目的 采用激光散射法测定妥布霉素地塞米松滴眼液及其原料药地塞米松的粒度及粒度分布.方法 采用马尔文Mastersizer 3000激光粒度仪,Hydro EV型湿法进样器,以地塞米松饱和溶液为分散介质(折射率1.33),样品折射率1.59,吸收率0.001,背景测量时间10 s,样品测量时间10 s,遮光度5％～10％,泵转速2 ×103 r·min-1,滴眼液直接加样平衡2 min后测定;地塞米松以0.01％吐温20分散后加样,20％强度超声5 min后再以2％强度超声5 min测定.结果 滴眼液及地塞米松的粒度分布测定值d(0.1)、d(0.5)、d(0.9)的RSD均小于5％,并与显微测定结果相符.结论 所用激光散射法操作简便、重复性好,适用于测定妥布霉素地塞米松滴眼液及地塞米松原料药的粒度及粒度分布.

目的:探讨飞秒激光小切口角膜基质透镜取出术(SMILE)与智能脉冲技术辅助经上皮准分子激光角膜切削术(SPT-TransPRK)术后早期视觉质量的差异和变化情况。方法:采用队列研究方法，选取2021年2—5月于大连医科大学附属大连市第三人民医院行角膜屈光手术者92例92眼，均为右眼入组，其中SMILE组40例40眼，SPT-TransPRK组52例52眼。分别于术前及术后1个月、3个月检查受检者视力，计算有效性，有效性＝术后裸眼视力(UCVA)/术前最佳矫正视力；采用AR-1自动电脑验光仪测量屈光度；采用Sirius角膜地形图测量角膜高阶像差(HOA)，包括总HOA、球差和彗差；采用OQASⅡ视觉质量分析系统测量客观散射指数(OSI)，调制传递函数截止频率(MTF cut-off)，斯特列尔比(SR)，模拟对比度视力VA100、VA20和VA9(白天、黄昏、夜晚)。结果:术后3个月，SMILE组与SPT-TransPRK组UCVA、有效性比较差异均无统计学意义( Z＝0.880， P＝0.380； t＝0.920， P＝0.058)，SPT-TransPRK组术后表现为低度远视。术前、术后1个月和术后3个月SMILE组总HOA分别为(0.47±0.18)、(0.70±0.22)和(0.74±0.19)μm，SPT-TransPRK组分别为(0.40±0.14)、(0.98±0.35)和(0.94±0.22)μm；术前、术后1个月和术后3个月SMILE组球差分别为(－0.20±0.09)、(－0.44±0.14)和(－0.44±0.15)μm，SPT-TransPRK组分别为(－0.20±0.10)、(－0.71±0.23)和(－0.75±0.20)μm。2个组术眼手术前后不同时间点总HOA和球差比较，差异均有统计学意义(总HOA： F分组＝13.851， P＝0.001； F时间＝29.960， P<0.001.球差： F分组＝31.037， P<0.001； F时间＝48.005， P<0.001)，其中2个组术后角膜总HOA、球差均较术前增加，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；术后1个月和3个月，SMILE组术眼总HOA和球差均小于SPT-TransPRK组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。2个组术后1个月、3个月角膜彗差较术前增加，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。SMILE组术后1个月OSI高于术前，MTF cut-off、SR和VA9低于术前，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；术后3个月OSI高于术前，SR和VA9低于术前，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。SPT-TransPRK组术后1个月OSI高于术前，MTF cut-off、SR、VA100、VA20和VA9低于术前，差异均有统计学意义(均 P<0.05)，术后3个月OSI、MTF cut-off、SR、VA100、VA20和VA9与术前比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。2个组间术眼彗差、OSI、MTF cut-off、SR、VA100、VA20和VA9总体比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:SMILE和SPT-TransPRK均是矫正近视的有效方法，术后早期视觉质量相似，但相较SPT-TransPRK，SMILE引起更小的角膜总HOA与球差改变。

