调节性T细胞通过多种介质抑制致病性T细胞的激活和随后的效应功能，在机体免疫耐受机制中发挥关键作用，参与了多种自身免疫病的发生发展。叉头框蛋白P3（Foxp3）特异性表达于调节性T细胞，并可以维持调节性T细胞的增殖分化及其抑制功能，Foxp3 +调节性T细胞是目前已知的主导免疫耐受的淋巴细胞，研究发现多种药物可提高体内调节性T细胞水平，促进免疫耐受，最终抑制自身免疫。

目的:探讨卵巢上皮性癌（卵巢癌）患者腹水来源的外泌体对卵巢癌干细胞样细胞（OCS-LC）干性特征及侵袭能力的影响。方法:（1）采用无血清悬浮培养法诱导卵巢癌细胞系A2780细胞生成OCS-LC，并采用成球实验、分化功能实验以及流式细胞仪检测等方法鉴定OCS-LC的成球克隆生长、定向分化潜能、干性标志物CD 133表达等干性特征。（2）采用超速离心法提取卵巢癌来源外泌体（OCDE），包括卵巢癌患者腹水来源及A2780细胞来源的外泌体［即腹水来源外泌体（ADE）及细胞来源外泌体（CDE）］，采用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析（NTA）法测量外泌体粒径、蛋白印迹（western blot）法检测特异性蛋白分子热休克蛋白70（HSP-70）、CD 63、CD 9的表达等方法对外泌体ADE和CDE进行鉴定。（3）将ADE和CDE分别与OCS-LC共培养，即ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组，以磷酸盐缓冲液（PBS）与OCS-LC共培养作为空白对照组。通过观察3组OCS-LC的成球周期、最大球直径及成球率，评估各组OCS-LC的成球能力；采用免疫荧光染色法检测3组OCS-LC的干性标志物CD 133的表达；实时荧光定量PCR技术检测3组OCS-LC中干细胞转录因子八聚体结合转录因子4（Oct-4）和Nanog mRNA的表达；穿膜小室（transwell小室）实验检测3组OCS-LC的侵袭能力。 结果:（1）OCS-LC的鉴定：成球实验显示，OCS-LC单细胞悬液在无血清培养基中可二次成球生长；分化功能实验显示，OCS-LC细胞球在含血清培养基中改变生长方式，分化成呈贴壁生长的A2780细胞；流式细胞仪检测显示，OCS-LC中CD 133阳性（ CD133+）细胞的比例为（18.9±0.9）%，显著高于其对照（即A2780细胞）的（0.6±0.5）%（ t=38.570， P<0.01）。（2）OCDE的鉴定：透射电镜下观察，外泌体ADE和CDE均可见清晰的脂质双层膜结构，一侧呈凹陷的半球形或杯托样；NTA法测量显示，外泌体粒径主要在30~100 nm范围，平均粒径67.2 nm；western blot法检测显示，特异性蛋白分子HSP-70、CD 63、CD 9均呈阳性表达。（3）共培养后，成球实验显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组OCS-LC均可继续成球生长，其中ADE+OCS-LC组细胞呈现两种生长方式，大部分细胞继续维持干性成球生长，小部分细胞出现分化，呈贴壁生长；3组OCS-LC的成球周期分别为（15.3±1.5）、（10.3±0.6）、（6.7±0.6） d，细胞球最大直径分别为（100.3±3.2）、（145.2±5.1）和（170.0±2.1） μm，成球率分别为（1.05±0.20）%、（4.15±0.10）%和（10.45±0.25）%，3组分别比较，差异均有统计学意义（ P均<0.05），且CDE+OCS-LC组分别与ADE+OCS-LC组比较，差异也均有统计学意义（ P均<0.05）。免疫荧光染色法检测显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组，CDE+OCS-LC组OCS-LC细胞球中呈绿色荧光的 CD133+细胞数依次增多，3组OCS-LC细胞球中 CD133+细胞比例［分别为（26.6±1.5）%、（46.2±2.1）%和（58.4±2.2）%］比较，差异有统计学意义（ F=187.588， P<0.05），且CDE+OCS-LC组较ADE+OCS-LC组更高（ t=6.753， P<0.05）。实时荧光定量PCR技术检测显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组OCS-LC中Oct-4 mRNA的表达水平分别为1.04±0.12、3.46±0.24、4.03±0.31，Nanog mRNA表达水平分别为1.00±0.07、1.57±0.32、2.66±0.15，3组分别比较，差异均有统计学意义（ P均<0.05），且CDE+OCS-LC组均显著高于ADE+OCS-LC组（ P均<0.05）。transwell小室实验显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组的侵袭细胞数依次增多，分别为（30±5）、（102±4）、（210±7）个，3组比较，差异有统计学意义（ F=820.800， P<0.05），且CDE+OCS-LC组显著高于ADE+OCS-LC组（ t=23.202， P<0.05）。 结论:卵巢癌ADE能够增强和维持OCS-LC的干性特征，促进肿瘤细胞的侵袭转移，但CDE优于ADE。

