目的 探讨新型量子点荧光免疫层析法测定血清淀粉样蛋白A(SAA)的应用.方法 采用双抗夹心法结合量子点荧光免疫层析技术制备以二硝基苯酚(DNP)-牛血清白蛋白(BSA)系统为质控线的SAA检测试剂盒.通过鸡IgY-羊抗鸡IgY系统作为对照评价了 DNP-BSA系统作为质控线的可行性,并通过优化量子点微球与抗体的偶联条件,进一步提高试剂盒的性能,并对试剂盒的空白限、检出限、线性范围、精密度、准确度、特异度、稳定性,以及临床实际样本测定等方面进行了评价.结果 以DNP-BSA系统作为质控线的SAA试剂盒受干扰成分浓度的影响小,稳定性高,热稳定性好.量子点微球与SAA抗体偶联比例为100 μg/mg,偶联反应液浓度为25 mmol/L 3-吗啉丙磺酸pH 7.4,与DNP-BSA偶联比例为100 μg/mg,偶联反应液浓度为25 mmol/L吗啉乙磺酸pH 6.0时偶联效果最佳.试剂盒最低检出限为0.5 mg/L;线性范围为1～200 mg/L,R2≥0.99;批内精密度变异系数(CV％)≤5.31％,批间精密度CV％≤15％;在低、高浓度的回收率分别为101.42％、98.83％;在血红蛋白浓度≤5 g/L,胆红素浓度≤0.15 g/L,胆固醇浓度≤15 g/L,甘油三酯浓度10 g/L时,SAA的检测结果无干扰;试剂盒在50 ℃放置21 d,稳定性良好;试剂盒与Roche的SAA电化学发光试剂盒同步检测67例样本结果具有高度一致性.结论 研制的SAA检测试剂盒灵敏度、线性、精密度、准确度、特异度及加速稳定性都满足试剂盒的要求,与鸡IgY-羊抗鸡IgY系统相比DNP-BSA系统作为质控线独立性好,测定临床样本准确度和热稳定性更佳.

目的 对胶乳增强免疫比浊神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)试剂盒进行性能验证.方法 按照CNAS-GL037:2019《临床化学定量检验程序性能验证指南》、WS/T492-2016《临床检测定量测定项目精密度与正确度性能验证》并结合试验工作,重新设计了检验方法,在贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析对北京九强金斯尔NSE胶乳增强免疫比浊法试剂盒的正确度、精密度、线性范围、可报告范围和生物参考区间等性能进行验证和评估,并与对应罗氏电化学发光法试剂盒进行方法学比对.测试结果与厂家所给出的产品分析性能以及美国国家卫生委员会临床检测中心(National Center for Clinical Laboratories,NCCL)的相关指标进行了对比.结果 5个水平的正确度偏倚分别为1.74％、-1.42％、-0.88％、-3.09％和-0.90％;2个水平的批内及批间精密度的变异系数(coefficient of variation,CV)分别为1.85％和0.88％(判断标准CV<7.5％),4.99％和3.34％(判断标准CV<10％);线性范围(3.5～148.1ng/mL)验证回归系数a值为0.9894,R2=0.9978;最大稀释倍数为8倍,临床可报告上限为1165.2ng/mL;厂家提供的生物参考区间为0～16.3ng/L,符合率R为100％,各性能均通过验证.此外,与罗氏电化学发光试剂盒进行方法学比对,其相关性分析结果为:两种方法的相关性(R2=0.989)、一致性(CCC=0.984)均较好,在临床判定效果上同Roche的电化学发光试剂盒相比,免疫增强比浊方法阳性符合率为95.74％,阴性符合率为96.23％,两者测定值接近,相关系数达0.9894.结论 基于全自动生化分析平台测定的NSE胶乳增强免疫比浊试剂盒,各性能均可以较好地满足临床使用要求,且与电化学发光法检测结果一致性较好,有望进一步推进NSE国产体外诊断试剂盒的临床应用.

