目的:探讨1例罕见的双费城染色体(Ph)伴双der(9)急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者的遗传学病因。方法:选取2020年6月至上海闸新中西医结合医院就诊的1例双Ph伴双der(9)B-ALL患者为研究对象。采用骨髓形态学分析、流式免疫分型、G显带核型分析、荧光原位杂交(FISH)、基因检测以及染色体微阵列分析(CMA)等方法对患者不同阶段的骨髓样本进行检测和分析。结果:患者初诊时骨髓形态学、流式免疫分型均支持B-ALL的诊断，其G显带核型为双Ph且疑似存在2条与22号染色体易位的9号染色体的超二倍体， BCR-ABL1融合基因阳性。复发时基因检测提示 ABL1基因的激酶编码区存在c.944C>T杂合变异，FISH证实2条9号染色体上均存在 ABL1-BCR融合信号，CMA显示9号染色体嵌合纯合比例约为40%，22号染色体嵌合重复比例约为43%。 结论:本例患者双der(9)约在40%的细胞中完全同源，其产生机制可能与双Ph相同，可归因于有丝分裂时发生的染色体未分离。

目的 探讨长链非编码RNA-Ang362(lncRNA-Ang362)在妊娠期高血压(PIH)中的表达及其对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、迁移的影响.方法 收集2017年7月-2020年12月荆州市中心医院妇产科收治的PIH患者180例为实验组,同期180名正常孕妇为对照组.体外培养人主动脉VSMC,使用Lipofectamine 3000将用于lncRN A-Ang362和第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)沉默的小干扰RNA(si-Ang362、si-PTEN)及其相应的阴性对照载体分别转染至细胞,并分为对照组、血小板衍生生长因子(PDGF)-BB组、si-NC组、Ang362沉默组、Ang362沉默+si-PTEN-NC组、Ang362沉默+si-PTEN组;除对照组外,其余组均给予20 ng/mL的PDGF-BB处理.RT-qPCR检测细胞中lncRNA-Ang362和PTEN、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的mRNA表达;Western blot检测细胞中PTEN/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白[PTEN、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)]的表达.结果 实验组血浆中lncRNA-Ang362的表达水平[(1.62±0.21)vs.(1.00± 0.00)]显著高于对照组,差异有统计学意义(t=39.610,P＜0.001).与对照组比较,PDGF-BB组细胞中lncRNA-Ang362表达水平、VSMC增殖活力、划痕愈合率和PCNA、MMP-2和MMP-9 mRNA水平以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR比值显著升高,PTEN mRNA和PTEN蛋白水平显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与si-NC组比较,Ang362沉默组细胞中lncRNA-Ang362表达水平、VSMC增殖活力、划痕愈合率和PCNA、MMP-2和MMP-9 mRNA水平以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR比值显著降低,PTEN mRNA和PTEN蛋白水平显著升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与Ang362沉默+si-PTEN-NC组比较,Ang362沉默+si-PTEN组VSMC增殖活力、划痕愈合率和 PCNA、MMP-2、MMP-9 mRNA 水平以及 p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT 和 p-mTOR/mTOR 比值显著升高,PTEN mRNA和PTEN蛋白水平显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 lncRNA-Ang362在PIH中高表达,并可能通过下调PTEN,激活PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进VSMC增殖、迁移,进而参与PIH的发生发展.

目的 研究子宫肌瘤组织中肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、硫酸基转移酶2A1 (SULT2A1)表达量与细胞侵袭、上皮间质转化的相关性,为临床提供参考.方法 选择2014年5月-2016年12月在宁波开发区中心医院手术切除的子宫肌瘤患者为研究对象,收集子宫肌瘤组织和正常子宫肌组织,采用荧光定量PCR试剂盒测定MLCK、SULT2A1的mRNA表达量,采用酶联免疫吸附试剂盒测定MLCK、SULT2A1及细胞增殖、凋亡、侵袭、上皮间质转化相关基因的蛋白表达量.结果 子宫肌瘤组织中MLCK的mRNA表达量以及MLCK、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、生存素(Survivin)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、趋化因子受体-4 (CXCR4)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP7、MMP9、N-钙黏蛋白(N-cad-herin)、波形蛋白(Vimentin)、Snail的蛋白表达量均显著高于正常子宫肌组织,SULT2A1、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、自杀相关因子(Fas)、Fas配体(FasL)、Rb、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、E-cadherin的mRNA表达量以及SULT2A1的蛋白表达量均显著低于正常子宫肌组织;子宫肌瘤组织中Bcl-2、Survivin、PCNA、SDF-1、CXCR4、MMP2、MMP7、MMP9、N-cadherin、Vimentin、Snail的蛋白表达量与MLCK的蛋白表达量呈正相关,与SULT2A1的蛋白表达量呈负相关,Bax、Fas、FasL、Rb、PTEN、E-cadherin的蛋白表达量与MLCK的蛋白表达量呈负相关,与SULT2A1的蛋白表达量呈正相关.结论 子宫肌瘤组织中MLCK的高表达以及SULT2A1低表达会促进细胞的增殖、侵袭及上皮间质转化.

