本文回顾性分析2013年9月至2019年9月华中科技大学同济医学院附属同济医院4例经病理证实的肝包膜下脾组织植入患者的临床及影像资料，4例患者中1例有既往胰腺低分化腺癌并行胰腺体尾部及脾脏切除病史，2例有脾外伤病史。共6个脾种植结节，均位于肝包膜下，病灶最大径1.8~4.8（2.9±1.2）cm，边界清楚。CT平扫示结节密度稍低于肝脏，增强后动脉期明显强化，强化程度高于肝组织；延迟期强化程度减低，和肝组织密度相似或稍低。相对于脾结节及肝脏，植入脾组织包膜在动脉期强化稍低、静脉期及延迟期强化逐渐明显。MRI平扫示植入脾组织与正常脾脏信号相仿，T 1WI呈低信号，T 2WI呈均匀高信号，强化方式同CT增强，DWI示扩散明显受限。本研究提示有脾脏手术或脾外伤史患者，肝包膜下见界清结节，动脉期明显强化，边缘见渐进强化包膜，应考虑脾组织植入可能，以避免不必要的手术。

目的:探讨非血缘脐带血移植(UCBT)治疗儿童复发难治性EB病毒相关噬血细胞综合征(EBV-HLH)的临床经验及疗效。方法:回顾性分析2015年9月郑州大学第一附属医院儿科诊治的1例复发难治性EBV-HLH合并肠穿孔，最终接受UCBT治愈患儿的临床资料，并进行文献复习。结果:患儿，男，1岁6个月，因"发热15 d，皮疹9 d"为主诉入院，主要表现为高热，肝、脾、淋巴结大，快速进展的全血细胞减少、肝功能损害，骨髓涂片可见吞噬血细胞，2015年9月确诊为EBV-HLH，按国际组织细胞协会制定的HLH-2004方案化疗，维持期间2次复发，给予挽救性二线方案"培门冬酰胺酶、阿霉素脂质体、依托泊苷、甲泼尼龙"(L-DEP方案)化疗，化疗后评估噬血细胞综合征指标完全缓解，突发肠穿孔，紧急外科手术行小肠造瘘术，病情稳定后，给予"氟达拉滨+白消安+环磷酰胺"方案(Flu+BU+CY方案)预处理后行UCBT，全程静脉营养支持，移植后第13天中性粒细胞植入，第35天血小板植入，嵌合率为100%，植入成功；移植后第15天出现肝小静脉闭塞征，移植后第22天出现真菌性肺炎，移植后第26天出现皮肤移植物抗宿主病(GVHD)Ⅱ度，给予相应治疗好转；移植后第49天行二期肠造瘘关瘘术；现随访至移植后70个月，患儿一般状况良好，病情持续缓解，无慢性GVHD及其他合并症。结论:异基因造血干细胞移植可能是治疗儿童复发难治性EBV-HLH的唯一有效手段；无合适同胞或非血缘供者时，非血缘脐带血干细胞可作为移植物来源；肠穿孔术后肠造瘘不是移植禁忌。

异位脾种植是指由于脾外伤或脾切除术后所引起的脾脏自体种植，可发生于盆腔、胸腔和腹腔等部位。本文介绍1例胃镜下发现胃底肿物8个月余，行内镜黏膜下剥离术治疗后诊断为胃底异位脾脏患者的诊治情况。

[目的]探讨脱细胞骨基质/磷酸钙/半水硫酸钙(ACBM/CPC/CSH)复合人工骨材料的生物相容性及成骨性能.[方法]物理混合法合成ACBM/CPC/CSH复合人工骨材料,制备材料浸提液,用于急性、亚急性毒理、热原和表皮刺激实验.材料肌肉埋植实验,第7、14和21 d取材组织病理学检查,观察肌肉炎症反应;第14 d取材行流式细胞检查,观察血液与组织CD4+、CD8+T淋巴细胞含量变化,CCK-8法检测细胞毒性.建立大鼠股骨髁骨缺损模型,分别植入ACBM/CPC/CSH骨材料组(材料组)、磷酸钙/半水硫酸钙(CPC/CSH)(对照组)和不植任何材料(空白组),观察成骨情况.[结果]浸提液未引起小鼠急性与亚急性毒理反应,体重变化差异无统计学意义(P＞0.05).热原实验体温正常.表皮注射实验72h内皮肤未出现红斑.肌肉埋植实验,第7d肌肉组织有轻微炎症反应,21 d炎症消失;第14d流式细胞学检查,材料组、对照组和空白组外周血CD4+[(9.6±1.8)vs(10.1±1.2)vs(10.7±1.4),P=0.470],CD8+[(9.5±1.1)vs(10.3±1.8)vs(10.5±1.7),P=0.249];脾脏 CD4+[(18.1±1.5)vs(17.2±7.3)vs(17.5±1.0),P=0.195],CD8+[(8.8±7.2)vs(7.7±7.6)vs(7.8±7.2),P=0.359]淋巴细胞含量差异无统计学意义(P＞0.05).X 线片与Micro-CT结果显示,各组骨缺损均有不同程度修复,ACBM/CPC/CSH骨材料修复效果最佳.[结论]ACBM/CPC/CSH复合人工骨材料具有良好的生物相容性和体内成骨性能,有利于不规则骨缺损的修补.