目的:探讨肠道菌群、叶酸及两者的关联性对首发未用药精神分裂症（SCZ）患者精神症状的影响。方法:选取2018年3月至2019年12月郑州大学第一附属医院首发未用药SCZ患者100例（SCZ组）和健康对照者90名（健康对照组），采用电化学发光法测定血清中叶酸水平，采用阳性和阴性症状量表（PANSS）评定SCZ组精神症状，采用认知功能成套测验（MCCB）评估认知功能。采集粪便样本提取细菌DNA，进行16S rRNA测序。探索SCZ患者肠道菌群和叶酸对精神症状和认知功能的影响。结果:SCZ组纳入男41例，女59例，年龄（22.6±8.2）岁；健康对照组纳入男32名，女58名，年龄（23.0±3.0）岁。SCZ组血清叶酸水平低于健康对照组［ M（ Q1， Q3）］［6.92（4.98，8.49）μg/L比8.93（7.13，13.37）μg/L］（ P<0.001）。SCZ组肠道菌群中双歧杆菌属［0.005（0.003，0.013）比0.014（0.004，0.031）］和拟杆菌属相对丰度［0.015（0.001，0.091）比0.083（0.029，0.193）］低于健康对照组（均 P<0.001）。与健康对照组相比，SCZ组在认知功能的七大维度的评分下降明显（均 P<0.05）。SCZ组血清叶酸水平与PANSS中阴性症状分呈负相关（ r=-0.378， P<0.001），与信息处理速度（ r=0.310， P=0.011）呈正相关。SCZ组双歧杆菌属相对丰度与血清叶酸水平呈正相关（ r=0.374， P<0.001），与一般精神病理分呈负相关（ r=-0.326， P=0.001），与信息处理速度呈正相关（ r=0.330， P=0.003）。多重线性回归分析结果显示SCZ患者叶酸×双歧杆菌属交互项与一般精神病理分相关（ F=8.655， P＝0.007），回归系数为-29.240。叶酸×双歧杆菌交互项与认知功能无相关性（均 P>0.05）。 结论:首发未用药SCZ患者中血清叶酸水平和双歧杆菌相对丰度下降，并且与其精神症状相关，提示菌群相对丰度和叶酸水平可作为精神症状的潜在客观评估指标。

目的:调查济南市6～18岁健康儿童呼出气一氧化氮正常值范围。方法:选取2017年10月11日至26日济南市6～18岁在校健康儿童，进行问卷调查、体格检查及呼出气一氧化氮检测。采用电化学原理的检测方法分别测定50 mL/s流速时口呼出气一氧化氮(FeNO 50)、200 mL/s流速时口呼出气一氧化氮(FeNO 200)、肺泡一氧化氮(CaNO)及10 mL/s流速时鼻呼出气一氧化氮(FnNO 10)水平。分析FeNO 50、FeNO 200、CaNO和FnNO 10分布情况，并应用多元线性回归模型分析各指标与性别、年龄、身高、体质量指数(BMI)的关联。 结果:本研究共纳入772名健康儿童，其中男364名，女408名；年龄12.1(11.8～12.3)岁，身高154.8 (153.6～156.0) cm，BMI 20.3(20.0～20.6) kg/m 2。FeNO 50、FeNO 200、CaNO、FnNO 10测量值分别波动于3.0～168.0 ppb、2.0～44.0 ppb、0.5～44.2 ppb、0～1 253.0 ppb。FeNO 50、FeNO 200、CaNO均呈偏态分布，其95%上限值分别为35.0 ppb、13.3 ppb和8.5 ppb。FeNO 50在男童中的几何均值(95% CI)为14.6 (13.7～15.5) ppb，高于女童[13.3 (12.7～14.0) ppb]，差异有统计学意义( Z＝1.470， P＝0.027)；在多元线性回归中，FeNO 50与年龄、身高均呈正相关( β＝0.023、0.007，均 P<0.05)，与BMI呈负相关( β＝－0.016， P<0.05)。FeNO 200在男性中几何均值(95% CI)为7.1(6.8～7.4) ppb，高于女童[6.4 (6.1～6.6) ppb]，差异有统计学意义( Z＝1.747， P＝0.004)；在多元线性回归中，FeNO 200与身高呈正相关( β＝0.005， P<0.05)，与性别呈负相关(女童： β＝－1.126， P<0.05)。男童与女童间CaNO比较差异无统计学意义( P>0.05)，其与性别、年龄、身高、BMI均无相关性(均 P>0.05)。FnNO 10呈正态分布，其均值为456.2 ppb，95% CI为29.3～863.4 ppb，男童均值(95% CI)为408.7 (377.1～443.0) ppb，高于女童[368.8 (339.0～401.3)ppb]，差异有统计学意义( Z＝1.722， P＝0.005)；在多元线性回归中与性别相关( β＝－36.098， P<0.05)，与年龄、身高、BMI均无相关性(均 P>0.05)。 结论:济南6～18岁健康儿童FeNO 50、FeNO 200、CaNO和FnNO 10指标的正常值范围分别为3.0～35.0 ppb、2.0～13.3 ppb、0.5～8.5 ppb和29.3～863.4 ppb。FeNO 50与年龄、身高、BMI相关，FeNO 200与性别、身高相关，FnNO 10与性别有关，CaNO及FnNO 10与年龄、身高、BMI均无相关性。