目的:初步探讨拉曼光谱分析技术在脑胶质瘤术中病理学诊断中的应用效果。方法:采集首都医科大学附属北京天坛医院神经外科接受手术治疗患者的术中冰冻病理标本。共采集29例标本，包括24例胶质母细胞瘤[世界卫生组织(WHO)分级4级]，5例正常脑组织(系肿瘤周围组织，经病理学检测证实)。对每例标本进行多点采集拉曼光谱，并提取胶质母细胞瘤组织与瘤周正常脑组织的主要差异光谱，先使用主成分分析技术确定主要成分，并在此基础上建立支持向量机分类器训练诊断模型。计算主成分谱的灵敏度、特异度和准确率，绘制受试者工作特征曲线并计算曲线下面积，以评价模型的诊断效能。结果:29例标本共采集101条基于532 nm绿激光的拉曼散射光谱，其中病理学诊断为WHO 4级的肿瘤组织55条，正常脑组织46条。采集的光谱在1 168 cm －1、1 640 cm －1和2 860 cm －1处均出现了较强的共振拉曼峰，在仅使用支持向量机分类的情况下，得到了灵敏度为98.2%、特异度为80.4%、准确率为90.1%及曲线下面积为0.875的诊断模型。其中主成分因子(PC)1和PC2作为主成分分类器的灵敏度为90.9%、特异度为95.7%、准确率为93.1%、曲线下面积为0.942；PC1、PC2和PC3作为主成分分类器的灵敏度为96.4%、特异度95.7%、准确率为96.0%、曲线下面积为0.984。 结论:拉曼光谱分析技术可较好地区分脑胶质瘤组织和正常脑组织，有望作为一种术中快速诊断技术用于指导手术治疗。

目的：:观察经上皮准分子激光角膜切削术（TPRK）后眼罩冷敷缓解患者术后不适的临床疗效。方法：:前瞻性随机对照研究。选取2018年10月至2019年4月在温州医科大学附属眼视光医院之江院区行TPRK的患者87例（174眼），根据随机数字表随机分成冷敷组和对照组，2组均选取右眼进行观察。冷敷组在术后留观期间给予4 ℃冷藏硅胶眼罩冰敷袋，冷敷20 min，其余处理同对照组。对照组常规用药不冷敷。分别于术后2 h、1 d、2 d、3 d、5 d每天相对固定时间填写眼部不适感评分量表，包括视物模糊、畏光、异物感、流泪、眼痛、眼痒、眼部分泌物等术后不适情况。并于术后5 d、12 d、1个月、3个月分别评估角膜上皮愈合情况、裸眼视力（UCVA）、等效球镜度（SE）、角膜上皮下雾状混浊（haze）、调制传递函数截止频率（MTF cutoff）、客观散射指数（OSI）等指标。采用重复测量方差分析、独立样本 t检验对数据进行分析。 结果：:术后2 h时，畏光、异物感、眼痛评分等指标在2组间差异均有统计学意义（ F=15.93， P<0.001； F=9.52， P=0.003； F=13.57， P<0.001）。2组间视物模糊、流泪、眼痒、眼部分泌物差异均无统计学意义。术后1 d视物模糊指标在2组间差异有统计学意义（ F=9.69， P=0.003），畏光、异物感、流泪、眼痛、眼痒、眼部分泌物等指标差异无统计学意义。术后2、3、5 d所有不适症状组间差异均无统计学意义。术后5 d、12 d、1个月、3个月，2组间角膜上皮愈合情况、UCVA、SE、Haze等差异均无统计学意义。术后3个月2组间客观光学质量评估差异均无统计学意义。 结论：:TPRK术后冷敷疗法能够改善术后早期疼痛、畏光、异物感等刺激症状，但对术后远期视力恢复没有明显作用，且对术后角膜上皮修复、视觉质量恢复等无负面影响。

目的:比较飞秒激光小切口角膜基质透镜取出术(SMILE)和角膜波前像差引导的个性化飞秒激光制瓣的准分子激光原位角膜磨镶术(WF-LASIK)矫正中高度近视早期的效果和光学质量。方法:前瞻性病例对照研究。分析徐州市第一人民医院2021年11月至2022年2月中高度近视41例(41只眼)的临床资料，结合其眼科检查及个人需求分为SMILE组21例(21只眼)和WF-LASIK组20例(20只眼)。光学质量检测采用双通道客观视觉质量分析系统(OQAS分析仪)，泪膜稳定性检测采用眼表综合分析仪(Oculus分析仪)。对两组患者术前、术后1个月斯特列尔比值(SR)、调制传递函数截止频率(MTF cut off)、客观散射指数(OSI)、客观模拟对比度视力(predicted VA 100%)、首次泪膜破裂时间(fBUT)和平均泪膜破裂时间(avBUT)进行分析和比较。结果:SMILE和WF-LASIK两组术后SR和MTF cut off均降低，组间SR差异无统计学意义( t＝1.26， P＝0.421)；MTF cut off差异无统计学意义( t＝0.36， P＝0.720)；OSI呈增加趋势，组间OSI差异有统计学意义( t＝-2.91， P＝0.006)，术后两组OSI均显著增加，差异均有统计学意义，其中SMILE组的OSI低于WF-LASIK组(SMILE组： t＝-3.09， P＝0.006；WF-LASIK组： t＝-2.88， P＝0.009)。术后两组fBUT显著降低(SMILE组： t＝5.69， P<0.001；WF-LASIK组： t＝3.67， P＝0.002)；术后两组avBUT显著降低(SMILE组： t＝4.88， P<0.001；WF-LASIK组： t＝3.12， P＝0.005)，SMILE和WF-LASIK组间差异无统计学意义。Spearman相关性分析提示术前屈光状态等效球镜度与OSI存在显著负相关( r＝-0.38， P＝0.013)，SR和MTF cut off存在显著正相关( r＝0.69， P<0.001)。 结论:SMILE和WF-LASIK术后OSI增加和泪膜稳定性降低是导致术后光学质量下降的主要原因，因此，OQAS和Oculus分析仪的组合可作为评估屈光手术后光学质量有效的补充测量。