目的 探讨亮菌口服液中亮菌多糖对结肠癌、黑色素瘤和肉瘤等恶性肿瘤生长、增殖和侵袭的影响.方法 离体水平分别对人结肠癌细胞系HCT116细胞和鼠转移性黑色素瘤细胞系B16-F10细胞加入不同浓度(10μg·mL-1、100 μg·mL-1和250 μg·mL-1)的亮菌多糖(亮菌口服液中提取),采用MTT法检测亮菌多糖对结肠癌、黑色素瘤的细胞毒性作用.在体水平选取BALB/c雌性小鼠24只,分别随机设置肉瘤荷瘤对照组(将浓度为2×106 cells/500 μL的肉瘤腹水肿瘤细胞,经皮下植入小鼠左腋窝)、低剂量亮菌多糖干预组(腹腔注射25 mg·kg-1)和高剂量亮菌多糖干预组(腹腔注射50 mg·kg-1),分析不同浓度亮菌多糖对荷瘤小鼠外周血生化指标及肝、肾组织病理形态的影响.结果 10 μg·mL-1、100 μg·mL-1和250μg·mL-1硫酸化亮菌多糖未能显著抑制上述肿瘤细胞的生长(P＞0.05);25 mg·kg-1和50 mg·kg-1的亮菌多糖对肿瘤生长抑制均强于对照组,诱导荷瘤小鼠脾脏重量及外周血的血小板计数、AST水平增加均高于对照组(P＜0.05).结论 在体水平下,亮菌多糖可延缓肉瘤在荷瘤小鼠体内的生长和增殖,且对荷瘤小鼠没有显著的肝肾毒性,但对结肠癌、黑色素瘤的生长的影响不大.

目的 体外构建基于脾脏脱细胞支架的组织工程肝脏,并探索其理想的体内植入策略.方法 获取健康SD大鼠脾脏,采用低温冻融结合十二烷基硫酸钠灌注法制备脾脏脱细胞支架(DSM).Seglen改良两步胶原酶灌注法获取大鼠原代肝细胞,经脾动脉再植入DSM内体外构建组织工程肝脏.以SD大鼠为受体,比较异位血管吻合移植、肝断面缝合移植、肝内嵌入移植以及肠系膜包裹移植4种策略的优缺点.结果 肝细胞支架种植率为(74.5±7.7)％,HE染色与扫描电镜显示细胞状态良好,免疫荧光染色证实细胞正常表达ALB、G6Pc.异位血管吻合移植手术难度高,围手术期死亡率高达33.3％,术后6h支架内形成大量血栓;肝断面缝合无法迅速建立充分血供,术后3d未见成形移植物;肝内嵌入移植法细胞最长可存活14d;肠系膜包裹移植术后14d时支架内细胞存活率为(38.3±7.1)％.结论 利用DSM构建的组织工程肝脏能部分表达肝细胞特异性功能,肠系膜包裹移植策略简单安全有效,是目前可行的体内移植方式.

