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微流控芯片在眼科基础与临床研究中的应用进展
编辑人员丨4天前
微流控芯片是一门多学科交叉技术。其中,微流控器官芯片技术飞速发展通过在微米量级对细胞和微环境进行精确调控,模拟体内生理环境,克服传统动物模型和细胞培养技术的不足。在眼科领域,微流控器官芯片模型主要集中在仿生角膜、视网膜和眼后房等以进行干眼、青光眼、年龄相关性黄斑变性和糖尿病视网膜病变等疾病模型的研究。另外,控芯片实现对泪液、眼内液标志物的连续监测和即时诊断已成为当下的研究热点。微流控芯片在药物分析、药物研发与筛选领域还具有广泛的应用前景。本文对近年来微流控芯片在眼科体外模型构建、即时检测和药物分析等应用方面的进展和不足进行总结,并对其未来的发展方向进行展望。
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编辑人员丨4天前
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不同血小板配型方案在血小板输注无效患者中的输注效果分析
编辑人员丨4天前
目的:分析不同血小板配型方案在血小板输注无效(PTR)患者中的输注效果。方法:回顾性分析2021年1至12月太原市血液中心接收的PTR患者94例,其中男26例,女68例,年龄[ M( Q1, Q3)]为53(34,66)岁。采用ELISA进行血小板抗体筛查,对于人类白细胞抗原(HLA)-Ⅰ类抗体阳性患者,利用Luminex平台液相芯片法鉴定抗体特异性,在本实验室建立的血小板供者基因数据库中寻找其特异性抗体对应等位基因表达抗原缺失的血小板;对于HLA-Ⅰ类抗体筛查阴性患者,通过聚合酶链反应-序列特异性核苷酸探针(PCR-SSO)技术进行HLA-A、B位点中、高分辨等位基因分型,采用HLA交叉反应组基因型配型方案,从血小板供者基因数据库中寻找相容性血小板或直接根据血清学交叉配型结果进行选择。统计分析不同错配位点组以及不同配型方案组的血小板计数增长值(PCI)达标率和输注总有效率。 结果:在94例PTR患者中检出血小板抗体39例,阳性率为41.5%,抗体特异性全部为HLA-Ⅰ类抗体,其中1例伴人类血小板抗原(HPA)抗体。采用规避抗体配型法为39例HLA-Ⅰ类抗体阳性患者提供了134次相容性血小板,输注总有效率为97.8%(131/134);HLA-A抗原错配、HLA-B抗原错配及HLA-A、B抗原同时错配组的PCI达标率分别为81.6%(31/38)、86.5%(32/37)、78.6%(22/28),输注总有效率分别为97.4%(37/38)、94.6%(35/37)、100%(28/28),差异均无统计学意义(均 P>0.05)。采用HLA抗原交叉反应组基因型配型和血清学交叉配型方法为55例HLA-Ⅰ类抗体筛查阴性患者提供了118次相容性血小板,随访收集到输注效果90次,输注总有效率为76.7%(69/90)。 结论:联合使用血小板不同配型方案可提高PTR患者的PCI达标率和输注总有效率。
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编辑人员丨4天前
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基因组时代临床医生如何做到精准诊断遗传性肾脏病
编辑人员丨4天前
虽然临床医生通过诊断性实验室(遗传检测机构或实验室)所提供的新的遗传学技术如二代测序及染色体芯片等极大地提高了对遗传性肾脏病的诊断,然而,要做到精准诊断此类疾病,首先需要临床医生能识别出可能的此类疾病患者,然后在熟知各种遗传检测方法的基础上依据患者表型选择恰当的分子诊断技术手段和合适的组织标本进行检测,获得的遗传检测报告需结合患者的表型、可能的遗传模式以及共识指南等进行临床解读,与此同时发挥研究性实验室功能,通过应病而设的技术方法解决诊断性实验室无法解决的特殊问题,最终为患者及其家庭提供精准诊治意见。
