目的:探讨基于靶向整合素α vβ 3的放射性核素靶向治疗(TRT)联合基于程序性死亡受体蛋白配体1(PD－L1)的免疫治疗的抗肿瘤疗效及其潜在机制。 方法:制备可特异性靶向整合素α vβ 3的分子探针 177Lu－伊文思蓝(EB)－精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸(RGD)，并测定其放射性比活度与放化纯。建立结肠癌MC38荷瘤鼠模型，进行生物分布及microSPECT显像研究。通过监测小鼠肿瘤体积和体质量变化来评估疗效与安全性(各组 n＝9)；采用流式细胞术分析A组(对照组；生理盐水治疗)、B组( 177Lu－EB－RGD单药治疗，18.5 MBq)、C组(PD－L1抗体单药治疗，10 mg/kg)和D组(联合治疗，18.5 MBq 177Lu－EB－RGD与10 mg/kg PD－L1)荷瘤鼠经治疗后肿瘤微环境(PD－L1 ＋免疫细胞、CD8 ＋T细胞和调节性T细胞)的改变(各组 n＝3)。采用重复测量方差分析、两独立样本 t检验分析数据。 结果:177Lu－EB－RGD放射性比活度为(55.85±14.00) GBq/μmol，放化纯大于95%。MicroSPECT显像中， 177Lu－EB－RGD在荷瘤鼠肿瘤中清晰可见，且摄取率高、滞留时间长，注射后24 h肿瘤/肌肉比值达14.87±0.88，而在正常组织摄取及滞留较少；生物分布结果显示，注射后4 h 177Lu－EB－RGD较 177Lu－RGD表现出明显增高的肿瘤摄取[(12.00±1.60)和(3.69±0.37)每克组织百分注射剂量率(%ID/g)； t＝8.63， P<0.01]。在治疗开始后第6天，A～D各组小鼠肿瘤体积差异有统计学意义( F＝7.32， P＝0.03)，在监测时间内，D组平均肿瘤体积最小，治疗效果最好，7/9的荷瘤鼠表现为完全缓解，且未出现肿瘤复发。流式细胞术结果显示，TRT可导致肿瘤微环境中PD－L1表达上调，B组与A组PD－L1 ＋免疫细胞数差异有统计学意义(CD45 ＋/PD－L1: 2.34%与0.95%，CD11b ＋/PD－L1：2.41%与0.66%； t值：11.17和8.70，均 P<0.01)，而免疫治疗及联合治疗使C、D组微环境中的CD8 ＋T细胞浸润较A组急剧增加(2.07%与0.26%，2.71%与0.26%； t值：4.10和6.03，均 P<0.05)。 结论:TRT联合免疫治疗可协同增强抗肿瘤疗效，有望应用于可接受TRT的转移性肿瘤患者的治疗。

目的:探讨四维自动左心房（左房）定量（4D Auto LAQ）分析技术在慢性肾脏病（CKD）患者的左房容积和应变功能改变评估中的作用，同时筛选出能够早期识别CKD患者左房功能受损的敏感参数。方法:回顾性队列研究。选取2022年8月—2023年3月在大连医科大学扬州临床医学院肾内科住院治疗的、未进行透析的CKD患者90例作为病例组，根据患者肾小球滤过率进行CKD分期，进而分别纳入CKD3、CKD4、CKD5组；另选取同期健康体检的志愿者34例作为对照组。采用单因素方差分析、 χ2检验和非参数检验分析基线资料的组间差异。采集并对比各组被试者左心室（左室）后壁厚度（LVPWD）、左室射血分数（LVEF）、左房前后径（LAD），左室收缩末期内径（LVESD）、左室舒张末期内径（LVEDD）、二尖瓣口舒张早期峰值流速（E峰）、二尖瓣口舒张晚期峰值流速（A峰）、二尖瓣环舒张早期运动速度峰值（e’峰）、E/A值和E/e’值等二维常规超声心动图参数，左房最小容积（LAVmin）、左房最大容积（LAVmax）、左房收缩前容积（LAVpreA）、左房最大容积指数（LAVImax）、左房射血容量（LAEV）；左房射血分数（LAEF）等4D Auto LAQ分析的左房容积参数，以及储存期纵向应变（LASr）和周向应变（LASr-c）、管道期纵向应变（LAScd）和周向应变（LAScd-c）、收缩期纵向应变（LASct）和周向应变（LASct-c）等4D Auto LAQ分析的左房应变参数。