目的:探讨神经轴突导向因子2(Slit2)在恶性神经胶质瘤组织中的表达及与患者临床病理特征和生存率的关系。方法:选取河南省商丘市第一人民医院和郑州大学第一附属医院2016年9月到2019年9月收集的104例神经胶质瘤和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学检测Slit2蛋白表达，分析Slit2表达水平与患者临床病理特征和预后的关系。采用 χ2检验分析Slit2与临床病理特征的关系，生存分析采用Kaplan-Meier生存曲线，多因素采用Logistic回归分析。 结果:神经胶质瘤组织中Slit2蛋白表达阳性率[19.23%(20/104)]明显低于癌旁组织[80.77%(84/104)]，差异有统计学意义( χ2＝17.120， P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ级患者神经胶质瘤组织Slit2蛋白表达阳性率[38.10%(16/42)]明显高于Ⅲ~Ⅳ级患者神经胶质瘤组织Slit2蛋白表达阳性率[6.45%(4/62)]，差异有统计学意义( χ2＝11.109， P<0.05)。中高分化患者神经胶质瘤组织Slit2蛋白表达阳性率[28.13%(18/64)]明显高于低分化患者神经胶质瘤组织Slit2蛋白表达阳性率[2.50%(2/40)]，差异有统计学意义( χ2＝9.902， P<0.05)。Slit2高表达组患者生存率[55.00%(11/20)]明显高于Slit2低表达患者生存率[32.14%(27/84)]，差异有统计学意义( χ2＝8.771， P<0.05)。多因素回归分析，结果显示临床分期、分化程度和Slit2表达水平均是影响神经胶质瘤患者总生存率的独立危险因素( P<0.05)。 结论:Slit2蛋白在神经胶质瘤组织中呈低表达，与患者临床分期和分化程度以及总生存率密切相关。

目的:探讨神经轴突导向因子2(Slit2)对神经胶质瘤细胞的增殖、迁移和糖酵解的影响。方法:选取2018年6月到2022年6月河南省商丘市第一人民医院收治的61例神经胶质瘤和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学分析Slit2蛋白在神经胶质瘤和癌旁组织的阳性率。将神经胶质瘤细胞株U251堆积分为对照组和Slit2 KD组，分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析细胞增殖；采用Transwell和划痕实验分析细胞迁移；采用试剂盒检测葡萄糖提呈和乳酸水平；采用生物化学酶法检测己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性。组间比较采用 t检验。 结果:神经胶质瘤组织中Slit2蛋白表达阳性率(43/61，72.13%)明显低于癌旁组织(16/61，26.23%)，差异有统计学意义( χ2＝12.091， P<0.05)。对照组细胞活力(1.86±0.07)明显高于Slit2 KD组细胞(1.22±0.08)，差异有统计学意义( t＝13.910， P<0.05)。对照组细胞在体内成瘤体积[(829.50±44.12) mm 3]明显高于Slit2 KD组细胞[(531.00±64.42) mm 3]，差异有统计学意义( t＝12.090， P<0.05)。对照组细胞在体内成瘤重量[(4.63±0.66) g]明显高于Slit2 KD组细胞[(2.22±0.20) g]，差异有统计学意义( t＝11.070， P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(81.17±4.49)个]和划痕愈合率[(78.33±8.04)%]明显高于Slit2 KD组细胞(56.50±6.66)[(54.67±6.21)%]，差异有统计学意义( t＝7.525、5.703， P<0.05)。对照组细胞己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性(0.96±0.04、0.95±0.04、0.97±0.04)明显高于Slit2 KD组细胞(0.64±0.09、0.73±0.04、0.51±0.05)，差异有统计学意义( t＝7.961、8.963、15.780， P<0.05)。对照组细胞葡萄糖摄取量和乳酸水平[(0.75±0.08)、(3.92±0.31) mmol/L]明显高于Slit2 KD组细胞[(0.32±0.04)、(2.75±0.28) mmol/L]，差异有统计学意义( t＝12.350、6.782， P<0.05)。 结论:Slit2在神经胶质瘤细胞中高表达，通过调节糖酵解通路关键酶活，介导神经胶质瘤细胞的增殖和迁移能力。