目的 对1例患者衍生的9号染色体进行基因组拷贝数分析, 明确其遗传物质的来源并推测其发生机制.探讨微阵列比较基因组杂交技术 (array-based comparative genomic hybridization, array-CGH) 在临床分子遗传学诊断中的应用及其优越性.方法 对患者外周血进行常规G显带分析, 进一步应用array-CGH对患者进行全基因组扫描检测, 应用Real-time Quantitative PCR对异常拷贝数区域进行验证检测, 确定其衍生染色体片段的来源.结果 患者外周血染色体核型分析提示为46, XX, der (9) (p?) .array-CGH分析提示患者9q22和9q34之间插入了16p13.3约3.68M的重复片段、14q32.3约3.37M的重复片段以及9q33.3约25Kb的重复片段.RT-q PCR证明array-CGH的结果是正确的.结论 患者衍生的9号染色体来源于16p、14q及9q部分片段的重复, 是导致患者多次流产的主要原因.array-CGH应用到临床具有高分辨、高通量和高准确性的优点, 适用于全基因组拷贝数变异分析.

目的 确定1例生长发育迟缓、语言发育障碍及智力障碍患儿的致病原因.方法 应用常规外周血淋巴细胞培养G显带对患儿及父母核型分析后,进一步采用高通量测序(next generation sequencing,NGS)技术对患儿进行全基因组测序分析,确定核型分析中无法明确的多余片段的来源,并采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术验证.结果 G显带分析显示患儿染色体核型为47,XX,+mar,患儿父母核型未见异常.NGS提示患儿多余片段来自9p13.1p24.3(10001～39786086),重复片段的长度约39.77 Mb,FISH验证结果一致.结论 患儿核型中的衍生染色体片段源自9号染色体短臂,其异常表型归因于9p13.1p24.3三体.细胞遗传学联合NGS和FISH技术有助于准确鉴别异常染色体来源,可为临床诊疗提供准确的遗传学依据.

结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)是一种少见的常染色体显性遗传的神经皮肤综合征,发病率为1/10 000 ～ 1/6000[1-2].本病可引起多系统受累,如血管纤维瘤、色素脱失斑、癫痫、大脑皮质结节、室管膜下巨细胞星形细胞瘤(subependymal giant cell astrocytoma,SEGA)、心脏横纹肌瘤、肾血管平滑肌脂肪瘤(angiomyolipoma,AML)、肺淋巴管肌瘤病(lymphangioleiomyomatosis,LAM)等.TSC1、TSC2是TSC的致病基因,前者位于9q34,编码错构瘤蛋白,后者位于16p13.3,编码马铃薯球蛋白,二者形成二聚体复合物,抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1)信号通路表达.

目的 了解超声及实验室检查,以及不同遗传诊断技术在筛查及明确源于亲代臂间倒位的18号染色体重组胎儿中的作用,探讨18号染色体重组胎儿表型与其核型之间的关联.方法 分析分别于2017年3月及2018年3月在厦门市妇幼保健院接受产前诊断及遗产咨询的2个18号染色体臂间倒位家系的胎儿及其父母染色体核型、染色体微阵列分析及荧光原位杂交等检查结果.并检索科学引文索引、PubMed、中国知网中国全文数据库、万方数据等数据库,检索时间为1970年至2018年6月.对本文及文献报道的1 8号染色体臂间倒位产前诊断家系孕产妇的遗传咨询、超声及实验室检查发现、妊娠结局及随访等情况进行分析. 结果 家系1孕22周孕妇外院行无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)提示胎儿18号染色体非整倍体高风险;孕24周-2本院超声提示胎儿存在室间隔缺损、小下颌等,经产前诊断确认胎儿染色体核型为46,XY,rec(18)dup(18q)inv(18)(p11.32q12.1)pat,系遗传自父亲;胎儿父亲18号染色体存在臂间倒位,核型为46,XY,inv(18)(p 11.32q12.1).家系2孕12周+3血清学筛查提示胎儿18-三体高风险,孕13周13超声提示胎儿颈项透明层(nuchal translucency,NT)增厚、孕15周+6双侧脉络丛囊肿,经产前诊断确认胎儿核型为46,XX,rec(18)dup(18q)inv(18)(p 11.32q 12.1)mat,系遗传自母亲;母亲系18号染色体臂间倒位携带者,核型为46,XX,inv(18)(p 11.32q1 2.1).共检索到5个1 8号染色体臂间倒位家系的文献报道,结合本文2个家系共9例18号染色体重组胎儿,其中3个1 8号染色体臂间倒位家系的孕妇血清学筛查或NIPT提示18-三体高风险;7例胎儿存在超声软指标或结构异常.结论 超声筛查对于18号染色体重组胎儿的发现具有较高的检出率,但超声表型与其核型之间的关联尚不明确;染色体微阵列分析及荧光原位杂交等方法的联合运用,有助于明确复杂衍生染色体的类型及其来源.