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编辑人员丨4天前
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我国结核病定点医疗机构实验室检测能力调查分析
编辑人员丨4天前
目的:了解我国结核病定点医疗机构实验室检测技术的开展能力和质量.方法:本研究基于中国疾病预防控制中心结核病防治临床中心2023年开展的"全国结核病医疗机构防治体系和运行机制研究"收集的结核病医疗机构相关数据,通过与2015年结核病定点医疗机构调查数据进行比较,以分析结核病实验室检测技术开展的情况和趋势.两次调查同时覆盖单位共46家,包括综合性医院、传染病院、院所合一的结核病防治机构、公共卫生中心和结核病专科医院.结果:纳入的46家结核病定点医疗机构中包括省级机构19家(41.3%)和地市级机构27家(58.7%).调查机构2022年平均门诊人次为16 424例次,其中耐多药/利福平耐药结核病门诊185例次;平均收治结核病患者1460例,其中收治耐多药/利福平耐药结核病患者131例.在实验室检测开展方面,调查机构2022年实验室检测主要以涂片、培养和药物敏感性试验三大常规检测技术为主.从不同机构类型来看,三级甲等医疗机构在PCR检测(70.8%,17/24)、基因芯片检测(37.5%,9/24)、分子菌种鉴定(58.3%,14/24)的开展率方面明显高于其他等级医疗机构[分别为 27.3%(6/22)、4.5%(1/22)和 22.7%(5/22);x2=8.712、5.518 和 6.002,P=0.003、0.019和0.014],且在传统结核病实验室检测技术(痰涂片、痰培养、传统药物敏感性试验)开展的总体工作量[分别为19 825(11 253,38 363)、13 266(4164,24 213)和1264(534,2523)例次]均明显高于其他等级医疗机构[分别为 8072(2132,17 239)、2292(1076,10 075)和 323(101,1572)例次;Z=-2.452、2.702 和-2.225,P=0.014、0.007和0.026].从地区分布来看,仅高分辨率熔解曲线开展率检测东部地区(35.3%,6/17)略低于中部地区(76.5%,13/17),差异有统计学意义(x2=6.494,P=0.039).从历年变化来看,2022年GeneXpert MTB/RIF检测(93.5%,43/46)、基因芯片检测(21.7%,10/46)等简便、快速的诊断技术较2014年[开展比例分别为41.3%(19/46)和 8.7%(4/46)]应用更为广泛,且 GeneXpert MTB/RIF 检测[2014 年诊断 38(11,150)例次;2022 年诊断2485(856,8349)例次;Z=-3.724,P<0.001]、抗体检测[2014 年诊断 500(200,1010)例次;2022 年诊断 3401(1066,7275)例次;Z=-4.235,P<0.001]等技术的诊断工作量呈上升趋势.在实验室质控方面,培养技术的质量控制仍然是需要重点关注的领域,2022年仅有76.1%(35/46)的医疗机构被室间质控,且参与最多的为第三方机构质控[74.3%(26/35)].结论:2014年以来,我国结核病定点医疗机构的实验室检测能力有了不同程度的提升,特别是分子生物学检测能力有了显著的发展,在关注结核病实验室检测能力建设的基础上,实验室工作质量是未来重点关注领域.
