目的 研究黄精不同炮制品的草酸钙针晶形态差异以及测定不同炮制品的草酸钙含量.方法 于2021年7月至2022年8月,利用显微镜观察净制、清蒸、酒蒸、酒炖、黑豆制等5个生黄精的炮制品中草酸钙针晶形态,采用高效液相色谱法测定草酸钙的含量.结果 不同黄精炮制品的草酸钙针晶呈束状,离散、碎裂程度不同;炮制后,清蒸黄精的草酸钙针晶所受破坏程度最小,酒蒸黄精的最大.草酸钙含量:酒蒸黄精1.95％>酒炖黄精1.70％>黑豆制黄精1.56％>清蒸黄精0.99％>生黄精0.83％.结论 与生品相比,不同炮制方法均对黄精草酸钙针晶有一定破坏,但破坏程度不同;酒蒸黄精的草酸钙含量在四种黄精炮制品中最高,清蒸黄精最低.

目的:探讨左卡尼汀对草酸钙诱导肾小管上皮细胞(HK-2)铁死亡的影响。方法:采用蛋白质印迹法检测不同浓度(0、2、4、8 mmol/L)草酸钙对HK-2细胞铁死亡相关蛋白长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、胱氨酸转运蛋白系统(XCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达的影响，筛选实验最适的草酸钙浓度。将HK-2细胞分为4组：①对照组，细胞贴壁后用正常培养基培养12 h，然后继续用正常培养基；②左卡尼汀组，细胞贴壁后用含5 mmol/L左卡尼汀的培养基预处理12 h，然后更换为含有5 mmol/L左卡尼汀的培养基；③草酸钙组，细胞贴壁后用正常培养基培养12 h，然后更换为含有最适浓度草酸钙的培养基；④草酸钙+左卡尼汀组，细胞贴壁后用含5 mmol/L左卡尼汀的培养基预处理12 h，然后更换为含有5 mmol/L左卡尼汀和最适浓度草酸钙的培养基。4组更换培养基后继续培养24 h，收集细胞或上清液，采用蛋白质印迹法检测铁死亡相关蛋白醌氧化还原酶(NQO1)、ACSL4、XCT、GPX4蛋白表达水平。采用相应试剂盒分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛水平；活性氧试剂盒检测细胞活性氧水平；二价铁离子探针检测细胞内铁离子蓄积情况。采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞损伤程度。采用透射电镜观察线粒体损伤情况。对细胞行DAPI染色观察细胞核损伤情况；行苏木素染色观察草酸钙晶体黏附情况。结果:蛋白质印迹法检测结果显示，0、2、4、8 mmol/L草酸钙组的ACSL4蛋白表达分别为0.37±0.16、0.68±0.16、0.73±0.09、0.89±0.03，XCT蛋白表达分别为1.11±0.10、0.91±0.14、0.83±0.09、0.80±0.07，GPX4蛋白表达分别为1.23±0.13、0.99±0.17、0.81±0.05、0.72±0.06，与0 mmol/L组相比，2、4、8 mmol/L组ACSL4蛋白表达升高，XCT、GPX4蛋白表达降低，差异均有统计学意义( P<0.05)，其中4 mmol/L组与0 mmol/L组比较差异更显著( P<0.01)，故将4 mmol/L作为最适浓度进行后续实验。对照组、左卡尼汀组、草酸钙组、草酸钙+左卡尼汀组的NQO1水平分别为0.36±0.06、0.54±0.05、0.76±0.07、0.90±0.03，左卡尼汀组与对照组比较差异有统计学意义( P<0.05)，草酸钙组与对照组比较差异有统计学意义( P<0.01)，草酸钙+左卡尼汀组与草酸钙组比较差异有统计学意义( P<0.05)；ACSL4水平分别为0.66±0.10、0.58±0.08、0.99±0.03、0.77±0.09，XCT水平分别为0.93±0.08、0.85±0.07、0.76±0.06、0.99±0.05，GPX4水平分别为1.10±0.09、1.09±0.09、0.85±0.03、0.99±0.02，左卡尼汀组与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)，草酸钙组与对照组比较差异有统计学意义( P<0.01)，草酸钙+左卡尼汀组与草酸钙组比较差异有统计学意义( P<0.05)。对照组、左卡尼汀组、草酸钙组、草酸钙+左卡尼汀组SOD水平分别为(100.00±5.79)%、(105.80±3.26)%、(44.74±7.60)%、(85.01±5.15)%，GSH水平分别为(100.00±4.73)%、(107.10±5.48)%、(53.49±3.98)%、(81.18±5.48)%，丙二醛水平分别为(100.00±2.36)%、(98.00±11.10)%、(129.11±2.59)%、(113.35±5.79)%，左卡尼汀组与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)，草酸钙组与对照组比较差异有统计学意义( P<0.01)，草酸钙+左卡尼汀组与草酸钙组比较差异有统计学意义( P<0.05)。对照组、草酸钙组、草酸钙+左卡尼汀组活性氧荧光强度分别为(63.98±9.41)AU、(145.41±8.39)AU、(85.37±4.51)AU，亚铁离子荧光强度分别为(39.77±0.68)AU、(68.40±3.14)AU、(48.60±4.30)AU，草酸钙组与对照组比较差异有统计学意义( P<0.01)，草酸钙+左卡尼汀组与草酸钙组比较差异有统计学意义( P<0.01)。对照组、左卡尼汀组、草酸钙组、草酸钙+左卡尼汀组LDH水平分别为(100.00±5.37)%、(99.50±6.38)%、(153.77±6.06)%、(132.50±5.58)%，左卡尼汀组与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)，草酸钙组与对照组比较差异有统计学意义( P<0.01)，草酸钙+左卡尼汀组与草酸钙组比较差异有统计学意义( P<0.05)。透射电镜检查结果显示，相较于对照组，草酸钙组的线粒体皱缩，嵴断裂或消失，可见明显的双层膜结构；相较于草酸钙组，草酸钙+左卡尼汀组线粒体皱缩情况减轻，嵴相对增多，个别可见双层膜结构。DAPI染色结果显示，相较于对照组，草酸钙组部分细胞核损伤明显加重；相较于草酸钙组，草酸钙+左卡尼汀组细胞核损伤明显减轻。晶体黏附实验结果显示，相较于对照组，草酸钙组草酸钙晶体呈黑色颗粒状黏附于细胞，汇聚成团；相较于草酸钙组，草酸钙+左卡尼汀组黑色颗粒黏附于细胞的情况明显减轻。 结论:左卡尼汀能够减轻草酸钙诱导HK-2细胞的氧化应激和铁死亡，从而减轻细胞损伤和晶体黏附。

