鱼类的许多生理过程都受到烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors)的调节,如神经肌肉信号传递.在海洋环境中,三带双锯鱼(Amphiprion ocellaris)被芋螺(Conus)捕食的过程与烟碱型乙酰胆碱受体密切相关.本研究以三带双锯鱼肌肉、脑、肠道组织的cDNA作为模板,克隆三带双锯鱼烟碱型乙酰胆碱受体不同亚基的基因,在此基础上进行生物信息学分析,同时构建系统进化树.研究结果表明,从三带双锯鱼肌肉组织中克隆得到了烟碱型胆碱能受体α1亚基(cho-linergic receptor nicotinic alpha 1 subunit,chrna1)和烟碱型胆碱能受体 e 亚基(cholinergic receptor nicotinic epsilon subunit,chrne)基因序列;从脑组织中克隆获得烟碱型胆碱能受体α10亚基(cholinergic receptor nicotinic alpha 10 subunit,chrna10)基因序列.将得到的基因序列利用Colabfold软件对其编码蛋白的3D结构进行预测,所得结果与已经解析的烟碱型乙酰胆碱受体的结构高度相似.采用荧光定量PCR技术对chrna1、chrne、chrna10基因在三带双锯鱼肌肉、脑、肠组织中的表达水平进行检测,结果显示,chrna1、chrne基因在肌肉组织中的表达量非常高,在脑组织中的表达量非常低,肠道组织中没有检测到表达.chrna10基因在脑组织中的表达量较低,在肌肉、肠道组织中没有检测到表达.系统进化树结果表明不同物种间乙酰胆碱受体的蛋白序列高度保守,三带双锯鱼与模式生物斑马鱼(Danio rerio)几乎同源.

目的:探讨千层纸素A (oroxylin A，OrA)对结核分枝杆菌感染诱导的巨噬细胞焦亡的作用及分子机制。方法:构建结核分枝杆菌感染J774A.1细胞体外模型；MTT法检测OrA对J774A.1细胞活力的影响；乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)检测试剂盒检测细胞LDH释放水平；Western blot检测细胞焦亡相关蛋白NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3, NLRP3)、GSDMD-N、caspase1-p20、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC)、α7烟碱乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor，α7nAChR)蛋白质表达水平及NF-κB p65的磷酸化。ELISA检测各组细胞IL-1β表达水平；免疫荧光检测α7nAChR蛋白及定位。结果:MTT结果表明OrA在80 μmol/L浓度范围内对J774A.1细胞无细胞毒性；OrA抑制J774A.1细胞LDH的释放，降低细胞焦亡相关蛋白NLRP3、GSDMD-N、caspase1-p20的蛋白质表达水平以及ASC寡聚化，促进α7nAChR蛋白表达，并抑制NF-κB p65磷酸化和IL-1β的释放；加入α7nAChR激动剂PNU282987可降低GSDMD-N并抑制NF-κB p65磷酸化。结论:OrA可能通过调控胆碱能抗炎通路抑制结核分枝杆菌感染诱导的巨噬细胞焦亡。

目的:探讨不同时间迷走神经电刺激（vagus nerve stimulation，VNS）对心脏骤停（cardiac arrest，CA）/心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation，CPR）后大鼠预后的影响。方法:采用改良经皮心外膜电刺激诱导心室颤动方法建立大鼠CA模型。53只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分成假手术组（SHAM， n=5）、CPR组（ n=12）和VNS组（ n=36）。SHAM组不经历CA/CPR；VNS治疗分别设置在CA前30 min（PRE组， n=12）、自主循环恢复（recovery of spontaneous circulation，ROSC）后5 min（POST5组， n=12）以及ROSC后30 min（POST30组， n=12），以统一的刺激参数给予迷走神经电刺激30 min。观察大鼠ROSC后24、48、72 h的神经功能缺损评分和72 h生存率。采用TUNEL染色检测ROSC后72 h的大鼠脑组织皮质区细胞凋亡情况，采用免疫荧光检测α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 subunit-containing nicotinic acetylcholine receptor，α7nAChR）的表达。计量资料组间比较采用单因素方差分析，生存率采用Kaplan-Meier分析和Log-rank检验。以 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:与CPR组（生存率为33.33%）相比，CA前VNS处理（PRE，生存率为75%）和CA后VNS处理（POST5组生存率75%；POST30组生存率83.33%）均可显著提高大鼠CPR后72 h生存率（ P <0.05），降低ROSC后的神经功能缺损评分，降低脑皮质细胞凋亡阳性率，而VNS各处理组间差异无统计学意义（ P>0.05）。VNS处理后脑皮质α7nAChR的表达较CPR组增加。 结论:CA前和ROSC后5 min和30 min给予VNS处理均对CA/CPR大鼠具有脑保护的作用，其机制可能与激活α7nAChR介导的抗炎与抗凋亡效应有关。