骨肉瘤是起源于骨组织的高度恶性肿瘤，具有病死率高、预后差的特点。肿瘤微环境的异质性是影响骨肉瘤发生发展及预后的关键。单细胞测序技术通过鉴定骨肉瘤组织中的肿瘤细胞、免疫细胞和基质细胞的功能特征和基因表达模式，描绘了细胞间复杂的交互网络，是解析肿瘤微环境异质性的重要手段。应用单细胞测序技术的高分辨率优势，在骨肉瘤组织中鉴定了SPP1（+）巨噬细胞、C1QC（+）巨噬细胞和CLEC11A（+）B细胞等新的细胞亚型，它们在肿瘤微环境中起着促进肿瘤生长和侵袭的作用。通过对骨肉瘤干细胞亚群的鉴定，推测SERPINA1_CSCL1、FUS_CSCL2和SPP1_CSCL3这三群干细胞可能是骨肉瘤细胞的起源。运用单细胞测序发现mregDCs通过特异性表达CCR7、CCL17、CCL19和CCL22因子从而招募Treg细胞，促进免疫逃逸和肿瘤进展。此外，单细胞测序技术通过鉴定骨肉瘤耐药的潜在靶点，基于此建立耐药风险评分模型，为制定个性化的化疗方案提供依据。在疾病的预后方面，单细胞测序技术识别了骨肉瘤中与免疫浸润相关的基因（如 EPHX2、 FDPS、 GBP1、 MMD和 ZYX），并以此构建了骨肉瘤的预后分析模型，对预测患者的预后具有指导意义。

肝细胞癌（以下简称肝癌）是临床上最常见的肝脏原发性恶性肿瘤，其恶性程度高、易复发转移，患者预后极差。近年来，血小板在促进肝癌恶性进展中的作用受到广泛关注：一方面，血小板通过肿瘤微环境直接促进肝癌细胞增殖和侵袭；另一方面，血小板通过协助肿瘤细胞躲避免疫监视等途径促进肝癌细胞发生远处转移。此外，血小板特异性分泌的生长因子及促血管生成因子也直接或间接参与肝癌细胞增殖、侵袭以及肿瘤周围血管新生。另外，在大多数肝癌患者合并肝硬化的背景下，由于门静脉高压、脾功能亢进导致血小板减少是否会促进肝癌恶性进展仍无定论。基于血小板在肝癌中的作用，血小板及其相关评分在肝癌诊断和预后评估中的价值也成为研究的热点。笔者详细阐述血小板在肝癌恶性进展中的作用机制，以及血小板作为肝癌诊断和预后评估工具的最新研究进展，这对优化肝癌治疗方案和探讨新的肝癌治疗策略具有重要意义。