目的:探究不同甲状腺激素水平对妊娠妇女免疫功能及妊娠结局的影响。方法:选取菏泽市立医院妇产科2022年1月至2022年12月期间就诊的150例孕妊娠妇女为研究对象，所有研究对象均接受甲状腺激素水平及免疫功能相关检测。依据甲状腺激素水平分为甲亢组(32例)，甲减组(41例)和正常组(77例)。电化学发光法测定游离甲状腺素(free thyroxine，FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine，FT3)、促甲状腺素(thyroid-stimulatinghormone，TSH)；免疫比浊法检测免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)M、IgG、IgA水平；流式细胞仪测定CD4 ＋、CD8 ＋细胞水平并计算CD4 ＋/CD8 ＋比值；统计分析甲亢组、甲减组和正常组血清学指标及妊娠结局的差异。 结果:甲亢组，甲减组和正常组妇女的TT4、FT3、TSH水平差异均具有统计学意义[mmol/L：(25.89±2.15)比(12.56±2.56)、(14.89±2.11)；pmol/L：(7.01±1.05)比(3.06±0.89)、(3.62±0.59)；mIU/L：(2.26±0.45)比(13.87±1.59)、(2.78±0.52)， F值分别为361.28、264.21、2219.25， P值均<0.05]；甲亢组、甲减组、正常组的IgM、IgG、IgA、CD4 ＋、CD8 ＋、CD4 ＋/CD8 ＋水平差异均具有统计学意义[g/L：(1.69±0.22)比(1.04±0.26)、(1.22±0.15)；g/L：(10.92±1.56)比(9.16±1.52)、(9.77±1.36)；g/L：(1.84±0.36)比(1.35±0.45)、(1.62±0.37)；%：(37.89±4.56)比(31.26±4.15)、(34.06±4.15)；%：(34.26±4.96)比(27.26±4.15)、(30.26±4.26)；(1.45±0.16)比(0.91±0.11)、(1.12±0.15)； F值分别为99.49、13.50、14.46、21.99、22.87、129.59， P值均<0.05]；甲亢组、甲减组、正常组妇女不良妊娠结局发生率差异具有统计学意义[31.25%比31.71%比3.90%， χ2＝19.94， P<0.05]；甲状腺激素、免疫功能与妊娠结局呈正相关( r值分别为0.689、0.745、0.569、0.623、0.687、0.645、0.745、0.699、0.612， P值均<0.05)。 结论:甲状腺激素水平异常对妊娠期女性免疫功能及妊娠结局有影响，及时进行处理可能提高妊娠妇女生育质量，保障母婴身体健康。

目的:探讨检测外周血中外泌体磷脂酰肌醇蛋白聚糖-1(GPC-1)抗原对术前协助诊断胰腺癌(PDAC)的应用价值。方法:对2017年6月至2018年6月河北省人民医院31例PDAC患者(实验组)和22例慢性胰腺炎患者(对照组)的外周血，用超速离心机分离出外泌体，采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法染色，流式细胞仪测定外泌体GPC-1的阳性率，同时采用电化学发光免疫分析法测定两组患者外周血糖类抗原19-9(CA19-9)含量。相关分析打用Person相关分析。结果:GPC-1＋外泌体在实验组的表达较对照组的表达率明显升高(27.52%比4.96%， Z＝－5.145， P<0.01)，差异有统计学意义；CA19-9在实验组的表达较对照组明显升高(176.40 mg/L比16.07 mg/L， Z＝－3.342， P<0.05)，差异有统计学意义。GPC-1＋外泌体、CA19-9在受试者工作特征(ROC)曲线中的曲线下面积(AUC)分别为0.918、0.771( t＝19.440， P<0.05)，差异有统计学意义。外泌体GPC-1阳性率的约登指数为0.812，其GPC-1阳性率为12.16%，敏感度为90.30%，特异度为90.90%，误诊率为9.10%，漏诊率为9.70%。将CA19-9与GPC-1＋外泌体联合用于PDAC的早期诊断时其ROC曲线下面积为0.922，95%可信区间为0.848～0.997，与GPC-1＋外泌体独立诊断PDAC比较(ROC曲线下面积为0.918)，差异无统计学意义( t＝0.664， P>0.05)。 结论:外周血GPC-1＋外泌体测定对临床上协助诊断PDAC的参考价值优于CA19-9，且不劣于两指标联合的诊断效率。