噻虫嗪属于第二代新烟碱类杀虫剂，其急性中毒病例国内未见报道。本文回顾1例患者口服噻虫嗪中毒后出现呕吐、全身抽搐、神志不清、氧饱和度下降。经洗胃、呼吸机支持，并使用丙泊酚、咪达唑仑、苯巴比妥钠、丙戊酸钠仍无法控制抽搐。后予盐酸戊乙奎醚和血液灌流联合血液滤过治疗，患者最终康复出院。结合已发表的新烟碱类中毒文献，我们建议急性重度噻虫嗪中毒主要的治疗是洗消和对症支持治疗，盐酸戊乙奎醚和血液灌流联合血液滤过治疗可能改善患者预后。

目的:探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor，α7nAchR)在迷走神经电刺激治疗缺血性脑卒中模型小鼠神经炎症损伤中的作用及机制。方法:90只SPF级小鼠按照随机数字表法分为假手术+迷走神经电刺激组(sham+VNS组)、模型组(永久性大脑中动脉闭塞组pMCAO组)、模型+迷走神经电刺激组(pMCAO+VNS组)、模型+α7nAchR激动剂组(pMCAO+P组)、模型+迷走神经电刺激+α7nAchR拮抗剂(pMCAO+VNS+A组)、模型+迷走神经电刺激+α7nAchR拮抗剂安慰剂组(pMCAO+VNS+AC组)。造模时监测各组小鼠生命体征变化，并于造模成功后7 d、14 d和21 d通过神经系统严重程度评分(neurologic severity score，NSS)和胶布撕脱实验进行神经功能缺损评估；采用免疫荧光法和Western blot法检测小鼠脑组织α7nAchR的表达及其神经细胞定位，ELISA法检测炎性因子TNF-α和IL-6含量。采用Prism 8.0软件进行统计分析，采用单因素方差分析对造模期间生理参数进行统计，使用重复测量方差分析比较神经行为学评分结果， t检验比较蛋白质水平以及荧光强度。 结果:(1)重复测量方差分析结果显示，NSS评分中组别与时间的交互作用不显著( F＝0.91， P>0.05)，各组小鼠的组别主效应( F＝46.68， P<0.05)与时间主效应( F＝25.56， P<0.05)均显著。Tukey's检验结果显示，在第21天的NSS评分中，pMCAO+VNS组和pMCAO+P组小鼠的NSS评分均明显低于pMCAO组( P<0.05)；pMCAO+P组与pMCAO+VNS组比较则差异无统计学意义( P>0.05)；pMCAO+VNS+A组小鼠的NSS评分均高于pMCAO+VNS组( P<0.05)，同时又明显低于pMCAO+VNS+AC组( P<0.05)。胶布撕脱实验中，小鼠的胶布接触时间和撕脱时间中组别与时间的交互作用不显著( F＝0.67，0.71，均 P>0.05)，各组小鼠的组别主效应( F＝30.12，42.46，均 P<0.05)与时间主效应( F＝52.18，47.34，均 P<0.05)均显著。Tukey's检验结果显示，在第21天的胶布撕脱实验中，pMCAO+VNS组小鼠的胶布接触时间和撕脱时间均明显短于pMCAO组(均 P<0.05)；pMCAO+P组与pMCAO+VNS组比较则差异没有统计学意义(均 P>0.05)。(2)免疫印迹实验表明，与pMCAO组(0.36±0.01)相比，pMCAO+VNS组和pMCAO+P组α7nAchR表达均增加[(0.83±0.03)、(0.67±0.02)， t＝13.53，16.08，均 P<0.01]，pMCAO+VNS+A组(0.37±0.01)较pMCAO+VNS组较显著降低( t＝12.88， P<0.01)。免疫荧光结果也显示，与pMCAO组(3.75±0.19)相比，pMCAO+VNS组和pMCAO+P组小鼠脑组织α7nAchR蛋白表达均增加[(8.96±0.48)、(8.17±0.64)， t＝10.04，6.67，均 P<0.05]。(3)ELISA结果表明，与pMCAO组比较，pMCAO+VNS组及pMCAO+P组小鼠血清和组织上清液中TNF-α水平和IL-6水平均明显降低于pMCAO组( t＝23.28，15.30，12.26，11.08，均 P<0.05)。pMCAO+VNS+A组小鼠血清和组织上清液中TNF-α水平以及血清和组织上清液中IL-6水平均高于pMCAO+VNS组( t＝12.70，11.01，11.69，17.37；均 P<0.05)和pMCAO+VNS+AC组( t＝12.29，11.07，14.61，29.27；均 P<0.05)。 结论:VNS能够减少pMACO小鼠脑组织炎症反应，改善神经运动评分，这一保护作用可能与VNS诱导的α7nAchR在缺血性脑卒中缺血半影区神经细胞中表达有关。