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编辑人员丨4天前
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骨髓增生异常肿瘤伴单纯5q-进展为肥大细胞白血病-骨髓增生异常肿瘤1例临床分析并文献复习
编辑人员丨4天前
目的:探讨骨髓增生异常肿瘤(MDS)伴单纯5q-进展为肥大细胞白血病(MCL)-MDS患者的临床特征及诊治,并进行相关文献复习。方法:选择2021年4月6日广元市中心医院血液科收治的1例MDS伴单纯5q-进展为MCL-MDS的66岁男性患者为研究对象。采用回顾性分析方法,对本例患者的病史、临床特征、实验室及辅助检查结果等临床资料进行分析。根据患者临床表现、实验室及辅助检查结果,对其进行诊断和治疗。对本例患者的随访截至2022年12月9日。本研究以"骨髓增生异常综合征""骨髓增生异常肿瘤""肥大细胞白血病""原癌基因蛋白质类c-kit""5q-"" ASXL1""myelodysplastic syndromes""myelodysplastic neoplasm""mast-cell leukemia""proto-oncogene proteins c-kit"为中、英文关键词,在中国知网数据库、万方数据服务知识平台及PubMed数据库中检索MCL-MDS患者相关文献,并对文献报道的MCL-MDS患者进行分析和总结。文献检索时间为2001年1月1日至2022年12月8日。本研究获得广元市中心医院伦理委员会审批(批准文号:GYZXLL202379),并与患者签署临床研究知情同意书。 结果:①本例患者因"气促、乏力5个月,加重1 +个月"入院。院外就诊时发现血红蛋白(Hb)值显著降低,予悬浮红细胞输注后症状好转,但是气促、乏力症状反复。②入院后本例患者血常规检查结果示,大细胞性贫血,Hb值为41 g/L,平均红细胞体积(MCV)为119.7 fL。腹部彩色多普勒超声检查结果示,轻度脾大。骨髓细胞形态学检查和骨髓病理活组织检查结果示,红系、粒系、巨核系均存在病态造血。核型分析结果显示5q-。MDS全基因组芯片检测结果显示,5q-嵌合。二代测序结果示,存在 ASXL1、 KIT突变。③本例患者被诊断为MDS伴单纯5q-、 KIT及 ASXL1突变。予地西他滨(10 mg/d×7 d,6周为1个疗程)+来那度胺(10 mg/d×21 d,4周为1个疗程)治疗7个疗程后,患者病情好转,脱离输血依赖,Hb值维持为88~90 g/L。2022年1月起继续接受来那度胺单药治疗(25 mg/d),并定期复查,Hb值为80~90 g/L,无其他血细胞减少症状。13个月后患者出现皮疹、乏力、腹痛。再次行腹部彩色多普勒超声检查结果示,脾体积明显增大(长径为18 cm)。复查骨髓涂片细胞学、骨髓细胞流式细胞术(FCM)免疫分型及骨髓活组织检查发现异常肥大细胞。依据患者临床表现及相关检查结果,本例患者被诊断为MCL-MDS,予达沙替尼(100 mg/d)联合DA3+7(柔红霉素40 mg/d,d1~3+阿糖胞苷100 mg/d,d1~7)方案治疗。治疗后患者脾体积缩小,输血间隔时间延长。复查骨髓细胞形态学检查结果示,肥大细胞比例为8.5%。患者出院后因不能耐受胃肠道不良反应自行停用达沙替尼。截至随访结束,患者仍存活。④按照本研究设定的文献检索策略,纳入2篇MCL-MDS相关文献。共计纳入包括本研究1例患者在内的3例由MDS进展为MCL-MDS病例。其中,1例患者未行 KIT突变检测,伴t(9;22)及20q-,予泼尼松50 mg/d治疗,生存期为2个月。另1例患者不伴 KIT D816V,染色体核型正常,予伊马替尼100 mg/d治疗,生存期为3个月。本研究患者伴5q-、 ASXL1及 KIT突变,予达沙替尼100 mg/d联合DA3+7方案,生存期>5个月。 结论:本例患者为MDS进展为MCL-MDS,考虑与伴 KIT及 ASXL1突变相关。MCL-MDS患者预后非常差,单用糖皮质激素、酪氨酸激酶抑制剂(TKI)疗效欠佳,TKI联合化疗可能延长患者生存期。
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编辑人员丨4天前
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应用国际间能力验证实验结果设立HLA抗体判定界限值及临床应用
编辑人员丨4天前