目的 对1例产前异常胎儿及其双亲行细胞遗传学及分子遗传学研究,以明确胎儿异常遗传物质的来源及其发生机制.探讨染色体微阵列分析(Chromosomal Microarray Analysis,CMA)在临床产前诊断中的临床价值.方法 对患儿脐血及其双亲外周血进行常规G显带分析,进一步应用CMA对患儿进行全基因组拷贝数分析.结果 G显带核型分析提示胎儿脐血染色体核型结果为46,XX,der(8)(?::p23→qter),其母亲外周血核型结果为46,XX,t(8,9) (p23,p22),父亲核型未见异常.胎儿衍生8号染色体来源于携带平衡易位染色体的母亲.CMA检测提示胎儿存在9p21.3-p24.3区域22.666Mb的重复片段及8p23.2-p23.3末端4.413Mb的缺失片段.胎儿核型最终修正确定为46,XX,der (8)t(8,9)(p23.2,p21.3) mat.结论 胎儿染色体9p重复伴8p末端缺失可能造成出生后的严重异常表型,本文对该患胎进行了产前诊断及遗传学分析,为临床产前诊断和遗传咨询提供了有力依据.

目的 探讨Wolf-Hirschhorn综合征(WHS)的临床表现、遗传学特征、治疗及预后等.方法 回顾分析2009年6月-2018年6月诊治的11例WHS患儿的临床资料.结果 符合WHS染色体改变诊断标准者15例,其中男6例、女9例,就诊年龄中位数为4月龄.15例患儿的染色体检测均有4p结构畸变,主要为单纯4p缺失(46.6％),其他还存在臂间倒位、重复或插入、衍生染色体、环状染色体.其中3例进一步行基因检测确认缺失片段大小.15例中11例资料完整,临床表现明确.首诊原因包括癫痫5例,生后反应差、低体质量5例,肺炎1例.主要核心临床表现为生长/精神发育迟缓、癫痫、希腊武士头盔面容,还可能存在多系统异常.3例在1岁内因肺炎/惊厥死亡,存活者均存在严重智力运动发育落后.结论 WHS为4号染色体的结构畸变,4p16.3上的关键基因缺失,导致生长/精神发育迟缓、癫痫、特殊面容、多系统异常,预后较差.

目的 探讨全基因组染色体微阵列分析(CMA)及核型分析在颈项透明层(NT)增厚胎儿中的临床检测效能和价值,分析NT增厚在染色体显微及亚显微水平上的遗传学发病原因.方法 选取2017年1月1日—2018年9月30日在安徽省妇幼保健院产前诊断中心就诊的62例早孕期(11～13+6周)孕妇,经超声检查提示胎儿NT厚度≥2.5 mm,经羊水穿刺获取标本,再行标准的"核型分析+CMA"检查,确定遗传学诊断,结合临床资料分析检测结果 .结果 ①核型分析的检出率为16.13％(10/62),其中唐氏综合征5例,18三体综合征2例,1例嵌合体,另有2例结构畸变;CMA总检出率为24.19％(15/62),7例非整倍体与核型结果一致,8例为染色体微缺失/微重复.②按照NT值分组,核型分析和CMA在2.5 mm≤NT<3.5 mm、3.5 mm≤NT<4.5 mm、NT≥4.5 mm组中检出率分别为13.33％(4/30)/20.00％(6/30)、22.73％(5/22)/22.73％(5/22)、10.00％(1/10)/40.00％(4/10).③受检样本中3例核型与CMA结果不符,1例核型为46,XN(28)/47,XN,+mar(14),CMA显示12p13.33p11.1区段发生2次重复,1例核型为46,XN,t(1:16)(q41:q23)pat,CMA正常,1例核型提示18号衍生染色体46,XN,der(18),CMA提示18p11.32p11.21区带存在14.9 Mb缺失,同时Yp11.31p11.2区域存在约8.2 Mb重复.在52例核型正常、NT增厚的胎儿中,CMA额外检出6例(11.54％)亚显微拷贝数变异(CNV),大小介于459 kb～2.03 Mb,涉及1q21.1q21.2、2q13、Xq28、11p15.4等区带.结论 胎儿NT增厚与染色体异常关系密切,且随NT值升高合并染色体病风险增大,CMA能检测传统核型分析无法识别的染色体微缺失/微重复,建议对NT增厚胎儿,应采用核型分析+CMA的标准遗传学诊断模式.