目的:构建一种基于超分子主客体化学组装的聚集诱导发光囊泡材料（AIE-HG-Vesicle）用于递送小干扰RNA（siRNA）及实现荧光成像功能，并探究其被肿瘤细胞摄取的效果及其基于siRNA对肿瘤细胞的杀伤效果。方法:通过合成聚乙烯亚胺树型分子修饰的β-环糊精（H-β-CD-dendrimer）作为主体化合物，同时合成含有四苯乙烯AIE基团的Bola型金刚烷（G-Ada-AIE）作为客体化合物，通过超分子主客体自组装过程制备得到AIE-HG-Vesicle囊泡材料用于负载siRNA。通过透射电子显微镜及动态光散射仪测试其形貌和尺寸，通过荧光分光光度计测试其聚集诱导发光性质，通过凝胶阻滞实验测试其对siRNA的负载效果，通过激光共聚焦显微镜测试负载siRNA的AIE-HG-Vesicle囊泡材料在肿瘤细胞内的递送效果，并通过MTT实验测试负载siRNA的AIE-HG-Vesicle囊泡材料对肿瘤细胞的杀伤效果。结果:AIE-HG-Vesicle具有囊泡状形态，直径约为100 nm，壁厚约为9 nm，且表面带正电荷可有效负载siRNA。负载于AIE-HG-Vesicle的siRNA表现出良好的稳定性，且负载siRNA后的AIE-HG-Vesicle可将siRNA递送到HeLa细胞内部，并可通过聚集诱导发光现象被观测到，负载siRNA后的囊泡对HeLa细胞有明显的杀伤效果。结论:构建了AIE-HG-Vesicle可用于递送siRNA，该材料具有荧光成像和基于siRNA的肿瘤细胞毒性作用，后期有望应用于肿瘤体内治疗。