目的:探讨气管镜窄带成像联合血清热休克蛋白70（HSP70）、神经轴突导向因子1（Ntn1）对支气管肺癌的临床诊断价值。方法:回顾性队列研究。回顾性分析2021年1月至2022年1月山西省肿瘤医院收治的96例疑似中央型肺癌合并气道阻塞患者的临床资料，所有患者均采用支气管光镜检查及窄带成像进行分析，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清HSP70、Ntn1水平。以病理活组织检查结果为金标准，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析气管镜窄带成像联合血清HSP70、Ntn1水平对支气管肺癌的诊断价值。结果:96例疑似患者中，男性70例，女性26例，年龄（46±5）岁；经病理确诊中央型肺癌72例，其中鳞状细胞癌43例，腺癌24例，小细胞癌3例，未分化2例，肺部良性病变24例。气管镜窄带成像诊断支气管肺癌的灵敏度、特异度、准确度分别为90.3%、79.2%、87.5%。肺癌患者血清HSP70、Ntn1水平均高于良性患者（均 P<0.05）。ROC曲线显示，HSP70、Ntn1诊断支气管肺癌的最佳临界值分别为10.08 ng/ml、562.82 pg/ml，血清指标（HSP70+Ntn1）诊断支气管肺癌的灵敏度、特异度、准确度分别为93.1%、58.3%、84.4%；气管镜窄带成像联合血清指标诊断支气管肺癌的灵敏度、特异度、准确度分别为98.6%、87.5%、95.8%，其准确度高于单独气管镜窄带成像或血清指标（ χ2值分别为4.36、7.07，均 P<0.05）。 结论:气管镜窄带成像对支气管肺癌具有较好的诊断价值，而联合血清HSP70、Ntn1能进一步提高临床诊断效能。

目的:探讨Slit引导配体2(Slit2)对糖尿病小鼠角膜上皮和神经损伤修复的促进作用及其可能的分子机制。方法:选取60只SPF级5~6周龄C57BL/6小鼠，采用随机数字表法分为正常对照组、糖尿病模型组和Slit2注射组，每组20只。糖尿病模型组和Slit2注射组小鼠采用链脲霉素腹腔内注射法建立糖尿病模型。构建小鼠角膜上皮损伤修复模型，Slit2注射组于造模后即刻结膜下注射Slit2重组蛋白，糖尿病模型组小鼠结膜下注射等容量PBS，正常对照组不做处理。采用角膜荧光素染色法观察小鼠角膜上皮缺损后24、48和72 h愈合情况；采用实时荧光定量PCR法检测正常对照组和糖尿病模型组小鼠角膜上皮中Slit2及其相关受体mRNA的表达；采用角膜铺片β-tubulin Ⅲ荧光染色法观察小鼠角膜神经形态变化；采用免疫荧光法检测正常对照组和糖尿病模型组小鼠角膜上皮中Slit2的表达分布及修复的角膜上皮中Slit2、表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、苏氨酸蛋白激酶(AKT)、β-连环蛋白(β-catenin)和Ki67的表达。将小鼠角膜上皮干/祖细胞系(TKE2)分为正常对照组、高糖组和Slit2干预组。采用Western blot法检测各组细胞中p-EGFR/EGFR、p-AKT/AKT、p-ERK/ERK和β-catenin的表达；取高糖培养的TKE2，采用Western blot法检测0.01、0.1和0.5 μg/ml Slit2处理10 min及0.5 μg/ml的Slit2处理前和处理后10、20、30、60、120 min时p-EGFR/EGFR和p-AKT/AKT的表达。原代培养各组小鼠三叉神经节(TGs)细胞，采用β-tubulin Ⅲ免疫荧光染色法观察Slit2对于TGs细胞轴突再生的影响。结果:角膜上皮刮除后48 h和72 h，与正常对照组和Slit2注射组比较，糖尿病模型组小鼠角膜上皮修复速度明显减慢。糖尿病模型组小鼠正常角膜上皮中Slit2及其Robo1、Robo2、Robo4受体mRNA相对表达量明显高于正常对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。糖尿病模型组损伤修复的角膜上皮中Slit2免疫荧光强度明显弱于正常对照组。角膜铺片神经荧光染色显示，与糖尿病模型组比较，角膜上皮损伤后7 d Slit2注射组角膜神经丛致密，神经纤维数量增多且分布均匀，神经末梢可见较多分支。正常对照组和Slit2注射组修复的角膜上皮中p-EGFR、p-ERK、β-catenin和Ki67荧光明显强于糖尿病模型组。高糖组TKE2细胞内p-EGFR/EGFR、p-AKT/AKT和β-catenin相对表达量均明显低于正常对照组和Slit2干预组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。Slit2处理高糖培养TKE2细胞后10 min，p-EGFR/EGFR和p-AKT/AKT的相对表达量较处理前均明显升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)，随着Slit2质量浓度的增加，TKE2细胞中p-EGFR/EGFR和p-AKT/AKT相对表达量逐渐升高，Slit2质量浓度为0.5 μg/ml时对EGFR和AKT信号通路的活化作用最明显。高糖组体外培养的TGs突触长度为(40.52±5.44)μm，明显短于正常对照组的(72.14±9.48)μm和Slit2注射组的(73.04±4.66)μm，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:Slit2通过激活EGFR信号通路对糖尿病模型小鼠角膜上皮发挥保护作用，并通过增加角膜上皮下神经丛密度和促进TGs细胞轴突生长，发挥神经保护能力。