应用Pearson相关分析左房应变参数与LAEF和LAVImax的相关性，绘制受试者操作特征（ROC）曲线寻找评价左房功能的最优参数，并通过Pearson相关和Spearman相关探讨其相关性。 结果:（1）基线资料组间比较：与对照组相比，CDK3组、CKD4组和CKD5组患者血肌酐和脑钠肽水平均升高，CKD4组和CKD5组收缩压和舒张压均升高，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。与CKD3组相比，CKD4和CKD5组收缩压和血肌酐均升高，CKD5组脑钠肽升高，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）；与CKD4组相比，CKD5组血肌酐和脑钠肽均升高，差异有统计学意义（ P值均<0.05）。各组被试者年龄、性别、体表面积、体质量指数比较，差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。（2）二维常规超声心动图参数测量值组间比较：9个常规超声心动图参数中，LVEDD、LVESD、LVPWD、A峰、E/e’、LAD 4组间比较差异均有统计学意义（ P值均<0.05），LVEF、E峰、E/A 4组间比较差异无统计学意义（ P值均>0.05）。CKD4组和CKD5组LVEDD、LVPWD、A峰、E/e’、LAD均高于对照组；CKD5组LVESD低于对照组、CKD3组和CKD4组，CKD5组LVEDD高于CKD3组、E/e’高于CKD3组和CKD4组，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（3）4D Auto LAQ参数测量值组间比较：CKD3组LAVmin、LAVpreA、LASr、LAScd、LASr-c、LAScd-c，以及CKD4组和CKD5组12个4D Auto LAQ参数与对照组比较差异均有统计学意义（ P值均<0.05）；CKD5组LAVmax、LAEV及LASct的绝对值高于CKD3组，LASr低于CKD3组，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。病例组各组LAVmax、LAVmin、LAVpreA、LAVImax、LAEV、LASct、LASct-c的绝对值均高于对照组，且随CKD分期增加而增加；LAEF及LASr、LAScd、LASr-c、LAScd-c的绝对值均低于对照组，且除LASr-c外，其他4个参数值随CKD分期增加而降低。以上各指标4组间总体比较，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（4）相关性分析：LAEF与 LAScd、LASct、LAScd-c、LASct-c均呈负相关（ r=0.298、-0.219、-0.323、-0.293， P值均<0.05），与LASr、LASr-c均呈正相关（ r=0.466、0.574， P值均<0.001）；LAVImax与LASr、LASr-c呈负相关（ r=-0.322、-0.433， P值均<0.001），与LAScd-c呈正相关（ r=0.327， P<0.001）。（5）ROC曲线分析结果显示，左房应变参数LASr的ROC曲线下面积最大［AUC为0.922（95％ CI 0.877~0.967），灵敏度为67.80％，特异度为100.00％，截断值为0.175］，优于其他参数。（6）对基线资料与应变参数（LASr、LASr-c）的相关性进行分析，血肌酐、收缩压、脑钠肽与LASr的均呈负相关（ r=-0.589、-0.441， rs=-0.578， P值均<0.001）。在观察者内和观察者间进行重复性检验时，ICC>0.75，表示重复性较好。 结论:CKD患者左房容积增大，储备功能、管道功能降低，泵功能代偿性升高。LASr是早期识别CKD患者左房功能受损的敏感参数，血肌酐、收缩压和脑钠肽与左房功能受损相关。4D Auto LAQ技术是评估CKD患者左房功能的有效方法，在临床工作中具有一定的指导作用。

