文章总结了我在2023年第十六届亚太玻璃体视网膜学会"陈之昭博士全球眼研究合作论坛"中的发言、作为全球眼遗传联盟(GEGC)分会组织、共八位卓著演讲者参加.在科学研究中,合作和沟通很重要.研究合作通常源于科学会议,例如:1985年中山眼科中心主办的第一届中国国际眼科会议、多次举办的GEGC会议、国际玻璃体视网膜淋巴瘤(vitreo retinal lymphoma,VRL)会议等.VRL 是我参与并证实全球合作卓有成效的研究课题之一,VRL是一种致死率很高的眼病,及时诊断并治疗可改善患者预后.我们在1995年首次报告VRL患者玻璃体中IL-10增高,且IL-10/IL-6比值大于1.这至今仍能助诊.MYD88突变亦可协助诊断B-细胞VRL.当前,新的体液分子特征将作为一种VRL诊断和预后评估有前景的辅助手段.与其他罕见疾病一样,诊治和治愈VRL需要全球合作.我很荣幸参加此论坛会,借此感谢我的导师、同事、学生、国内外的合作者和家人.

目的:观察糖尿病视网膜病变（DR）患者血浆外泌体、微囊泡（MV）、血浆和玻璃体中炎症相关蛋白S100A8的表达，并于糖尿病大鼠模型中进行验证，初步探讨其在DR发生和发展中的作用。方法:病例对照研究和基础研究。2018年9月至2019年12月于天津医科大学眼科医院就诊的2型糖尿病患者、住院行玻璃体切割手术患者以及同期健康体检者共计73名纳入研究。其中，采集血浆32名，收集玻璃体液41名，并据此分为血浆样本研究队列和玻璃体样本研究队列。将受试者分为未发生眼底改变的单纯糖尿病组（DM组）、非增生型DR组（NPDR组）和增生型DR组（PDR组）；健康体检者作为正常对照组（NC组）。玻璃体样本研究队列中对照组为黄斑前膜或黄斑裂孔患者玻璃体液。超速离心法分离血浆外泌体和MV。采用透射电子显微镜、纳米粒度分析仪、蛋白质免疫印迹法（Western blot）鉴定外泌体和MV。采用酶联免疫吸附试验法测定S100A8质量浓度。18只健康雄性Brown Norway大鼠经随机数字表法分为正常对照组和糖尿病组，每只9只。糖尿病组大鼠经链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型。建模后5个月采用免疫组织化学染色、Western blot检测正常对照组、糖尿病组大鼠视网膜S100A8的表达情况。两组间计量数据比较采用 t检验；多组计量数据比较采用单因素方差分析。 结果:血浆中成功分离得到具有各自特征的外泌体和MV。PDR组患者血浆外泌体和玻璃体S100A8浓度均高于NPDR组、DM组、NC组，差异有统计学意义（ P=0.039、0.020、0.002、0.002， P<0.000、<0.000 ）。血浆样本队列研究4个组受试者血浆、血浆MV的S100A8质量浓度总体比较，差异无统计学意义（ F=0.283、0.015 ， P=0.836、0.996 ）。免疫组织化学染色结果显示，糖尿病组大鼠视网膜神经节细胞、双极细胞、视锥视杆细胞和血管内皮细胞均表达S100A8蛋白。与正常对照组大鼠比较，糖尿病组大鼠视网膜组织中S100A8表达水平升高，差异有统计学意义（ t=8.028， P=0.001 ）。 结论:循环外泌体中S100A8蛋白水平随2型糖尿病患者DR严重程度明显增高。S100A8可能是DR炎症环境的影响因素，是潜在的抗炎治疗靶点。

