目的:观察PINK1/Parkin-溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)通路介导的线粒体-溶酶体自噬对肾缺血再灌注(I/R)损伤后上皮-间充质转化(EMT)的影响，探讨其在移植肾损伤中的作用。方法:采用随机数字表法将32只Sprague Dawley(SD)大鼠分为4组( n＝8)：假手术组(S组)、肾I/R组、肾I/R+Parkin过表达组(I/R+rAAv组)、肾I/R+Parkin沉默组(I/R+sh组)。采用夹闭双侧肾蒂45 min后恢复肾脏灌注24 h的方法制备肾I/R损伤模型。尾静脉注射腺相关病毒rAAv-Parkin和sh-Parkin分别过表达和沉默Parkin，并设空载体对照。术后24 h处死大鼠，采血并取肾皮质，检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平，使用试剂盒分别检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、大鼠肾损伤分子-1(Kim-1)和腺苷三磷酸(ATP)水平，蛋白质印迹法(Western blot)检测肾组织E-黏钙蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SAM)及线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3B、P62及LAMP2的表达。两组间的比较采用非配对 t检验。 结果:与S组比较，I/R组血清Scr、BUN、LDH和MDA浓度升高，Kim-1表达上调[(123.45±21.23) μmol/L比(60.12±8.98) μmol/L， t＝9.381， P<0.05；(40.57±9.33) mmmol/L比(18.22±6.34) mmmol/L， t＝7.527， P<0.05；(65.12±12.87) U/L比(30.12±6.21) U/L， t＝6.145， P<0.05；(13.21±4.23) mmmol/L比(6.78±2.21) mmmol/L， t＝6.445， P<0.05；(10.11±4.23) nmol/L比(1.21±4.0.43) nmol/L， t＝5.125， P<0.05]；肾皮质ATP含量减少，E-cad表达下调及α-SAM表达上调(0.34±0.14比1.00， t＝5.608， P<0.05；1.78±0.21比1.00， t＝7.129， P<0.05)；PINK1、Parkin和LC3B表达下调，LAMP2表达上调(0.41±0.23比1.00， t＝6.134， P<0.05；0.54±0.16比1.00， t＝7.182， P<0.05；0.45±0.23比1.00， t＝6.051， P<0.05；1.56±0.14比1.00， t＝7.109， P<0.05)。与I/R组比较，I/R+rAAv组血清Scr、BUN、LDH和MDA浓度降低，Kim-1表达下调[(78.32±12.24) μmol/L比(123.45±21.23) μmol/L， t＝5.137， P<0.05；(20.45±9.67) mmmol/L比(40.57±9.33) mmmol/L， t＝6.182， P<0.05；(45.27±10.46) U/L比(65.12±12.87) U/L， t＝5.891， P<0.05；(7.23±3.56) mmmol/L比(13.21±4.23) mmmol/L， t＝5.128， P<0.05；(4.67±1.65) nmol/L比(10.11±4.23) nmol/L， t＝6.871， P<0.05]；肾皮质ATP含量增多，E-cad表达上调及α-SAM表达下调(0.89±0.35比0.34±0.14， t＝7.598， P<0.05；1.11±0.45比1.78±0.21， t＝5.125， P<0.05)；PINK1、Parkin和LC3B表达上调；LAMP2表达下调(2.12±0.55比0.41±0.23， t＝6.678， P<0.05；2.78±0.33比0.54±0.16， t＝6.982， P<0.05；1.45±0.52比0.45±0.23， t＝6.571， P<0.05；1.01±0.20比1.56±0.14， t＝7.223， P<0.05)。与I/R组比较，I/R+sh组血清Scr、BUN、LDH和MDA浓度明显升高，Kim-1表达明显上调；肾皮质ATP含量明显减少，E-cad表达下调及α-SAM表达上调；PINK1、Parkin和LC3B表达下调，LAMP2表达上调。 结论:调控Parkin的表达且通过PINK1/Parkin-LAMP2线粒体-溶酶体自噬途径能减轻肾I/R损伤引起的EMT，其可能是逆转移植肾EMT的重要机制。