目的:探讨血红素加氧酶-1（HO-1）对巨噬细胞炎症反应的抑制作用及其机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7，取对数生长期细胞用于实验。将RAW264.7细胞分为4组。空白对照组细胞于37 ℃下95%空气、5% CO 2常规培养，不给予任何处理；脂多糖（LPS）模型组在培养基中加入1 mg/L的LPS制备LPS攻击模型；HO-1诱导组在培养基中加入30 μmol/L的HO-1诱导剂血红素孵育1 h后，再加入1 mg/L的LPS孵育；HO-1抑制组在培养基中加入5 μmol/L的HO-1特异性拮抗剂锌原卟啉Ⅸ（ZnPPⅨ）孵育0.5 h后，再加入1 mg/L的LPS孵育。各组加入LPS孵育48 h后取细胞上清液，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测HO-1、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）及线粒体自噬标志物微管相关蛋白1轻链3B（LC-3B）的蛋白表达；采用免疫荧光染色法检测活性氧（ROS）的表达。 结果:与空白对照组比较，LPS模型组细胞发生了一定的应激反应，出现线粒体自噬，但部分炎症因子表达受限，与细胞功能受损有关，表现为HO-1、IL-1β、LC-3B、ROS的蛋白表达均明显升高，而TNF-α、TXNIP、NLRP3的蛋白表达均明显降低，说明LPS攻击后细胞受损严重，模型制备成功。与LPS模型组比较，HO-1诱导组HO-1蛋白表达明显增加（HO-1/GAPDH：0.31±0.03比0.22±0.03， P<0.05），TNF-α、IL-1β、TXNIP、NLRP3、LC-3B、ROS蛋白表达均被明显抑制〔TNF-α蛋白（TNF-α/GAPDH）：0.08±0.01比0.45±0.05，IL-1β蛋白（IL-1β/GAPDH）：0.50±0.01比0.82±0.03，TXNIP蛋白（TXNIP/GAPDH）：0.21±0.02比0.28±0.02，NLRP3蛋白（NLRP3/GAPDH）：0.11±0.01比0.17±0.02，LC-3B蛋白（LC-3B/GAPDH）：0.67±0.04比0.92±0.12，ROS（荧光强度）：80.9±12.5比94.1±19.5，均 P<0.05〕，说明诱导HO-1表达可抑制炎症反应和氧化应激，减少线粒体自噬；而拮抗HO-1可促进炎症反应、氧化应激及线粒体自噬，表现为TNF-α、IL-1β蛋白表达被抑制程度较HO-1诱导组明显减轻〔TNF-α蛋白（TNF-α/GAPDH）：0.26±0.02比0.08±0.01，IL-1β蛋白（IL-1β/GAPDH）：0.76±0.01比0.50±0.01，均 P<0.05〕，且TXNIP、NLRP3、LC-3B、ROS蛋白表达均较LPS模型组明显增加〔TXNIP蛋白（TXNIP/GAPDH）：0.43±0.02比0.28±0.02，NLRP3蛋白（NLRP3/GAPDH）：0.24±0.02比0.17±0.02，LC-3B蛋白（LC-3B/GAPDH）：1.12±0.07比0.92±0.12，ROS（荧光强度）：112.0±17.0比94.1±19.5，均 P<0.05〕。 结论:HO-1可通过抑制TXNIP/NLRP3炎症小体活化减少炎症介质释放，从而降低炎症反应。

目的:对比分析小脑幕上胶质肉瘤与胶质母细胞瘤的临床特点。方法:回顾性分析华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科2011年4月至2018年9月收治的12例小脑幕上胶质肉瘤患者(胶质肉瘤组)和63例小脑幕上胶质母细胞瘤患者(胶质母细胞瘤组)的临床资料。两组患者均采用开颅肿瘤切除术，术后均行病理学检查。比较两组患者的一般资料、影像学及病理学资料。结果:两组的年龄和性别的差异均无统计学意义(均 P>0.05)。两组的肿瘤位置、体积、强化形式、瘤周水肿程度及瘤内囊变坏死间的差异均无统计学意义(均 P>0.05)，但胶质肉瘤组侵犯硬膜的占比高于胶质母细胞瘤组(分别为8/12、16/63， P<0.05)。胶质肉瘤组组织学上表现为典型的胶质瘤成分和间叶组织成分，其中胶质瘤成分的染色情况基本同胶质母细胞瘤组，肉瘤成分特异性表达网状纤维。两组在异柠檬酸脱氢酶1/2突变、1p杂合性缺失、19q杂合性缺失、1p/19q联合缺失、α地中海贫血伴精神发育迟滞综合征(ATRX)的致病基因突变、 p53突变及表皮生长因子受体活化突变间的差异均无统计学意义(均 P>0.05)，但胶质肉瘤组的Ki-67值高于胶质母细胞瘤组[分别为(32.3±14.2)%、(20.5±9.7)%， P<0.001]，且胶质肉瘤组发生 TERT启动子区突变的占比高于胶质母细胞瘤组(分别为6/8、8/37， P<0.05)，而发生 MGMT启动子区甲基化的占比低于胶质母细胞瘤组(分别为1/8、20/37， P<0.05)。两组在肿瘤切除程度方面的差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:胶质肉瘤与胶质母细胞瘤的影像学表现无明显差异，但胶质肉瘤易侵犯硬膜、Ki-67值较高、易发生 TERT启动子区突变、但不易发生 MGMT启动子区甲基化，其中的肉瘤成分特异性表达网状纤维。