目的 通过两种国产成形环动物实验的病理学分析,探索建立规范的成形环临床前体内实验的病理评价方法.方法 通过外科手术将两种国产瓣膜成形环及其对照产品分别植入17只(实验组)和5只(对照组)成年小尾寒羊的二尖瓣位或三尖瓣位,术后20周处死羊,通过大体观察、组织病理学和扫描电镜等方法观察手术相关损伤、成形环的完整性、炎性反应、内皮化和纤维鞘形成、纤维组织过度生长、血栓形成等情况,对于心、肝、脾、肺、肾、脑等脏器梗死和感染等情况进行评估,对实验终点前死亡的羊进行死因分析,判断死亡与成形环的关系,从而评价其安全性.结果 所有羊的成形环植入位置准确,成形环完整,未见折断或裂开,未见瓣叶及冠脉等手术损伤.除4只羊(实验组3只、对照组1只)分别于术后2、11、12和13周死亡外,术后满20周的羊,成形环表面纤维鞘均较完整,未见血栓及纤维组织过度生长.成形环周围见少量淋巴细胞及多核巨细胞浸润,实验组1例炎性反应较重,可见中性粒细胞.实验组成形环表面内皮化率[(92.0±8.1)％]与对照组内皮化率[(97.0±2.4)％]的差异无统计学意义(P=0.081).6例可见小灶心肌坏死,1例小灶肾梗死,1例自发性肉芽肿性肝炎.未达实验终点的4只羊均死于肺部感染,其中3只羊(实验组2只,对照组1只)纤维鞘不完整,内皮化率5％ ～60％,1只(实验组)血栓形成,1只小灶心肌坏死.结论 针对瓣膜成形环的规范的病理评价应在不同的形态学水平对产品完整性、局部组织相容性和远端器官并发症等方面进行系统的观察,并注意鉴别手术操作、术后感染及植入材料不良反应与术后并发症或动物死亡的关系,客观、准确地评价植入材料的安全性.

目的:观察载异烟肼、利福平、吡嗪酰胺/乙酰乙酸(HRZ/PLGA)涂层的自体髂骨修复兔脊柱结核骨缺损的病理学特点,以及材料对外周脏器的组织毒性.方法:将60只新西兰兔脊柱结核模型随机分为3组,每组20只,彻底病灶清除术后,A组(实验组)植入载HRZ/PLGA抗结核药缓释涂层的自体髂骨;B组(对照组)植入载空白涂层的白体髂骨;C组(空白对照组)单纯植入自体髂骨.术后第2、4、8、16周时各组随机抽取5只兔,取术区组织进行解剖大体观察和病理切片显微镜下观察,从组织病理学角度观察植骨界面愈合情况及植骨材料降解情况;术后第2周、4周留取A组兔的心、肝、脾、肾脏器制作病理标本观察抗结核缓释涂层材料对外周脏器有无组织毒性;术后第2、4、8、16周对A组(实验组)兔进行影像学检查(X线、CT、MRI),观察植骨融合情况.结果:解剖大体观察发现,A组兔观察至术后16周时,骨缺损处已由致密而规则的骨组织替代,硬度与周围骨组织相似,植骨界面已达骨性愈合,植骨材料的降解与整合已基本完毕;B、C组部分兔在观察至术后16周时可见椎旁淡黄色脓性物质形成,骨缺损处瘢痕增生明显,病变性骨桥形成,骨桥及邻近椎体可见虫蚀样破坏及缺损.镜下观察发现,A组兔观察至术后16周时骨缺损处板层骨及小梁骨生成增多,骨细胞增殖活跃,骨细胞形态及骨小梁结构完整并趋向成熟,未见炎性细胞及坏死物质形成;B、C组兔在观察至术后16周时有较多不规则的成骨细胞及纤细的骨小梁形成,新生骨小梁间可见炎性细胞聚集,部分有坏死物质形成.通过影像学观察A组实验兔的植骨愈合情况,至术后16周时,骨-材料界面结合紧密,植骨融合良好.对三组术后各时间点骨-材料界面的病理切片做骨小梁面积定量分析,观察至术后8周及16周时,A组骨小梁面积显著高于B组及C组(P＜0.01).综上观察指标,A组兔脊柱结核病灶骨-材料界面愈合过程优于B组及C组(P＜0.05).术后2周、4周时镜下观察A组兔的心、肝、脾、肾组织,均未见外周脏器损伤.结论:在病理学层面观察,载缓释抗结核药HRZ/PLGA涂层的自体髂骨植入兔脊柱结核骨缺损后有助于促进局部骨缺损的修复和病灶的治愈,对外周脏器无明显组织毒性,是一种良好的局部抗结核缓释材料.