目的:探讨花旗松素（taxifolin，TAX）改善顺铂（cisplatin）致急性肾损伤的作用及机制。方法:（1）40只C57BL/6小鼠随机分为4组：对照组、TAX组、顺铂组、顺铂+TAX组。测量各组小鼠体重情况。检测各组小鼠血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平；通过HE染色观察小鼠肾组织病理学改变；通过酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定血清炎性因子白细胞介素（IL）-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平；通过试剂盒测定各组小鼠肾组织氧化应激指标[活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、还原型谷胱甘肽（GSH）]；实时荧光定量PCR法测定炎性因子 IL- 6、 TNF- α和 IL- 1β，抗氧化基因解耦联蛋白2（ UCP2）、 SOD2、 CAT以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（ PGC- 1α）mRNA表达情况；通过测定肾组织ATP水平和线粒体DNA（mtDNA）含量评价线粒体功能；通过Western印迹法测定腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和磷酸化（p）-AMPK蛋白表达情况。（2）通过建立Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型评价TAX对顺铂化疗效果的影响。 结果:与对照组比较，TAX组小鼠体重未明显降低，且未出现明显肾损伤（均 P>0.05），提示口服TAX具有良好的安全性。与顺铂组比较，TAX能够显著延缓顺铂引起的小鼠体重下降，降低小鼠血清Scr和BUN水平，并缓解肾组织病理学改变（均 P<0.05）。TAX能够显著下调顺铂诱导的小鼠血清炎性因子IL-6和TNF-α水平，以及肾脏炎性因子 IL- 6、 TNF- α、 IL- 1β mRNA表达（均 P<0.05）。TAX能够显著降低顺铂致急性肾损伤小鼠肾组织ROS和MDA水平，并提高SOD、CAT和GSH活性（均 P<0.01）。同时，TAX能够显著上调顺铂致急性肾损伤小鼠肾脏抗氧化基因 UCP2、 SOD2、 CAT mRNA以及 PGC- 1α mRNA表达，并提高肾组织ATP和mtDNA水平（均 P<0.01）。Western印迹结果显示，TAX显著促进顺铂致急性肾损伤小鼠肾脏AMPK磷酸化蛋白表达（ P<0.01）。此外，通过Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型证实，TAX对顺铂抗肿瘤疗效无显著影响。 结论:TAX能够改善顺铂引起的肾脏氧化损伤，其机制可能与激活AMPK/PGC-1α通路有关。

目的:探讨完全型圆头精子症患者临床表型、精子形态特征及辅助生殖技术治疗的效率。方法:收集2019年11月至2022年5月期间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心就诊的完全型圆头精子症患者（完全型圆头精子症组），采集外周血进行遗传学检测，全外显子测序挖掘致病基因，并对精液常规、精子形态及超微结构进行分析；全部患者均接受了卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）联合人工卵子激活（artificial oocyte activation，AOA）治疗。选取同日取卵的行常规ICSI周期患者作为对照组，并采用时差动态监测系统监测发育全程动态参数，分析2组受精及胚胎发育效率、发育动力学参数及临床治疗结局。结果:完全型圆头精子症组4例，对照组9例。完全型圆头精子症患者均合并精子活力低下、精子DNA碎片率升高，精子形态及顶体荧光染色均显示头部呈小圆形伴顶体区缺失；透射电子显微镜下圆头精子头部顶体完全缺失且多见核质松散、空泡化等异常，颈部线粒体鞘数量减少且排列杂乱，鞭毛轴丝“9+2”结构多见异常。4例患者中1例为 DPY19L2基因纯合缺失，1例为 DPY19L2基因新发纯合移码变异。完全型圆头精子症组受精率、双原核受精率、第3天优质胚胎率、第6天囊胚形成率、第6天优质囊胚形成率与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）；完全型圆头精子症组胚胎发育早期时间参数第二极体释放时间、原核消失时间，2至6-细胞各时期时间显著早于对照组且差异均有统计学意义（均 P<0.05），2组胚胎分裂模式差异无统计学意义（ P>0.05）。4例完全性圆头精子症患者中，2例新鲜胚胎移植各活产健康男婴1名，2例解冻周期移植活产健康男婴、女婴各1名。 结论:完全型圆头精子症患者精子形态学异常表型特征明显，ICSI联合AOA是有效的辅助生殖治疗手段。

