为了查明高寒地区建植一年生禾本科人工草地的土壤节肢动物群落动态,2019年4月在青藏高原东缘红原县境内建植了黑麦草和燕麦两种一年生单播人工草地,并以天然草地为对照.2019-2022年每年9月下旬对土壤节肢动物群落、植物群落和土壤理化性质开展观测.结果表明:1)土壤节肢动物的群落组成结构在3种草地及年际间差异显著;2)土壤节肢动物密度、类群数、Shannon指数和均匀度指数在3种草地间差异不显著;3)随着年限增加,3种草地的土壤节肢动物密度显著波动;黑麦草和燕麦草地土壤节肢动物类群数和Shannon指数显著降低,均匀度指数仅在第4年显著降低;天然草地的Shannon指数呈显著波动,均匀度指数无明显变化;4)草地的地上和地下生物量、土壤全磷、全钾、有效氮含量是影响土壤节肢动物群落的主要因子.研究表明,在高寒地区种植一年生禾本科牧草对土壤节肢动物群落的组成结构有显著影响,对密度及多样性指数影响不显著;种植年限对群落组成结构、密度和多样性指数影响显著.

目的 探讨无需缝合的外科嵌入式方法在复制小鼠原位肝癌(HCC)肿瘤模型中的应用,并评估该模型在肿瘤生物学研究中的价值.方法 通过体外培养Hepa1-6细胞至适宜浓度,并采用小动物一体式麻醉系统对C57 BL/6J小鼠实施麻醉.该研究采用细胞法、挂线法和嵌入法复制原位肝癌移植瘤模型,并对手术时长、小鼠复苏时间及存活率进行比较.此外,通过MRI技术动态监测肿瘤的形成过程,并对比3种方法的肿瘤成瘤率、单瘤率及腹壁肿瘤种植率.通过病理学检测评估肿瘤组织的结构和病理特征.结果 细胞法组手术时间较挂线法组短(P＜0.05),嵌入法组手术时间较挂线法组短(P＜0.05),细胞法组与嵌入法组手术时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).细胞法组复苏时间较挂线法组短(P＜0.05),嵌入法组复苏时间较挂线法组短(P＜0.05),细胞法与嵌入法复苏时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).MRI结果显示,挂线法组肿瘤呈块状生长,可见分隔及类圆形伪影,局部观察受限.细胞法组肿瘤呈片状不规则生长,可见多发肿瘤.嵌入法组肿瘤呈团块状均匀生长,边缘较清.细胞法组模型复制后第7天平均肿瘤体积较挂线法组大(P＜0.05),嵌入法组模型复制后第7天平均肿瘤体积较挂线法组小(P＜0.05),细胞法组与嵌入法组模型复制后第7天平均肿瘤体积比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各组模型复制后第21天平均肿瘤体积比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各组平均肿瘤重量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各组单瘤率、腹壁肿瘤种植率比较,差异有统计学意义(P＜0.05),嵌入法组单瘤率较细胞法组高(P＜0.05).各组成瘤率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).HE染色结果示,各组肿瘤细胞呈巢状分布,排列紧密,核深染呈分裂象,肿瘤浸润肝组织,符合肝癌病理学特点.结论 采用嵌入法复制的原位移植瘤小鼠模型操作简单,手术时间短,可重复性高,为肝癌的相关基础实验研究及在体动态监测提供了一种重要的实验工具.

口腔上颌窦瘘是指口腔与上颌窦发生的病理性连通。由于上颌窦底骨板的缺损，在缺牙区进行种植治疗具有较大困难。本文报道1例上颌第一磨牙缺失合并口腔上颌窦瘘的病例，上颌窦底缺损直径大于5 mm。一期手术行口腔上颌窦瘘修补术及位点保存术；二期手术行经侧壁开窗上颌窦底提升术及引导骨再生术，同期植入种植体，完成上部结构修复。通过治疗重建牙槽嵴的软硬组织，恢复患者的咀嚼功能，并获得较理想的美观效果。