目的：:比较6～12岁儿童单独使用1%环喷托酯和1%环喷托酯-复方托吡卡胺联合用药的睫状肌麻痹效果。方法：:前瞻性随机对照研究。2018年7─9月在北京市海淀区妇幼保健院进行睫状肌麻痹验光的6～12岁屈光不正儿童98例（98眼），根据随机数字表法随机分为单独用药组和联合用药组。单独用药组给予1%环喷托酯点眼3次；联合用药组给予1%环喷托酯点眼3次和复方托吡卡胺点眼2次。分别于点眼前，第1次点眼后30、45、75 min测量等效球镜度（SE）和瞳孔直径。使用独立样本 t检验比较2组基线数据。采用重复测量资料的方差分析对不同给药方法在不同时间SE和瞳孔直径的影响进行分析。使用Pearson相关性分析睫状肌麻痹程度与瞳孔散大程度之间的关系。 结果：:2组SE值均在点眼后30 min内向正值方向发展，45 min达到最佳效果，45～75 min基本保持平稳，不同时间点睫状肌麻痹作用差异有统计学意义（ F=57.06， P<0.001）。不同给药方式对睫状肌麻痹效果影响差异无统计学意义。随时间延长，不同给药方式睫状肌麻痹效果差异无统计学意义。点眼后2组瞳孔直径均随时间延长而增大，时间因素引起瞳孔直径变化差异有统计学意义（ F=502.87， P<0.001）。联合用药组瞳孔直径大于单独用药组（ F=30.63， P<0.001），随时间延长，联合用药组瞳孔直径均大于单独用药组，差异有统计学意义（ F=13.53， P<0.001）。2组点眼后75 min SE改变值与瞳孔直径增加值之间均无相关性。 结论：:在我国6～12岁儿童中，1%环喷托酯-复方托吡卡胺联合用药在睫状肌麻痹效果、起效时间以及持续时间方面均未优于1%环喷托酯单独用药，而联合用药后瞳孔散大的不良反应明显大于单独用药。

目的:比较靶向相对分子质量1.8×10 4转位蛋白(TSPO)的分子探针 N， N-二乙基-2-[2-(4- 18F-氟苯基)-5，7-二甲基吡唑[1，5-a]并嘧啶-3-基]乙酰胺( 18F-FDPA)和 18F-(R)-( N-仲丁基)-3-氟甲基- N-甲基-4-苯基喹啉-2-甲酰胺(LW223)用于探测兔腹主动脉粥样硬化易损斑块(VAP)的可行性和效能。 方法:选取9只健康新西兰大白兔，用完全随机法分为3组(每组3只)：正常对照组(A组)、VAP组(B组)和VAP治疗组(C组)，分别于造模后第12、16和24周末注射 18F-FDPA和 18F-LW223，并于注射后40～50 min行活体腹主动脉PET/CT和同机CT血管成像(CTA)。所有显像结束后，处死全部动物，行腹主动脉病理学及免疫荧光检测。采用重复测量方差分析(Bonferroni法)和配对 t检验分析数据。 结果:18F-FDPA在3组不同时间点(第12、16和24周末) PET/CTA同机显像中，靶本比(TBR；腹主动脉病灶/左心室血池)值间差异均有统计学意义( F值：68.09～144.88，均 P<0.001)。在第12周末显像中，3组腹主动脉区域均无明显显像剂摄取增高灶。在第16和24周末显像中，B组腹主动脉局部的摄取均高于同期时间点的C组(均 P<0.05)和A组(均 P<0.001)；C组腹主动脉局部的摄取高于同期时间点的A组(均 P<0.01)。3组不同时间点PET/CTA图像中，腹主动脉区域均无明显 18F-LW223摄取增高灶。在上述3个不同时间点，3组 18F-FDPA和 18F-LW223的TBR值间差异均有统计学意义( t值：2.88～36.79，均 P<0.05)。病理HE、免疫荧光CD68和TSPO染色显示，B组 18F-FDPA高摄取易损斑块处巨噬细胞浸润数量多于C组。 结论:与 18F-LW223相比， 18F-FDPA可用于早期探测兔腹主动脉易损斑块，并可评估降脂药物干预后易损斑块稳定性的变化。