目的:评估细针穿刺洗脱液中癌胚抗原（CEA）、鳞状细胞癌抗原（SCC-Ag）、细胞角质蛋白19片段（Cyfra211）、甲状腺球蛋白（TG）、铁蛋白（Fer）和降钙素原（PCT）在鉴别良恶性颈部结节中的应用价值，以期筛选最优鉴别诊断模型。方法:选择2017年8月至2019年8月在湖北省孝感市中心医院行细针穿刺细胞学检查的单发颈部结节患者396例，采用电化学发光分析法测定穿刺洗脱液CEA、SCC-Ag、Cyfra211、TG、Fer和PCT水平，以细胞病理学诊断为"金标准"，通过受试者工作特征（ROC）曲线分析穿刺洗脱液各指标单项检测以及联合检测的诊断效能。结果:396例患者中，恶性结节101例，良性结节295例。恶性结节患者穿刺洗脱液CEA、SCC-Ag、Cyfra211、TG和Fer明显高于良性结节患者[（27.73 ± 10.63）μg/L比（16.81 ± 8.18）μg/L、（1.59 ± 0.74）μg/L比（1.09 ± 0.83）μg/L、（3.31 ± 1.48）μg/L比（1.66 ± 0.59）μg/L、（144.96 ± 38.93）μg/L比（95.03 ± 47.23）μg/L和（191.18 ± 80.13）μg/L比（137.87 ± 63.22）μg/L]，PCT明显低于良性结节患者[（0.61 ± 0.24）μg/L比（1.01 ± 0.52）μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。ROC曲线分析结果表明，单项诊断性能较高指标为CEA、Cyfra211和TG（曲线下面积>0.7，约登指数>0.5）；CEA、Cyfra211和TG联合检测的曲线下面积明显高于任何指标两两联合检测（ P<0.05）。 结论:细针穿刺洗脱液CEA、Cyfra211和TG联合检测可有效鉴别良恶性颈部结节。

目的:探讨术后谵妄患者脑脊液中胆碱能及单胺类神经递质水平的变化。方法:纳入68例术前认知功能正常的脊柱脊髓外科手术患者，术前诊断为椎管内髓外硬膜下良性占位性病变，其中18例发生术后谵妄(谵妄组)，46例未发生术后谵妄(对照组)，4例诊断不明确(剔除)。于病灶切除术前及术后第3天收集脑脊液，采用高效液相色谱/电化学检测法测定乙酰胆碱(Ach)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的浓度。结果:病灶切除术前谵妄组与对照组脑脊液中Ach、NE、E、DA、5-HT的基线水平均差异无统计学意义(均 P>0.05)。手术后，谵妄组脑脊液中Ach水平[(0.63±0.26)μmol/L]显著低于对照组[(0.77±0.19)μmol/L]( P＝0.032)；其他神经递质水平均差异无统计学意义(均 P>0.05)。谵妄组患者中，手术后脑脊液中Ach水平[(0.63±0.26)μmol/L]较基线水平[(0.75±0.19)μmol/L]显著降低( P＝0.021)；NE水平[(1.58±0.28)μmol/L]较基线水平[(1.49±0.21)μmol/L]显著升高( P＝0.036)；肾上腺素水平无显著变化( P＝0.497)；DA水平[(0.86±0.18)μmol/L]较基线水平[(0.82±0.15)μmol/L]显著升高( P＝0.045)；5-HT水平[(2.94±0.28)μmol/L]亦较基线水平[(2.75±0.35)μmol/L]显著升高( P＝0.022)。对照组患者中，仅5-HT水平[(2.90±0.31)μmol/L]较基线水平[(2.76±0.26)μmol/L]显著升高( P＝0.016)，其他神经递质水平与基线水平相比均差异无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:术后谵妄患者的脑脊液中胆碱能神经递质水平降低而单胺类神经递质水平升高，由此可推测胆碱能神经系统活性减弱和单胺能神经系统过度兴奋或许是术后谵妄发生发展的重要病理生理环节。