目的:探讨即刻种植后骨组织引导再生(GBR)术对骨缺损骨再生的成骨能力。方法:选取山西煤炭中心医院2017年3月至2018年11月收治的单颗上前牙拔除后即刻种植合并唇侧骨缺损患者68例为研究对象，采用随机数字表法分为两组，观察组34例，使用Bio-Oss骨粉和海奥生物膜进行GBR术，对照组34例，自然愈合。使用锥形束CT于种植即刻、种植后6个月、种植后12个月测量种植体颈部肩台上方1、4、7、10 mm点处唇侧骨壁的厚度，进行对比分析。结果:种植即刻至种植后6个月，两组种植体颈部肩台上方1、4、7、10 mm点处唇侧骨壁的厚度变化量差异无统计学意义( P>0.05)；种植后6～12个月，观察组种植体颈部肩台上方1、4、7、10 mm点处唇侧骨壁的厚度变化量分别为(0.12±0.08)mm、(0.11±0.06)mm、(0.10±0.08)mm、(0.08±0.06)mm，对照组分别为(0.51±0.15)mm、(0.40±0.10)mm、(0.39±0.07)mm、(0.25±0.07)mm，两组差异均有统计学意义( t＝5.218、4.647、4.007、3.507，均 P<0.05)。两组种植后6个月种植体唇侧骨厚度差异无统计学意义( P>0.05)；种植后12个月，观察组种植体唇侧骨厚度为(2.87±0.49)mm，对照组为(1.51±0.41)mm，两组差异有统计学意义( t＝5.779， P<0.05)。 结论:GBR术能够保证成骨性细胞的优先迁移生长空间，以良好的成骨能力提供足够骨量完成骨缺损的结构性重建。

目的:探讨地屈孕酮（dydrogesterone，DYD）对植入窗期子宫内膜超微结构的影响。方法:前瞻性研究分析2020年7月至2022年7月期间于浙江省人民医院生殖医学中心行体外受精-胚胎移植（ in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）并符合纳排标准的患者资料，并对患者的子宫内膜进行扫描与透射电子显微镜检测。对因男性因素行IVF-ET的20例患者进行自身对照研究，比较自然周期和DYD 40 mg/d转化周期植入窗期子宫内膜超微结构的差异。同时采用自身对照研究，筛选原因不明反复种植失败（recurrent implantation failure，RIF）行IVF-ET患者（ n=43），比较不同剂量DYD（40 mg/d与80 mg/d）转化后内膜超微结构的变化。 结果:男性因素不孕患者自然周期与DYD转化周期的子宫内膜在转化日的超声厚度测量、回声分型和在植入窗期的胞饮突评分、核仁通道系统（nucleolar channel system，NCS）阳性率、分泌状态评分、线粒体数目和形态评分差异均无统计学意义（均 P>0.05）。RIF患者DYD 80 mg/d组的胞饮突评分（-46.26±19.97）、NCS阳性率［65.12%（28/43）］和线粒体形态评分［0（0，1）］均显著高于DYD 40 mg/d组［-67.62±15.94， P<0.001；39.53%（17/43）， P=0.043；0（0，0）， P=0.023］，而两组间子宫内膜厚度、回声类型、分泌状态评分及线粒体数目差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:口服DYD转化内膜可以构建与自然周期类似的植入窗期子宫内膜超微结构。80 mg/d DYD剂量可以改善RIF患者子宫内膜的胞饮突成熟度评分、NCS阳性率和线粒体形态评分。