目的:基于波塞冬标准分析卵巢低反应（poor ovarian response，POR）人群的胚胎非整倍体率，探究卵巢储备评估指标对卵子质量的预测价值。方法:基于2017年1月至2020年12月期间于山东大学附属生殖医院生殖遗传科行胚胎移植前非整倍体筛查（preimplantation genetic testing for aneuploidies，PGT-A）助孕的患者临床资料，进行回顾性病例对照研究。根据年龄和卵巢储备水平参照波塞冬标准分为POR 1组，即非高龄非预期POR组［年龄<35岁，抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）≥1.2 μg/L，获卵数≤9枚，258个周期］；POR 2组，即高龄非预期POR组（年龄≥35岁，AMH≥1.2 μg/L，获卵数≤9枚，397个周期）；POR 3组，即非高龄低储备组（年龄<35岁，AMH<1.2 μg/L，获卵数≤9 枚，99个周期）；POR 4组，即高龄低储备组（年龄≥35岁，AMH<1.2 μg/L，获卵数≤9 枚，377个周期）。以年龄为匹配因素，选取卵巢储备及卵巢反应均正常女性设立非POR组作为对照（非POR 1组、非POR 2组、非POR 3组和非POR 4组，AMH≥1.2 μg/L，获卵数>9枚）。根据各组样本量差异，对非高龄组进行1∶2倾向性评分匹配（propensity score matching，PSM；POR 1组比非POR 1组；POR 3组比非POR 3组），高龄组进行1∶1 PSM（POR 2组比非POR 2组；POR 4组比非POR 4组）。胚胎整倍体率和非整倍体率作为主要观察指标，获卵数、MⅡ（成熟卵子）数、双原核（two pronuclei，2PN）数、检测囊胚数、胚胎整倍体数、非整倍体数、嵌合体胚胎数/率作为次要观察指标。结果:POR 1~4组的获卵数［7.0（6.0，9.0）枚、7.0（5.0，8.0）枚、6.0（4.0，9.0）枚和5.0（3.0，7.0）枚］和检测囊胚数［3.0（2.0，4.0）枚、2.0（1.0，3.0）枚、3.0（2.0，4.0）枚和2.0（1.0，3.0）枚］均显著少于同龄非POR 1~4组［获卵数：16.0（13.0，20.0）枚、14.0（11.0，17.0）枚、16.0（13.0，20.0）枚、13.0（11.0，17.0）枚，均 P<0.001；检测囊胚数：4.0（3.0，6.0）枚、3.0（2.0，5.0）枚、4.0（3.0，6.0）枚、3.0（2.0，5.0）枚，均 P<0.001］。非POR 4组在校正重复取卵周期、PGT-A指征、促排卵方案和促性腺激素用量后，POR 4组胚胎非整倍体率显著高于非POR 4组（ OR=1.252，95% CI：1.053~1.488， P=0.011），POR 1组、2组、3组患者与相应的非POR 1、2、3组相比，胚胎非整倍体率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:高龄（≥35岁）女性卵巢储备异常降低不仅减少了获卵数，而且因影响卵子质量进而导致胚胎整倍体率下降、非整倍体率上升；而非高龄（<35岁）女性卵巢储备降低主要影响获卵数。

目的:应用腺相关病毒(AAV)-规律间隔成簇短回文重复序列及其相关核酸酶9(CRISPR/Cas9)系统体外实验研究基因治疗威尔森氏症(WD)。方法:选用2月龄雄性Toxic milk (TX)小鼠作WD模型，设计小向导RNA(sgRNA)并构建含有CRISPR元件的AAV载体质粒命名为pAAV-sgRNA1、2、3，制备AAV，病毒滴度达1～4×10 13 GC/ml；感染WD肝细胞，72 h后提取基因组DNA，聚合酶链反应(PCR)后测序检测基因编辑效率，筛选出其中活性最高者sgRNA1，构建相应的同源修复模板(HT)质粒命名为pAAV-HT，应用AAV-sgRNA1和AAV-HT共感染WD肝细胞，测序和T7E1酶切检测模板修复效率；用HT特异性引物行PCR，验证HT掺入。组间比较采用Student’s t检验。 结果:Sanger测序结果显示，sgRNA1在体外有最高的编辑效率[(20.2±2.3)%]，与sgRNA2、3比较[(3.1±1.3)%、(14.6±2.0)%]，差异有统计学意义( P<0.05)。进一步用HT进行基因修正，能检出特异性修正后的ATP7B基因；二代测序测序显示修复率为(7.9±2.7)%。 结论:AAV-CRISPR系统在体外可以达到较高编辑效率和修复效率。