目的:研究2型糖尿病患者玻璃体液中褪黑素水平与糖尿病性视网膜病变(DR)的相关性。方法:前瞻性队列研究。随机纳入郑州大学第一附属医院2021年11月至2023年7月拟行玻璃体切除手术者84例(84只眼)，其中根据疾病种类不同将糖尿病性视网膜病变43例(43只眼)纳入DR组，原发性孔源性视网膜脱离(RRD)41例(41只眼)纳入RRD组，于术中抽取患者玻璃体液0.5～1.0 ml，应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患者玻璃体液中褪黑素水平。收集DR组患者的空腹血糖、糖化血红蛋白、糖尿病性视网膜病变分期及糖尿病病程，并分析其与玻璃体液褪黑素水平的相关性。采用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)分析各组患者的睡眠质量，并采用Spearman相关分析法分析各组玻璃体液褪黑素水平与睡眠相关指标的相关性。结果:DR组的玻璃体液褪黑素水平增高，其浓度为(70.60±23.56)pg/ml，高于RRD组的(42.94±21.63)pg/ml( t＝5.60， P<0.001)。DR组患者空腹血糖、糖化血红蛋白、糖尿病性视网膜病变分期及糖尿病病程与玻璃体液内褪黑素水平无明显相关性( r＝0.01、－0.07、0.06、0.04， P＝0.963、0.705、0.712、0.806)。DR组33例的睡眠质量、睡眠效率、睡眠障碍及PSQI总分与其玻璃体液褪黑素水平呈现负相关( r＝－0.62、－0.51、－0.40、－0.50; P<0.001、0.003、0.021、0.003)，而入睡时间、睡眠时间及日间功能障碍与其玻璃体液褪黑素水平无相关性(均 P>0.05)。RRD组34例的日间功能障碍与其玻璃体液褪黑素水平具有正相关( r＝0.36， P＝0.038)，余均无相关性(均 P>0.05)。 结论:糖尿病性视网膜病变患者玻璃体液中褪黑素水平升高与DR的发生或发展具有相关性，睡眠较差的DR患者玻璃体液内褪黑素水平较低。

目的:对比观察成人和儿童眼犬弓蛔虫病（OT）的临床表现特点，初步探讨眼内液检测在OT早期诊断中的作用。方法:回顾性研究。2018年1月至2019年10月于首都医科大学附属北京朝阳医院眼科临床及实验室检查确诊的OT患者60例60只眼纳入研究。采集患者病史信息并行裂隙灯显微镜、间接检眼镜检查以及房水或玻璃体液犬弓蛔虫抗体检测。行视力检查58例；未行视力检查2例，均为儿童患者。视力检查采用新版标准对数视力表进行，统计时换算为最小分辨角对数（logMAR）视力。根据年龄将患者分为成人组、儿童组，分别为12例12只眼、48例48只眼。对比观察两组患者临床特点及诊疗要点。符合正态分布的计量资料组间比较行独立样本 t检验；偏态分布的计量资料组间比较行Mann-Whitney秩和检验。定性资料比较行 χ2检验。 结果:成人组、儿童组患者中，有明确犬猫接触史者分别为7（58.3%，7/12）、34（70.8%，34/48 ）例，成人组明显低于儿童组，但差异无统计学意义（ χ2=0.236， P=0.627）。首诊时，成人组、儿童组患者自述视物模糊分别为10（83.3%，10/12）、22例（45.8%，22/48 ）。成人组、儿童组患眼logMAR视力≥1.85者分别为3（25.0%，3/12）、20（43.5%，20/46）只眼；小于0.3者分别为8（66.7%，8/12）、22（45.8%，22/46）只眼。成人组患眼视力优于儿童组，差异有统计学意义（ Z=2.162， P=0.031）。两组患眼不同临床分型构成比比较，差异无统计学意义（ χ2=1.908， P=0.385）。成人组、儿童组患眼眼前节炎症发生率分别为25.0%（3/12）、56.3%（27/48 ）；两者比较，差异无统计学意义（ χ2=3.750， P=0.053 ）。成人组、儿童组患眼玻璃体液抗体浓度均大于房水。玻璃体液、房水抗体浓度，儿童组分别为36.51（22.58）、19.94（21.78）U/ml；成人组分别为45.95（56.44）、32.20（38.64）U/ml。儿童组患眼玻璃体液、房水抗体浓度比较，差异有统计学意义（ Z=-1.984， P=0.047 ）。 结论:与儿童OT患者比较，成人OT患者初诊时视力更好，玻璃体腔炎症或增生轻微；眼内液弓蛔虫相关的抗体检测有助于早期明确诊断。