目的:探讨复合人表皮干细胞（ESC）的猪脱细胞真皮基质（ADM）对裸鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法:采用实验研究方法。采用数码相机拍照观察猪ADM形态，采用苏木精-伊红（HE）染色观测猪ADM中细胞残留，采用扫描电子显微镜观察猪ADM表面结构，采用红外光谱仪分析猪ADM二级结构，采用动态光散射粒度分析仪分析猪ADM粒径，采用纳米粒度电位仪分析猪ADM电位。采用倒置荧光显微镜观察猪ADM在培养基中放置30 min、1 d、5 d的形态（样本数为2）；采用随机数字表法（分组方法下同）将猪ADM分为5 min组、10 min组、20 min组、30 min组、60 min组、120 min组，常温静置相应时间，称量法计算吸水量（样本数为3）；将Swiss小鼠胚胎成纤维细胞（Fb）分为仅有培养基的空白对照组和另加入相应终质量浓度的ADM浸提液的50.0 g/L ADM浸提液组、37.5 g/L ADM浸提液组、25.0 g/L ADM浸提液组、12.5 g/L ADM浸提液组、6.5 g/L ADM浸提液组，分别于培养24、48、72 h，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖率并进行细胞毒性分级（样本数为5）；将1只6周龄雄性SD大鼠红细胞分为生理盐水组、超纯水组及添加相应终质量浓度猪ADM浸提液的5 mg/mL ADM浸提液组、10 mg/mL ADM浸提液组、15 mg/mL ADM浸提液组，于反应3 h，采用酶标仪检测血红蛋白的吸光度值代表猪ADM血液相容性（样本数为3）。从陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院泌尿外科2020年7月收治的1名6岁健康男童包皮环切术后废弃包皮中分离培养ESC并采用流式细胞术鉴定。混合培养法构建复合ESC的猪ADM（以下简称ESC/ADM）颗粒，培养3 d后采用HE染色和激光扫描共聚焦显微镜观察ESC/ADM复合效果。将36只7~8周龄雄性无胸腺裸鼠分成单纯磷酸盐缓冲液（PBS）组、单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组，每组9只，并建立全层皮肤缺损创面模型，伤后即刻，创面均一次性采用相应试剂处理。分别于伤后1、7、11、15 d，观察创面愈合情况并计算创面愈合率（样本数为3）；伤后7 d，行HE染色观察创面上皮化情况并测量未上皮化长度（此处及以下样本数均为4）；伤后11 d，行Masson染色观察创面胶原沉积和真皮化情况并计算创面切面真皮面积，行免疫荧光染色并计算创面表达ESC特异性标志物CD49f的细胞数，行实时荧光定量反转录PCR检测创面移植ESC的3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）的mRNA表达。对数据行独立样本 t检验、单因素方差分析、重复测量方差分析、LSD- t检验。 结果:猪ADM为白色微粒状，内部无细胞存在，由网状结构组成，结构排列无序，表面粗糙；猪ADM分别在1 659、1 549、1 239 cm -1波数处出现吸收峰；猪ADM在溶液中主要粒径分布在500~700 nm；猪ADM表面带负电荷。放置30 min、1 d、5 d，猪ADM均形态相对稳定；放置30~120 min猪ADM吸水量保持相对高水平。6.5 g/L ADM浸提液组、12.5 g/L ADM浸提液组、25.0 g/L ADM浸提液组小鼠胚胎Fb在培养24 h细胞毒性分级为1级，其余各组各时间点细胞毒性分级均为0级。反应3 h，超纯水组红细胞中血红蛋白的吸光度值明显高于生理盐水组和15 mg/mL ADM浸提液组（ t值分别为8.14、7.96， P<0.01）。第4代细胞常规培养3 d形态呈鹅卵石样且低表达CD71和高表达CD49f的被鉴定为ESC。猪ADM颗粒上有ESC附着、生长。伤后1 d，单纯PBS组、单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面大小基本一致。伤后7、11、15 d，各组裸鼠创面收缩，其中单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面收缩明显。伤后7 d，单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面愈合率明显高于单纯PBS组（ t值分别为2.83、4.72， P<0.05或 P<0.01）；伤后11 d，ESC/ADM组裸鼠创面愈合率明显高于单纯PBS组（ t=4.86， P<0.01）；伤后15 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面愈合率均明显高于单纯PBS组（ t值分别为2.71、2.90、3.23， P<0.05）。伤后7 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面未上皮化长度分别为（816±85）、（635±66）、（163±32）μm，明显短于单纯PBS组的（1 199±43）μm（ t值分别为5.69、10.19、27.54， P<0.01）。伤后11 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面切面真皮面积明显大于单纯PBS组（ t值分别为27.14、5.29、15.90， P<0.01）；单纯ADM组和ESC/ADM组裸鼠创面的胶原生成比单纯PBS组明显，单纯ESC组和单纯PBS组相近。伤后11 d，单纯ESC组和ESC/ADM组裸鼠创面中CD49f表达阳性数量分别为（135±7）、（185±15）个，GAPDH的mRNA表达阳性；单纯PBS组、单纯ADM组裸鼠创面均无CD49f、GAPDH的mRNA表达。 结论:ESC/ADM颗粒能够促进裸鼠全层皮肤缺损创面愈合，这可能与其提高了ESC移植后的存活率和ADM促进了真皮结构重排、血管新生有关。