目的 了解子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)不同r-AFS分期患者血清弗林蛋白酶(Furin)、肿瘤生长因子-β(tumor growth factor-β,TGF-β)、血管生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及神经轴突导向因子-1(neuron towards axon guidance factor-1,netrin-1)水平表达及 Furin 基因 P1 启动区 r2071410 C/T 位点多态性,探讨其与深圳地区EMT发病的相关性.方法 选取2021年5月～2023年1月深圳市龙华区人民医院确诊的EMT患者102例为EMT组,并根据r-AFs分期法将EMT组分为Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期.同时收集同期非EMT患者78例为对照组.采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清 Furin,TGF-β,VEGF 及 netrin-1 水平,并采用反转录-实时荧光定量聚合酶链反应法(reverse transcription-real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析Furin基因P1启动区r2071410 C/T位点多态性.结果 EMT组患者血清Furin(140.84±47.02pg/ml),TGF-β(376.46±82.36ng/L)和 VEGF 水平(167.67±53.02ng/L)明显高于对照组(55.49±13.67pg/ml,216.37±15.04ng/L,102.27±8.45ng/L),而 netrin-1 水平(48.37±15.20pg/ml)明显低于对照组(165.85±15.63pg/ml),差异具有统计学意义(t=28.409,20.347,16.915,36.653,均 P＜0.05).Ⅲ～Ⅳ 期患者血清 Furin(192.41±20.62pg/ml),TGF-β(452.61±72.03ng/L)和 VEGF 水平(201.84±28.01ng/L)明显高于 Ⅰ～Ⅱ 期(78.05±16.54pg/ml,283.75±56.92ng/L,126.07±19.35ng/L),而 netrin-1 水平(37.95±11.34pg/ml)明显低于 Ⅰ～Ⅱ 期(61.05±9.52pg/ml),差异有统计学意义(t=31.071,18.054,19.183,21.625,均 P＜0.05).经 Pearson/Spearman 相关性分析结果显示,Furin 与 TGF-β,VEGF水平及临床分期呈正相关(r=0.614 9,0.752 6,0.790 5,均P＜0.05),而与netrin-1水平呈负相关(r=-0.670 1,均P＜0.05).EMT组患者Furin基因P1启动区r2071410 C/T位点TT基因型和T等位基因频率(42.16％,55.39％)明显高于对照组(7.69％,19.87％),且Ⅲ～Ⅳ期TT基因型和T等位基因频率(51.79％,65.18％)比Ⅰ～Ⅱ期(30.43％,43.48％)明显升高,差异具有统计学意义(x2=26.500,46.472,4.721,9.626,均P＜0.05).EMT组不同基因型患者血清Furin水平差异具有统计学意义(F=51.286,P＜0.001),其中TT基因型患者血清Furin水平(216.29±68.53pg/ml)明显高于CC(83.04±21.37pg/ml)和CT基因型(89.18±20.95pg/ml),差异具有统计学意义(t=27.146,25.719,均P＜0.01),但CC与CT基因型之间差异无统计学意义(t=1.326,P＞0.05).结论 EMT患者血清Furin水平明显升高,且与TGF-β,VEGF,netrin-1水平及临床分期呈一定相关性;同时Furin基因P1启动区r2071410 C/T位点呈多态性分布,其中TT基因型患者血清Furin水平升高更为明显,可能与深圳地区EMT发病有关.

目的 探究缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清长链非编码RNA H19(lncRNA H19)、神经轴突导向因子1(NT-1)水平及临床意义.方法 选取2019年2月至2021年2月哈尔滨医科大学附属第一医院收治的102例HIE患儿(HIE组).根据HIE严重程度,分为轻度组(30例)、中度组(41例)和重度组(31例).根据HIE患儿预后情况,分为预后良好组(76例)和预后不良组(26例).以同期新生儿外科手术治疗的脐茸、脐尿管瘘患儿作为对照组,共60例.检测新生儿血清lncRNA H19、NT-1水平.采用多因素Logistic回归模型分析影响HIE患儿预后的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对HIE患儿预后的评估价值.结果 HIE组血清lncRNA H19、NT-1水平均低于对照组[(1.17±0.24)比(2.35±0.53)、(312±71)ng/L 比(514±61)ng/L](均 P＜0.001).轻度组、中度组及重度组血清 lncRNA H19、NT-1 水平均呈依次降低趋势(均P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,血清lncRNA H19、NT-1是HIE患儿不良预后的危险因素(均P＜0.001).ROC曲线分析结果显示,lncRNA H19、NT-1联合检测的曲线下面积大于 lncRNA H19、NT-1 单独检测(Z=4.912,4.763,均 P＜0.001).结论 HIE 患儿血清 lncRNA H19、NT-1水平降低,与HIE病情程度有关,二者联合对HIE患儿不良预后具有较高的预测价值.