目的：:检测血管活性肠肽受体2（ Vipr2）敲除小鼠多巴胺（DA）等神经递质含量和视网膜电生理，明确 Vipr2敲除对视网膜功能的影响。 方法：:实验研究。利用RT-PCR检测血管活性肠肽（ Vip）、 Vipr2在4周龄雄性C57BL/6J小鼠眼球组织中的表达水平。通过CRISPR-Cas9基因编辑技术构建 Vipr2敲除（ Vipr2-KO）小鼠，然后在4周龄时检测 Vipr2-KO和 Vipr2野生型（ Vipr2-WT）小鼠视网膜中DA等神经递质含量及视网膜电生理功能。 Vipr2-KO小鼠与 Vipr2-WT小鼠DA等神经递质含量比较采用独立样本 t检验，而2种小鼠视网膜电生理数据比较采用双因素重复测量方差分析。 结果：:Vip和 Vipr2 mRNA在小鼠视网膜、脉络膜+视网膜色素细胞、角膜和巩膜中均有表达；在虹膜和晶状体中 Vipr2呈低表达，未检测到 Vip表达。与 Vipr2-WT小鼠相比， Vipr2-KO小鼠表现为近视（ t=2.51， P=0.017），视网膜DA、3, 4-二羟基苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）含量均明显升高（ t=3.42， P=0.001； t=2.15， P=0.037； t=3.27， P=0.002），DOPAC/DA比值无变化；而玻璃体液中DA、DOPAC、DOPAC/DA、HVA、去甲肾上腺素含量差异均无统计学意义。视网膜和玻璃体液中天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、牛磺酸和γ氨基丁酸含量在 Vipr2-KO小鼠与 Vipr2-WT小鼠之间差异均无统计学意义。在暗适应不同光刺激强度下（-3.699、-2.201、-0.699、0.301、0.799 log cd·s/m 2）， Vipr2-KO小鼠相比 Vipr2-WT小鼠，b波振幅明显增加（ F=8.65， P=0.015）。 结论：:Vipr2敲除可引起4周龄小鼠屈光向近视发展，影响视网膜中DA、DOPAC、HVA合成代谢，并引起视网膜电生理功能异常。提示 Vipr2敲除可能通过影响视网膜功能参与近视形成，但具体作用机制有待进一步研究。

目的:系统评价新生血管性青光眼(NVG)患者眼内液中细胞因子的特征。方法:检索PubMed、Embase、Web of Science、中国知网、万方数据和维普数据库中2022年6月以前发表的NVG细胞因子水平检测文献，2名研究者独立遵循纳入和排除标准完成文献检索、纳入和数据提取。采用Stata 16.0软件进行定量分析，使用 I2检验评估研究异质性，并使用相应的效应模型进行效应合并，完成meta分析。 结果:共筛选出24篇文献，包括NVG组771例患者和年龄相关性白内障组(对照组)727例患者。房水中血管内皮生长因子(VEGF)质量浓度在2个组间合并效应值标准均数差( SMD)为8.79，95%可信区间( CI)：6.43～11.14；白细胞介素(IL)-6在2个组间 SMD为12.50，95% CI：9.41～15.58。NVG组患者房水和玻璃体液中VEGF、IL-6质量浓度显著高于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。NVG组房水中色素上皮衍生因子(PEDF)质量浓度较对照组下降( SMD：－3.03，95% CI：－5.50～－0.55)，差异有统计学意义( P<0.05)。NVG组房水中IL-8( SMD：3.99，95% CI：1.14～6.85)、红细胞生成素(EPO)( SMD：9.62，95% CI：0.44～18.79)、胎盘生长因子(PIGF)( SMD：2.62，95% CI：1.38～3.86)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)( SMD：3.37，95% CI：1.87～4.87)质量浓度均显著高于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；2个组间房水中IL-1β质量浓度比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:NVG患者房水中VEGF、IL-6、IL-8、EPO、PIGF、TNF-α质量浓度明显升高，PEDF质量浓度明显降低，这些生物标志物可以作为NVG潜在的治疗靶点或诊断指标。