目的:通过美国组织相容性和免疫遗传学委员会(ASHI)组织的国际间能力验证(PT)结果,设立抗人类白细胞抗原(HLA)抗体的判定界限值。方法:在液相芯片(Luminex)技术平台采用Single Antigen试剂检测HLA抗体,回顾分析2012年至2019年间江苏省血液研究所HLA配型实验室参加ASHI组织的11次共55个质控样本的HLA抗体PT结果。结果:在79种HLA-Ⅰ类抗体中检测到HLA-A、B、Cw抗体21、43、15种类型;44种HLA-Ⅱ类抗体中检测到HLA-DRB1、DQB1、DPB1抗体18、7、19种类型。分析每个质控样本中本实验室上报的所有HLA抗体的中位荧光强度(MFI)值,以及ASHI汇总的同期多中心对该特异性抗体判断其阴/阳性结果的符合率,并以95%、90%、80%、79%~50%、<50%的符合率范围,将MFI值由高到低排列成HLA抗体可能饱和度值、阳性决定值、阳性判定界限值、可疑阳性参考值及可疑阴性参考值的区间,建立了本实验室HLA抗体的判定界限值表,其中42种HLA-Ⅰ类、Ⅱ类特异性抗体类型数据完整。当实验室检测HLA-Ⅰ类、Ⅱ类抗体的MFI值处于判定界限值表中80%及以上符合率时,可用于判断检测到HLA抗体。当HLA抗体的MFI值达到阳性决定值时可能对临床诊断及治疗有一定的指导意义。当抗体达到饱和值、处于可疑阳性或可疑阴性参考判定界限值时,可提示临床需要进行HLA抗体检测的动态随访。结论:通过国际间PT的实验结果制定实验室HLA抗体的判定界限值,并对实验结果的判读及临床诊断和治疗均有参考价值,故移植中心应重视HLA抗体检测的室间比对质量控制工作。
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编辑人员丨4天前
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三维培养肿瘤模型在结直肠癌中的研究进展
编辑人员丨4天前
传统的肿瘤培养模型包括二维肿瘤细胞培养和异种移植物模型,前者存在缺乏肿瘤异质性、模型失真等问题,后者存在建模成功率偏低、耗时长、价格贵等缺点。近年出现的体外三维(3D)培养模型可以较好地模拟体内肿瘤的空间结构与生长环境,保留肿瘤细胞的病理与遗传学特征,并反映肿瘤细胞间、肿瘤与微环境间的复杂相互作用,逐渐成为肿瘤机制研究、药物筛选和肿瘤个体化治疗的有力工具。球状体、类器官、微流控装置等3D肿瘤模型技术日渐成熟,共培养、3D生物打印、气液界面等新技术的应用使模型的仿真性进一步提高,一些模型可重建肿瘤微环境,一些模型甚至具有内源性免疫成分与微脉管系统。近年来,有学者将异种移植物模型与类器官技术相结合,构建了体内/体外配对的生物模型库,发挥出两种技术的优势,并可针对具有特定分子学特征的肿瘤进行个体化精准疗法研发。至今,上述技术已广泛应用于结直肠癌研究领域。作者团队目前研究采用结直肠癌患者来源的3D微肿瘤模型指导术后化疗药物选择,建模成功率高、药物筛选实验结果理想。相信随着相关技术的进步,3D肿瘤模型将在结直肠癌研究、药物研发与转化、疗法筛选及个体化治疗等领域发挥巨大作用。
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编辑人员丨4天前
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不同年龄段儿童鼻病毒的检测及临床特点
编辑人员丨4天前
目的:了解不同年龄段儿童鼻病毒的检测结果及临床表现。方法:采集2019年1—12月汕头大学医学院第二附属医院住院的2 908例呼吸道感染患儿的咽拭子,应用多重PCR和Luminex悬浮液态芯片技术进行呼吸道病原体核酸检测,对单一鼻病毒阳性的病例分年龄段进行分析,比较其检测结果、临床症状、影像学及实验室检查指标特点。结果:单一鼻病毒阳性170例(5.85%,170/2 908),不同年龄组间阳性率比较差异有统计学意义( χ2=9.66, P<0.05),以>28日龄~1岁组阳性率最高(7.80%),>1~3岁组阳性率最低(4.50%)。不同年龄组间均可出现发热、咳嗽、喘息表现,分别以>6岁、>28日龄~1岁和>1~3岁组比例最高( χ2=12.82、21.78、12.54, P均<0.05)。≤28日龄组气促、发绀比例最高(43.75%、37.50%),头痛以>6岁年龄组比例最高(50.00%)。影像学显示3岁以下年龄组主要表现为支气管肺炎。不同年龄组间淋巴细胞计数升高和降低比例差异有统计学意义( χ2=31.41,29.90, P均<0.05)。 结论:鼻病毒在婴儿期检出率最高。新生儿以气促、发绀为主要表现,胸片以支气管肺炎为主;婴幼儿以咳嗽、喘息为主要表现;学龄期儿童主要表现为发热、头痛,胸片结果多正常。