[目的]研究湖北黄精花部形态结构特征和大小孢子发生及雌雄配子体发育过程,以丰富黄精属植物的生殖生物学理论,为进一步开展湖北黄精的品种选育提供依据.[方法]以不同发育时期的湖北黄精花芽为试验材料,用显微观察法观察花部形态结构特征,石蜡切片技术对单花雌雄蕊进行切片观察.[结果]湖北黄精的花被为白色或淡黄绿色,花被筒近喉部稍缢缩;具6枚雄蕊,花丝下端与花被合生,花药开裂方式为纵裂;雌蕊子房上位,3心皮,花柱与子房等长.湖北黄精花药壁由4层细胞组成,成熟的绒毡层具多核,绒毡层发育类型为分泌型;小孢子母细胞减数分裂为连续型,四分体呈左右对称型排列,成熟花粉粒为2-细胞型;存在小孢子发育不同步的现象.雌蕊胚珠具双珠被、厚珠心;四分体呈直线型排列,胚囊发育类型为蓼型;存在双胚囊胚珠现象.在雄蕊的花药壁和雌蕊的子房壁都观察到有束状草酸钙针晶.[结论]湖北黄精雌雄蕊具有较原始的发育特征,虽然在发育过程中都存在异常现象,但雄蕊最终能形成正常的雄配子体,雌蕊低频率的双胚囊现象对总体受精结果影响很小.湖北黄精杂交育种可以选择花药开裂前一时期的花粉,花药壁和子房壁观察到的束状草酸钙针晶无法作为湖北黄精物种鉴定的依据.

在显微镜下,白花蛇舌草粉末,果皮表皮细胞表面观多角形,直径约75 μm;导管梯纹、具缘纹孔或螺纹;种皮表皮细胞淡棕色,直径15～50μm,密布淡黄色小点.草酸钙针晶成束或散离存在于长圆形的薄壁细胞中,簇晶大小不一,天花粉粒类球形,表面具细网状雕文.水线草粉末,果皮表皮细胞垂周壁波状弯曲,直径约80 μm;种皮表皮细胞垂周壁微弯曲,表面无黄色小点.草酸钙成束,天花粉粒表面无网状雕纹.纤花耳草粉末,种皮表皮细胞较小,直径10～30 μm,垂周壁弯曲,天花粉粒直径18～20 μm,表面无网状雕纹,针晶长约110 μm.使用时应注意区分,以保证临床安全用药.

目的:对小凤仙花的性状与显微鉴定特征进行系统地描述.方法:采用基原鉴定、性状鉴定和显微鉴定方法.结果:小花凤仙花性状特征为须根较多,弯曲.茎节膨大处有对生的分枝,表面具纵棱.总状花序淡黄色.显微特征为叶、茎的表皮均含有草酸钙针晶束和油滴,栅栏组织未穿过主脉;根、茎横切面针晶束常见.粉末可见单细胞和多细胞的非腺毛;直轴式和不定式气孔为主;草酸钙针晶束、簇晶多见;导管类型多样;可见晶鞘纤维等.结论:性状与显微特征可为小花凤仙花药材鉴别提供参考依据,为该药材的进一步研究利用奠定基础.