目的:通过成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统构建HMGB2基因敲除的小鼠巨噬细胞株(Raw264.7)，并验证肺炎克雷伯菌(KP)感染后HMGB2敲除细胞介导促炎因子产生和杀菌能力的变化。方法:针对小鼠HMGB2基因靶向设计向导RNA(sgRNA)，将插入sgRNA的pX459质粒转染Raw264.7细胞，利用抗性筛选和有限稀释法获得HMGB2基因敲除细胞克隆。利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)对所获细胞克隆的HMGB2基因和蛋白表达进行鉴定。通过细菌计数测定HMGB2 －/－ Raw264.7吞噬和杀伤细菌能力，通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HMGB2 －/－ Raw264.7促炎因子分泌情况。组间比较采用 t检验。 结果:利用嘌呤霉素成功筛选出单克隆细胞株，HMGB2蛋白在敲除细胞株中完全不表达，HMGB2敲除后对KP的吞噬与正常细胞比较，差异无统计学意义(2.37±0.31比2.33±0.15， t＝0.17， P>0.05)，但感染后18 h胞内细菌存活比例显著高于正常细胞[(67.67±9.02)%比(32.33±6.11)%， t＝5.62， P<0.01]；KP感染HMGB2 －/－ Raw264.7，促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6分泌量显著低于正常细胞[(54.00±18.08) pg/ml比(111.70±8.50) pg/ml， t＝5.00， P<0.01；(65.67±9.87) pg/ml比(128.00±30.61) pg/ml， t＝3.36， P<0.01；(72.67±9.07) pg/ml比(95.00±5.29) pg/ml， t＝3.68， P<0.05]。 结论:通过CRISPR/Cas9技术成功构建HMGB2基因敲除Raw264.7细胞株，验证了HMGB2对诱导相关炎性因子及抗KP感染的影响。

目的:通过锥形束CT评价种植体支抗辅助无托槽隐形矫治远移磨牙的临床效果，为临床提供参考。方法:回顾性纳入2018年1月至2021年9月就诊于南昌大学附属口腔医院正畸科并采用支抗种植体刚性连接支抗牙构建间接支抗、辅助控制无托槽隐形矫治远移上颌磨牙的成年患者26例，其中男性12例，女性14例，年龄（26.4±4.2）岁（19~31岁）。采用锥形束CT三维测量方法，测量患者矫治前（T0）、上颌第一磨牙远移到位时（T1）和前牙排齐内收到位时（T2）的上颌第一磨牙、第二前磨牙和中切牙牙根和牙尖以及牙根中心点位置，并采用单因素重复测量方差分析比较不同时间点间差异。结果:上颌中切牙牙根和牙尖矢状向位置3个时间点间总体差异均有统计学意义（ F=24.84， P<0.001； F=27.66， P=0.001）；其中T0与T1差异均无统计学意义（ P>0.05）；T1与T2差异均有统计学意义（ P<0.05），分别舌向内收（1.81±0.28）和（2.17±0.42）mm。上颌第二前磨牙牙根和牙尖矢状向位置3个时间点间总体差异均有统计学意义（ F=17.16， P=0.001； F=57.99， P<0.001）；其中T0与T1差异均无统计学意义（ P>0.05）；T1与T2差异均有统计学意义（ P<0.05），分别向远中移动（1.95±0.42）和（2.53±0.33）mm。上颌第一磨牙牙根和牙尖矢状向位置3个时间点间总体差异均有统计学意义 （F=9.37， P=0.002； F=140.26， P<0.001）；其中T0与T1差异均有统计学意义（ P<0.05），分别向远中移动（1.98±0.25）和（3.51±0.30）mm；而T1与T2差异均无统计学意义（ P>0.05）。上颌第一磨牙牙根中心点垂直向位置3个时间点间差异有统计学意义（ F=59.06， P<0.001）；其中T0与T1差异有统计学意义（ P<0.05），龈向压低（2.28±0.24）mm；而T1与T2差异无统计学意义（ P>0.05）。其他测量指标3个时间点间总体差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:使用种植体支抗辅助无托槽隐形矫治远移磨牙可有效增强支抗牙的支抗作用。