目的:以磷脂杂化法制备系列仿生微泡超声造影剂，通过检测其理化性质和生物效能，评估该方法制备仿生微泡的可行性和广谱适用性。方法:通过薄膜-水化、磷脂杂化、机械振荡等步骤制备仿白细胞微泡(MB leu)、仿血小板微泡(MB pla)及仿红细胞微泡(MB ery)，采用动态光散射检测仿生微泡的粒径、电位，应用激光共聚焦显微镜观察结构，流式细胞计数检测MB leu、MB pla、MB ery典型细胞膜蛋白，聚丙烯酰胺凝胶电泳验证仿生微泡所含相应细胞膜蛋白，并进行体外细胞实验和动物实验检测安全性，超声成像检测离体和在体成像能力和稳定性，活体荧光成像检测在体代谢情况，超声分子成像检测仿生微泡在大鼠缺血-再灌注模型和急性肝炎模型中的应用价值。 结果:仿生微泡呈圆形、分布均匀、无明显聚集，细胞膜成功嵌于微泡磷脂膜上。三种仿生微泡的粒径与对照微泡比较差异无统计学意义(均 P>0.05)，而电位低于对照微泡(均 P<0.05)。离体和在体实验证实仿生微泡生物安全性良好。仿生微泡包含相应细胞膜的主要蛋白。超声造影显示仿生微泡稳定性及在体成像效果良好。活体荧光成像显示仿生微泡膜主要经肝脾代谢。MB leu、MB pla在两种疾病模型中均有良好的靶向成像效果。 结论:本研究通过磷脂杂化法成功制备三种仿生微泡超声造影剂，其安全性良好、性能稳定。该方法具有良好的广谱适用性，是一种便于推广应用的仿生微泡制备技术。

目的:建立铁蛋白-普鲁士蓝纳米材料（ferritin-PB NPs）的制备方法，并探究其光热转换性能和对肿瘤细胞的光热杀伤效果。方法:首先通过沉淀法制备普鲁士蓝纳米材料（PB NPs），随后负载于铁蛋白空腔结构中，构建得到ferritin-PB NPs。采用红外光谱和紫外可见分光光谱测试ferritin-PB NPs中的成分组成，采用动态光散射仪和透射电子显微镜测试ferritin-PB NPs的尺寸及形貌，通过热成像仪测试ferritin-PB NPs的光热升温效果及光热稳定性效果，通过激光共聚焦显微镜观察ferritin-PB NPs在HeLa细胞和HepG2细胞中的摄取效果，并通过MTT实验测试ferritin-PB NPs对HeLa细胞的光热杀伤效果。结果:ferritin-PB NPs的形貌为铁蛋白内部包覆PB NPs的复合结构，可响应730 nm激光辐照迅速将光能转化为热能，导致测试溶液温度明显升高。ferritin-PB NPs能迅速被HeLa细胞和HepG2细胞摄取，并且在730 nm光照条件下抑制HeLa细胞的增殖。结论:通过简便的方法制备了ferritin-PB NPs，具有良好的生物相容性和光热细胞毒性效果，后期有望用于体内肿瘤治疗。

目的:制备pH敏感脂质体，避免溶酶体对单磷酸脂质A(monophosphoryl lipid A，MPLA)的降解，提高MPLA的利用率。方法:以DOPE、CHEMS为载体材料，采用薄膜分散法制备pH敏感脂质体。应用动态光散射仪测定脂质体的粒径及Zeta电位，透射电镜观察不同pH值条件下pH敏感脂质体的外观形态，应用流式细胞术评价THP-1、DC2.4细胞对脂质体的吞噬效果，激光共聚焦显微镜下观察脂质体与溶酶体的共定位情况。以乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)为模式抗原，配伍MPLA pH敏感脂质体免疫BALB/c小鼠，ELISA定量检测血清乙型肝炎表面抗体(anti-HBs)水平，ELISPOT检测小鼠脾淋巴细胞IFN-γ、IL-2斑点形成细胞数(spot forming cells, SFCs)。结果:制备的pH敏感脂质体的平均粒径为(90.90±1.13) nm，多分散指数(polydispersity index, PDI)为0.076±0.013，Zeta电位为(－27.900±0.666) mV，随着溶液的pH值减小粒径明显增大，呈现不规则形态，具备显著的pH敏感性。THP-1细胞吞噬pH敏感荧光脂质体的吞噬率为10.40%，DC2.4细胞的吞噬率为12.40%，吞噬荧光脂质体的吞噬率分别为1.09%和0.28%。激光共聚焦显微镜观察到pH敏感荧光脂质体被THP-1细胞吞噬后，存在于细胞质中，而荧光脂质体存在于溶酶体中，MPLA pH敏感脂质体与MPLA脂质体比较可以显著提高小鼠细胞免疫应答水平，MPLA pH敏感脂质体组的IFN-γ和IL-2 SFCs水平均显著高于MPLA脂质体组( P<0.01)和无佐剂组( P<0.001)。 结论:pH敏感脂质体递送系统可以提高MPLA的利用率，使MPLA更好地发挥佐剂作用。