目的:评价海马含β4亚基的烟碱型乙酰胆碱受体(Chrnb4)在老龄小鼠术后谵妄中的作用。方法:SPF级雄性C56BL/6J小鼠48只，18月龄，体质量29～35 g。采用随机数字表法分为6组：胫骨骨折手术组(TF组， n＝6)、假手术组(Sham组， n＝6)、胫骨骨折手术＋阿地芬宁组(TA组， n＝9)、胫骨骨折手术＋对照溶剂组(TV组， n＝9)、假手术＋阿地芬宁组(SA组， n＝9)和假手术＋对照溶剂组(SV组， n＝9)。采用七氟烷麻醉下胫骨骨折手术制备术后谵妄模型。假手术为仅进行麻醉和皮肤切口并缝合。TA组、TV组、SA组、SV组于术前5 d置入脑室微量给药套管，每组再随机选取3只小鼠，置入海马CA1区微丝阵列电极。于术后30 min时，TA组和SA组脑室输注阿地芬宁(62.5 nmol/μl)2 μl，TV组和SV组给予对照溶剂2 μl，间断24 h给药，连续给予7 d。TF组及Sham组于术后24 h时，采用实时定量PCR法检测海马组织Chrnb4 mRNA表达水平。TA组、TV组、SA组、SV组分别于术后第7、8天采用旷场实验及O迷宫实验评价冲动样行为；行为学实验结束后，采用免疫荧光染色法检测海马CA1区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及囊泡谷氨酸转运蛋白1(Vglut1)的表达，旷场实验期间记录小鼠海马CA1区局部场电位。 结果:与Sham组相比，TF组海马Chrnb4 mRNA表达上调( P<0.05)；与TV组相比，TA组和SV组旷场实验中心路程百分比和O迷宫开放象限停留时间百分比降低，CA1区场电位β波功率降低，海马CA1区GFAP和Vglut1表达下调，GFAP ＋-Vglut1 ＋共染面积减少( P<0.05)。SA与SV组各指标比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:海马Chrnb4可能参与了老龄小鼠术后谵妄的发生机制，该过程可能与抑制神经元兴奋性毒性有关。

急性肾损伤（acute kidney injury，AKI）是威胁人类健康的主要疾病之一，其进一步发展可导致终末期肾病。胆碱能抗炎通路（cholinergic anti-inflammatory pathway，CAP）在多器官炎症中的保护作用已有研究，迷走神经可通过CAP激活胆碱能受体进而抑制炎性因子的释放。CAP主要通过α7烟碱型乙酰胆碱受体发挥作用，但是有关CAP在AKI中的保护作用，尤其是CAP治疗在AKI进展中的应用和临床指导意义研究尚少。因此，本文就CAP在AKI中的应用作一简要综述，旨在为AKI的发病机制研究和诊疗提供新的思路。

敌敌畏中毒可导致机体出现毒蕈碱（M）样症状、烟碱（N）样症状和中枢神经系统表现。当重度中毒合并难治性休克时，死亡率超过60%。目前，体外膜肺氧合（ECMO）技术用于中毒的研究越来越多，但ECMO用于救治敌敌畏中毒导致的难治性低血压目前尚无报道。我们对3例静脉-动脉体外膜肺氧合（VA-ECMO）救治急性重度敌敌畏中毒导致难治性休克的成功案例进行分析，探索VA-ECMO在重度敌敌畏中毒患者中的有效性。