目的 探讨雷帕霉素(RAPA)诱导过继性输注的耐受性树突状细胞(DCs)对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的治疗效果.方法 分离15只BALB/C雄性小鼠(MHC为H-2Kd)的骨髓细胞及脾细胞,输注入经8.5Gy辐射处理(TBI照射)的30只雄性C57BL/6J小鼠(MHC为H-2Kb)中建立aGVHD模型(BALB/C→C57BL/6J);为验证aGVHD造模是否成功,将C57BL/6J小鼠分为MHC不合移植组、MHC相合移植组及单纯TBI照射组(10只/组),3组小鼠经8.5 Gy TBI照射后分别输入BALB/C来源骨髓细胞及脾细胞、C57BL/6J来源骨髓细胞及脾细胞及同等体积PBS对照,采用流式细胞术检测供鼠植入比例并观察受鼠存活情况.体外培养受鼠骨髓来源DCs,加入RAPA以诱导耐受性DCs(RAPA-tDCs),加入PBS作为对照DCs(PBS-DCs).将aGVHD模型鼠随机分为3组(10只/组),分别是RAPA-tDCs实验组(静脉输注RAPA-tDCs 4 ×106/只)、PBS-DCs对照组(静脉输注PBS-DCs 4 ×106/只)及PBS对照组(静脉输注PBS);采用活体荧光成像观察DCs在aGVHD小鼠体内的迁移、分布情况;同时监测3组小鼠的平均体重波动并统计生存率,评价RAPA-tDCs对小鼠aGVHD的抑制效果.结果 流式细胞术检测:与PBS-DCs组小鼠比较,RAPA-tDCs组小鼠DCs表面的CD40、CD80、CD86和MHCII表达丰度明显受到抑制(P＜0.05);2组小鼠DCs表面趋化因子受体CCR1平均荧光强度(MFI)为14.5±1.4vs.10.0±2.1,表面趋化因子受体CCR5为12.7±2.3 vs 7.2±1.2(P＜0.05),表面趋化因子受体CCR7为7.8±1.3vs.6.2±2.5(P＞0.05).活体成像分析:RAPA处理不影响DCs在体迁移能力,RAPA-tDCs仍可归巢至淋巴结、脾脏等淋巴组织或器官.PBS-DCs组和RAPA-tDCs组aGVHD小鼠在移植后19d体重(g)下降-2.4±1.5 vs-1.9±1.2(P＜0.05),生存期(d)延长10.1±5.5 vs 16.6±6.7(P＜0.05),但各组小鼠最终均全部死亡,整体生存率无差异.结论 RAPA可通过抑制小鼠DCs表面共刺激分子的表达诱导DCs耐受,过继性RAPA-tDCs仍具备一定的T细胞富集区归巢能力;过继性输注RAPA-tDCs可一定程度缓解小鼠aGVHD,延长小鼠生存期,但对其整体存活率无明显改善.

目的 以颅骨缺损植入钛网的新西兰兔为观察对象, 检测钛离子在体内的释放及变化趋势, 为钛金属在临床安全应用提供实验依据.方法 选择健康新西兰兔48只, 雌雄各半, 兔龄34个月, 体质量2.53.5 kg.制作颅脑缺损模型, 分为对照组和实验组.对照组24只, 均未植入钛修复体;实验组24只, 行钛网修补, 随机分为4组 (依据术后1、3、6、12个月划分), 每组6只.采用电感耦合等离子体质谱分析仪 (ICP-MS) 测定血清、尿液、毛发及肝、脾、肺、肾、脊髓等钛离子浓度, 对相关临床资料进行比较.结果 钛植入体术后血清和尿液中钛离子浓度较术前明显升高, 术后16个月与术前比较, 差异有统计学意义 (P＜0.05), 其中血清钛离子浓度[ (87.13±10.51) ng/mL]在术后第3个月达到最高, 尿液钛离子浓度[ (68.32±18.22) ng/mL]在术后第1个月达到最高, 随后下降并均在术后第12月钛离子水平逐渐接近术前, 差异无统计学意义 (P＞0.05);术后肺、肝、肾、脾、脊髓、淋巴结中钛离子水平较对照组有明显升高, 差异有统计学意义 (P＜0.05).术后1个月内脏组织器官钛离子浓度均达到最高值, 术后有下降趋势.其中脊髓的钛离子浓度在术后1、3、6、12个月[ (3.64±0.15) μg/mL、 (2.43±0.17) μg/mL、 (1.87±0.34) μg/mL、 (1.76±0.19) μg/mL]均高于其他内脏组织.结论 钛植入体在新西兰兔体内是相对安全的, 远期需要建立一个人体相对安全的钛离子浓度检测体系.