目的 探究多巴丝肼、普拉克索联合治疗帕金森病(PD)的效果及对人帕金森病蛋白2(PARK2)、线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)及神经轴突导向因子1(Netrin-1)的影响.方法 选择2021年7月至2023年6月于新乡医学院第一附属医院治疗的PD患者108例为研究对象,依据随机数字表法分为试验组和对照组,每组54例.对照组行多巴丝肼治疗,试验组行多巴丝肼、普拉克索联合治疗.观察两组治疗前后PD严重程度,认知功能水平,睡眠障碍情况,血清PARK2、CKMT1A、Netrin-1水平和不良反应.结果 治疗后,试验组统一PD评定量表(UPDRS)各分项得分及总分、匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分均低于对照组(P<0.05),简易智力状态检查量表(MMSE)评分高于对照组(P<0.05).试验组血清PARK2、Netrin-1水平均高于对照组(P<0.05),血清CKMT1A水平低于对照组(P<0.05).试验组总有效率大于对照组(P<0.05).两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05).结论 多巴丝肼、普拉克索联合治疗PD可缓解患者症状,提高其认知功能及睡眠质量,改善血清PARK2、CKMT1A、Netrin-1水平.

轴突生长导向因子-1(netrin-1)是netrins家族中研究最广泛的成员.netrin-1 最初被认为是胎儿发育过程中轴突引导的调节因子,与其经典受体非协调 5(uncoordinated-5,UNC5)与结直肠癌缺失基因(deleted in colorectal cancer,DCC)共同介导轴突的吸引或排斥.随着更多netrin-1受体的发现,如唐氏综合征细胞粘附分子(down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)、整合素α6β4(integrin α6β4,Inα6β4)和整合素α3β1(integrin α3β1,Inα3β1)、腺苷A2B受体(A2B adenosine receptor,A2BAR)和CD146等的发现,扩展了netrin-1在非神经系统的功能,如调控血管生长,肿瘤生长,细胞凋亡,炎症发展.本文就netrin – 1及其受体在非神经系统中的作用的研究进展进行概述.

目的 探讨血清妊娠相关蛋白-A (PAPP-A) 、神经轴突导向因子-1 (Netrin-1) 、胎盘蛋白13 (PP13) 、雌三醇水平对胎儿生长受限的预测价值.方法 将丽水市中心医院2015年3月至2016年12月收治的孕早期2 431例孕妇中胎儿生长受限的71例作为研究对象 (观察组) , 此期间胎儿发育正常孕妇50例作为对照组.入院后空腹采集外周静脉血, 分离血清, 采用化学发光法测定雌三醇浓度, 采用酶联免疫双抗体夹心法测定PAPP-A、Netrin-1、PP13浓度.结果观察组孕妇血清PAPP-A、Netrin-1、PP13、雌三醇阳性率高于对照组, 差异均有统计学意义 (χ2=23.742、18.643、26.179、25.530, Ps<0.05) ;观察组孕妇血清PAPP-A、Netrin-1、PP13、雌三醇水平低于对照组, 差异均有统计学意义 (χ2=14.122、38.476、17.322、14.747, Ps<0.05) ;血清PAPP-A、Netrin-1、PP13、雌三醇水平与胎儿生长受限呈负相关.结论 血清PAPP-A、Netrin-1、PP13、雌三醇水平对胎儿生长受限均有一定的预测价值.

目的 观察胶质细胞Slit1对脊髓背根节(DRG)神经元突起生长的影响.方法 构建大鼠Slit1 siRNA,转染至大鼠原代DRG卫星胶质细胞.利用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot技术检测Slit1 mRNA和蛋白的表达情况;将siRNA-Slit1转染成功的胶质细胞与大鼠原代DRG神经元共培养48 h,显微镜下观察神经元突起生长情况.结果 (1)与阴性对照组比较,siRNA-Slit1组胶质细胞Slit1 mRNA的表达量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);空白对照组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)siRNA-Slit1组Slit1蛋白的表达量明显低于阴性对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.01),而空白对照组与阴性对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)siRNA-Slit1组神经元突起长度明显短于阴性对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.01).结论 Slit1是诱导神经元突起生长的重要导向分子,可促进离体DRG神经元突起的生长.