目的 综合评价乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis和光果甘草G.glabra的质量,通过化学计量学寻找质量差异标志物并建立快速判别乌拉尔甘草和光果甘草模型.方法 建立甘草药材液相指纹图谱,确立共有峰,共有峰数据结合模糊物元模型与偏最小二乘法判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)化学计量学方法进行质量综合评价及质量差异标志物筛选.基于近红外光谱建立不同的快速判别模型,通过对比筛选出最佳的快速判别模型.结果 模糊物元分析表明乌拉尔甘草与光果甘草存在显著差异;经PLS-DA,结果表明甘草酸铵、甘草素、甘草苷为乌拉尔甘草和光果甘草的差异标志物;光谱经SG预处理,iPLS波段筛选所建立的决策树判别模型,精确率为0.88、准确率为0.88、F1(精确率和准确率的调和平均值)为0.88.结论 乌拉尔甘草与光果甘草之间存在显著差异.通过近红外光谱技术建立的判别模型,为快速区分这2种基原甘草提供了有效手段,有助于提升甘草药材质量控制水平.

目的 研究黄芪六一汤(Huangqi Liuyi Decoction,HLD,黄芪-甘草 6∶1 组成)黄酮组分的提取和聚酰胺树脂富集纯化工艺.方法 以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、芒柄花苷、甘草素、毛蕊异黄酮、异甘草素、芒柄花素 9 个成分为评价指标,以G1-熵权法确定各指标的组合权重,进行综合评分;采用Box-Behnken设计-响应面法(Box-Behnken design-response surface methodology,BBD-RSM)对HLD黄酮组分提取的关键影响因素乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间、提取次数进行优化;采用单因素实验考察上样药液pH值、上样药液质量浓度、上样药液体积流量、上样量、水洗脱用量、洗脱剂乙醇体积分数、洗脱剂体积流量、洗脱剂用量等因素对黄酮组分聚酰胺富集纯化工艺的影响,采用Plackett-Burman设计(Plackett-Burman design,PBD)结合BBD-RSM筛选显著影响因素并对其进行工艺优化,比较聚酰胺树脂纯化前后各指标的含量.结果 最优提取工艺为 69%乙醇回流提取 2 次,每次 10 倍量乙醇提取 65 min;最优纯化工艺为pH值4.8、质量浓度 0.20 g/mL的上样药液以 0.8 mL/min体积流量按树脂-生药 1∶1 的质量比上样,4 个柱体积(BV)纯水以 1.5 mL/min的体积流量洗脱除杂,8 BV体积分数69%乙醇以 1.5 mL/min体积流量洗脱,所得黄酮组分提取物中 9个指标成分含量约是纯化前的 14倍.结论 优选的HLD黄酮组分的提取和富集纯化工艺稳定、可行,可为进一步成药性研究和组分中药研制奠定基础.

目的 研究异甘草素-4'-O-芹糖(1→2)葡萄糖苷(licraside)干预缓解胆汁淤积的分子作用机制.方法 用慢病毒沉默人肝癌HepG2细胞中法尼醇X 受体(FXR),记为 siFXR-HepG2 细胞.将 HepG2 细胞和 siFXR-HepG2 细胞均分为正常组、模型组和实验组.模型组和实验组均给予胆红素+丙磺舒诱导高胆酸盐高胆红素模型;然后,正常组和模型组均不进行任何处理,实验组给予80 μmol·L-1 licraside干预24 h.考察各组细胞的细胞活力及总胆汁酸(TBA)、胆红素等生化指标的含量,用蛋白质印迹法考察各组细胞FXR、胆酸盐输出泵(BSEP)等蛋白的表达水平.结果HepG2细胞中正常组、模型组和实验组及siFXR-HepG2细胞中正常组、模型组和实验组的细胞活力分别为(100.00±17.15)％、(39.41±2.91)％、(70.79±3.74)％、(81.41±5.12)％、(33.49±2.69)％和(44.08±4.82)％,TBA 水平分别为(7.98±5.87)、(46.18±10.93)、(9.25±7.20)、(11.18±3.36)、(38.28±5.12)和(34.79±5.39)μmol·L-1,总胆红素水平分别为(5.21±3.27)、(40.29±24.88)、(5.21±2.64)、(12.00±4.64)、(56.36±14.85)和(15.39±5.56)μmol·L-1,FXR 蛋白相对表达水平分别为 1.00±0.10、0.81±0.07、1.11±0.09、0.10±0.02、0.12±0.02 和 0.10±0.04,BSEP 蛋白相对表达水平分别为 1.00±0.17、0.81±0.02、0.88±0.03、0.70±0.09、0.49±0.07和0.60±0.10.HepG2细胞中实验组的上述指标和模型组相比,在统计学上差异均有统计学意义(P＜0.001,P＜0.01,P＜0.05);除TBA外,siFXR-HepG2细胞中实验组的上述指标和模型组相比,在统计学上差异均有统计学意义(P＜0.001,P＜0.01).结论 Licraside可以有效降低高胆酸盐高胆红素细胞的生化指标水平,这种作用是通过激动FXR的蛋白表达后,增加胆酸盐外排,减少胆汁酸的合成,达到缓解胆汁淤积的作用.