目的:对河南省不同产地短梗菝葜药材进行系统的生药学鉴别研究.方法:采用水合氯醛透化法、石蜡切片、徒手切片、薄层色谱及高效液相色谱法,对短梗菝葜药材进行了系统的研究.结果:短梗菝葜药材粉末为浅土黄色,粉末中淀粉粒甚多;纤维、导管较多;偶见草酸钙针晶、晶鞘纤维和木栓细胞.根茎横切面最外侧为数层木栓化细胞,皮层可见众多根迹维管束和草酸钙针晶,木质部外侧常常具1个裂生式分泌腔.不同产地的短梗菝葜在与对照品薯蓣皂苷元、白藜芦醇薄层色谱相同的位置均显示相同颜色的斑点.建立了短梗菝葜中薯蓣皂苷元的含量测定方法.结论:该研究结果为寻找新的药用资源、澄清品种及控制短梗菝葜药材质量提供了一定的参考依据.

目的 系统鉴别醋延胡索饮片及其混伪品零余子并分析其掺伪的加工方法,为保障延胡索饮片的安全性和有效性提供较全面的参考.方法 对醋延胡索和零余子进行性状、显微、理化等定性鉴别,并以HPLC和LC-MS/MS对其进行延胡索乙素的定量研究.结果 通过观察零余子外表面凸起的芽痕及其粉末中的草酸钙针晶束可将其快速定性鉴别.碘化铋钾反应、紫外荧光法和HPLC法可用于鉴别醋延胡索和零余子,但均不具备鉴别混伪饮片的可操作性.LC-MS/MS可测零余子中的微量延胡索乙素,借此可推测其加工混伪的方法.结论 该研究系统地鉴别了醋延胡索及其伪品零余子,并为甄别二者的混伪饮片提供了参考.

目的:建立鹿药的质量标准.方法:从原植物形态、性状特征、显微特征、薄层色谱(TLC)等方面对药材进行定性鉴别;测定药材的水分、灰分、浸出物;采用高效液相色谱法测定药材中(25S)-17α-羟基-5α-螺甾烷-9-烯-3β-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基(1→3)]-β-D-葡萄吡喃糖基(1→4)-β-D-半乳吡喃糖苷(SJ-13)的含量,色谱柱为Waters SunFire C18,流动相为乙腈-水(35∶65,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm,柱温为20℃,进样量为10 μL.结果:原植物为多年生草本植物,高30～60 cm;药材表面呈棕色至棕褐色,具皱纹;显微特征为表皮1列细胞;药材粉末呈灰黄色,含大量草酸钙针晶.药材样品的TLC图斑点大部分清晰,分离度好;药材中水分为5.26%～8.88%,总灰分为4.60%～28.86%,酸不溶性灰分为1.56%～23.39%,水浸出物为23.84%～51.26%,醇浸出物为22.65%～57.36%;SJ-13检测进样量线性范围为8.92～31.22μg(r＝0.999 9),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于1%,加样回收率为97.0%～99.2%(RSD＝0.8%,n＝6),耐用性试验的RSD均小于1%,10批药材样品中SJ-13的含量范围为4.40～29.80 mg/g.结论:初步拟定鹿药药材中水分不得过11%,总灰分不得过35%,酸不溶性灰分不得过28%,水浸出物不得少于19%,醇浸出物不得少于18%,SJ-13含量不得少于4.40 mg/g;该试验所建标准可用于鹿药的质量控制.

目的:建立中药薯莨的质量控制方法,提高其质量可控性.方法:采用显微鉴别法对薯莨的粉末显微特征进行鉴别,薄层色谱法(TLC)对薯莨进行薄层色谱鉴别,高效液相色谱法(HPLC)测定薯莨中儿茶素和表儿茶素含量,参考2015年版《中国药典》四部通则测定10批薯莨的水分、总灰分、酸不溶性灰分和醇溶性浸出物含量.结果:薯莨粉末显微特征明显,具有草酸钙针晶、淀粉粒和石细胞等.薄层色谱鉴别显示薯莨中主斑点分离较好,斑点颜色及Rf值与对照药材一致.HPLC结果显示薯莨药材中的儿茶素和表儿茶素分离度好,线性范围分别是4.900 ～ 196.0,5.020～200.8 mg·L-1,相关系数r均为0.999 9.精密度、重复性和稳定性良好,平均加样回收率分别为99.67％和99.25％,RSD分别为1.5％和1.6％.不同批次薯莨中儿茶素和表儿茶素的含量范围分别为0.553 2～10.25 mg·g-1和0.646 1 ～11.06 mg·g-1.10批水分质量分数平均值为16.3％,总灰分质量分数平均值为3.97％,酸不溶性灰分平均值为1.41％,醇溶性浸出物平均质量分数为20.3％.结论:该方法简便、准确、可靠,可以为更有效的控制薯莨的质量提供参考依据.

目的 对益肺止咳胶囊进行显微鉴别研究.方法 按显微鉴别方法,采用常规粉末制片,镜检.结果 通过对6批样品显微观察,考虑其检出组分的特征性及检出的难易程度,筛选出猫爪草的表皮毛、表皮细胞(内含棕色核状物)、白及的表皮细胞(垂周壁波状弯曲)、草酸钙针晶、蛤蚧的横纹肌纤维、皮肤碎片等6个特征唯一,有唯一对应药材的、出现频率较高的粉末特征,作为益肺止咳胶囊显微鉴别依据.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于益肺止咳胶囊的质量控制.