36.4℃,心率(HR) 84次/分,呼吸(RR)20次/分,血压(BP)136/62 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),精神差,计算力、记忆力、定向力轻度降低,双肺呼吸音正常,心脏各项检查正常.急诊化验示,肝功能:丙氨酸氨基转移酶(ALT) 284U·L-1、天冬氨酸氨基转移酶(AST) 433 U·L-1、直接胆红素(DBIL) 446.8 μmol· L-1、总胆红素(TBIL)781.7 μmol·L-1;凝血功能:凝血酶原活动度(PTA) 29.3％、凝血酶原时间(PT)24.2 s;血氨79.80 μmol· L-1.