目的:建立一种测定兔眼组织中加替沙星浓度的方法，并比较加替沙星眼用凝胶兔眼单次和多次点眼后在眼组织及血浆中的药代动力学特征。方法:取94只健康新西兰兔。任意选取10只新西兰兔不给予任何药物用于空白组织获取，将剩余84只按照随机数字表法随机分成单次给药组36只和多次给药组48只，雌雄各半，均取左眼为实验眼。单次给药组左眼给予1滴加替沙星眼用凝胶，分别于点眼后0.5、1、3、5、7、10 h收集泪液后进行心脏取血并处死，分别取房水、结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体、晶状体、玻璃体、视网膜和脉络膜；多次给药组左眼每次给予1滴加替沙星眼用凝胶，每天3次，分别于连续给药第4和第6天首次给药后0.5 h，第7天首次给药后0.5、1、3、5、7、10 h进行心脏取血和眼组织收集。采用甲醇沉淀蛋白法预处理各样本，采用高效液相色谱串联质谱法测定并计算实验兔血浆及眼组织中加替沙星的达峰浓度(C max)、达峰时间(T max)、曲线下面积(AUC)等药代动力学参数，流动相采用甲醇-0.1%乙酸水溶液(体积比＝70∶30)，采用正离子多反应检测模式，以环丙沙星为内标物，并参照《中国药典》(2020年版)9012生物样品定量分析方法验证指导原则对方法的选择性、标准曲线和定量下限、准确度和精密度、提取回收率和基质效应、稳定性进行验证。结合加替沙星对眼部常见感染菌的最小抑菌浓度(MIC 90)，计算各组织和血浆C max/MIC 90和AUC/MIC 90值。 结果:加替沙星在各眼组织和血浆中线性关系良好；角膜组织中的日间准确度为－1.5%～6.0%，日间精密度≤15%；角膜组织中的提取回收率为92.0%～94.8%，经内标归一化计算得到的低、中、高浓度的基质效应精密度均不大于3.3%，单次给药后加替沙星在眼前节和后节组织均有较高的药物浓度分布，AUC 0－t从高到低分别为泪液、角膜、结膜、虹膜－睫状体、巩膜、房水、脉络膜、视网膜、晶状体和玻璃体，C max分别为94.90 μg/g、7.34 μg/g、3.65 μg/g、1.81 μg/g、1.75 μg/g、1.31 μg/ml、0.86 μg/g、0.53 μg/g、0.13 μg/g、0.07 μg/ml，除晶状体、脉络膜和玻璃体液中的T max为0.5 h，其余各组织T max均为1 h。多次给药第4、6、7天的0.5 h各眼部组组织中加替沙星浓度比较，差异无统计学意义( P>0.05)，且角膜、结膜和巩膜中AUC 0－t约为单次给药的2.04、2.12和2.32倍。单、多次给药后进入体循环的加替沙星浓度均低于25.00 ng/ml。对于金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，加替沙星眼用凝胶连续用药后在眼前节结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体、房水和脉络膜中的药代动力学/药效学均可满足C max/MIC 90≥10且AUC/MIC 90≥30。 结论:成功构建快速灵敏的眼组织加替沙星浓度测量方法。加替沙星眼用凝胶以每天3次点眼连续用药3 d后眼组织可达到稳态浓度，且比单次给药在眼组织浓度升高。局部使用加替沙星眼用凝胶可实现眼部结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体常见感染细菌的有效治疗。

目的:探讨糖尿病视网膜病变（DR）患者外周血和玻璃体液中分泌颗粒蛋白Ⅲ（SCG3）的表达情况。方法:横断面研究。收集2018年5至12月于天津医科大学眼科医院玻璃体视网膜科接受玻璃体切除术的患者77例（77只眼），年龄（60.75±11.34）岁，男性41例，女性36例。根据血糖水平、糖尿病病史和眼底表现分为DR组和非糖尿病组，进一步按血脂水平和体重指数（BMI）分为血脂偏高和血脂正常、BMI偏高和BMI正常者分别进行观察。所有患者进行眼部检查，根据身高和体重计算BMI，取外周血检测血脂水平。患者于玻璃体切除术中取玻璃体液，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定所有患者玻璃体液标本中及外周血血浆中的SCG3。应用Wilcoxon秩和检验对SCG3浓度进行统计学比较。结果:DR组患者43例，其中脂血偏高25例，正常18例；BMI偏高22例，正常21例。非糖尿病组34例，其中脂血偏高13例，正常21例；BMI偏高17例，正常17例。DR组SCG3［6.02（4.34，11.76）ng/ml］高于非糖尿病组［4.30（3.20，10.78）ng/ml］（ Z=-2.339， P<0.01）。DR组中血脂偏高者的SCG3［7.94（5.33，13.51）ng/ml］高于非糖尿病组中血脂者正常者［4.04（3.12，7.77）ng/ml］（ Z=-3.473， P<0.01）。DR组中血脂偏高者的SCG3高于血脂者正常者［4.45（3.71，9.14）ng/ml］（ Z=-2.511， P<0.01）。DR组中BMI较高者的SCG3［7.12（4.56，13.12）ng/ml］高于非糖尿病组BMI正常者［3.53（3.16，4.38）ng/ml］（ Z=-3.767， P<0.01）。DR组中BMI正常者的SCG3［5.72（4.10，11.60）ng/ml］高于非糖尿病组BMI正常者（ Z=-2.862， P<0.01）。血浆中的SCG3极少或无法检测到。 结论:DR患者玻璃体液中SCG3表达上调，但SCG3几乎很难在正常的血管系统中被检测到。 （中华眼科杂志，2020，56：933-937）