目的:探讨输尿管脱细胞基质(UDM)涂层对脂肪干细胞分化的影响。方法:2018年1月至2019年10月利用灌注法制备犬UDM，为UDM组，以正常犬输尿管为正常输尿管组。采用HE染色、DAPI染色和DNA定量检测评估UDM组和正常输尿管组中细胞成分的残留情况；Masson三色染色和胶原定量检测评估UDM组和正常输尿管组中胶原的保留情况；阿尔新蓝染色和糖胺聚糖定量检测评估UDM组和正常输尿管组中糖胺聚糖的分布及含量。分离培养犬脂肪间充质干细胞(cADMSCs)并用流式细胞仪鉴定。用胃蛋白酶消化法制备UDM涂层作为实验组，Ⅰ型鼠尾胶原涂层作为对照组，将cADMSCs种植在不同涂层上，免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测cADMSCs的分化情况。结果:HE和DAPI染色结果显示UDM组未见明显的细胞核残留；DNA定量检测结果显示UDM组中DNA含量[(38.87 ± 3.40) ng/mg]明显低于正常输尿管组[(1 694.63 ± 169.83) ng/mg， P<0.05]。Masson三色染色和胶原定量检测结果显示UDM组中胶原含量[(265.89 ± 16.40) μg/mg]与正常输尿管组[(288.73 ± 16.32) μg/mg]的差异无统计学意义( P>0.05)。阿尔新蓝染色结果显示UDM组中有糖胺聚糖分布；糖胺聚糖定量检测结果显示UDM组中糖胺聚糖含量[(1.57±0.19) μg/mg]低于正常输尿管组[(3.43±0.12) μg/mg] ( P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示，实验组培养3、7、10 d的α-SMA的表达量(2.51 ± 0.27、3.68 ± 0.33、4.91 ± 0.45)均高于相应对照组(0.97 ± 0.09、1.02 ± 0.10、1.00 ± 0.11)，差异均有统计学意义( P < 0.05)；随着培养时间增加，实验组α-SMA的表达量逐渐增加，差异均有统计学意义( P<0.05)，而对照组随着培养时间增加，α-SMA的表达量差异均无统计学意义( P > 0.05)。免疫荧光染色检测结果示实验组和对照组α-SMA的表达趋势与蛋白质印迹法检测结果一致。 结论:制备的UDM去除了细胞成分，且很好地保留了胶原结构和生物活性成分；UDM涂层可促进cADMSCs向平滑肌细胞分化。

目的:探索和评价数字化外科技术用于引导 125I粒子植入治疗头颈深部肿瘤的精确性、适形性和临床应用价值。 方法:回顾性选取12例行 125I放射性粒子近距离放疗的头颈深部肿瘤患者。治疗前基于CT图像设计插植针和粒子位置。根据治疗计划构建数字化定位模型将计划的插植针位置精准导入至手术导航系统，并根据患者面部外形轮廓和插植针位置方向设计打印个体化穿刺引导模板。术中在导航引导下进行模板核准就位，在导航系统的可视化针道、实时插植针位置和模板导向孔共同引导下进行插植针穿刺和放射性粒子植入。CT检查验证插植针与粒子的位置，并计算实际靶区剂量分布，观察术中及术后是否出现血肿、疼痛、感染、穿刺点不愈合、肿瘤细胞种植等不良反应。 结果:12例患者均在数字化外科技术引导下完成插植针穿刺和放射性粒子植入，实时可视化引导效果佳，插植针、粒子与治疗计划中的位置、数目相符，空间分布均匀。术后剂量验证 D90范围为83.7～131.0 Gy，平均107.5 Gy； V100范围为89.6%～99.3%，平均94.6%； V150范围为40.2%～58.9%，平均47.8%。术中术后未出现严重不良反应。 结论:采用数字化外科技术，将手术导航系统与3D打印个体化穿刺引导模板结合共同引导插植针穿刺和 125I粒子植入，提高了近距离放疗的精确性和适形性，在头颈部近距离放疗特别是深部解剖结构复杂区具有临床应用价值。

反复种植失败（RIF）是一个具有挑战性的临床难题。尽管近年来体外受精-胚胎移植技术飞速发展，RIF仍是影响女性成功妊娠的重要问题，至今难以形成统一的诊疗标准。RIF病因复杂，包括母体因素、男性因素和胚胎因素，其中母体因素又包括免疫异常、血栓前状态、子宫内膜容受性不良、感染、生殖系统解剖结构异常和内分泌稳态失衡等。RIF病因的复杂性和多样性决定了在临床工作中需针对不同病因制订个性化诊疗方案。本共识将为RIF的检查、评估和管理提供建议，为医生的决策提供参考，规范RIF诊治。