目的:评价托烷司琼对缺氧复氧心肌细胞焦亡的影响及其与α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)的关系。方法:正常培养的H9C2心肌细胞，采用随机数字表法分成4组( n＝6)：对照组(C组)、缺氧复氧组(H/R组)、托烷司琼+缺氧复氧组(Tro+H/R组)和α7nAchR拮抗剂MLA+托烷司琼+缺氧复氧组(MLA+Tro+H/R组)。除C组外，其余3组均采用缺氧12 h，复氧6 h的方法制备心肌细胞缺氧复氧模型。Tro+H/R组缺氧前1 h时加入托烷司琼，终浓度10 nmol/L；MLA+Tro+H/R组缺氧前2 h时加入MLA，1 h后加入托烷司琼，终浓度均为10 nmol/L。于复氧6 h时，采用荧光免疫双染caspase-1-AlexaFluor 488/DAPI法确定心肌细胞焦亡率，ELISA法检测上清液IL-1β和IL-18浓度，2，4二硝基苯肼显色法检测上清液LDH活性，Western blot法检测心肌细胞α7nAchR、NOD样受体蛋白-3(NLRP3)和caspase-1表达。 结果:与C组比较，H/R组细胞焦亡率、上清液LDH活性、IL-1β和IL-18浓度升高，NLRP3和caspase-1表达上调，α7nAchR表达下调( P<0.05)；与H/R组比较，Tro+H/R组细胞焦亡率、上清液LDH活性、IL-1β和IL-18浓度降低，NLRP3和caspase-1表达下调，α7nAchR表达上调( P<0.05)；与Tro+H/R组比较，MLA+Tro+H/R组细胞焦亡率、上清液LDH活性、IL-1β和IL-18浓度升高，NLRP3和caspase-1表达上调，α7nAchR表达下调( P<0.05)。 结论:α7nAchR参与了托烷司琼抑制缺氧复氧心肌细胞焦亡的过程。

目的:观察烟碱型胆碱受体α5（CHRNA5）在前列腺癌中的表达及对前列腺癌DU145细胞恶性转移的影响。方法:前列腺癌组织及癌旁正常前列腺组织取自2022年1月至2023年10月于天津医科大学总医院接受手术治疗的15例前列腺腺癌患者。免疫组织化学实验检测前列腺癌癌组织以及癌旁正常前列腺组织CHRNA5的表达水平；将前列腺癌细胞系DU145细胞分为3个实验组：si CHRNA5组、si NC组以及Yes相关蛋白1/PDZ结合域的转录共刺激因子（YAP1/TAZ）抑制剂组。通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测DU145细胞的增殖能力；通过Transwell实验分析DU145细胞的侵袭能力；通过细胞划痕实验分析DU145细胞的迁移能力；通过流式细胞术分析DU145细胞的凋亡率；通过蛋白免疫印迹检测YAP1/TAZ信号通路以及CHRNA5蛋白的表达水平。两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:前列腺癌组织CHRNA5的表达水平高于癌旁正常前列腺组织（0.28±0.07比0.89±0.08， t＝12.178， P<0.05）。si CHRNA5以及YAP1/TAZ抑制剂组的DU145细胞增殖能力低于si NC组（1.72±0.06比0.83±0.01比0.81±0.05， F＝11.369， P<0.05）；si CHRNA5以及YAP1/TAZ抑制剂组的DU145细胞侵袭数低于si NC组（139.19±10.76比83.89±9.36比79.93±8.25， F＝21.328， P<0.05）；si CHRNA5以及YAP1/TAZ抑制剂组的DU145细胞迁移率低于si NC组[（88.65±6.06）%比（55.86±5.33）%比（56.23±3.88）%， F＝20.162， P<0.05]；si CHRNA5以及YAP1/TAZ抑制剂组的DU145细胞凋亡率高于si NC组[（3.16±0.36）%比（12.62±0.25）%比（13.26±0.17）%， F＝13.179， P<0.05]；si CHRNA5以及YAP1/TAZ抑制剂组的DU145细胞YAP1、TAZ蛋白水平低于si NC组（0.81±0.12比0.32±0.15比0.28±0.09， F＝15.782， P<0.05；0.79±0.12比0.18±0.09比0.22±0.06， F＝17.336， P<0.05）；pcDNA3.1 CHRNA5组DU145细胞的YAP1、TAZ蛋白表达水平高于pcDNA3.1 NC组（0.32±0.06比0.78±0.03， t＝11.569， P<0.05；0.26±0.07比0.72±0.03， t＝16.238， P<0.05）。 结论:CHRNA5在前列腺癌组织中高表达，CHRNA5能够通过激活YAP1/TAZ通路促进前列腺癌DU145细胞的增殖、迁移以及侵袭。