目的:比较生甘草、炒甘草及蜜炙甘草主要化学成分,研究其质量传递规律,为甘草炮制品的质量控制提供参考依据.方法:参照《中华人民共和国药典》2020年版(一部)甘草饮片项下含量测定方法测定生甘草、炒甘草及蜜炙甘草中指标成分,计算其转移率;建立同时适用于生甘草、炒甘草及蜜炙甘草的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)进行相似度分析,标定共有峰并进行成分指认;结合多元统计分析进行不同炮制品的差异性分析,找出主要差异性成分.结果:生甘草、炒甘草及蜜炙甘草中甘草苷的质量分数依次为0.63%～2.75%、1.30%～4.87%、0.56%～2.36%,转移率为136.8%～226.3%(生甘草到炒甘草)、76.0%～96.2%(生甘草到蜜炙甘草);甘草酸的质量分数依次为2.07%～6.07%、3.70%～10.25%、1.71%～5.23%,转移率为157.1%～188.5%(生甘草到炒甘草)、78.0%～99.6%(生甘草到蜜炙甘草),上述转移率均位于均值的±30%.甘草炮制品的HPLC指纹图谱相似度高(0.958～0.996),标定共有峰15个,指认共有峰10个,分别为D-xylonic acid、芹糖甘草苷、甘草苷、6″-O-乙酰甘草苷、芹糖异甘草苷、芒柄花苷、异甘草苷、新异甘草苷、甘草素、甘草酸.主成分分析显示生甘草、炒甘草、蜜炙甘草整体化学模式存在差异,主要差异成分有6个,包括甘草苷和甘草酸等.结论:不同甘草炮制品的化学指纹图谱相似度高,无法显示炮制引起的三者的差异性;但三者整体化学模式具有差异,主要体现在单个化学成分的含量变化,尤其是甘草苷和甘草酸,该结果为不同甘草炮制品的质量标准建立及其相关复方制剂的整体和全程质量控制提供了参考.

目的 建立清宁散HPLC指纹图谱检测方法,并对其质量标志物(quality markers,Q-Marker)进行预测分析,为清宁散质量控制提供参考依据.方法 基于指纹图谱和网络药理学方法,通过响应面优化法确定清宁散基准样品的最佳制备工艺;采用HPLC法建立清宁散指纹图谱,对共有峰进行归属和指认;基于可行性和可追溯性进行活性成分筛选,通过网络药理学构建"成分-靶点-通路"网络,分析清宁散潜在的Q-Marker.结果 确定了清宁散中桑白皮、赤茯苓、甘草的最佳炮制工艺,清宁散HPLC指纹图谱共标定了 39个共有峰,通过对照品色谱及质谱,指认出18个共有成分,分别为1号峰异鼠李素、2号峰甘草苷、3号峰芥子碱硫氰酸盐、4号峰β-胡萝卜苷、10号峰松苓新酸、15号峰去氢土莫酸、16号峰甘草酸铵、19号峰槲皮素、20号峰绿原酸、21号峰甘草查耳酮A、22号峰桑黄酮G、24号峰京尼平苷酸、26号峰桑皮苷A、29号峰桑辛素、31号峰槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、34号峰毛蕊花糖苷、35号峰芹菜素、38号峰茯苓新酸A,相似度均大于0.93;经网络药理学分析,筛选出桑皮苷A、桑辛素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、茯苓新酸A、京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、甘草苷、甘草酸铵8个活性成分,进行"成分-靶点-通路"网络构建分析,富集的通路包括T细胞受体信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase-protein kinase B,PI3K-Akt)信号通路等,根据连接度分析,初步预测8个活性成分可能通过调节相关信号通路达到清肺止咳的作用.结论 响应面优化结合指纹图谱和网络药理学分析预测清宁散治疗疾病的Q-Marker,所建立的方法操作简捷,结果准确,稳定性好,可用于清宁散的质量控制评价,也为进一步研究清宁散的作用机制提供参考.

目的 评价健肝乐颗粒质量.方法 分析采用Welchrom C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈-0.3%磷酸,梯度洗脱;体积流量 1.0 mL/min;柱温 30℃;检测波长 230 nm,建立HPLC指纹图谱.采用聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析考察质量一致性.HPLC法测定没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、芹糖甘草苷、甘草苷、异甘草苷、甘草酸铵 7 种指标成分的含量.结果 16 批样品指纹图谱中有 21 个共有峰,相似度均不低于 0.97,指认出 7 种成分.各批样品聚为 2 类,VIP 大于 1 的成分有 11 种.芍药苷含量最高,异甘草苷含量最低.结论 该方法稳定可靠,不同批次健肝乐颗粒质量一致.