目的:采用改良灌注法制备猪全胰腺脱细胞基质支架(APB)，并评价其生物学特征。方法:选取10只新鲜的来自健康4~6月龄体重(20.0±2.5)kg猪的胰腺组织，采用本实验室自行设计的简易灌流装置制备猪APB，观察APB的形态结构，检测其细胞外基质(ECM)的成分以及DNA含量；随后采用移植实验评估APB生物相容性，最后将APB再细胞化观察其促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖分化状况。结果:脱细胞过程结束后APB颜色透明，原有组织轮廓保留完整；形态学检测表明APB保留原有的三维结构，ECM结构及成分保存较好，未见残留的细胞结构及成分；与正常猪胰腺组织相比，APB的ECM含量[胶原：(846.1±280.0)ng/mg干重比(754.7±249.6) ng/mg干重；葡萄糖胺聚糖(433.6±142.6) ng/mg干重比(397.2±98.7) ng/mg干重]，差异无统计学意义(均 P>0.05)；但APB的DNA含量较正常猪胰腺组织降低[(83 464.2±27 813.4) ng/mg干重比(298.9±96.8) ng/mg干重， t＝11.56， P<0.001]，差异有统计学意义；APB在皮下埋植后随着时间延长，重塑评分升高，引起有益的重塑反应；再细胞化的APB可促进BMSCs的增殖及分化。 结论:本研究所制备的APB符合脱细胞标准，维持原有的三维结构，具有良好的生物相容性，有利于种植细胞的增殖分化。

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)/内皮祖细胞(EPC)作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨(ECM-TEB)修复大鼠股骨缺损的效果。方法:分离培养骨髓来源的MSC和EPC并进行功能鉴定，种植上架于纳米晶胶原基人工骨颗粒，培养14 d后冻干，获得MSC/EPC ECM-TEB和MSC ECM-TEB。扫描电镜观察MSC和EPC在支架表面的生长形态。分别提取MSC ECM-TEB蛋白浸提液(对照组)和MSC/EPC ECM-TEB蛋白浸提液(实验组)，加入EPC培养系统中进行迁移、划痕修复、管腔形成检测；另加入MSC培养系统中进行茜素红染色和碱性磷酸酶(ALP)染色检测，观察两组细胞募集、血管生成和成骨分化情况。选取12只SD大鼠，建立股骨缺损模型，按照随机数字表法分为：(1)假手术组：仅在缺损处进行清创处理；(2)MSC ECM-TEB组：在缺损处植入MSC ECM-TEB；(3)MSC/EPC ECM-TEB组：在缺损处植入MSC/EPC ECM-TEB，每组4只大鼠。2个月后行Micro-CT检查和缺损区Masson三色染色观察骨缺损修复情况。冻干后低温保存3个月，采取同位素相对标记与绝对定量技术(iTRAQ)标记蛋白质谱检测MSC ECM-TEB和MSC/EPC ECM-TEB在成血管方面的差异，并采用基因本体论/京都基因与基因组百科全书技术(GO/KEGG)功能富集方法分析其原因。结果:MSC和EPC在支架表面生长、增殖良好，形成光滑的细胞层状结构。实验组在细胞迁移数、划痕修复比例和管腔形成长度分别为(121.6±8.3)个、(61.5±5.9)%、(11.3±0.6)mm，较对照组显著增多[(85.0±6.7)个、(39.3±3.6)%、(5.9±0.4)mm]( P均<0.01)。茜素红染色和ALP染色结果显示，实验组钙结节矿化面积比例显著增加[(38.8±3.3)%∶(49.9±3.0)%、(38.8±2.4)%∶(45.3±3.3)%] ( P均<0.05)。Micro-CT和Masson染色结果表明，MSC/EPC ECM-TEB组骨缺损修复良好，MSC ECM-TEB组仅形成少量新骨，假手术组几乎没有新骨形成；骨体积分数、骨小梁数量和骨小梁厚度差异均有统计学意义( P<0.05)。蛋白质谱分析结果表明，与MSC ECM-TEB组相比，MSC/EPC ECM-TEB组中有83个血管生成相关的因子显著上调(差异倍数>2， P<0.05)；GO/KEGG功能富集分析显示，与MSC ECM-TEB相比，MSC/EPC ECM-TEB在"血管发育"等生物过程存在明显差异( P<0.01)，"血管平滑肌收缩通路"等显著增强( P<0.01)。 结论:与MSC ECM-TEB相比，MSC/EPC ECM-TEB在细胞募集、血管生成和新骨生成方面显著增强，是一种更佳的可用于创伤性骨缺损修复的组织工程骨构建策略。