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编辑人员丨4天前
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山西地区原发性高血压人群MTHFR C677T基因多态性及其与血压严重程度的关联性
编辑人员丨4天前
目的:探讨山西地区原发性高血压人群MTHFR C677T基因多态性及其与该地区高血压严重程度的关联性。方法:选择2017年1月至2018年1月山西医科大学第二医院收治的306例原发性高血压患者为研究对象。收集患者临床资料,检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)及其他相关实验室指标,应用基因芯片技术对研究对象进行MTHFR C677T基因多态性分析,并对原发性高血压发生相关因素进行logistic回归分析。结果:山西地区原发性高血压患者CC、CT、TT基因型频率分别为22.22%、47.06%和30.72%,符合Hardy-Weinberg平衡,具有群体代表性。与MTHFR 677CC相比,MTHFR 677CT和MTHFR 677TT基因型可使高血压严重程度增加2.29倍和2.24倍;吸烟史、高血压家族史、Hcy和TG为增加原发性高血压严重程度的独立危险因素( OR=2.04,1.81,1.04,1.26)。 结论:MTHFR C677T基因型、Hcy、TG、吸烟史及高血压家族史作为原发性高血压严重程度的独立危险因素,可用来预测原发性高血压的严重程度,为及早开展相应预防及治疗措施提供有效依据。
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编辑人员丨4天前
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数码液相芯片法检测特异性抗中性粒细胞胞浆抗体的诊断效能研究
编辑人员丨4天前
通过比较数码液相芯片法(digital liquid chip method,DLCM)检测血清抗髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)抗体和抗蛋白酶3(proteinase 3,PR3)抗体与酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测结果的一致性与符合率,探讨其对抗中性粒细胞胞浆抗体相关血管炎(antineutrophil cytoplasmic antibodies associated vasculitis,AAV)的临床诊断效能,为临床实验室抗MPO抗体和抗PR3抗体检测方法的选择提供参考。本研究为横断面研究,选取2021年1—3月在四川大学华西医院实验医学科临床免疫室检测抗中性粒细胞胞浆抗体的样本307例,收集其血清样本及相关临床信息,同时采用ELISA和DLCM平行检测血清样本中抗MPO抗体和抗PR3抗体水平,使用间接免疫荧光法(indirect immunofluorescent,IIF)就两种方法学差异样本进行复测验证。采用SPSS 26.0对检测结果进行统计分析,运用Cohen′s kappa系数分析比较两种方法检测结果的一致性,运用配对χ2检验比较两种方法检测结果对AAV的敏感度和特异度。结果显示,采用ELISA和DLCM两种方法平行检测抗MPO抗体阳性例数分别为ELISA 63例和DLCM 44例,阴性例数分别为ELISA 244例和DLCM 263例;检测抗PR3抗体阳性例数分别为ELISA 34例和DLCM 28例,阴性例数分别为ELISA 273例和DLCM 279例。两种方法检测抗MPO抗体和抗PR3抗体的检测结果均有良好的一致性与符合率,其中抗MPO抗体总符合率为92.51%,阳性符合率为66.67%,阴性符合率为99.18%,一致性分析结果显示 kappa =0.741,具有较强一致性;抗PR3抗体总符合率为96.74%,阳性符合率为76.47%,阴性符合率为99.27%,一致性分析结果显示 kappa =0.821,具有很强一致性。IIF复测差异样本结果均显示DLCM结果与IIF结果符合率更高。抗MPO抗体和抗PR3抗体联合检测性能比较分析结果显示,DLCM的特异度优于ELISA,其敏感度较ELISA偏低。综上,DLCM检测抗MPO抗体和抗PR3抗体检测结果与ELISA结果比较均具有良好的一致性与符合率。在联合检测抗MPO抗体和抗PR3抗体时,DLCM特异度优于ELISA。
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编辑人员丨4天前