目的:探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)联合长链非编码核糖核酸X染色体失活特异性转录本(LncRNA XIST)评估膀胱癌患者预后的价值。方法:选择2018年6月至2019年6月本院收治的膀胱癌患者52例作为观察组，另选择同期接受体检的健康者43例作为对照组。两组分别于术前和体检时采集空腹状态外周静脉血，测定血清VEGF、MCP-1、LncRNA XIST水平，并进行相关性分析。术后随访1年，记录术后6个月和1年生存率。根据受试者工作特征(ROC)曲线计算血清VEGF、MCP-1、LncRNA XIST预测膀胱癌患者生存的截断值，将患者分为VEGF、MCP-1、LncRNA XIST高表达组和低表达组，分析不同亚组患者的生存情况。结果:观察组的血清VEGF、MCP-1、LncRNA XIST水平显著高于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。VEGF表达水平与膀胱癌患者肿瘤最大直径、T分期、分化程度、肿瘤分级、局部肿瘤浸润深度、远处转移、淋巴转移有相关性( P<0.05)；MCP-1表达水平与膀胱癌患者T分期、分化程度、肿瘤分级、局部肿瘤浸润深度有相关性( P<0.05)；LncRNA XIST表达水平与膀胱癌患者T分期、分化程度、肿瘤分级、局部肿瘤浸润深度、淋巴转移有相关性( P<0.05)。血清VEGF、MCP-1联合LncRNA XIST检查对膀胱癌诊断及预后的评估价值均高于单项和双项检查(AUC＝0.909，95% CI：0.850~0.968；AUC＝0.682，95% CI：0.538~0.826)。VEGF、MCP-1和LncRNA XIST高表达组的膀胱癌患者术后1年生存率显著低于低表达组，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:血清VEGF、MCP-1联合LncRNA XIST检测有助于提高膀胱癌患者诊断率，且对预后具有一定评估价值。

目的:探讨可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNFα)单独检测和联合检测评价老年心力衰竭(心衰)患者预后作用。方法:回顾性选取2019年4月至2020年4月在天津市胸科医院心血管病河西医院诊区住院的128例老年心衰患者，根据随访1年内有无发生心衰再入院、全因死亡及心血管死亡事件，将患者分为预后良好组60例和预后不良组68例。记录患者的一般临床资料和常规化验检查指标，在入院时常规抽取sST2、IL-6和TNFα血清学指标检测，比较单项、两两联合、三项联合的结果，绘制受试者工作特征曲线(ROC)，分析其对心衰患者预后的预测作用。结果:预后不良组患者的sST2(29.4±7.7)mg/L、IL-6(23.1±45.7)ng/L和TNFα(30.9±82.1)ng/L，分别高于预后良好组的(25.0±9.1)mg/L、(22.5±49.1)ng/L、(13.5±22.3)ng/L( t值分别为2.42、－2.32、－2.37，均 P<0.05)。sST2、IL-6及TNFα单项检测对心衰的预后的比较，ROC下面积(AUC)分别为0.636、0.619、0.622(均 P>0.05)；检测特异性sST2(56.7%)高于IL-6(51.7%)和TNFα(46.7%)，差异有统计学意义( P<0.05)，检测敏感度TNFα(80.9%)高于sST2(64.7%)、IL-6(79.4%)，差异有统计学意义( P<0.05)；两两联合检测的预测结果提示sST2+TNFα较其余两个指标组合的AUC值更高(均 P<0.05)，sST2+IL-6+TNFα的联合检测AUC及特异性均高两两联合(均 P<0.05)。 结论:sST2+IL-6+TNFα的联合检测在预测老年心衰患者1年预后方面表现良好，临床推广可行性高。