目的:分析脓毒症患者和健康对照者血清脂质组学变化，寻求差异脂质代谢物，初步揭示脓毒症发生过程中的脂质组学变化。方法:采用前瞻性观察性研究方法，采集2019年9月至2020年4月在山西白求恩医院重症监护病房（ICU）明确诊断为脓毒症的30例患者及同期年龄匹配的30例健康体检者的上肢浅静脉晨血血样。采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）技术进行血清脂质代谢产物分析，并对质控样本进行基峰图（BPC）分析，验证实验的重复性；运用Student- t检验和差异倍数（FC）分析筛选差异脂质代谢物，判断其表达变化趋势；运用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）观察两组样本整体分布情况，评价模型准确性，并结合变量权重值（VIP）选取差异显著的脂质代谢物；最后利用Metabo Analyst平台开展脂质代谢通路分析。 结果:BPC结果显示实验重复性好，实验数据可靠。PCA模型主要参数模型解释率R 2X＝0.511，表示模型可靠；OPLS-DA模型主要参数模型解释率R 2Y＝0.954，预测能力Q 2＝0.913，亦表明模型稳定可靠。以FC>2.0或FC<0.5、 P<0.05为基础，结合VIP>1，共筛选得到72个差异脂质代谢物，结合Metabo Analyst 5.0平台数据库比对结果，指认出24个可识别的差异脂质代谢物，其中磷脂酰乙醇胺（PE）8个，溶血磷脂酰胆碱（LPC）7个，磷脂酰胆碱（PC）6个，溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）2个，磷脂酰丝氨酸（PS）1个。与健康对照者相比，脓毒症患者大部分脂质分子表达下调，包括PC、LPC、LPE和部分PE，而部分PE和PS则表达上调，主要与甘油磷脂中的PE（18∶0p/20∶4）、PC（16∶0/16∶0）和LPC（18∶1）代谢通路密切相关。 结论:脓毒症患者与健康对照者脂质代谢差异显著，差异脂质分子PE（18∶0p/20∶4）、PC（16∶0/16∶0）、LPC（18∶1）可能是脓毒症干预和预测的重要靶点。

目的:探讨腺苷酸活化蛋白激酶亚基α2(protein kinase AMP-activated catalytic subunit alpha 2，Prkaa2）与核糖体蛋白S6激酶A1 （ribosomal protein S6 kinase A1，Rps6ka1）的关系及Prkaa2对转化生长因子β1 （transforming growth factor-β，TGF-β1）诱导的肾小管上皮细胞纤维化的影响。方法:用重组蛋白TGF-β1诱导NRK-52e细胞制备纤维化的细胞模型。采用实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）、蛋白质印迹法检测大鼠肾小管上皮细胞系NRK-52e细胞（对照组）和10 ng/ml TGF-β1诱导12、24、36 h的NRK-52e细胞中Prkaa2的表达水平。于NRK-52e贴壁生长达30%时加入Prkaa2低表达慢病毒，转染72 h后收集细胞，并于Prkka2低表达慢病毒组及Prkaa2空病毒组中用qRT-PCR检测Prkaa2敲减效率。设立TGF-β1诱导、Prkaa2RNAi+ TGF-β1诱导和Prkaa2空病毒+TGF-β1诱导3个实验组，同时以正常未作任何处理的NRK-52e细胞系为对照组。