目的:观察孔源性视网膜脱离（RRD）伴格子样变性（LD）患眼玻璃体液中相关细胞因子表达水平。方法:临床观察性研究。2022年5月至2023年2月于东南大学附属中大医院及南京医科大学附属眼科医院检查确诊且首次行玻璃体切割手术（PPV）治疗的RRD伴或不伴LD患者43例43只眼纳入研究。将患者分为RRD伴LD组（LD组）、RRD不伴LD组（Non-LD组），分别为27例27只眼、16例16只眼。选取同期特发性黄斑裂孔患者6例6只眼、特发性视网膜前膜患者4例4只眼作为对照组。PPV开始未开放眼内灌注前，切除并抽吸未稀释的中央部玻璃体液0.5 ml。采用Luminex高通量多因子检测技术定量检测玻璃体液中单核细胞趋化蛋白-1 （MCP-1）、巨噬细胞炎症蛋白（MIP）-1α、MIP-1β、干扰素-γ诱导蛋白-10 （IP-10）、白细胞介素（IL）-6、IL-8、巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）、肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ、细胞间黏附分子（ICAM）-1、血管细胞黏附分子（VCAM）-1、血小板内皮细胞黏附分子（PECAM）-1、胎盘生长因子（PLGF）、血管内皮生长因子（VEGF）浓度。组间细胞因子表达水平比较采用Kruskal-Wallis秩和检验，DSCF法校正事后两两比较的显著性水平。结果:LD组、Non-LD组、对照组患眼IL-6 （ H=14.400）、IL-8 （ H=13.610）、MCP-1（ H=12.050）、VEGF （ H=9.920）、MIP-1α （ H=6.620）、IP-10 （ H=7.780）、MIF （ H=12.920）、PECAM-1（ H=9.990）、ICAM-1 （ H=8.070）、PLGF （ H=16.850）浓度比较，差异有统计学意义（ P<0.05 ）。组间两两比较，LD组玻璃体液中IL-6、IL-8、PLGF浓度高于Non-LD组，差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:RRD伴LD患眼玻璃体液中IL-6、IL-8、PLGF表达水平升高。

目的:观察角膜缝线相关感染性眼内炎患眼的临床特征及预后情况。方法:回顾性病例分析。2020年1月至2021年12月于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科检查确诊的角膜缝线相关感染性眼内炎患者5例5只眼纳入研究。其中，男性3例，女性2例；均为单眼发病；年龄（30.80±21.98）岁。晶状体相关手术角膜切口缝线4只眼；穿透性角膜移植缝线1只眼。角膜缝线眼表存留时间（20.00±7.41）个月。5只眼中，因眼红、眼痛于外院给予角膜缝线拆除1只眼；其余4只眼中，缝线松动3只眼。给予患眼感染性眼内炎标准治疗，包括全身及局部抗感染治疗；角膜缝线拆除、眼内注药、玻璃体切割手术（PPV）治疗。PPV中根据情况决定是否给予硅油填充。治疗后随访时间（11.00±7.38）个月。观察分析手术前后患眼最佳矫正视力（BCVA）、B型超声及微生物培养结果等资料。结果:患眼角膜可见围绕缝线的浸润、溃疡灶或脓肿。B型超声检查可见患眼全段玻璃体混浊、视网膜前机化条索、球壁水肿。玻璃体液培养结果阳性3只眼，分别为草绿色链球菌、人葡萄球菌人亚种、表皮葡萄球菌。治疗后所有患眼眼内感染均成功控制，无眼内容物剜除或眼球摘除者。治疗前，患眼BCVA为无光感~数指；治疗后，BCVA> 0.3者2只眼。结论:角膜缝线相关感染性眼内炎患眼角膜均可见围绕缝线的浸润、溃疡灶或脓肿，其与缝线长期存留于眼部有关；大部分患眼就诊时存在缝线松脱；及时治疗可有效控制感染，部分患眼视力预后良好。