目的:探讨微小RNA-499（miR-499）调节α型和β型肌球蛋白重链（α-MHC、β-MHC）基因轴在脓毒症心功能障碍（SMD）中的作用机制及意义。方法:将60只健康成年雄性SD大鼠按随机数字法分为磷酸盐缓冲液（PBS）对照组（PBS组）、脂多糖（LPS）致SMD模型组（LPS组）、miR-499激动剂预处理组（agomir+LPS组）和miR-499抑制剂预处理组（antagomir+LPS组），每组15只。采用腹腔注射LPS 10 mg/kg制备SMD大鼠模型；PBS组腹腔注射等量PBS。两个预处理组分别于制模前连续3 d经尾静脉注射agomir 30 mg/kg或antagomir 80 mg/kg，每日1次；PBS组和LPS组不给予预处理。注射LPS 5 h后检测超声心动图，并记录相关指标；在注射LPS 6 h后取左心房血和心肌组织，采用实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测血浆和心肌组织中miR-499的表达量；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测心肌组织中α-MHC、β-MHC的蛋白表达；采用电化学发光仪测定血浆心力衰竭标志物N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）水平。结果:与PBS组比较，LPS刺激后大鼠出现精神萎靡，血浆和心肌组织中miR-499表达下调，且心肌组织中α-MHC表达显著下调、β-MHC表达显著上调，超声心动图结果显示左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、心排血量（CO）、每搏量（SV）和心率（HR）分别下降了49.1%、59.2%、48.8%、39.4%、15.9%，且血浆NT-proBNP水平显著升高，表明LPS能诱导大鼠心功能障碍。与LPS组相比，给予agomir预处理过表达miR-499后，超声心动图显示大鼠心功能改善，表现为LVEF、LVFS显著升高〔LVEF：0.662±0.020比0.323±0.024，LVFS：（36.16±1.43）%比（20.20±1.32）%，均 P<0.01〕；同时大鼠心肌组织中β-MHC/α-MHC失调被逆转，β-MHC蛋白表达显著下调（β-MHC/GAPDH：0.74±0.04比2.97±0.34， P<0.01），α-MHC的蛋白表达显著上调（α-MHC/GAPDH：1.59±0.05比0.74±0.14， P<0.01），且血浆NT-proBNP水平明显下降（ng/L：114.49±6.85比334.13±4.36， P<0.01）。而给予antagomir预处理抑制miR-499表达后，超声心动图显示大鼠心功能被显著抑制，表现为LVEF、LVFS较LPS组显著下降〔LVEF：0.297±0.021比0.323±0.024，LVFS：（19.38±1.52）%比（21.20±1.32）%，均 P<0.01〕；同时大鼠心肌组织中α-MHC蛋白表达显著下调（α-MHC/GAPDH：0.63±0.03比0.74±0.14， P<0.01），β-MHC蛋白表达显著上调（β-MHC/GAPDH：3.03±0.47比2.97±0.34， P<0.01），且血浆NT-proBNP水平明显升高（ng/L：373.91±4.23比334.13±4.36， P<0.05）。 结论:miR-499能通过调节SMD大鼠心肌组织中α-MHC、β-MHC的表达水平，改善脓毒症引起的心功能障碍；靶向调节miR-499的表达可能成为治疗SMD的有效途径。

目的:通过一项多中心研究，在全国多个地区招募参考个体，建立中国3 d至6岁儿童外周血降钙素原（PCT）的生物参考区间。方法:于2020年10月至2021年5月，在全国11个省市的18家医院中招募3 d至6岁表观健康儿童和无特定疾病儿童3 353例，分为3~28 d、29 d~1岁、1~3岁、4~6岁4个年龄组，收集其血清，使用罗氏Cobas e601电化学发光分析仪和诺尔曼NRM411-S7化学发光分析仪对其PCT进行测定，并采集末梢全血，使用诺尔曼NRM411-S7化学发光分析仪测定其末梢血PCT，剔除离群值后通过Man-Whitney U检验和Kruskal-Wallis检验分析性别、年龄和标本类型间差异，不同的分组分别取右侧单侧95%可信区间作为其生物参考区间。 结果:参考人群的外周血PCT水平未检出性别差异，各年龄段的末梢全血与血清PCT水平差异有统计学意义（ P<0.01），3~28 d年龄组与其他年龄组间差异有统计学意义。罗氏系统血清PCT 参考区间为：3~28 d，<0.23 μg/L，29 d~6岁，<0.11 μg/L。诺尔曼系统血清PCT 参考区间为：3~28 d，<0.21 μg/L；29 d~1岁，<0.09 μg/L；1~6岁，<0.10 μg/L；末梢全血PCT 参考区间为：3~28 d，<0.26 μg/L；29 d~6岁，<0.15 μg/L。 结论:末梢全血PCT水平分布，静脉血清和末梢全血间均存在有显著性差异；不同年龄组的儿童，尤其是28 d以下组，与其他年龄组之间的PCT水平分布也有显著性差异，故需分别建立其生物参考区间；另外考虑到儿童是高度异质性的群体，不同实验室引用该参考区间前应进行必要的验证。