通过蛋白质印迹法检测Prkaa1、Prkaa2、α-平滑肌肌动蛋白（Alpha-smooth muscle actin，α-SMA）、E钙粘蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9 （cysteinyl aspartate specific proteinase9，Caspase9）和p53基因（p53）的表达。从Prkaa2RNAi+TGF-β1诱导组和Prkaa2空病毒+TGF-β1诱导组中分别选取3个生物学重复样本，通过Affymetrix基因表达谱芯片测序结果筛选差异表达的基因。然后，在Prkaa2RNAi+TGF-β1、Prkaa2空病毒+TGF-β1诱导2个实验组中验证Prkaa2、Rps6ka1的表达。结果:qRT-PCR及蛋白印迹检测结果显示，TGF-β1诱导12 h时NRK-52e细胞中Prkaa2的mRNA和蛋白的相对表达量分别为1. 368±0. 083和1. 311±0. 007，与对照组1. 000±0. 123和1. 159±0. 009相比，差异有统计学意义（ P<0. 05）。qRT-PCR实验结果显示Prkaa2空病毒组相对表达量为1. 042± 0. 302，较Prkaa2低表达慢病毒组为0. 171±0. 165 ，Prkaa2 mRNA表达下调，差异具有统计学意义（ P= 0. 023）。蛋白质印迹法检测结果显示，TGF-β1诱导组E-cadherin相对表达量为2. 89±0. 04，较对照组3. 82±0. 03下调，差异有统计学意义（ P<0. 05）；TGF-β1诱导组Prkaa1相对表达量为1. 04±0. 04，较对照组1. 06±0. 05未见明显变化，差异无统计学意义（ P>0. 05）；TGF-β1诱导组α-SMA、Vimentin和Bax、Caspase9、p53相对表达量分别为3. 60±0. 03、1. 07±0. 07、1. 81±0. 02、1. 17±0. 04、0. 62± 0. 01，均较对照组2. 95±0. 04、0. 74±0. 03、1. 00±0. 04、0. 77±0. 05、0. 37±0. 01上调，差异均有统计学意义（ P<0. 05）。Prkaa2RNAi+TGF-β1诱导组E-cadherin相对表达量为3. 57±0. 03，较空病毒+ TGF-β1诱导组3. 04±0. 15上调，差异有统计学意义（ P<0. 05）；Prkaa2RNAi+ TGF-β1诱导组Prkaa1相对表达量为1. 03±0. 05，较空病毒+TGF-β1诱导组1. 05±0. 06未见明显变化，差异无统计学意义（ P>0. 05）；Prkaa2RNAi+ TGF-β1诱导组Prkaa2、α-SMA、Vimentin和Bax、Caspase9、p53相对表达量分别为0. 54±0. 02、3. 21±0. 07、0. 44±0. 03、1. 16±0. 08、0. 94±0. 03、0. 44±0. 03，均较空病毒+TGF-β1诱导组0. 89±0. 01、3. 49±0. 06、0. 98±0. 07、1. 87±0. 02、1. 21±0. 04、0. 65± 0. 03下调，差异均有统计学意义（ P<0. 05）。Affymetrix基因表达谱芯片测序结果显示核糖体蛋白S6激酶A1(ribosomal protein S6 kinase A1，Rps6ka1）下调。蛋白质印迹法和qRT-PCR验证结果提示，Prkaa2RNAi+TGF-β1诱导组Rps6ka1表达相对表达量为0. 60±0. 02、0. 590±0. 026，较Prkaa2空病毒+TGF-β1诱导组1. 15±0. 04、1. 003±0. 080下调，差异有统计学意义（ P<0. 05）。 结论:Prkaa2与Rps6ka1存在正向调控关系，抑制Prkaa2可以改善TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞纤维化。