心脏外科手术术中心肌缺血再灌注(ischemia and reperfusion，I/R)导致线粒体损伤，继而引起心肌细胞能量代谢改变、稳态破坏、活性氧产生和DNA损伤，激活心肌细胞凋亡和坏死信号，最终导致心肌功能障碍或心力衰竭。与以往I/R治疗靶点集中于某条通路或某个介质不同，自体线粒体移植(autologous mitochondria transplantation，AMT)将自身健康部位或器官组织的有呼吸活性的线粒体移植到I/R组织中，替代或修复已受损的线粒体，帮助组织和细胞功能恢复。近年来AMT在心肌I/R防治中取得了显著效果，本文就AMT在I/R心肌保护中的作用及机制进行综述。

缺血再灌注损伤会影响肝移植术后肝功能恢复，脂肪供肝则会加重上述情况。本文从细胞和分子角度分析了脂肪肝缺血再灌注损伤的发生机制，包括线粒体功能障碍，内质网应激和自噬的启动，泛素-蛋白酶体系统的失衡及各种效应分子等，为减少并预防肝脏移植术后缺血再灌注损伤的发生提供新的研究思路。

体外受精-胚胎移植（IVF-ET）女性可能经历反复着床失败。在“预培其损”理论指导下，中药复方可在IVF-ET前通过抗氧化应激、改善线粒体功能、减少细胞过度凋亡等途径，提高夫妻双方精卵质量以获取高质量胚胎；可促进血管生成、抗氧化应激、调节雌孕激素受体含量、调节免疫改善女性子宫内膜容受性，以利于胚胎植入；还可在移植后发挥补益脾肾、顾护胎元作用，以助着床，亦可缓解移植时患者的焦虑情绪。

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)在改善大鼠减体积移植肝脏的微循环中的作用。方法:贴壁法分离培养BMMSCs，转染HO-1/腺病毒(Adv)构建HO-1/BMMSCs。"二袖套"法建立大鼠原位50%减体积肝移植急性排斥反应模型，术后即刻分别注射生理盐水(NS)、BMMSCs或HO-1/BMMSCs单细胞悬液1 ml，观察存活的入组大鼠术后即刻、3、7和14 d的指标变化，每组每个时间点5只大鼠。通过生化检测线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶(mAST)的水平；化学比色法检测肝组织中Na ＋-K ＋-ATP酶活力；透射电镜技术检测术后7 d时的肝细胞线粒体超微结构；Power Lab检测肝移植术后7d时的门静脉压力；Western blot检测移植肝内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血管性假血友病因子(vWF)的表达水平；HE染色观察肝病理学改变；免疫组化观察肝组织vWF的表达情况；ELISA检测血清中透明质酸(HA)的水平。 结果:HO-1/BMMSCs能显著减轻50%减体积肝移植急性排斥反应模型中移植肝的病理损伤及排斥反应，改善线粒体损伤及能量代谢，同时能显著促进eNOS的表达，抑制iNOS的表达，降低门静脉压力，显著促进肝窦vWF的表达及HA的降解，保护肝窦内皮细胞，进而改善肝脏微循环，与NS组和BMMSCs组比较差异具有统计学意义( P<0.05)。 结论:HO-1/BMMSCs可以通过改善肝脏微循环，发挥保护大鼠减体积移植肝的作用。

肝移植是目前终末期肝病和肝功能衰竭等唯一有效的治疗手段，而移植术后发生的再灌注损伤在一定程度上影响着肝移植的成功率。缺血再灌注损伤（IRI）包括缺血和再灌注2个阶段，其发生涉及多种病理生理机制和细胞的活化，包括氧化应激、炎症细胞因子、钙超载、线粒体损伤、中性粒细胞和Kupffer细胞活化等，而活性氧在其中发挥着重要作用。细胞内活性氧主要来源于细胞质和线粒体。两种来源之间相互作用、相互促进。近年研究发现，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶（NOX）通过产生大量的胞质活性氧，介导氧化应激、免疫细胞活化和程序性细胞死亡等，参与肝脏IRI。本文对NOX在肝脏IRI中作用的最新研究进展（包括氧化应激、免疫细胞活化、及细胞凋亡、铁死亡等程序性细胞死亡）进行综述。