目的:探究调强放疗联合化疗对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清细胞增殖抗原(PCNA)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)、可溶性E-钙黏蛋白(SE-CAD)表达变化及与预后的关系。方法:选取2016—2018年南京医科大学附属淮安第一医院收治的晚期NSCLC患者84例(Ⅲ A、Ⅲ B、Ⅳ期分别为29、30、25例)，均给予调强放疗联合化疗。检测对比不同TNM分期、治疗前后血清PCNA、TSGF、SE-CAD水平，并比较不同疗效患者血清PCNA、TSGF、SE-CAD水平。采用 Logistic法分析血清PCNA、TSGF、SE-CAD水平与疗效关系。 Kaplan- Meier法生存分析。 结果:Ⅳ期患者疗前血清PCNA、TSGF、SE-CAD水平高于Ⅲ B和Ⅲ A期[(584.11±60.25) pg/ml∶(531.06±51.37) pg/ml和(477.54±46.49) pg/ml、(96.13±7.54) U/ml∶(88.52±5.91) U/ml和(82.41±5.0) U/ml、(3.02±0.26) ng/ml∶(2.87±0.22) ng/ml和(2.71±0.15) ng/ml，均 P<0.05]，Ⅲ B期高于Ⅲ A期(均 P<0.05)。疗后血清PCNA、TSGF、SE-CAD水平低于疗前水平[(396.11±50.23) pg/ml∶(528.37±75.09) pg/ml、(74.81±4.72) U/ml∶(88.68±6.13) U/ml、(1.92±0.24) ng/ml∶(2.86±0.31) ng/ml，均 P<0.05]。疗后18个月生存患者PCNA、TSGF、SE-CAD水平低于死亡患者[(332.51±54.32) pg/ml∶(444.92±60.07) pg/ml、(70.59±6.20) U/ml∶(78.05±8.44) U/ml、(1.71±0.24) ng/ml∶(2.08±0.27) ng/ml，均 P<0.05]。血清PCNA、TSGF、SE-CAD水平与预后显著相关(均 P<0.05)。84例NSCLC患者疗后客观缓解率为29%(24/84)。疗后血清血清PCNA、TSGF、SE-CAD高表达组生存曲线低于低表达组(均 P<0.05)。 结论:血清PCNA、TSGF、SE-CAD水平在晚期NSCLC患者中呈高表达，与临床分期、预后密切相关，且有助于预测生存状况。

目的:探讨吉非替尼治疗表皮生长因子受体（EGFR）阳性晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的效果。方法:选取2016年3月至2020年1月解放军联勤保障部队第九○四医院收治的60例EGFR阳性晚期NSCLC患者，采用随机数字表法分为吉非替尼治疗组（30例，采用吉非替尼治疗）和联合治疗组（30例，采用培美曲塞联合顺铂治疗），比较两组患者疗效、治疗前后肿瘤标志物[血清癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段抗原（CYFRA21-1）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）]水平、不良反应情况及6个月总生存（OS）率。结果:吉非替尼治疗组临床控制率高于联合治疗组[76.7%（23/30）比50.0%（15/30）， χ2＝4.593， P＝0.032]。两组治疗前CEA、CYFRA21-1、NSE水平差异均无统计学意义（均 P>0.05），治疗后吉非替尼治疗组CEA、CYFRA21-1、NSE水平分别为（902±41）μg/L、（3.1±0.4）ng/ml、（17.7±2.3）ng/ml，联合治疗组分别为（999±51）μg/L、（4.0±0.5）ng/ml、（19.4±3.1）ng/ml，吉非替尼治疗组均低于联合治疗组（ t＝7.441， P<0.01； t＝7.459， P<0.01； t＝2.486， P＝0.016）。两组治疗后CEA、CYFRA21-1、NSE水平较治疗前均降低，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。两组皮疹、血小板减少、消化道反应、蛋白尿发生率比较，差异均无统计学意义[26.7%（8/30）比23.3%（7/30）， χ2＝0.089， P＝0.766；16.7%（5/30）比13.3%（4/30）， χ2＝0.131， P＝0.718）；30.0%（9/30）比26.7%（8/30）， χ2＝0.082， P＝0.774；10.0%（3/30）比13.3%（4/30）， χ2＝0.162， P＝0.688]。吉非替尼治疗组治疗后6个月OS率为93.3%，联合治疗组为83.3%，两组差异无统计学意义（ χ2＝1.456， P＝0.228）。 结论:吉非替尼治疗EGFR阳性晚期NSCLC患者可增强抗肿瘤效果，降低肿瘤标志物含量，且安全性良好。