目的 建立15批经典名方养胃汤基准样品UPLC指纹图谱及其7种成分的定量分析方法,为养胃汤质量控制提供科学依据.方法 采用UPLC法,建立15批养胃汤基准样品UPLC指纹图谱.采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"对15批养胃汤基准样品指纹图谱进行相似度评价.采用超高效液相联合二极管阵列检测器及蒸发光散射检测器,建立人参皂苷Rg1、Re、Rb1和橙皮苷、和厚朴酚、厚朴酚及甘草酸7个成分的含量测定方法.结果 15批养胃汤基准样品UPLC指纹图谱相似度均大于0.9.经与对照品比对指认出奎宁酸、腺苷、鸟苷、新绿原酸、苍术苷A、绿原酸、隐绿原酸、儿茶素、甘草苷、芹糖甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、毛蕊花糖苷、甘草酸、6-姜辣素、川陈皮素、橘皮素、和厚朴酚、广藿香酮、厚朴酚20个色谱峰.15批养胃汤基准样品人参皂苷Rg1、Re、Rb1和橙皮苷、和厚朴酚+厚朴酚、甘草酸的质量分数均值的±30％范围分别为 0.084～0.155、0.065～0.120、0.246～0.457、4.911～9.120、0.971～1.804、0.990～1.838 mg/g.结论 建立的养胃汤基准样品UPLC指纹图谱和7种指标性成分的含量测定方法专属性强、灵敏度高、重复性好,可用于养胃汤基准样品的质量评价,为其后续制剂开发和质量控制研究提供参考.

目的:采用多指标成分定量测定联合化学计量学及熵权优劣解距离法(EW-TOPSIS)综合评价复方红豆杉胶囊的质量.方法:采用HPLC法同时测定 16 批复方红豆杉胶囊中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Ro、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、芹糖基甘草苷、甘草苷、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸和紫杉醇的含量,并对 16 批样品进行差异分析,挖掘出影响复方红豆杉胶囊质量的主要潜在标志物.结果:13 个成分分别在各自浓度范围内线性关系良好(r≥0.9994),平均加样回收率为 96.87%～100.11%(RSD<2.00%).化学计量学分析显示 16 批样品聚为 3 类;甘草酸、人参皂苷Rb1、甘草苷、芹糖基甘草苷、人参皂苷Rg1 和紫杉醇是影响复方红豆杉胶囊质量的主要潜在标志物.结论:所建立的方法操作简便、结果准确,可用于复方红豆杉胶囊质量的综合评价.

目的:建立超高压液相色谱结合一测多评(UPLC-QAMS)法同时测定珍珠胃安丸中甘草苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、丹皮酚、异甘草素、甘草酸铵、川陈皮素的含量.方法:采用超高压液相色谱法,使用Athena UHPLC C18 Column,120?(2.1 mm × 150 mm,1.8 μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05％磷酸溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,柱温35℃,检测波长为237 nm.以丹皮酚为参照物,确定其与其他9个成分的相对校正因子,QAMS法与外标法分别测定珍珠胃安丸中10个成分的含量.结果:在0.28～333.54 μg·mL-1线性范围内,10个成分呈良好的线性关系(r2＞0.999 9),平均加样回收率为98.55％～101.77％(n=6),RSD 1.33％～2.97％(n=6).丹皮酚与甘草苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸铵、川陈皮素的相对校正因子分别为0.276、0.699、0.439、0.583、0.423、0.172、0.320、1.013、0.541,外标法与QAMS法所测得10个成分的含量无明显差异.结论:本研究建立的QAMS法准确性高,可为珍珠胃安丸质量控制标准的提高提供依据.

目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定养血软坚胶囊中芹糖甘草苷、芍药内酯苷、獐牙菜苦苷、没食子酸甲酯、苯甲酰芍药苷、獐牙菜苷、6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、异甘草素、马钱苷酸、甘草素、没食子酸、芍药苷、氧化芍药苷、龙胆苦苷、甘草酸、异甘草苷、甘草苷的含量.方法 分析采用Waters BEH C18 色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相 2 mmol/L乙酸铵(含 0.1%甲酸)-乙腈,梯度洗脱;体积流量 0.3 mL/min;柱温 40℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式.结果 17 种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.999 6),平均加样回收率91.33%～104.03%,RSD 1.58%～3.50%.结论 该方法快速、准确、稳定,可用于养血软坚胶囊的质量控制.