目的:研究电离辐射对胎肝与骨髓来源造血干/祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cells，HSPCs)的影响差异。方法:取14.5 d小鼠胎肝及8周龄小鼠骨髓，分选c-Kit +细胞体外接受 60Co单次5、10 Gy照射，检测HSPCs中细胞凋亡、线粒体活性氧(ROS)水平、集落形成能力、DNA损伤情况。将12只CD45.1背景的C57BL/6J小鼠按随机数表法分成骨髓组(BM)和胎肝组(FL)， 60Co全身照射，第1次4.5 Gy照射，间隔30 min后再进行第2次5 Gy剂量照射，6 h后进行移植，12周后检测嵌合率、谱系分化以及细胞周期。分选胎肝及骨髓的c-Kit +细胞检测线粒体压力。 结果:与骨髓HSPCs相比，照射后胎肝HSPCs的细胞凋亡比例显著升高( t＝16.21、12.27， P<0.05)，ROS水平显著增加( t＝68.72、18.89， P<0.05)；集落形成能力显著降低，在5 Gy时胎肝HSPCs成集落能力显著降低，照射剂量为10 Gy时完全不能形成集落( t＝12.41、15.67、9.46， P<0.05)；γ-H2AX免疫荧光染色结果显示，照射后胎肝HSPCs的DNA损伤更加严重，形成的Foci数量显著升高( t＝2.27、2.03， P<0.05)。这些结果表明，胎肝HSPCs对辐射更加敏感。移植结果显示，移植胎肝HSPCs的嵌合率低于骨髓细胞( t＝5.84， P<0.05)；在移植嵌合小鼠的骨髓与脾脏中，胎肝细胞组髓系细胞的比例高于骨髓细胞组，提示胎肝HSPCs体内重建能力低于骨髓HSPCs，并且更容易向髓系分化。细胞周期检测结果显示胎肝组S期比例显著高于骨髓组( t＝2.89， P<0.05)。线粒体压力结果显示胎肝HSPCs基础呼吸能力( t＝39.19， P<0.05)、质子泄漏( t＝6.64， P<0.05)、三磷酸腺苷(ATP)产生( t＝9.33， P<0.05)、耦联效率( t＝7.10， P<0.05)均高于骨髓c-Kit +细胞；呼吸储备能力( t＝5.53， P<0.05)低于骨髓细胞。 结论:利用多种方法对照射后胎肝及骨髓来源的HSPCs进行检测，明确了电离辐射对两种不同HSPCs功能的影响，为深入探索放射对不同发育阶段造血干细胞的影响奠定基础。

目的:探讨地屈孕酮（dydrogesterone，DYD）对植入窗期子宫内膜超微结构的影响。方法:前瞻性研究分析2020年7月至2022年7月期间于浙江省人民医院生殖医学中心行体外受精-胚胎移植（ in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）并符合纳排标准的患者资料，并对患者的子宫内膜进行扫描与透射电子显微镜检测。对因男性因素行IVF-ET的20例患者进行自身对照研究，比较自然周期和DYD 40 mg/d转化周期植入窗期子宫内膜超微结构的差异。同时采用自身对照研究，筛选原因不明反复种植失败（recurrent implantation failure，RIF）行IVF-ET患者（ n=43），比较不同剂量DYD（40 mg/d与80 mg/d）转化后内膜超微结构的变化。 结果:男性因素不孕患者自然周期与DYD转化周期的子宫内膜在转化日的超声厚度测量、回声分型和在植入窗期的胞饮突评分、核仁通道系统（nucleolar channel system，NCS）阳性率、分泌状态评分、线粒体数目和形态评分差异均无统计学意义（均 P>0.05）。RIF患者DYD 80 mg/d组的胞饮突评分（-46.26±19.97）、NCS阳性率［65.12%（28/43）］和线粒体形态评分［0（0，1）］均显著高于DYD 40 mg/d组［-67.62±15.94， P<0.001；39.53%（17/43）， P=0.043；0（0，0）， P=0.023］，而两组间子宫内膜厚度、回声类型、分泌状态评分及线粒体数目差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:口服DYD转化内膜可以构建与自然周期类似的植入窗期子宫内膜超微结构。80 mg/d DYD剂量可以改善RIF患者子宫内膜的胞饮突成熟度评分、NCS阳性率和线粒体形态评分。